CULTIVO CELULAR

M. Sc. Roberto Ventura

Flores Biólogo –
Microbiólogo

tiernobacilo@hotmail.com
FITOHEMAGLUTININA
 ¿ QUE ENTIENDE POR CULTIVO CELULAR?
Proceso que implica el aislamiento de células de su estado natural y su Propagación
y mantenimiento en condiciones favorables fuera de su ambiente natural (In vitro)
Cultivo Cultivo secundario
primario o línea celular finita

Tumores
Línea celular Mutaciones aleatorias Celulas HeLa
Establecida, continua Modificación Henrieta Lacks
o inmortalizad artificial

¿ CÓMO CULTIVAMOS CÉLULAS?

Células Células no
adherentes adherentes

Cultivo adherente o Cultivo suspensión

en monocapa
 REQUERIMIENTOS DEL CULTIVO CELULAR

 SSUUSSTTR
RAATTOO
 NNUUTTRRII
EENNTTEES Sales

+
S inorgánicas Antibióticos
Aminoácidos y
 EESSTTEERR
Vitaminas antifúngicos
IILLIIDDAAD glucosa
D
 TEMPERATURA MEDIO BASAL Lípidos
 OXIGENO Factores de
crecimiento
 pH
Hormonas
 OSMOLARIDA Otras macromoléculas
D SUERO FETAL BOVINO
Composición inexacta
Variabilidad lote a lote
 REQUERIMIENTOS DEL CULTIVO CELULAR
 SUSTRATO
 NUTRIENTES
 ESTERILIDA
 TEMPERATURA
D 37
ºC
 OXIGEN 20 % 5 - 10 %
O O2 CO2
p pH
H
 OSMOLARIDA
7.4
Fase gaseosa
D CO2
(g)
Fase acuosa -
+
CO H2CO H +
2 (d) +
3 HCO3
H2O
 REQUERIMIENTOS DEL CULTIVO CELULAR

260 a 320
 SUSTRATO
mOsm/kg
 NUTRIENTES H2 H2
 ESTERILIDAD O O
 TEMPERATURA

 OXIGENO
Célula medio Célula medio Célula medio
 pH HIPEROSMÓTICO OSMÓTICO HIPOSMÓTICO

 OSMOLARIDA
D
 Fase estacionaria

Log (número de células)

PERFIL DE Fase de
CRECIMIENT
Fase exponencial muerte
O CELULAR

Fase de latencia tiempo

EN QUE MOMENTO CAMBIO EL MEDIO
 nutriente
TRIPSINA/EDTA
 tóxicos
 Superficie
Pase: trasferir las células a
otro recipiente con mayor
superficie
 CRECIMIENTO EXPONENCIAL

X(t) = (2n)(X0)
n = número de duplicaciones
X= Concentración de células

X0= número inicial de células

dX
dt = (μ)(X)
20 21 22 23
Tercera
Primera Segunda división
división
división

dX (μ)(t) lnX =(μ)(t) + c

X =
VELOCIDAD DE CRECIMIENTO (μ)

MONOD CURVE
 DUPLICACIONES O PASES

Paso 1 Paso 2 Paso 3

Log (número de células)

1 2 3 1 2 3 1 2 3 Duplicaciones

Tiempo de
Intervalo pase
duplicación tiempo
Densidad de siembra Densidad de recolección Número de Número de
(células/cm2) (células/cm2) pases duplicaciones
LAB A 1000 20000 1 ?
LAB B 2500 20000 1 ?
LAB C 5000 20000 1 ?
 APLICACIONE
S

Procesos

Celulares
básicos
Virología Inmunología

CULTIV
O
CELULAR
Biotecnología Farmacología

Medicina
Toxicidad
regenerativa
 CULTIVO EN EMBRIÓN DE
POLLO

1 2 3-6 7 8 9

13-14 12 11 10

19
14 15 16 17 18
¿la carne cultivada en un laboratorio es el futuro de la
comida?

Cultured meat: state of the art and future. Biomanufacturing Reviews (2018)
3:1
Bife de laboratório: Avançam as pesquisas em busca de uma carne
feita de células animais ou de plantas com as características
sensoriais do produto de origem bovina

LYNCH, J. e PIERREHUMBERT, R. Climate impacts of cultured meat and beef cattle. Frontiers
in
Sustainable Food Systems. 19 fev. 2019.
Bife de laboratório: Avançam as pesquisas em busca de uma carne
feita de células animais ou de plantas com as características sensoriais
do produto de origem bovina

https://revistapesquisa.fapesp.br/2019/07/10/bife-de-laboratorio-2/
Bife de laboratório: Avançam as pesquisas em busca de uma carne
feita de células animais ou de plantas com as características sensoriais
do produto de origem bovina

https://revistapesquisa.fapesp.br/2019/07/10/bife-de-laboratorio-2/
Bife de laboratório: Avançam as pesquisas em busca de uma carne
feita de células animais ou de plantas com as características sensoriais
do produto de origem bovina

https://revistapesquisa.fapesp.br/2019/07/10/bife-de-laboratorio-2/