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EXAMENES DE LABORATORIO

PROCEDIMIENTOS DE BIOSEGURIDAD
La bioseguridad es un conjunto de procedimientos técnicos que se debe
practicar diariamente y que no debe olvidar el personal de laboratorio.
Los procedimientos de bioseguridad tienen por finalidad:
PROTEGER
Al personal de laboratorio (o salud) contra la exposición innecesaria e
injustificada a microorganismos infecciosos.
EVITAR
La contaminación de las muestras que puede echar a perder el trabajo del
laboratorista con resultados falsos.
MANTENER
Los microorganismos infecciosos dentro del ambiente del laboratorio.
MICROORGANISMOS INFECTANTES
POR GRUPOS DE RIESGO
Es importante conocer los tipos de microorganismos infectantes tomar
las medidas de bioseguridad respectivas.
♦ Los microorganismos infectantes se clasifican por grupos de riesgo,
dependiendo de:
• La capacidad infectante del microorganismo.
– Los modos de transmisión (por ejemplo: aerosoles).
• Si son prevenibles por medio de inmunización (vacuna contra la hepatitis
B, fiebre amarilla, etc.).
• Si se dispone de medidas eficaces para el tratamiento contra el
microorganismo infectante (por ejemplo: uso de antibióticos).
EXISTEN PRECAUCIONES ESTÁNDARES PARA LA
COLECCIÓN DE SANGRE.
• Todas las muestras deben tratarse como potencialmente infecciosos
transmitidos por sangre (Hepatitis B, C, D, HIV, SIFILIS,).
• Los patógenos transmitidos por la sangre pueden ingresar al torrente
sanguíneo por medio de una lesión accidental por un objeto punzocortante.
• La transmisión indirecta puede producirse cuando una persona toca una
superficie u objeto contaminado y luego se toca la boca, los ojos, la nariz,
etc. El HBV puede sobrevivir en la superficie inanimadas o desecadas a
temperatura ambiente durante al menos una semana.
• El lavado de manos es el procedimiento más importante para prevenir de
diseminación de las enfermedades infecciosas.
• Los guantes son parte fundamental del equipo protector y deben
utilizarse cuando se realizan venopunciones.
• Los elementos cortantes (agujas, bisturí) contaminados y los residuos
infecciosos deben colocarse en recipientes adecuados resistentes a las
perforaciones. Los recipientes biopeligrosos deben estar accesibles con
facilidad y es preciso no llenarlos en exceso.
NORMAS GENERALES
• Pasar por un esquema de vacunación.
• Asumir que todo material biológico con que trabaja, es potencialmente
infectante.
• Limpiar y desinfectar prolijamente su área de trabajo antes y después de
• realizar su tarea.
• No pipetear nunca con la boca ni permitir que otro lo haga.
• No comer, beber, fumar, guardar alimentos, ni aplicarse cosméticos en el
área de trabajo. Tampoco permitir que otros lo hagan.
• No pasar la lengua por las etiquetas ni colocar materiales en la boca.
• Mantener el servicio limpio y aseado, retirar del mismo cualquier material
que no tenga relación con el trabajo.
• Descontaminar las superficies al final de la jornada o cuando se
derramen
• sustancias potencialmente peligrosas.
• Mientras trabaje, evitar tocarse con las manos enguantadas los ojos,
nariz,
boca ni la piel descubierta.
• Usar siempre guantes cuando manipule sangre, fluidos o muestras.
• No abandonar su lugar de trabajo ni circular por el servicio con los
guantes
puestos.
• Lavarse las manos después de manipular materiales y cuando salga
del
laboratorio.
• Descontaminar antes de eliminar o limpiar todos los materiales y
muestras
contaminadas, introducirlos en bolsas plásticas de cierre hermético,
con
rótulo adecuado para esterilizar y/ o incinerar.
• Usar batas o mandiles, no llevarlas fuera del laboratorio.
Desinfectarlas con
procedimientos apropiados.
• Usar siempre zapatos cerrados.
• Realizar todos los procedimientos evitando formar aerosoles, gotitas,
