Duplicacion del ADN

Es la capacidad que tiene el

ADN de hacer copias o réplicas
de su molécula. Este proceso
es fundamental para la
transferencia
de la información genética de
generación en generación.
Cuando hablamos de replicación del ADN, se
mencionan tres características:

Semiconservativa

 Bidireccional

 Discontinua o Asimetrica
 La replicacion es Semiconservativa

Significa que como resultado de la

Duplicacion, se obtienen
dos moléculas de ADN-dos dobles
hélices- ambas compuestas
por una hebra parental, y una
recientemente sintetizada.
 Bidireccional
Origenes de replicacion

Como la molecula de ADN es muy larga, existen multiples

Origenes de replicacion para hacer la duplicacion mas rapida
Discontinua o Asimetrica

El problema surge a partir del modo de acción de la

enzima
Encargada de agregar los nucleotidos a la cadena en
crecimiento
La ADN polimerasa δ es la encargada de copiar la
doble hebra
a partir del ORI, en una de las cadenas.
ESQUEMA DE LA DNA POLIMERASA
La ADN polimerasa δ solamente puede agregar
nucleótidos a un cadena polinucleotidica que ya
esta apareada con una cadena complementaria,
o, mejor aún: necesita un extremo 3´libre para
poder comenzar a polimerizar.
No puede INICIAR la sintesis de una cadena
“de novo”.

Quien le va a dar ese extremo 3´libre? Otra

enzima que recibe el nombre de PRIMASA o
ADN primasa. Sintetiza una pequena porcion de
ARN que recibe el nombre de cebador o primer,
de unos 10 nucleotidos de longitud.
 5´ 3´
¿ Como hace la ADN polimerasa para
sintetizar las cadenas en
ambos sentidos?

La DNA polimerasa solamente es

capaz de agregar nucleótidos
a partir de un extremo 3´libre, y
haciendo crecer la cadena
en sentido 5´-3´.

NUNCA lo hace en sentido opuesto.

5´ 3´ 5´ 3´
¿Cómo se logra que ambas se cadenas se copien?
En esa hebra “problema”, otra ADN polimerasa (la ADN
polimerasa α), se adelanta un poco, y sintetiza un fragmento
pequeño.
A medida que la burbuja crece, este ciclo se repite nuevamente.

Estos fragmentos reciben el nombre de

FRAGMENTOS DE OKAZAKI, en honor a su descubridor.
Finalmente, esos cebadores de ARN son removidos o sacados
Por una nucleasa reparadora, y el espacio que queda es
Rellenado por una tercera ADN polimerasa especial, la ADN
Polimerasa β

Sintesis de la cadena adelantada

Sintesis de la cadena atrasada

Crece la horquilla
de replicacion

Cadena de ADN
recien sintetizada
 Polimerasas de mamiferos

ENZIMA FUNCIÓN

Síntesis Hélice retardada. Síntesis del cebador: 10 bases de

ADN Pol α
ADN y 25 de ARN.

ADN Pol δ Síntesis de la Hélice conductora.

Unión de los fragmentos de Okazaki ( de aproximadamente

ADN Pol β
250 pb).

ADN Pol γ Síntesis ADN mitocondrial.

 Proteinas que ayudan a desestabilizar la doble helice

5´
3´

5´

3´

5´

3´

Topoisomerasas I y II
o Girasa y Topo II
Cual es la función de las
topoisomerasas?
 Actualmente, los conocimientos acerca de la duplicación del
ADN se han incrementado notablemente. Todo el proceso se
divide, para su estudio, en dos fases: fase de iniciación y fase
de elongación

Para explicar el proceso , vamos a utilizar el

siguiente esquema para representar al ADN.
5´ 3´
3´ 5´

Las dos hebras del ADN son complementarias y

antiparalelas
 FASE DE INICIACIÓN

A partir de los puntos de iniciación se originan las denominadas

burbujas de replicación, las cuales presentan dos zonas con forma
de Y llamadas horquillas de replicación que se van abriendo
gradualmente a medida que se sintetiza nuevas hebras
complementarias de ADN
Burbujas de
replicación

3´
5´
3´ 5´

Horquillas de
replicación
 FASE DE INICIACIÓN
Para que el proceso se lleve a cabo con la máxima celeridad, la
duplicación comienza simultáneamente en muchos puntos de la doble
cadena, puntos de iniciación (oriC) en los que abundan las secuencias
GATC.

...ACGTGATCGGGCTA....ACCGATCACATCGG.....AGGCGATCTTACG...
...TGCACTAGCCCGAT....TGGCTAGTGTAGCC .... TCCGCTAGAATGC...

Los puntos de iniciación son reconocidos por proteínas específicas,

entre las que caben citar a las helicasas, que rompen los puentes
de hidrógeno entre las bases nitrogenadas, las girasas, las
topoisomerasas, y las proteínas SSB (single Strand Binding-DNA)
o proteínas estabilizadoras de las dos hebras de ADN cuando
están separadas.

