EXTRACCIÓN EN FASE

SOLIDA
Es una técnica que permite concentrar y separar un analito,
catiónico o aniónico de una matriz compleja, mediante una
fase sólida estacionaria. Como resultado, se elimina la
matriz interferente, no retenida y, el analito se puede
analizar con la mejor sensibilidad posible, mediante la
técnica analítica adecuada.
 Procedimiento General en EFS

Etapa de Acondicionamiento:
La activación del adsorbente y de los
grupos funcionales se consigue al
pasar un volumen de solvente o
mezcla de solventes apropiado a
través de la columna.
Etapa de Carga de Muestra.
Se aplica la muestra en la parte superior del
lecho de adsorbente. Los contaminantes de
matriz pueden pasar por la columna sin ser
retenidos, y otros componentes de la matriz
pueden retenerse más o menos fuertemente
en la superficie del adsorbente.
Etapa de Lavado
El lavado permite la eliminación de
cualquier resto de compuestos que puedan
interferir manteniendo los analitos en el
lecho de adsorbente. Se pueden usar
solventes o mezcla de solventes de
diferente tipo para mejorar la eficacia del
lavado.
Etapa de Secado
Las trazas de solvente se eliminan
haciendo circular aire a través de la
columna durante 2 a 10 minutos.
Esta etapa mejora el rendimiento de
extracción.
Etapa de Elución
Se pasa un solvente adecuado por la
columna para eliminar la interacción
analito-solvente y eluir el 100% de los
compuestos de interés. El solvente
adecuado ha de tener la máxima interacción
con el analito y una interacción mínima con
las demás impurezas, dejándolas en el lecho
de adsorbente.
Etapa de Concentración
Los compuestos de interés se concentran evaporando una parte
del solvente. Es necesario secar el eluato con sulfato de sodio
para eliminar posibles trazas de agua.