salpicaduras o derrames.
• No guardar su ropa protectora de laboratorio en los mismos armarios
que la ropa de calle.
• Usar gafas de protección y/o mascarillas cuando necesite proteger
salpicaduras en los ojos y boca.
• Usar guantes siempre que pueda ocurrir contacto con sangre o material
infeccioso. Después de quitarse los guantes esterilizados junto con otros
desechos antes de eliminarlos
• Notificar al jefe del Centro de Salud todo derrame accidental o exposición
real o potencial de material infeccioso (accidentes, pinchazos al momento de
la toma de muestras). Llevar un protocolo escrito de tales accidentes e
incidentes y realizar una evaluación, vigilancia y tratamiento médicos
apropiados.
• En caso de que se rompa el recipiente que contenga la muestra, colocar
papel absorbente sobre el derrame y embeberlo con solución desinfectante.
• Dejar actuar por 15 a 30 minutos luego de lo cual proceder a la limpieza.
• El cuidado inmediato de la zona expuesta consiste en: Lavar las heridas con
agua y jabón y si se trata de mucosas lavar con agua.
• Si ocurre un derrame accidental, cubrirlo con papel u otro material
absorbente, luego verter (lejía al 50%) y dejarlo actuar por 10 minutos como
mínimo y limpiar. Repetir la limpieza con desinfectante. No olvidar usar
guantes.
• Si está embarazada tener cuidados especiales con microorganismos que
podrían afectar al feto (Ej. Rubéola).
• Colocar el material destinado a la eliminación o descontaminación en
bolsas de plástico que puedan ser autoclavados, rotulándolas
debidamente.
• Colocar las jeringas y agujas usadas en un recipiente imperforable.
• No intentar tapar, doblar ni romper las agujas.
• Sellar herméticamente los recipientes de muestras. Si las muestras
llegan a contaminar las paredes exteriores de los recipientes,
limpiarlos con un desinfectante como la solución de hipoclorito con
0,1% de cloro libre (1 g/L, 1000 ppm), o productos desinfectantes.
DEFINICIONES
• ANÁLISIS: Son pruebas diagnósticas para la valoración de un
determinado analito que nos informa el estado de salud del paciente.
• TOMA DE MUESTRA: Procedimiento especializado que consiste en la
obtención de uno o varios especímenes biológicos con el fin de
encontrar la causa o factores que afectan la salud.
• EXTRACCIÓN DE MUESTRAS SANGUÍNEAS: Consiste en la obtención
de una determinada cantidad de sangre de una arteria, vena o capilar
para su posterior análisis en el laboratorio.
• MUESTRA CAPILAR: Es la recolección de una muestra de sangre que
se obtiene punzando la piel. Los capilares son diminutos vasos
sanguíneos que se encuentran cerca de la superficie de la piel.
• MUESTRA VENOSA: Es la recolección de una muestra de sangre que
se obtiene mediante una punción venosa.
• PUNCIÓN VENOSA: La punción venosa permite extraer una mayor
cantidad de sangre para las pruebas necesarias. Las venas de elección
suelen ser las de la cara anterior den antebrazo porque resulta fácil
acceder a ellas.
• FROTIS SANGUÍNEO: Consiste en cubrir parcialmente el porta objeto
con una gota de sangre, de tal manera que las células de ésta se
dispongan formando una sola capa.
• TUBOS AL VACIO: Contenedores para muestra de sangre que
permiten extraer un volumen determinado de sangre al vacio. Los
tubos al vacio son identificados de acuerdo a una codificación
internacional que está dada por el color del tapón.
FACTORES FISIOLOGICOS QUE AFECTAN LOS
RESULTADOS DE LAS PRUEBAS:
• POSTURA: El cambio de una posición supina (boca arriba) a una
sentada o de pie produce un pasaje del agua corporal desde el
interior de los vasos sanguíneos hasta los espacios intersticiales. Las
moléculas más grandes no pueden filtrar al interior de los tejidos y
concentrarse en la sangre. Habrá aumentos significativos en los
valores de pruebas para lípidos, enzimas y proteínas.
