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UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DEL ESTADO DE MÉXICO

FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA

Autor
M en C. Ada Elia Díaz González Borja
2017
UNIDAD DE APRENDIZAJE DE BACTERIOLOGIA Y
MICOLOGIA

UNIDAD I
GENERALIDADES DE BACTERIOLOGIA Y MICOLOGIA

OBJETIVO: Constatar la morfología, sus principios metabólicos, genéticos y taxonómicos de las bacterias y hongos;
mediante la aplicación de técnicas de aislamiento para la identificación de los microorganismos.

1.1.2 Nutrición y crecimiento bacteriano.


1.1.2.1 Metabolismo.
1.1.2.2 Factores nutricionales.
1.1.2.3 Factores ambientales.
Proceso por el que los seres vivos, toman del medio donde habitan, las sustancias
químicas que necesitan para crecer y reproducirse .

Estas sustancias se denominan nutrientes, y se requieren para dos objetivos:

 Fines energéticos (reacciones de mantenimiento) ;


 Fines biosintéticos (reacciones plásticas o anabolismo).

Nutrientes:
Son los productos químicos exteriores, a partir de los cuales se construye una célula, los
cuales van a ser transformados en constituyentes celulares.
COMPOSICIÓN QUÍMICA DE UNA CÉLULA BACTERIANA:

Toda célula contiene gran cantidad de pequeñas moléculas así como de


macromoléculas

• Obtiene del medio exterior la mayoría de pequeñas moléculas o bien las sintetiza
a partir de moléculas simples.

• Las macromoléculas siempre las va a sintetizar en el interior (célula microbiana).


La célula bacteriana esta compuesta por:

C arbono
H ídrogeno
O xígeno
N ítrogeno
P fosforo
S azufre

Elementos que constituyen el esqueleto de las macromoléculas y micromoléculas para


realizar el metabolismo.

Elementos como: P, K, Ca, Mg, S, Fe, Zn, Mn, Cu, Mo, Co, y otros.

Agua: 90% la célula microbiana es agua.


MICROORGANISMO AUTÓTROFO
Son aquellos organismos cuyo desarrollo y reproducción son
independientes de fuentes externas de compuestos orgánicos.

Utilizan como:

Fuente de carbono: al dióxido de carbono


Fuente energética: la luz o la energía que se desprende en
reacciones químicas.

Ejemplo: Las plantas, las algas verde azuladas y algunas


bacterias son organismos autótrofos
Son aquellos organismos que requieren
compuestos orgánicos para crecer y
reproducirse.
Los compuestos orgánicos: les sirven como
fuentes de carbono y energía.
Organismos heteretrofos: animales,
protozoos, hongos y la mayoría de
bacterias
Utilizan el CO2 como fuente de carbono
Microorganismos Fuente de energía

Fototrofos utilizan luz

Quimiotrofos utilizan productos químicos

Quimiorganotrofos utilizan compuestos orgánicos


hidratos de carbono, hidrocarburos, lípidos, proteínas, alcoholes.

Quimiolitotrofos Utilizan compuestos inorgánicos


SH2 S0, NH3, NO2-, Fe
En la naturaleza, estos elementos se encuentran combinados, formando parte de sustancias
orgánicas y/o inorgánicas. Algunos de los nutrientes serán incorporados para construir
macromoléculas y estructuras celulares; otros solo sirven para la producción de energía, y no se
incorporan directamente como material celular; finalmente, otros pueden ejercer ambos papeles.
Macronutrientes: son elementos mayoritarios, como el carbono y el nítrogeno,
hidrógeno, oxígeno

Micronutrientes: son requeridos en pocas cantidades, pero son tan importantes


como los macronutrientes para la función celular. fósforo, potasio, azufre,
magnesio.

Elementos traza: zinc, cobre, manganeso, molibdeno, cobalto

Factores de crecimiento: Vitaminas y hormonas


Carbono: La célula bacteriana requiere de un compuesto orgánico, como fuente de
carbono.

Cel. bacteriana contiene Peso seco : 50% aproximadamente.

Importancia: forman el esqueleto de los tres más importantes nutrientes


carbohidratos, lípidos y proteínas.

Uso: obtención de energía y fabricar material celular.

Fuente de carbono orgánico: aminoácidos, ácidos grasos, compuesto aromáticos.


Nitrógeno: Es el segundo elemento mas abundante, en la célula.
Una bacteria contiene PS: 12 % aproximadamente.
.

