Polinización y fertilización in vitro

Procesos que conducen a la unión de las gametos

para formar el embrión, que junto con el endosperma darán
origen a la semilla, que generará una nueva planta.

“doble
fecundación”

Para que la polinización se produzca, durante el desarrollo

in vivo, deben ocurrir una serie de interacciones y señales
entre el grano de polen y los diferentes tejidos del pistilo.
 Solución:
Complicaciones embrión aborta en forma precoz rescate
in vivo
embrionario

Barreras prefertilización o
polen no puede germinar sobre el precigóticas
estigma de la flor

Eludidas
mediante

“fertilización “polinización in vitro”.

in vitro”

A pesar de la polinización, la
fecundación no puede llevarse a cabo
la fusión de las gametas aisladas se logra
por distintos métodos como la electrofusión,
altas concentraciones de calcio o elevado pH.
 Los granos de polen tenían la capacidad de germinar in vitro,
(1962) especies de Papaveráceas
directamente sobre los óvulos en cultivo.

polinización in vitro

aislamiento y la fusión in vitro de gametos, combinados

años 80 técnicas de micro manipulación
con métodos de cultivo de células únicas.

fertilización in vitro

sistemas de polinización y fertilización in vitro pretenden salvar las

barreras pre y postfertilización para obtener plantas fértiles.
 Polinización in vitro
barreras de prefertilización impiden la autofecundación o el
cruzamiento

incompatibilidad

autoincompatibilidad
interacciones polen-pistilo
a) autoincompatilidad esporifítica
el ovario aborta antes de que el
tubo polínico alcance la base del estilo.
resultado de la polinización está
determinado por el genotipo de la
planta en la que se ha formado el
grano de polen

inhabilidad de una planta hermafrodita para b) autoincompatibilidad gametofítica

producir cigotos
polinización está determinada
por el genotipo haploide del polen
POLINIZACIÓN IN VITRO METODOLOGÍAS

cultivar el pistilo in vitro y colocar

La polinización estigmática
el polen sobre el estigma.

Granos de polen germinan en un estilo compatible

El injerto del estilo
y luego se los une al ovario

se cultivan directamente sobre el medio

La polinización de óvulos aislados
de cultivo.

La polinización placental óvulos se ponen en contacto

polinización placental in vitro con el polen

mezclas de polen no compatible con

La polinización con polen mentor
polen compatible muerto (denominado “mentor”)
Fertilización in vitro
Aislamiento y selección de las gametos
a) Conocer morfología floral
b) Aislar las gametos masculinos mediante choque
eléctrico, osmótico y/o de pH.
c) Aislar el saco embrionario y los gametos femeninas mediante
microdisección

Microinyección de células espermáticas o núcleos electrofusión

Fertilización in vitro
espermáticos aislados

Fusión de las gametos

Cultivo de óvulos y embriones in vitro rescate de embriones

Factores que afectan:
el medio de cultivo
la osmolaridad
los reguladores de crecimiento.