• RITMO CIRCADIANO: Diurno pertenece a la luz del día, y ritmo diurno
se refiere a las fluctuaciones del líquido corporal que se producen
durante el día. Los niveles de algunas hormonas como el cortisol y la
hormona corticotrópica, disminuyen en la tarde. Otros valores, como
la del hierro y los eosinófilos, aumentan en la tarde.
• EJERCICIO: La actividad muscular eleva los valores de las pruebas para
creatinina, proteínas, creatincinasa, aspartato transaminasa y lactato
deshidrogenasa. Las investigaciones también sugieren que el ejercicio
activa la coagulación y la fibrinolisis e incrementa los recuentos de
plaquetas.
• ESTRÉS: La ansiedad puede producir un aumento transitorio de
leucocitos así como el equilibrio ácido-base.
• DIETA: El ayuno significa la falta de ingestión de alimentos y bebidas,
excepto agua, durante las 8 a 12 horas previas a la extracción de
sangre. Si un paciente recibió alimentos en forma reciente (menos de
2 horas antes) tendrá un aumento transitorio en el dosaje de glucosa
y lípidos en sangre. Como consecuencia, el suero o plasma pueden
tener un aspecto turbio (lipémico) que interfiere con ciertas pruebas,
en especial con la determinación de glucosa, sodio y hemograma
completo.
• HABITO DE FUMAR: Los pacientes que fuman antes de la colección de
la sangre pueden tener elevaciones de los recuentos de los leucocitos
y de los niveles de cortisol. El tabaquismo crónico puede conducir a
una disminución de la función pulmonar y producir aumento de los
niveles de hemoglobina. Las punciones cutáneas también pueden ser
más difíciles de obtener como resultado del deterioro de la
circulación.
CARACTERISTICAS FISICAS DEL MATERIAL
ENTREGADO A CADA TOMA DE MUESTRA
TUBOS Y FRASCOS
• TAPA LILA:
Contiene EDTA como anticoagulante, el cual se llena al vacío con 3 ml
de sangre mezclando suavemente. Se utiliza para la determinación de
hematocrito hemograma y/o recuentos.
• Lo más importante es mantener la relación entre sangre y
anticoagulante para evitar falsos resultados.
• Una vez tomada la muestra se puede dejar a temperatura ambiente o
refrigerar hasta su traslado.
TAPA ROJA
• Este tubo no contiene anticoagulante, por lo tanto, sirve para las
determinaciones bioquímicas de rutina: creatinina, transaminasas, etc.,
además de las determinaciones serológicas. Una vez tomado el volumen
requerido se puede dejar a temperatura ambiente o refrigerado.
• Las determinaciones de glucosa y de potasio, son las únicas que se verían
alteradas pasadas más de 4 horas.
• También se utiliza para las mediciones de electrolitos y bicarbonato de
monitores.
ANTICOAGULANTES
• Una vez extraída la sangre, ésta puede conservarse coagulada o
mantenida incoagulable mediante la adición de un anticoagulante.
CARACTERÍSTICAS BÁSICAS DE LOS ANTICOAGULANTES MÁS USADOS
EN HEMATOLOGÍA
• No alterar el tamaño de los hematíes.
• No producir hemólisis.
• Evitar al máximo la agregación plaquetaria.
• No alterar la morfología de los leucocitos.
• La sangre tratada con anticoagulante debe procesarse lo antes
posible, incluso mantenida bajo refrigeración (4 ºC) si no pasan de las
2 horas.
• El tiempo máximo entre la extracción de la sangre y su procesamiento
depende del coagulante de elección y no debe ser más de 4 horas, a
excepción del anticoagulante EDTA (etilendiaminotetracético) que
puede ser hasta 24 horas (en refrigeración a 4 ºC).
• Los anticoagulantes pueden emplearse en forma sólida o líquida. Los
primeros están indicados para la determinación de los parámetros
hematológicos,ya que no producen, como los anticoagulantes
líquidos, dilución de la sangre.
ANTICOAGULANTES SÓLIDOS
• EDTA
• Anticoagulante de Wintrobe
• Heparina
ANTICOAGULANTES LÍQUIDOS
• Citrato trisódico
• Oxalato sódico
HEMOGRAMA-HEMOGLOBINA-HEMATOCRITO
Hemograma

