METABOLISMO MICROBIANO

Productos de desecho

Nutrientes
Energía para
el movimiento,
transporte de
Energía nutrientes, etc
para el
desarrollo
Anabolismo

Catabolismo
Componentes
celulares

Fuente de energía
 FUNCIONES

CONVERSION
NUTRIENTES EN
OBTENCION ENERGIA PRECURSORES
DEL ENTORNO

FUNCIONES CELULARES
ESPECIFICAS
 El ATP actúa como transportador de energía o
como intermediario entre aquellas reacciones que
proporcionan energía y las que la consumen

Glucosa Energía  ATP  Energía  Lípido

   
CO2 + H2 O ADP + P ADP + P Ácido Graso
+ Glicerol
COMPUESTOS RICOS EN ENERGÍA :

-Adenosina trifosfato ( ATP )

-Guanosina trifosfato ( GTP )

-Acetil fosfato

-Ácido 1,3-difosfoglicérido

- Ácido fosfoenolpirúvico ( PEP )

 O O
Configuración de alta energía (anhídrido)
O P O P O
O- O-

O
O P O CH2 Configuración de baja energía (éster)
O-
La molécula de ATP:
MONEDA ENERGETICA DE LA CELULA

Se forma por procesos como:

a) Fosforilación a nivel de sustrato FERMENTACION

b) Fosforilación Oxidativa RESPIRACION

c) Fotofosforilacion FOTOSINTESIS
El ATP se sintetiza por transferencia directa de
una molécula de fosfato de alta energía desde un
compuesto orgánico fosforilado hasta ADP, por un
proceso llamado
FOSFORILACION A NIVEL DE SUSTRATO
 FERMENTACION

PROCESO EN CUAL UN SUBSTRATO ORGANICO

PARCIALMENTE ES OXIDADO A COMPUESTOS
INTERMEDIARIOS SIN PRESENCIA DE
ACEPTORES EXOGENOS DE ELECTRONES

- Vía Glicolítica o de Embden Meyerhof Parnas

- Vía de las Pentosas o Shunt de las Pentosas

- Vía de Entner Doudoroff

 Vía de Embden Meyerhof-Parnas (EMP) ó via
Glucolítica o Anaerobia:

La Glucosa es degradada sin Oxígeno; esta vía la usan las

bacterias anaerobias y algunas bacterias anaerobias
facultativas.

Históricamente, la vía EMP también se ha llamada vía

fermentativa.

En ella, el Acido Pirúvico actúa como aceptor intermediario de

electrones, pero luego es oxidado entregando sus iones al
Lactato de sodio para formar Acido Láctico, o a otras sales
orgánicas y formar diferentes Acidos Mixtos. Estos ácidos son
los productos finales de este metabolismo, lo que explica la
caída del pH en las pruebas de fermentación.
 PRUEBAS DE LABORATORIO:

CALDO ROJO DE FENOL

CALDO ROJO DE METILO

CALDO VOGES PROSKAUER

MEDIO OF

AGAR TSI

MEDIOS DE CULTIVO SELECTIVOS Y DIFERENCIALES

 CALDO ROJO DE FENOL
DETERMINA LA CAPACIDAD DE UN
MICROORGANISMO DE DEGRADAR UN
CARBOHIDRATO ESPECIFICO CON
PRODUCCION DE ACIDO Y GAS.

- CARBOHIDRATO 1%

- SE UTILIZA CAMPANA DE DURHAM

- INDICADOR DE pH: ROJO FENOL

CO2

Prueba Positiva Prueba Negativa

CALDO ROJO DE FENOL

G L S X
 CALDO ROJO DE METILO - RM

PRUEBA CUALITATIVA DE LA PRODUCCION DE

ACIDOS QUE REQUIERE QUE LOS
MICROORGANISMOS PRODUZCAN ACIDOS
FUERTES (LACTICO, ACETICO, FORMICO,
SUCCINICO) A PARTIR DE GLUCOSA A TRAVES DE
LA VIA FERMENTATIVA DE ACIDOS MIXTOS.

