Ensayo de Omeprazol en tabletas de Omeprazol (10 mg) gastro-

resistentes por CLAR (BP 2009)

Peso 345.4 g/mol

Molecular:
Acido/base: Zwitterionic o
Anfótero
pKa: 4.8 (básico), 9.3
(ácido)
Procedimiento:
Log P: 2.4
Pesar y triturar 20 tabletas. Pesar una cantidad equivalente a 24 mg de Omeprazol.
Preparar las siguientes soluciones para CLAR.
1.Dispersar en 150 mL de fase móvil, mezclar con la ayuda de ultrasonido durante
30 min, diluir con suficiente fase móvil para producir 200 mL, mezclar, filtrar.
Tomar10 mL y llevarlos a 100 mL con fase móvil
2.Preparar una solución de sustancia de referencia de omeprazol 0.0012% p/v en
fase móvil.
 Condiciones de CLAR:
Columna: C8 (Silica Octil silano)
Fase móvil: 27 vol de acetonitrilo y 73 vol de una solución
de ortofosfato de hidrógeno disódico 0.14%
p/v, que ha sido previamente ajustada a pH 7.6
con ácido ortofosfórico

Detección: UV a 280 nm

Adecuabilidad del sistema:

La prueba no es válida a menos que en el cromatograma obtenido en la
solución (3), la resolución entre las señales de la impureza D del omeprazol y
el omeprazol sea mayor que 3.0

Determinación del contenido:

Calcular el contenido de omeprazol en las tabletas de los cromatogramas
obtenidos, usando el contenido declarado de omeprazol en la solución de
referencia de omeprazol
 Ejemplo:

Se analizarán tabletas que contienen 10 mg de Omeprazol.

Se colectan 20 tabletas, su peso es de 10.0665 g. La cantidad total de Omeprazol en

20 tabletas de acuerdo a la especificación es:

10 mg x 20 tabletas = 200 mg

La cantidad de polvo de tableta equivalente a 24 mg de Omeprazol es:

(24 mg/200 mg) x 10.0665g ~1.2 g

Si se pesan 1.2097 g de polvo de tableta y es analizado por el

procedimiento descrito, se obtienen los siguientes resultados, ¿cuál será el
contenido de omeprazol por tableta?
 Preparación de la solución de referencia de Omeprazol:
La sustancia de referencia de Omeprazol tiene una pureza del 99.9%.
Se pesan 0.1213 g de la sustancia de referencia y se disuelven en fase
móvil hasta 100.0 mL. Se toman 10.00 mL de esta solución y se lleva a
100.0 mL con fase móvil; de esta solución se toman 10.00 mL y se
diluyen a 100.0 mL con fase móvil. El área obtenida de esta solución
para la señal de Omeprazol es de 108 871.
Omeprazol (Muestra)

Área=109 766
Absorbancia UV

Solución (1)

Omeprazol (Sustancia de referencia)

Área=108 871

Solución (2)
 Manejo de Datos:
La concentración de la solución de referencia
de omeprazol (2), se calcula considerando la
pureza reportada y las diluciones realizadas (de
10.00 a 100.0 mL y posteriormente de 10.00 a
100.0 mL otra vez)
C1V1 C2V2
= =C3
V2 V3
[121.3 mg/100.0 mL] x [99.9%/100.0%] x
x[10.00 ml/100.0 mL] x [10.00 mL/100.0 mL] =
= 0.0121 mg/mL
 Manejo de datos:
[121.3 mg/100.0 mL] x [99.9%/100.0%] x [10.00 ml/100.0 mL] x [10.00 mL/100.0 mL] = 0.0121 mg/mL

Esta concentración proporciona una área de la

solución de referencia de: 108 871
Por lo que la concentración de omeprazol en la solución final (1), será de:

Areaestándar =m(Concentraciónestándar ) + b
Areamuestrra =m(Concentraciónmuestra ) + b
Areamuestrra (Concentraciónmuestra )
=
Areaestándar (Concentraciónestándar )
Areamuestrra (Concentraciónestándar )
=(Concentraciónmuestra )
Areaestándar

[109 766/108 871] x 0.0121 mg/mL = 0.0122 mg/mL

 Manejo de datos:
Por lo que la concentración de omeprazol en la solución final (1), será de:
[109 766/108 871] x 0.0121 mg/mL = 0.0122 mg/mL

La cantidad de omeprazol en la muestra original, considerando las

disoluciones (10.00 a 100.0 mL) y el volumen total final (200.0 mL), será
de:
C3V3
C2 = Masa =Concentración *Volumen
V2