• Para su realización requiere muestra de sangre venosa en tubo que


contenga anticoagulante de tipo etilen-diamino-tetra-acético, EDTA.

• No requiere ayuno.
• ALGUNOS REFIEREN 02 HORAS APROX.
SANGRE
91%=AGUA
7%=PROTEINAS
2%=OTROS SOLUTOS (IONES,GLUCOSA) ETC

Al centrifugar generamos dos fases:


PLASMA(55%)

ELEMENTOS FIGURADOS:
GR= 4-5 MILLONES. HTCO:45%

GB=5000 A 9000
PLAQUETAS 300MIL
• Examen que estudia los elementos figurados
de la sangre desde el punto de vista cuali y
cuantitativo: (morfología y cantidad) de:
 Glóbulos rojos.
 Plaquetas
 Glóbulos blancos: - Neutrófilos
- Basófilos
- Eosinófilos
- Linfocitos
- Monocitos
SERIE ROJA
Glóbulos rojos

Se estudia en la muestra:
• Su Número:
• % de glóbulos rojos en 1cc. de sangre = (HEMATOCRITO).
• Concentración de hemoglobina = Hgb. grs/dl.
• Volumen corpuscular
• Tamaño
• Forma
Valores normales del Hemograma

SEXO Nº DE G.ROJOS HEMATOCRITO HEMOGLOBINA

Hombre 4,2-5,4 x 106 /mm3 42 - 52% 14 - 17 gr / dl

Mujer 3,6-5,0 x 106 /mm3 36 - 48 % 12 - 16 gr / dl

AVERIGUAR ??????????
Volumen corpuscular medio (VCM):
Hematocrito/Nº de Hematíes (en millones)
Valor normal=82-98 microlitros

Concentración de Hemoglobina Corpuscular Media (CHCM)


Expresa el promedio de la concentración de hemoglobina del G.rojo.
Relaciona el peso de la hemoglobina y el volumen del hematíe.
Hemoglobina/Hematocrito
Valor normal=32 a 36%

Hemoglobina Corpuscular Media (HCM)


Informa acerca del contenido medio de Hb. En cada hematíe.
Su resultado se relaciona con el VCM y con la CHCM.
HCM= Hb/nº GR(en millones)
Valor normal= 27-31 picogramos
Hemoglobina Corpuscular Media
(HCM)
Indica la hemoglobina contenida en un
hematíe

Esta medición, permite detectar


precozmente la deficiencia de fierro
Anormalidades de los eritrocitos
• Forma
• Tamaño
• Citoplasma (Inclusiones)
Anisocitosis
diferentes tamaños
Diferentes formas y tamaños de los
eritrocitos.
Glóbulos rojos
↓ ANEMIA: ↑ POLIGLOBULIA:

Destrucción de G.R. Aumento en la producción


↓de la producción de G.R. medular.
Pérdida de G.R. Secundarios a mayor
requerimiento de oxígeno.
Ficticia (Hemodilución).
Ficticio.
Alteraciones de los eritrocitos:

 Alteraciones del
tamaño: anisocitosis.
 Alteraciones de la
forma:
poiquilocitosis.
 Inclusiones en el
glóbulo rojo:
 punteado basófilo.
 cuerpos de Howell – Jolly
 presencia de núcleos en
su interior
G.R normales
Poiquilocitosis
Diferentes formas
ALTERACIÓN DE LA FORMA
•Acantocitos
•Dacriocitos
•Degmacitos
•Drepanocitos
•Equinocitos o hematíes crenados
•Esferocitos
8??? •Esquistocitos
•Estomatocitos
•Queratocitos o hematíes en casco
•Knizocitos
•Leptocitos (codocitos o hematíes en
diana)
•Ovalocitos (elipticitos)
•Poiquilocitos
•Picnocitos
Eliptocitosis

Poiquilocitosis
ESFEROCITOS
• Más pequeñas,más esféricas, más
concentración de HB.

• Se ve en:
• Anemia Hemolítica
• Esferocitosis hereditaria
• Hiperesplenismo
• Quemaduras graves
• Hipofosfatemia
• Sepsis por Clostridium Welchii
Esquistocitos
Hematíes maduros, de tamaño y forma
irregulares o fragmentos celulares, debidos
a roturas de la membrana.

Se presentan en:
•- anemias hemolíticas por fragmentación
mecánica
•- síndrome hemolítico urémico
•- púrpura trombótica trombocitopénica
•- microangiopatías del embarazo y
puerperio.
•- Coagulación intravascular diseminada
La vida media de un glóbulo rojo es de 120 dias.