Definición de Volumen de Lecho

El Volumen de Lecho se define como la cantidad mínima de
solvente necesaria para humedecer una cantidad definida de
adsorbente en la columna. Depende de la naturaleza del
adsorbente y es aproximadamente de 120 mL para 100mg o 500
mL para 500mg de SiO2 de 60 Å.
Ventajas de Extracción en fase sólida (SPE)
 Mejora la sensibilidad
 Línea base más limpia
 Cuantificación más exacta
 Mejora el procesamiento de datos y la
interpretación de resultados
 Se obtienen resultados más confiables, rápidos
y reducción en los costos de los análisis.
Microextracción en fase
sólida(MEFS)
La MEFS puede ser entendida como una columna capilar de
cromatografía de gases (CG) muy corta abierta al exterior.
La MEFS es una fibra cubierta con una fase que sirve para
la extracción, que puede estar constituida de un polímero
líquido o un solvente sólido. Esta capa puede extraer
diferentes tipos de moléculas, volátiles o no volátiles, de
diferentes tipos de medios en fase líquida o gaseosa.
Primera etapa extracción
La fibra está recubierta por un sorbente
que se pone en contacto con la muestra,
con tiempo y temperatura controlados y
predeterminados. En esta etapa se
produce la migración de los analitos
desde la disolución hasta la fibra,
concluyendo cuando se produce el
equilibrio entre ambos
Segunda etapa desorción.
se retiran los analitos retenidos en la
fibra. Se puede realizar térmicamente o
por adición de un disolvente orgánico
según la técnica que se vaya a utilizar
posteriormente.
Esta técnica presenta una serie de ventajas que
hacen que su utilidad sea muy alta. Es una técnica
simple, de bajo coste, que puede ser automatizada,
se puede utilizar con pequeños volúmenes de
muestra y generalmente no requiere el uso de
disolventes orgánicos para llevar a cabo la
preconcentración, hecho que sí sucede en el caso de
otras técnicas como la extracción en fase sólida, por
ejemplo. Su diseño ligero y portátil, lo hace muy útil
en el caso de realizar análisis de campo
El principal inconveniente que presenta es la
limitada capacidad de las fibras, ya que la
cantidad de recubrimiento es muy pequeña.
Como consecuencia de ello no se obtienen unos
límites de detección bajo (pobre sensibilidad)
 QUECHERS METODO DE
EXTRACCION EN FASE SOLIDA
El método QuEChERS es un sistema de extracción en fase
sólida dispersiva (dSPE) que implica dos etapas
fundamentales, una primera etapa de extracción simple
seguida de una fase de limpieza del extracto mediante
extracción en fase sólida por dispersión. En la primera
etapa, se realiza una extracción con un disolvente orgánico,
generalmente acetonitrilo, en presencia de diferentes sales.
Las sales que pueden ser empleadas en esta etapa son el
sulfato de magnesio, el cloruro sódico, el citrato tribásico de
sodio dihidrato y citrato de sodio dibásico sesquihidrato.
La función de cada una de estas sales en la etapa de
extracción es diferente:
 Sulfato de magnesio (MgSO4) mejora la recuperación
del analito al facilitar la partición de los pesticidas en la
fase orgánica (acetonitrilo) gracias a que retiene agua.
 Cloruro sódico (NaCl) ayuda a controlar la polaridad
favoreciendo la separación de fases entre el contenido de
agua y la orgánica.
 Acetato de sodio ayuda a la regulación del pH.
 Sales de citrato se emplean para ajustar del pH a valores
de 5,5 donde se extraen la mayoría de los componentes
ácidos y básicos de la muestra.
La selección de las sales a emplear va a depender de los
compuestos que se desean analizar y el tipo de protocolo de
análisis a utilizar:
 Método original “QuEChERS”: utiliza sulfato de magnesio
y cloruro sódico
Método AOAC (AOAC 2007.01): emplea sulfato de
magnesio y acetato de sodio
Método EN 15662: combina sulfato de magnesio, cloruro
sódico, citrato tribásico de sodio dihidrato y citrato de sodio
dibásico sesquihidrato
En la segunda etapa de este procedimiento corresponde a
una limpieza o “cleanup” del extracto mediante la
extracción en fase sólida dispersiva. Este paso facilita la
eliminación del agua residual y de los compuestos presentes
en la matriz del alimento que podrían provocar
interferencias en el análisis, como los lípidos, azúcares,
ácidos orgánicos y pigmentos. Las sales y sorbentes
empleados en esta fase son:
 Sulfato de magnesio (MgSO4): elimina el exceso de agua
residual.
 Amina primaria/secundaria (PSA): elimina ácidos orgánicos,
ácidos grasos, azúcares y pigmentos de antocianina.
 Sorbente C18: elimina grasas, esteroles y otras interferencias
no polares de la muestra.
 Carbón negro grafitado (GCB): elimina pigmentos de la
muestra como clorofilas y carotenoides, sin afectar a los
compuestos planares.
La selección de la fase sólida dispersiva va a depender del
tipo de alimento que es analizado, así existen diferentes
protocolos de “clean-up” para:
• Frutas y verduras en general.
• Frutas y verduras con grasas y ceras.
• Frutas y verduras pigmentadas (vegetales verdes,
zanahorias, vino,…)
• Frutas y verduras altamente pigmentadas.
• Frutas y verduras con pigmentos y grasas (estos también
pueden emplearse para el análisis de leche, carne y
pescado).
Después del proceso de limpieza, se lleva a cabo una
centrifugación y el extracto está listo para ser directamente
analizado o sometido a evaporación y recomposición en el
disolvente apropiado para su análisis.
Rápido, fácil, económico, eficaz, solido y seguro, el método
QuEChERS está ganando popularidad en todo el mundo
como el método a elegir para el análisis de multi-resíduos de
pesticidas en alimentos y productos agrarios. El método
QuEChERS ofrece las ventajas de altas recuperaciones,
resultados precisos, rapidez de tratamiento, poco uso de
solvente y material de vidrio y además requiere poco
espacio de laboratorio y pocos reactivos. El proceso es
robusto y fiable.