Análisis

Instrumental
Cromatografía de reparto (líquido – líquido)
Integrantes Grupo 2
Brenda Odalis Baca 20162030253
Mayra Dalila Cartagena 20152100057
Vanessa Alejandra Bustillo 20152001727
Sindy Fabiola Romero 20070000062

Lic. Marina Sánchez

1
 Introducción

La mayoría de los métodos de análisis son en los casos más

favorables, selectivos pero no específicos. Por ellos, cuando
se trata de muestras completas, la separación del analito de
las posibles interferencias es una etapa esencial.

La posibilidad de determinar varios analitos después de una

separación previa es lo mejor. Uno de los mejores métodos
para conseguir la separación indicada es la cromatografía.

2
 Objetivo General

Conocer aspectos importantes de la

cromatografía de reparto como técnica de
análisis químico.
Objetivos

Objetivos Específicos
Describir las fases que se dan en la cromatografía de reparto
basándose en las polaridades relativas de las fases móvil y
estacionaria.

Mencionar algunas aplicaciones de la cromatografía de

reparto o líquido-líquido.

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3
 Cromatografía de reparto (líquido – líquido)

La cromatografía es un potente
método de separación que tiene
aplicación en todas las ramas de la
ciencia. Agrupa un conjunto
importante y diverso de métodos
que facilitan la separación,
identificación y determinación de
componentes estrechamente
relacionados en mezclas complejas;
muchas de dichas separaciones son
imposibles por otros medios.

4
 Clasificación de las técnicas
cromatográficas

De acuerdo con la forma del Con base en la naturaleza del soporte en De acuerdo con el mecanismo
lecho cromatográfico: el que se aloja la fase estacionaria: de separación

a
la n

na
a p

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a

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Crom g r

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Cromatografía gas –

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Cromatografía líquido -.
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Cr nida exc
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ato
Cro

om

Cromatografía de
–
Cr

intercambio iónico

5
La Cromatografía de Reparto (o líquido
- líquido), se basa en las características
de solubilidad relativa de los solutos
entre la fase móvil y una fase
estacionaria de un líquido no polar.

La fase líquida se impregna a un soporte

inerte de sílice o, en el caso de
cromatografía de fase invertida, se une
químicamente.
Al principio, en la cromatografía de reparto se
utilizaban columnas del tipo líquido-líquido.
En la actualidad éstas han sido reemplazadas
por columnas de fase líquida unida a los
sistemas de cromatografía de líquidos
modernos.
En la cromatografía líquido-líquido, éstos se mantienen en su lugar mediante
adsorción física. Por otro lado, en la cromatografía de fase unida, están
ligados por medio de un enlace iónico, lo que da por resultado rellenos muy
estables e insolubles en la fase móvil. Asimismo, las columnas de fase unida
7 son
En la cromatografía de reparto, la capacidad transportadora de un solvente puede evaluarse a
tráves de su capacidad para formar puentes de hidrogeno con el agua del soporte
estacionario. Así se habla de eluyentes hidrófilos e hidrófobos.

Para el desarrollo del cromatograma debe elegirse el solvente menos hidrófilo posible que
permita el desplazamiento.

8
 Rellenos de fase normal y de fase inversa

Con base en las polaridades relativas de las fases móvil y

estacionaria, se distinguen dos tipos de cromatografía de
reparto.
Cromatografía en fase normal: la fase móvil es un
disolvente apolar o poco polar y la fase estacionaria
presenta elevada polaridad.

En un principio, la cromatografía de líquidos utilizaba

en fases estacionarias el agua o el trietilenglicol; como
fase móvil se empleaba un solvente relativamente como
20%
el hexano o el isopropiléter. 80%

9
Cromatografía en fase inversa: la fase
estacionaria es no polar, con frecuencia un
hidrocarburo. La longitud de la cadena del
grupo alquilo influye en la eficacia de la
separación, pues a mayor longitud mayores
serán el tiempo de retención y el tamaño de
partícula capaz de retener.