.
Reticulocitos(son GR jóvenes)

• El recuento de reticulocitos es de gran valor en el estudio de la


anemia
El rango normal en adultos y niños es de 0,2 a 2%, esto se puede
comprender mejor si entendemos que cada día muere entre un 1-2%
de los eritrocitos. , los valores de referencia oscilan entre 2-6%.
Cuerpos de Howell-Jolly
Se ven cuando existe
anesplenia orgánica o
funcional.
Corresponde a restos
nucleares. Habitualmente son
atrapados por el bazo. Cuando
este no existe, aparecen en la
sangre periférica.
Análisis de la serie blanca
Exámen de orina:

Importante valorar la recolección de la muestra.

• Color.
• Densidad.
• Proteinuria.
• Sedimento urinario.
Orina
• El color normal es amarillo por elimanación de sustancias
(urocromo) y grado de concentración de estas.

• Una orina normal puede tener elementos anormales como


proteínas, cristales,etc.
Turbidez
• Causas normal: Orina no recién emitida, precipitación de fosfatos en
pH alcalino.

• Causas patológicas: Leucocituria,


bacteriuria y la hematuria.
Densidad
• Se mide por un densímetro, refleja la concentración disuelta de
solutos en la orina .

• El valor normal es entre 1.001 a 1.034 de acuerdo al balance hídrico.

• Valores mayores de 1024 implican capacidad de concentración


conservada.
PH
• En condiciones fisiológicas el ph de la orina oscila entre 4.0 y 8.0 .

• La primera micción matinal habitualmente ácida (ph5-6) ,se debe a la


excreción de hidrogeniones a razón de 1mEq-K-día.
Orina alcalina
• Dietas vegetarianas .

• Embarazo.

• Diuréticos.

• Infección urinaria a proteus.


Proteinuria
• Las tiras reactivas poseen una limitación cuantitativa, detectan sólo
albúmina.

• La proteinuria del examen de orina detecta sólo valores mayores de


300 mg. en 24 hs, por lo tanto no detecta proteinuria fisiológica ni
microalbuminuria.
Glucosa
• No se detecta en condiciones normales.
• El umbral renal es 180 mg/dl.
• La glucosuria requiere por lo menos 200 mg/dl.
• Puede haber glucosuria con glicemia normal: en defectos
del transporte de glucosa renal o disfunciones tubulares.
Cetonas

• Están ausentes en condiciones normales


• Su presencia se relaciona con: cetoacidosis
,alcoholismo o ayuno.
Hemoglobina
• Hematuria ,es lo primero a plantear si aparece positiva en una tira
reactiva.

• Hemoglobinuria aparece cuando aumenta la concentración de


hemoglobina en plasma (hemólisis) y se excede la capacidad de
fijación de la haptoglobina .
Sedimento urinario
• Células .
• Cilindros.
• Cristales.
• Bacterias.
Sedimento patológico.
• Hematuria: es importante el estudio del sedimento para el
diagnóstico.

• Leucocituria mayor de 4.5 por campo. Puede provenir de cualquier


sector del riñon.
Si se acompaña de proteinuria y clilindruria lo más probable es el origen renal
Si se acompaña de piocituria puede correspoder a infección.
Son polimorfonucleares.
Si aparen eosinófilos pensar en nefritis insterticial secunadaria a
fármacos.
Perfil lipídico:

• Triglicéridos
• Colesterol LDL (lipoproteína de baja densidad)
• Colesterol HDL (lipoproteína de alta densidad)
• Colesterol total
• Colesterol VLDL (lipoproteína de muy baja densidad) en
suero.

• Es necesario no ingerir alimentos ni líquidos, a excepción de agua, entre 9 a 12 horas


antes de tomar la muestra de sangre.
Valores normales:

Colesterol total: menor de 200 mg/dL


HDLcol,: superior a 40 mg/dL
Triglicéridos: 10 a 150 mg/dL
LDLcol.: 60 a 130 mg/dL
VLDLcol: 2 a 38 mg/dL.
Perfil Lipídico:

• Los valores altos de HDL (60 o más) son protectores


y por lo tanto deseables .

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