©
 FASE DE ELONGACIÓN
Es la fase en la que tiene lugar la síntesis de nuevas hebras de
ADN complementarias a cada una de las dos hebras de ADN
originales. En esta fase intervienen varios tipos de ADN
polimerasas que se nombran como α, β y δ. La actividad de estos
enzimas es por una parte polimerasa, es decir que seleccionan y
unen entre sí los nucleótidos que corresponden a los
complementarios de la hebra molde a medida que la van
recorriendo, y actividad exonucleasa, por la cual se eliminan
nucleótidos erróneos o mal apareados y fragmentos de ARN
colocados provisionalmente, como se verá posteriormente.

Para entender el proceso, vamos a centrar la atención en una sóla

horquilla de replicación, y para un mejor entendimiento se verá
independientemente lo que sucede en cada hebra, sabiendo que el
proceso transcurre casi simultáneamente en las dos hebras.
 FASE DE ELONGACIÓN
Se inicia con la enzima PRIMASA, que coloca en cada horquilla unas hebras
cortas de ARN complementarias llamadas CEBADORES en el sentido 5´ a 3
´. Posteriormente, la ADN polimerasa comienza la síntesis añadiendo
nucleótidos en el extremo 3´
3´
5´
PRIMASA

5´
3´
ADN polimerasa 3´

CEBADOR 3´
ADN COMPLEMENTARIO 5´

La hebra que vemos arriba crece de forma continua, mientras

que la otra lo va a hacer de forma discontinua
 FASE DE ELONGACIÓN
Para que siga creciendo la otra
En la hebra que vemos arriba la
hebra se ha de formar un nuevo
ADN polimerasa sigue avanzando
cebador alejado del primero.
ininterrumpidamente, por ello se
Seguidamente las ADN polimerasas llama de crecimiento continuo
continuan en esta hebra colocando
desoxirribonucleótidos, llegando hasta 3´
sustituir al primer cebador. A esta hebra se
5´
le llama retardada o de crecimiento
discontinuo.

5´
3´

ARN
3´
Fragmento de OKAZAKI
5´

Hemos visto que las ADN polimerasas colocan desoxirribonucleótidos complementarios de

la hebras moldes (3´a 5´) y que también sustituye los ribonucleótidos de las cadenas
cortas de ARN (5´a 3´), pero no une los nucleotidos vecinos de la misma hebra.
 FASE DE ELONGACIÓN
Para que los nucleótidos de la hebra de crecimiento discontinuo tengan
continuidad hace falta la acción de un enzima llamado LIGASA.

3´
Ligasa 5´

5´
3´

3´
5´
 FASE DE ELONGACIÓN
El proceso visto se repite en las dos horquillas de replicación de cada
burbuja hasta que se llegan a encontrar las nuevas hebras que se han
formado en horquillas vecinas y con sentido opuesto.

3´
5´

5´
3´

3´
5´
 FASE DE ELONGACIÓN

El avance en la hebra superior es continuo. En la inferior se forma

otro nuevo cebador y un fragmento de ADN (OKAZAKI)

3´
5´

5´
3´

3´
5´
 FASE DE ELONGACIÓN

Ha desaparecido un cebador. Ahora queda que la ligasa una

los desoxirribonucleótidos de la hebra de crecimiento
discontinuo.
3´
5´

5´
3´

3´
5´

Ligasa
 FASE DE ELONGACIÓN

Ya hay continuidad en la hebra inferior.

3´
5´

5´
3´

3´
5´
Supongamos que sólo queda un fragmento de ADN por copiar.
 FASE DE ELONGACIÓN

Aquí vemos que se ha colocado el último cebador en la

cadena inferior y que la ADN polimerasa aún no ha
terminado su trabajo sustituyendo al penúltimo cebador, 3´
5´

5´
3´
5´
3´

3´
5´

©
 FASE DE ELONGACIÓN

Ya ha sido sustituido el penúltimo cebador, pero falta unir los

desoxirribonucleótidos mediante la ligasa.

3´
5´

5´
3´
5´
3´

3´
5´
 FASE DE ELONGACIÓN

Finalmente, vemos total continuidad en las dos hebras, pero

observamos que en las copias hijas hay fragmentos de ARN.

3´
5´

5´
3´
5´
3´

3´
5´
 FASE DE ELONGACIÓN

En ésta imagen vemos, nuevamente, al resultado de la duplicación todavía

con las cadenas cortas de ARN o cebadores que le hicieron falta a la
ADN polimerasa para llevar a cabo el proceso.

3´
5´
3´ 5´

3´
5´
5´
3´

Para concluir la duplicación, esos dos cebadores colocados en los extremos

han de ser eliminados mediante la actividad exonucleasa de el enzima ADN
polimerasa I.
 FASE DE ELONGACIÓN

Apreciamos como el resultado final son dos moléculas de ADN a las

que le falta en una de sus hebras un pequeño fragmento final.

5´ 3´
3´ 5´

5´ 3´
3´
5´