Uso: al ser metabolizado es utilizado para fabricar material celular, ácidos nucleícos y
como coenzimas.
Componente: mayoritario de proteínas, ácidos nucleícos y otros constituyentes
celulares.
Presente en la naturaleza:
Como nitrógeno atmosférico
Forma inorgánica:
Forma orgánica:
Nitratos, nitritos
Aminoácidos
Sales de amonio Pépticos.
Hidrógeno y Oxígeno.

 Forman parte de muchos compuestos orgánicos.


 Se encuentran en el agua como componentes de
nutrientes y en la atmósfera.

Además el O2 se utiliza en la respiración aeróbica y


como aceptor terminal de electrones.
Fósforo:
Uso: Esencial en la síntesis de:
ácidos nucleícos
proteínas
fosfolípidos de la pared celular y ATP.
Forma fosfolípidos y polímetros de la pared celular

Presente en la naturaleza:
Forma orgánica PO4, alternativamente se puede utilizar

Fosfato inorgánico como son los glicerofosfatos y fosfolípidos


Azufre: Utilizado por la célula, como:
 Elemento importante en la biosíntesis de los aminoácidos, cisteína y
metionina.
 Forma parte de coenzimas.
 Presente en vitaminas, tiamina, biotina, acido lipoico y Co enzima A.

Presente en la naturaleza:
En forma inorgánica de sulfatos
En forma orgánica: cisteína, metionina
Potasio: El ión potasio actúa como:
Coenzima.
Activa las enzimas para la síntesis de proteínas, como catión en la
estructura de ARN y otras estructuras aniónicas celulares.
Presente en la naturaleza: sales de potasio, potasio en solución.
Magnesio: Utilizado para
 Estabilizar ribososmas, las membranas celulares, los ácidos nucleícos.
 Como cofactor en reacciones enzimáticas, especialmente las que implican transferencia de grupos fosfato.
Ejemplo: En reacciones que requieren ATP, el Mg++ puede unir la enzima al sustrato durante el
mecanismo de acción de la primera.

Presente en la naturaleza: Sales de Mg o Mg en solución.

Calcio :
 Estabiliza la pared celular bacteriana
 Juega un papel importante en la termorresistencia de la endospora bacteriana, como cofactor enzimas.
Presente en la naturaleza: en forma de sulfatos Ca SO4 y calcio en solución.
Sodio:
Es requerido solo por algunos microorganismos, debido a la naturaleza de su hábitat, para
bacterias marinas.
Utilización: Los miroorganismos marinos lo requieren para su crecimiento.
Presente en la naturaleza: Na en solución, cloruro de sodio Na Cl
Hierro: Utilizado como:
▪ Elemento importante en la respiración celular
▪ Componente clave de los citocromos y de las proteínas que contienen hierro.
▪ Las bacterias disponen de una serie de moléculas, denominadas sideróforos, capaces de
captar ese hierro (p.ej., hidroxamatos y enterobactina),
▪ Interviene como co-factor en ciertas enzimas.
Presente en la naturaleza: Fe en solución, Fe S
Las bacterias necesitan minúsculas cantidades de otros elementos (oligoelementos), a los que
también se denomina como micronutrientes o elementos traza:

Función: forman parte de enzimas que son catalizadores celulares

 Manganeso (Mn++): Cofactor de ciertas enzimas, y a veces puede sustituir al Mg++.


 Cobalto (Co++) se requiere casi exclusivamente para la vitamina B12 (de hecho, si
suministramos esta vitamina al medio, la bacteria se vuelve independiente del Co++
libre).
 Zinc: interviene en la estabilización de complejos enzimáticos como las ADN- y ARN-
polimerasas.
Molibdeno: participa en las llamadas molibdoflavoproteínas, implicadas en la
asimilación de nitratos. Por otro lado, participa como cofactor, junto con el Fe, en el
complejo nitrogenasa de las bacterias fijadoras de N2 atmosférico.

Níquel: participa en hidrogenasas, enzimas que captan o liberan H2.