- MEDIO DE CULTIVO: CALDO RM-VP

- REVELADOR: ROJO DE METILO

 CALDO ROJO DE METILO - RM

(-)
SIN (+)
INOCULAR
 PRUEBA DE VOGES PROSKAUER - VP

PRUEBA QUE DETERMINA COMO LA GLUCOSA ES

METABOLIZADA A ACIDO PIRUVICO Y LUEGO ES
DEGRADADO HASTA LA PRODUCCION DE
ACETOÍNA (ACETIL – METIL- CARBINOL),
PRODUCTO DE REACCION NEUTRA.

ACETOÍNA O2 Y KOH 40% DIACETILO α NAFTOL 0.5%

COMPLEJO COLOREADO ROJO

MEDIO DE CULTIVO: CALDO RM - VP

 CALDO VOGES PROSKAUER -VP

(+) (-)
SIN
INOCULAR
 VIAS ALTERNATIVAS DE LA GLUCOLISIS

Vía de Entner Doudoroff (ED).

También denominada vía aerobia porque requiere oxígeno para la
glucólisis.

Se forma Acido Pirúvico como intermediario y al carecer de las

enzimas deshidrogenasas necesarias para oxidar este ácido a ácido
láctico y otros ácidos mixtos, las bacterias oxidativas transfieren
los electrones disponibles al ciclo de Krebs, donde los iones se unen
finalmente al O2 para formar agua.

Los ácidos formados en esta vía son muy débiles en comparación

con los ácidos mixtos que resultan en la fermentación. No hay
producción de gas.
 PRUEBA DE OXIDACION FERMENTACION
O-F

-MEDIO DE CULTIVO: O-F HUGH Y LEIFSON

-SEMISOLIDO- SIEMBRA POR PICADURA

-RELACION 1:5(PEPTONA – CARBOHIDRATO)

-INDICADOR DE pH:
AZUL DE BROMOTIMOL
Amarillo (4.0) - Verde (7.1) - Azul (8.0)

CONDICIONES AEROBICAS Y ANOXIGENICAS

LECTURA:

Amarillo: Reacción Acida

Verde: No hay Reacción Acida

Tubo Abierto Tubo Cerrado Metabolismo

Amarillo Amarillo Fermentativo

Amarillo Verde Oxidativo

Verde Verde No Fermenta

No Oxida
 MEDIO O-F

FERMENTACION OXIDACION NO FERMENTA

NO OXIDA

LECTURA
 CONSULTA:
Vía de las Pentosas
El ATP se sintetiza a expensas de la fuerza motriz de
protones formados por el transporte de electrones en
un proceso llamado
FOSFORILACIÓN OXIDATIVA

La Fuerza Motriz de Protones es un estado energético

de la membrana que resulta de la separación de la
carga de los elementos del agua.
 RESPIRACION

PROCESO EN EL CUAL UN SUBSTRATO ES OXIDADO

COMPLETAMENTE A CO2 CON PARTICIPACION DE
UNA CADENA DE TRANSPORTADORES DE
ELECTRONES Y UN ACEPTOR EXOGENO FINAL DE
ELECTRONES:
- OXIGENO
- COMPUESTOS INORGANICOS: NO3, SO4, CO2, Fe,).
CICLO DE
KREBS ó
CICLO ACIDOS
TRICARBOXILICOS
FUERZA MOTRIZ DE PROTONES
ATPasa
 CITOCROMO OXIDASA

Citocromo O2 H2O y H2O2.

Bacterias aerobias, algunas anaerobias facultativas y

microaerófilas, muestran actividad oxidasa.

In vitro un substrato artificial (colorante) actúa como

aceptor de electrones:
- Clorhidrato de tetrametil-p-fenilendiamina 1%,
- Clorhidrato de dimetil-p-fenilendiamina 1%,
- Oxalato de p-aminodimetil anilina.
En estado reducido es incoloro, sin embargo en
presencia de la citocromo oxidasa y O2 :

Clorhidrato tetrametil p-fenilendiamina

Azul de Indofenol.

Se puede realizar por medio de uno de dos métodos:

1. La técnica directa en placa

2. Procedimiento indirecto con tira de papel de filtro o

tiras o discos comerciales impregnados con reactivo
desecado
Prueba Positiva Prueba Negativa

CITOCROMO OXIDASA
 (-) (+)

PRUEBA DE OXIDASA