0.0122 mg/mL x [100.0 mL/10.00 mL] x 200.0 mL

= 24.4 mg
Si el peso promedio de la tableta es de :
10.0665 g/20 tabletas = 0.5033 g
Por lo que el contenido de omeprazol por tableta será:
[24.4 mg x 0.5033 g]/1.2097 g = 10.2 mg
 Manejo de datos:
Por lo que el contenido de omeprazol por tableta será:
[24.4 mg x 0.5033 g]/1.2097 g = 10.2 mg

El porciento con respecto al marbete será de:

(10.2 mg/10 mg) x 100% = 102 % de la etiqueta

Y la desviación del contenido especificado será de:

[(10.2 mg – 10.0 mg)/10.0 mg] x 100% = + 2.00 %

 Manejo de datos:
La concentración de la solución de referencia de omeprazol (2), se calcula
considerando la pureza reportada y las diluciones realizadas (de 10.00 a 100.0 mL y
posteriormente de 10.00 a 100.0 mL otra vez)
[121.3 mg/100.0 mL] x [99.9%/100.0%] x [10.00 ml/100.0 mL] x [10.00 mL/100.0 mL] = 0.0121 mg/mL
Esta concentración proporciona una área de la solución de referencia de: 108 871
Por lo que la concentración de omeprazol en la solución final (1), será de:
[109 766/108 871] x 0.0121 mg/mL = 0.0122 mg/mL
La cantidad de omeprazol en la muestra original, considerando las
disoluciones (10.00 a 100.0 mL) y el volumen total final (200.0 mL), será
de:
0.0122 mg/mL x [100.0 mL/10.00 mL] x 200.0 mL = 24.4 mg
Si el peso promedio de la tableta es de :
10.0665 g/20 tabletas = 0.5033 g
Por lo que el contenido de omeprazol por tableta será:
[24.4 mg x 0.5033 g]/1.2097 g = 10.2 mg
Por lo que el porciento con respecto al marbete será de:
(10.2 mg/10 mg) x 100% = 102 % de la etiqueta
Y la desviación del contenido especificado será de:
[(10.2 mg – 10.0 mg)/10.0 mg] x 100% = + 2.00 %
 Ensayo de Fentanilo en un Inyectable de Citrato de Fentanilo
(528.6 g/mol) por CLAR (Br Pharm)
Peso 336.5
molecular: g/mol
Acido/base: Básico
pKa: 8.8
Log P: 3.8
Procedimiento:
Preparar las siguientes soluciones:
Solución (1): El inyectable es diluido con fase móvil para obtener el equivalente a 0.005% p/v de
Fentanilo.
Solución (2): Preparar una solución al 0.008% p/v de la sustancia de referencia de citrato de
Fentanilo en la fase móvil.
Condiciones de CLAR:
Columna: C18 (Octadecilsilano)
Fase móvil: Fosfato de potasio monobásico al 0.3 % en una mezcla de 4:40:56 de
acetonitrilo:metanol:agua, ajustada a pH 3.2 con ácido ortofosfórico
Detección: UV a 215 nm

Determinación del contenido:

Calcular el contenido de Citrato de Fentanilo en el inyectable, usando el contenido
declarado de la solución de referencia de Citrato de Fentanilo.
 Ejemplo:
Inyectable que contiene 50 μg/mL de Fentanilo (336.5 g/mol)
50 μg/mL corresponden a 0.050 mg/mL = 0.0050% p/v
Si la inyección de esta solución al cromatógrafo produce una señal con una área de 99 753 y
la solución de referencia* con una pureza de la sustancia de referencia de 99.7 %, produce
una señal con un área de 100 763, ¿cuál será el contenido de Fentanilo por
mL de inyectable?
*Esta solución de referencia se prepara de la siguiente manera: se pesaron 0.0810 g de la sustancia de
referencia Citrato de Fentanilo y se disuelve con fase móvil a 100.0 mL. Se toman 10.00 mL de esta
solución y se llevan a 100.0 con fase móvil.

