RESPUESTAS DE ANTICUERPOS ESPECÍFICOS DE

ISOTIPO EN SUEROS Y SECRECIONES MUCOSAS DE

TERNEROS INFECTADOS EXPERIMENTALMENTE CON
HERPES VIRUS BOVINO 1
ISOTYPE-SPECIFIC ANTIBODY RESPONSES IN SERA AND
MUCOSAL SECRETIONS OF CALVES EXPERIMENTALLY INFECTED
WITH BOVINE HERPESVIRUS 1

POR: CECILIA VILLARRAGA , JUAN SEBASTIÁN

 ABSTRACT
Bovine herpesvirus 1 (BHVl ) is an economically significant
pathogen of cattle, which can cause rhinotracheitis,
endometritis,, abortions, encephalitis, conjunctivitis and
systemic infections
The following seven field strains of BHVl were used for
experimental infection
Nine to 13 days after infection BHV1-specific antibodies of
the IgM isotype appeared in serum, nasal and ocular
secretions 
The first IgA antibodies were detected a few days later than
the IgM antibodies.
 INTRODUCCIÓN
Es un patógeno especifico y
¿ Que es el HERPES significativo del ganado que
VIRUS BOVINO causa alteraciones como :
TIPO 1 ? RINOTRAQUEI ENDOMETRITI CONJUNTIVITI
TIS S S
ABORTOS ENCEFALITIS

INFECCIÓN INDUCEN un amplio

DE espectro de respuestas
Sucede Herpe inmunitarias, entre las
que una s virus que se incluyen
Bovino respuestas de
VACUNACIÓ tipo 1 anticuerpos específicos
de isotipo
N
 OBJETIVO DEL
ESTUDIO

Fue monitorear sistemáticamente las respuestas del

isotipo contra HERPES VIRUS BOVINO TIPO 1, en las
secreciones nasales, oculares y genitales y en
sueros de terneros durante varios meses después de
la infección experimental con una de las siete cepas
de HERPES VIRUS BOVINO TIPO 1 .

A través de

ENSAYOS inmunoabsorbentes
ligados a enzimas (ELISA) para
detectar específicamente
anticuerpos
 MATERIALES Y METODOS
VIRUS
HERPES VIRUS
BOVINO 1

BABIUK SE USARON 7 CEPAS LAM Y

HARBERINK
DIFERENTES PARA LA
INFECCION
COOPER EDWARDS

ESPUMA LOWA

Todas las cepas se clonaron

mediante tres diluciones
limitantes en una cepa de
células de TRÁQUEA BOVINA
EMBRIONARIA
 ANIMALES Y DISEÑO
EXPERIMENTAL
Cada grupo
Se utilizaron 32 Se dividieron en recibió una de
terneros 8 grupos de 4 las siete cepas
frisones terneros de BHV-1

Fueron inoculados por

El grupo
aspersión intranasal, 4
restante se
ml en cada fosa nasal del
seleccionó como
virus
grupo control
Todos los terneros
desarrollaron Signos
clínicos graves típicos del
BHV-1
 PROCEDIMIENTO DE MUESTREO
SECRECION SECRECION SECRECION
SUERO
OCULAR NASAL GENITAL
Muestra de
sangre el día de Se recogieron en
la inoculación PID: día de
postinoculación
Se recogieron las
secreciones de la
mucosa. con
puntas de algodón
almacenada a
-70 ° C

Por centrifugación Entre 100 y 200 μl Entre 50 a 200

y almacenado a - de secreciones μl de
20 ° C secreciones
nasales y oculares genitales
 ANTICUERPOS MONOCLONALES
Los anticuerpos
monoclonales (MAb)
contra los isotipos de
inmunoglobulina
bovina Este MAb se usó
Se seleccionó
como anticuerpo
un MAb
conjugado en
dirigido contra
ELISA de IgA e IgM
gB, porque dio
y como material
los mejores
de recubrimiento
resultados en
en ELISA de IgG1 e
los ELISA
IgG2
 RESULTADOS
Anticuerpo
especifico de IgM

Nueve a 13 días
después de la
infección
Secreciones
En Fue el primer OCULARES y
Suero En
isotipo detectado NASALES
Fueron detectables
hasta CUATRO
SEMANAS después de
la infección
Los títulos máximos medios de IgM en suero alcanzaron niveles
superiores a 1000, en secreciones nasales superiores a 10 y en
secreciones oculares inferiores a 10
No hubo diferencias marcadas en las respuestas de IgM en
diferentes cepas de BHV 1
 RESULTADOS
Anticuerpo
especifico de IgA
 Los primeros anticuerpos IgA
se detectaron unos días
después que los anticuerpos
IgM
En suero, los
anticuerpos IgA ya no
eran detectables
después de 3 semanas,
Persistieron durante
períodos prolongados en
las secreciones de la
mucosa
 Los títulos máximos medios de IgA en suero fueron de alrededor de
100, en secreciones nasales ligeramente superiores a 10 y en
secreciones oculares algo inferiores a 10
Los títulos medios de IgA alcanzaron un nivel más bajo que los de la
IgM en suero
 RESULTADOS
Anticuerpo
especifico de IgG1

 Respuesta IgG1 uniforme

a los 13 días después de la
infección en las secreción
OCULAR
Las secreciones
oculares no estaban
contaminadas con
eritrocitos
Las secreciones genitales
de terneros y sueros
infectados fueron
negativos para
anticuerpos IgG1
 Los títulos aumentaron y alcanzaron un pico alrededor de cuatro
semanas después de la infección, después de lo cual permanecieron
en un nivel estable hasta el final del experimento

los anticuerpos también fueron detectables irregularmente en las

secreciones oculares; generalmente entre PID 28 y 56
 RESULTADOS
Anticuerpo
especifico de IgG2

 Respuesta IgG2 fue

bastante variable entre
los tipos de secreción

En suero existió mayor

repuesta de este
anticuerpo 12 días
después que IgG1

El resto de las secreciones

fueron negativas para
IgG2
 Los terneros que recibieron la cepa de Espuna tuvieron un título
medio bajo de anticuerpos IgG2 durante las primeras siete semanas
después de la infección
DISCUSIÓN
Su presencia
Anticuerpos
indica una
especifico de IgM
y IgA infección reciente
Se puede utilizar
por BHV1
en el
serodiagnóstico de
rutina de las
infecciones por
La persistencia de
BHVl.
anticuerpos IgA en las
secreciones nasales también
se ha demostrado después
de múltiples vacunas
 isotipo IgG 1 en
DISCUSIÓN pequeñas cantidades
Anticuerpos en las secreciones
especifico de
nasales contaminadas
IgG1
con sangre mucosa
Lo que sugiere que
estas IgG1 pueden
haberse filtrado de la
sangre como
consecuencia del daño
a la MUCOSA
REFERENCIAS

• 1. Madic J, Magdalena J, Quak J, van Oirschot J. Isotype-specific

antibody responses in sera and mucosal secretions of calves
experimentally infected with bovine herpesvirus 1. Veterinary
Immunology and Immunopathology. 1995;46(3-4):267-283.
GRACIAS