Son moléculas orgánicas específicas, necesarias en pequeña cantidad para el
crecimiento de algunas bacterias.
Se clasifican en dos grupos :

Liposolubles:
 A, D, E.
 No necesarias en el crecimiento bacteriano.
Hidrosolubles
 Necesarias en el crecimiento bacteriano.
 Son componentes de las coenzimas
 Necesarias en determinadas bacterias, que no pueden fabricarlas por sí mismas, al carecer de
parte o toda una ruta biosíntética.
Ejemplos:
La Brucella requieren como factores de crecimiento en sus medios de cultivo la
biotina, niacina, tiamina y ácido pantoténico.
El Haemophilus necesita suplementos de grupos hemo y piridín-nucleótidos.
Factor o vitamina Funciones principales

p-aminobenzoico (PABA) precursor del ácido fólico

Acido fólico metabolismo de compuestos C1, transferencia de grupos metilo

Biotina biosíntesis de ácidos grasos; fijación de CO2

Cobalamina (vitamina B12) reducción y transferencia de compuestos C1; síntesis de


desoxirribosa
Niacina (ácido nicotínico) precursor del NAD; transferencia de electrones en reacciones redox

Riboflavina precursor de FAD y FMN

ácido pantoténico precursor de la CoA

Tiamina (vitamina B1) descarboxilaciones; transcetolasas.

Complejo B6 (piridoxal, piridoxamina) transformaciones de aminoácidos y cetoácidos

Grupo Vitamina K, quinonas transportadores de electrones (ubiquinonas, menaquinonas, etc.)


Las bacterias necesitan grandes cantidades de agua. Requieren cierto grado de
humedad para crecer. Desde el punto de vista de sus posibles papeles, el agua es:

 Es el principal constituyente del protoplasto bacteriano.


 El medio universal donde ocurren las reacciones biológicas;
 Es un producto resultante de algunas reacciones bioquímicas.

Las fuentes de agua pueden ser:

 endógena: procedente de procesos de oxido-reducción.


 Exógena: (la más importante): procedente del medio, y que difunde a través de las
membranas.
• Temperatura (influye en el crecimiento)
• Humedad (cantidad de agua disponible en el sistema)
• pH (permite el desarrollo o inhibición de las bacterias)
• Disponibilidad de oxigeno (clasificación de microorganismo con base a las
necesidades de oxígeno)

FACTORES AMBIENTALES QUE INFLUYEN EN EL CRECIMIENTO


BACTERIANO
Parámetros ambientales:

El índice de crecimiento y muerte bacteriana, se ven influidos por parámetros


ambientales estos pueden:
 Favorecen la rápida reproducción microbiana
 Otros no permiten el desarrollo microbiano.
 No todos los microorganismos pueden desarrollarse en condiciones idénticas.
 Los microorganismos poseen limites inferiores y superiores de tolerancia, así como
óptimos para su crecimiento (rangos de tolerancia específica).
 En condiciones de laboratorio o naturales los parámetros ambientales o sus
interacciones van a controlar el índice de crecimiento y muerte de las especies
bacterianas.
Es un factor determinante en el crecimiento de los microorganismos, estos tienen una
temperatura mínima, óptima y máxima de crecimiento.
Temperatura mínima: por debajo de ella no hay crecimiento, se puede explicar en
función de un descenso de la fluidez de la membrana, donde se detienen los procesos
de transporte de nutrientes y el gradiente de protones.
Temperatura óptima: Las enzimas y reacciones se dan a su máxima tasa posible,
Maximo crecimiento. Un aumento de la temperatura favorece la velocidad de las
reacciones enzimáticas.
Temperatura máxima: No hay crecimiento, las proteínas, ADN y otras
macromoléculas sensibles se desnaturalizan e inactivan, hay colapsamiento de la
membrana citoplásmatica y a veces lisis térmica de la bacteria.
Con base al rango de temperaturas al que pueden crecer las distintas bacterias, se pueden
establecer tres tipos principales:
1.A Microorganismos Psicrófilos: temperatura óptima baja 0.0 a 20 °C. Ejemplo
(Pseudomonas, Flavobacterium, Alcaligenes). Presentan una mayor proporción de lípidos
insaturados y de cadenas cortas, que mantienen flexibles las membranas a bajas
temperaturas.
1.B Psicròfilo Extremo: temperatura optima de 4 0C, y es incapaz de crecer a 14ºC (se
muere de calor!). Ejemplo Polaromonas vacuolata, recientemente fue aislada en aguas
heladas de la Antártida.
Ejemplos de medios permanentemente fríos:
 La mayor parte de las aguas oceánicas (cuya temperatura media es de unos 5oC, pero que
en las profundidades alcanzan sólo 1-2ºC por encima de cero).
 Las áreas permanentemente heladas del Ártico y de la Antártida.
2. Microorganismos Mesófilos: temperatura óptima normal (la mayor parte de los
organismos) 20 a 50 °C. Ejemplo E coli. poseen mecanismos de control que
interrumpen la síntesis de proteínas, si la temperatura baja por debajo de los 5 0C.