Fentanilo (Muestra)
Absorbancia UV

Área=99 753

Solución (1)

Fentanilo (Sustancia de referencia)

Área=100 763

Solución (2)

Tiempo de retención
 Manejo de datos:
La concentración de la solución de referencia de Citrato de Fentanilo (2), se calcula
considerando la pureza reportada y las diluciones realizadas (de 10.00 a 100.0 mL)
[81.0 mg/100.0 mL] x [99.7%/100.0%] x [10.00 ml/100.0 mL] = 0.0808 mg/mL

Esta concentración proporciona una área de la solución de referencia de: 100 763
Por lo que la concentración de Citrato de Fentanilo en la solución final
(1), será de:
[99 753/100 763] x 0.0808 mg/mL = 0.0799 mg/mL
Para calcular la concentración de Fentanilo, se toman en cuenta los pesos
moleculares del Fentanilo (336.5 g/mol) y del citrato de Fentanilo (528.6
g/mol), es decir:
0.0799 mg/mL x [336.5 g/mol/ 528.6 g/mol] = 0.0509 mg/mL = 50.9 μg/mL

Por lo que el porciento con respecto al marbete será de:

(50.9 μg/mL/50 μg/mL ) x 100% = 101.8 % de la etiqueta
Y la desviación del contenido especificado será de:

[(50.9 μg/mL– 50 μg/mL )/50 μg/mL ] x 100% = + 1.80 %

Ensayo de Hidrocortisona en Ungüento de Hidrocortisona por CLAR
(BP 2009)
Peso Molecular: 362.5 g/mol

Acido/base: Neutro
pKa: ---
Log P: 1.2

Procedimiento:
Preparar las siguientes soluciones:
Solución (1): Disolver 25 mg de sustancia de referencia Hidrocortisona en 45 mL de metanol, adicionar 5 mL
de una solución de betametasona (estándar interno) al 0.5 % en metanol y adicionar agua hasta 100.0 mL.
Solución (2): Dispersar una cantidad de ungüento equivalente a 25 mg de Hidrocortisona en 100 mL de
hexano caliente, enfriar y extraer con 20 mL de una solución preparada de una mezcla de metanol:cloruro de
sodio 15% p/v (3:1). Repetir la extracción 2 veces más usando porciones de 10 mL de la mezcla metanol:
cloruro de sodio. A los extractos combinados adicionar 5 mL de una solución de betametasona (estándar
interno) al 0.5 % en metanol y llevar a 100.0 mL, mezclar y filtrar a traves de un filtro de microfibra de vidrio
(Whatman GF/C).
Condiciones de CLAR:
Columna: C18 (Octadecilsilano)
Fase móvil: Mezcla metanol:agua (50:50 v/v)

Detección: UV a 240 nm
 Determinación del contenido:
Calcular el contenido de Hidrocortisona en el ungüento, usando el contenido declarado de la
solución de referencia de Hidrocortisona.

Ejemplo:
Ungüento que contiene Hidrocortisona 1% p/p
La solución de estándar interno se prepara disolviendo 0.1249 g de betametasona en 25.0 mL de metanol
La solución (1) se prepara disolviendo 25.2 mg de sustancia de referencia de Hidrocortisona (99.8%).
La solución (2) se prepara con 2.4896 g del ungüento y aplicando el procedimiento descrito. En la figura
se observan las áreas para las soluciones (1) y (2), de las respectivas señales para la Hidrocortisona y el
estándar interno.

Hidrocortisona
Betametasona
Absorbancia UV

Área= 56 933
Área= 87 635

Solución (1)
Hidrocortisona
Betametasona
Área= 57 255
Área= 86 701

Solución (2)

Tiempo de retención
 Manejo de datos:
La concentración de la solución de referencia de Hidrocortisona (1), se calcula
considerando la pureza reportada y la dilución realizada:

[25.2 mg/100.0 mL] x [99.8%/100.0%] = 0.252 mg/mL

El contenido de Hidrocortisona en el ungüento se obtiene como sigue:
Para la solución (1), la concentración de 0.252 mg/mL proporcionará una relación de áreas de
Hidrocortisona/estándar interno: 87 635/56933 = 1.539
Para la solución (2), la muestra preparada, proporcionará una relación de áreas de
Hidrocortisona/estándar interno: 86 701/57 255= 1.514
Por lo que la concentración en la solución muestra sería:

[1.514/1.539] x 0.252 mg/mL = 0.248 mg/mL

Si el volumen de la solución final fue de 100.0 mL, la cantidad de hidrocortisona presente en la muestra sería:

0.248 mg/mL x 100.0 mL= 24.8 mg

Esta cantidad se encuentra en 2.4896 g (2489.6 mg) de unguentopor lo que la concentración en la formulación es::

[24.8 mg/2489.6 mg] x 100% p/p = 0.996 % p/p

Por lo que con respecto a la etiqueta:

(0.996%/1 %) x 100% = 99.6 % de la etiqueta

Y la desviación del contenido especificado será de:

[(0.996 %– 1 %)/1 %] x 100% = - 0.386 %