La fase móvil es un solvente relativamente

polar, como agua, metanol, acetonitrilo o Efecto de la longitud de la cadena del grupo alquilo sobre
tetrahidrofurano. la eficacia

10
 En la cromatografía en fase
normal, el componente menos
polar se eluye primero; al
aumentar la polaridad de la
fase móvil ocasiona una
disminución del tiempo de
elución.

En cambio, con la
cromatografía de fase inversa,
los componentes más polares
aparecen primero y un
aumento de la polaridad de la
fase móvil incrementa el tiempo
de elución.
11
La principal ventaja de las
separaciones en fase inversa es
que el agua se puede utilizar
como fase móvil. El agua es
barata, no tóxica, es un solvente
transparente a la radiación UV
y compatible con los solutos
biológicos.

Asimismo, la transferencia de
masas es rápida con fases
estacionarias no polares, como
el equilibrio de solvente
después de la elución con
gradiente.
12
 La elección de la composición de la fase móvil no es sencilla.
Debemos tener en cuenta múltiples factores:

Factor de selectividad Índice de polaridad

Orden polaridad Factor de retención
(α) (P’)
(k)

13
 Orden de Polaridad
Orden polaridad: hidrocarburos < éteres
< ésteres < cetonas < aldehídos <
amidas < aminas < alcoholes < agua
Índice de Polaridad
Es útil el concepto de índice de
polaridad (P’), que es una medida
numérica de la polaridad de un 04
disolvente (oscila entre –2, para los
fluoroalcanos, que son muy poco
polares, hasta 10^2, para el agua, muy
polar).
14
Factor de retención
Podemos mejorar la separación
manipulando el factor de retención (k),
variando la composición de la fase
móvil, de manera que su valor se
encuentre en el intervalo comprendido
entre 2 y 10.
04
Factor de Selectividad
También podemos recurrir si es necesario a
variar el factor de selectividad (α), cambiando
la naturaleza química de la fase móvil, pero
manteniendo el factor de retención en los
valores apropiados.
El índice de polaridad de una mezcla de disolventes A y B se calcula:

15
 En general, se comprueba que un cambio de dos
unidades de P’ origina aproximadamente una
variación de 10 veces en la constante de reparto k:

16
 Aplicaciones de la cromatografía de reparto

Farmacología:
01

17
 Aplicaciones de la cromatografía de reparto
Bioquímica:
02

Aminoácido
s

18
 Aplicaciones de la cromatografía de reparto

03 Alimentación

19
 Aplicaciones de la cromatografía de reparto

04 Industria química:
aromáticos, condensados, tensioactivos, propulsores, colorantes

Contaminantes:
05 pesticidas, herbicidas, fenoles, PCB

Medicina clínica y forense:

06 venenos, drogas, alcohol en sangre, extractos de orina, estrógenos

20
 Conclusiones

21
 La cromatografía pueden realizarse en fase normal o en fase
1 inversa, esto dependerá de la polaridad relativas de su fase
móvil y su fase estacionaria.

El factor de retención, el índice de polaridad y el factor de

selectividad son factores importantes y a tomar en cuenta al
2 momento de realizar una cromatografía de reparto.

Para el desarrollo del cromatograma debe elegirse el solvente

3 menos hidrófilo posible que permita el desplazamiento.

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 Bibliogra
fía
Cromatografía de reparto. (2015, August 14). Retrieved July 30, 2021, from
Cienciadelux.com website: https://cienciadelux.com/2015/08/14/cromatografia-de-
reparto/
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https://fcf.unse.edu.ar/archivos/series-didacticas/SD-44-Cromatografia-
CORZO.pdf
(2008). En D. A. Skoog, F. J. Holler , & S. R. Crouch, Principios de Analisis
Instrumental (págs. 828-836). Mexico: Cengage .

Corzo G. Adriana. Cátedra de Química Orgánica y Biológica. (Página

51) Facultad de Ciencias Forestales – U.N.S.E.
Abbott, D y Andrews, R. S. 1970. “Introducción a la Cromatografía”. Ed.
Alhambra, S. A. Madrid.
23
¡Muchas Gracias!