3. Microorganismos Termófilos: temperatura óptima alta (microorganismos aislados de


áreas volcánicas) mayores a 40 - 99°C .

 Ejemplo Bacillus staerothermophilus (manantial). Crecen en fuentes termales


volcánicas terrestres. Fuentes termales submarinas . Fumarolas hidrotermales .
 Materiales en fermentación como acúmulos de abono (compost) y ensilados pueden
alcanzar 65 0C.
3.A Termófilos extremos: temperatura óptima muy alta. Ejemplo Thermococcus celer
103° C
 El ph interior de la bacterias es neutro.
 Se describe como la concentración de iones hidrógeno (H+).

Sol neutra: pH 7.0


Sol ácida: pH menor a 7.0
Sol alcalina: pH mayores a 7.0

 En general los microorganismos no pueden tolerar valores extremos de pH.

 En condiciones alcalinas o ácidas:


 Se hidrolizan algunos componentes microbianos o
 Se desnaturalizan algunas enzimas.
 Todo microorganismo tiene un rango de pH dentro del cual es posible el crecimiento, y
posee un pH optimo.
 Los microorganismos son menos tolerantes a temperaturas elevadas y pH bajos, que
a pH neutro.
 El pH del medio afecta directamente a la bacteria, y a enzimas, afectando la
disociación y la solubilidad de muchas moléculas que ejercen algún efecto sobre
estas.
 Ocurren cambos en la morfología celular, incorrecta división celular, cambios en la
adhesión, floculación, etc.

Microorganismos acidófilos: Crecen a pH inferior a 5 ejem. (Thiobacillus pH: 0.5).

Microorganismos alcalinófilos: Crecen a pH superiores a 9 (Bacillus pH: 11).


AGUA

Todos los organismos requieren agua para vivir, en las bacterias el factor crítico es la
disponibilidad de agua líquida más que la cantidad total de agua presente en el ambiente.

El total de agua disponible para uso microbiano, se expresa como la actividad de agua (aw ).
 La disponibilidad del agua, es lo que se llama potencial de agua (aw) cuyos valores van de 0
a 1.
 El aw del H2O pura es 1.

 Las bacterias tienen valores de aW normalmente entre 0.90 y 0.99.

 Los solutos presentes en el medio compiten por el agua y la “fijan”, disminuyendo la


cantidad disponibles para las bacterias.
 Los solutos disueltos en agua (ejem. sales, azúcares) tienen afinidad por las moléculas
de H2O que los rodean, por lo que éstas tampoco estarán a disposición del
microorganismo.

 Aunque bacterias marinas como ciertos Vibrio y Pseudomonas encuentran valores de


0.980.

 El extremo (0.75) lo tenemos en la arquea Halobacterium, que habita en lagunas


hipersalinas.
Halófilos: microorganismos que viven en altas concentraciones de sales. Ejemplo (aw 0.75)
arquea Halobacterium, que habita en lagunas hipersalinas.

Osmófilos: microorganismos que viven en altas concentraciones de azúcares.

Xerófilos: microorganismos que viven en ambientes secos (hongos).


NECESIDADES DE OXÍGENO

Los microorganismos se clasifican en:


Aerobios estricto: Requieren O2 para crecer (21 %).
Ejemplo E. coli.
Anaerobios estricto: La presencia de O2 es letal, Ejemplo:
Fusobacterium, Clostridium y Bacteroides,
metanogénicas.
Aerobios Facultativos:Crecen en condiciones de
aerobiosis y anaerobiosis. Ejemplo Enterobacter.
Microaerófilos: Requieren CO2 de un 5 A 10%. Ejemplo a) aerobio estricto
Campylobacter. b) anaerobio estricto
c) aerobio facultativo
Anaerobios facultativo: No requieren y crecen peor d) microaerofilico
cuando el O2 está presente. Ejemplo Clostridium e) anaerobio facultativo
perfringes
 Microbiologia Veterinaria. Nestor Oscar Stanchi. Editorial Intermedica.2007.

 Brock, Madigan, Martinko, Parker. 2004 Biología de los microorganismos, 10 ed, Prentice Hall.

 Prescott, Harley, Klein 1999 Microbiología, McGraw-Hill Interamericana.

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