VARIACION GENTICA: La

Mutacin, Origen y deteccin

Dr. Csar A. Guzmn Vigo

FACULTAD DE MEDICINA HUMANA - UDCH
 Origen de la mutacin gnica
Concepto de mutacin:
Proceso mediante el
cual un gen sufre un
cambio estructural. En
la mayora de los casos,
el trmino se refiere a
un cambio fenotpico
causado por un gen
modificado
 Tipos de mutaciones:
Por sustitucion de un par de bases: m.puntuales
T
Bases pricas
Bases pirimdicas

A G m.por transicin

m. por transversin

C
Different types of radiation can lead to different types of chromosomal aberrations
and damage. Beta, gamma, and X rays (low LET) can cause damage to base pairs
or can cause single or double strand breaks, as shown in the top drawing of a DNA
strand. Alpha and neutron radiation (high LET) can cause double strand breaks,
as shown in the bottom drawing. Several Station experiments are dedicated to
quantifying the dose rate of both low and high LET radiation the crew receive
during their stay as part of the ongoing effort to improve shielding. [U. of Essen]
 Tipos de mutaciones:

Sustituciones: 1) Silenciosas o silentes: Los cambios no

alteran la secuencia de amincidos, debido a la
redundancia del cdigo: AGG---CGG (Arg)
2) Con cambio de sentido, provocan un cambio en un
nico amniocido: Sinomimia (aminocidos quimicamnte
similares AAA---AGA Lys bsica x Arg bsica) No
sinonimia (aminocidos quimicamente diferentes UUU --
- UCU Fen hidrofbica x Ser polar)
3) Mutaciones sin sentido: Producen uno de los tres
codones de terminacin en el RNAm: UAA, UAG, UGA
 Tipos de mutaciones:

Adicin o Deleccin 1. de un nico par de

nucletidos: Mutacin de cambio de fase 2. De
varios a muchos pares de nucletidos: Cualquier
insercin o deleccin de pares de bases que no
sea mltiplo de tres cambia la fase de lectura en
segmentos de DNA que determinan protena;
como resultado, a partir del sitio de cambio de
fase se sintetizan aa diferentes y con frecuencia
aparecen codones de terminacin: UAA, UAG,
UGA
 REVERSIN EQUIVALENTE

mutacin reversin
AAA (Lys) ------- GAA (Glu) ------- AAA ( Lys)
Silvestre Mutante Silvestre

mutacin reversin
UCC (Ser) ------- UGC (Cys) ------- AGA ( Ser)
Silvestre Mutante Silvestre

mutacin reversin
CGC (Arg bsica) ------- CCC (Pro no bsica) ------- CAC ( His bsica)
Silvestre Mutante Silvestre
 Tipos de mutaciones:

Reversin equivalente
La probabilidad de que un sitio mutante regrese a
un estado allico previo a travs de una mutacin
es mucho menor que la probabilidad de que vaya
a sufrir una nueva mutacin hacia otro estado
allico. La reversin requiere un cambio hacia
una base especfica (A, T, G C) mientras que
un nuevo estado allico lo puede causar un
cambio hacia cualquiera de las cuatro bases.
 Tipos de mutaciones:
M. de regulacin de la transcripcin o traduccin.
Cualquier mutacon del promotor puede reducir la
afinidad de la RNA polimerasa, y por lo tanto reduccin
en la produccin del RNAm (reduccin de una protena
determinada).
M. en lugares de corte y unin
Se producen en los lmites intrn-exn, alterando la seal
necesaria para la escisin apropiada de un intrn. Ello
ocurreen la secuencia GT que siempre define el locus
donante 5 o en la secuencia AG que define el locus
receptor 3
 Otros Tipos de mutaciones:

M. por trasposones(un tipo de DNA capaz de

propagar copias de si mismas) o elementos mviles.
Provocan mutaciones de cambio de pauta de lectura.
Insercin de elementos mviles ocasiona casos
aislados de neurofibromatosis I y hemofilia A
M. de DNA repetido en tandem
Los individuos patolgicos tienen cientos o incluso
miles, nmero que aumenta durante la meiosis o
durante el inicio del desarrollo fetal ( repeticiones
expandidas)
 Clasificacin de mutaciones:
Mutaciones inducidas: aquellas que surgen
despus de un tratamiento planeado con
mutgenos, agentes ambientales que
aumentan la tasa de mutacin
Mutaciones espontneas: aquellas que surgen
en ausencia de un tratameinto con un
mutgeno. Corresponden a la <tasa de
mutacin basal> y, presumiblemente son la
fuente natural de variacin gentica
observada en las poblaciones.
 Mecanismos de induccion de
mutaciones:
Mecanismos de accin: Reemplazar una base, alterar una
base de modo que empareje erroneamente con otra, o daar
una base, de modo que no pueda emparejar con ninguna.
Sustitucin de bases: anlogos de bases ( Tendencia natural
de las bases a adoptar formas diferentes Tautomerizacin -
Formas ceto enol)
Errorres de emparejamiento por ionizacin: El 5-BrU
anlago a la timina. La Timina empareja con la A, pero el 5-
BrU lo hace con la G. El BrU provoca transiciones G.C ---
A.T A.T G.C
Otro anlogo: 2-AP, anlogo a la adenina, que empareja con
la Timina, pero que en forma errnea lo hace con la C.
Provoca transiciones A.T ---G.C
 Mecanismos de induccion de
mutaciones:
Modificacin de bases: 1) Agentes alquilantes:
Etilmetanosulfonato (EMS) y la nitrosoguanidina (NG).
Aaden grupos alquilo: etilo en el caso de la EMS y
metilo en el caso de la NG.Esta ltima provoca
mutaciones transicionales G.C ---A .T
2) Agentes intercalantes: Proflavina, naranja de acridina,
compuestos ICR. Provocan inserciones o delecciones de
un par de nucletidos. Pueden colocarse entre las bases
del DNA de cadena sencilla, estabilizando las bases
desemparejadas durante la formacin de un desfase por
deslizamiento de la polimerasa.
 Mecanismos de induccion de
mutaciones:
Lesiones de bases: Elevado nmero de mutgenos,
bloquean la replicacin. UV: genera variedad de
fotoproductos en el DNA. La mutacin ms importante
es la transicin C --- T, pudiendo producir tambin
transversiones y desfases, as como duplicaciones y
delecciones de mayor tamao
La aflatoxina B1 (AFB1). Se une a la posicin N7 de la
guanina, rompe unin entre base y azcar, produciendo
sitio aprico.Provoca transversiones G.T --- T . A.
 Mecanismos de mutacion
espontnea
Causas: Errores en la replicacin ( la mayora transicionales),
lesiones espontneas ( despurinizacin + y desaminacin ) y
elementos genticos transponibles
Tasas de mutacin: a nivel nucleotdico es de 10-10 c/pb /div. cel.
(mutaciones que han escapado el proceso de reparacin del DNA)
En cada gen: 10-4 y 10-7 /locus/div.cel.
Margen de variacin: 1) Tamao del gen: somatostatina (1,480
pb), DMD (2 x 106 pb), otros: Hemofilia, Neurofibromatosis I
(elevadas tasas). 2) Presencia de puntos calientes: mutacin de C x
T, por metilacin de dinucletidos CG (formacin de 5-metilcitosina,
que pierde su grupo amino y se transforma en T).
Tasa de mutacion de CG es 12>que otras secuencias nucleotdicas.
3) Edad de padres : S. Marfan y Acondroplasia (para SM, riesgo
que corre un hombre de 30 de engendrar un hijo afectado es de 5
veces ms que uno de 40.
 Metilacin de la Citosina: La adicin de un grupo metil a una base
citosina forma 5-metil citosina. La consiguiente prdida de un grupo
Amino(desaminacin) forma timina, resultando as en una sustitucin
citosina ------ timina

H NH2 Desaminacin CH3 O

C C C C

H C Citosina N H C Timina N H

CH3 NH2 N C
N C
O C C O

H C 5-metil N
Citosina
Metilacin N C
 Efectos de la radiacin en las tasas
de mutacin
Mutacin en el hombre 1/10,000 genes /generacin.
Medicin directa es difcil
Persona en pas desarrollado: Exposicin a Rad.Ioniz. 6-7
rem (0,01 j.de energa /Kg de tejido).
En Japn: II guerra m.: personas expuestas desarrollaron
cnceres y aberraciones cromosmicas ( expuestos
recibieron entre 30 a 60 rem de radiacin). Efecto en
clulas germinales?
Estudioso recientes confirman aumentos de tasas en
leucemias, cncer de tiroides, en expuestos a pruebas
nucleares. Cncer al pulmn: presencia de radn, por
desintegracin de uranio
Evitar exposicin innecesaria de gnadas y fetos
 Mecanismos biolgicos de reparacin

Valor bajo de la tasa de mutacin espontnea: eficacia de

sistemas de reparacin, su eliminacin de alguno aumenta la tasa
de mutacin
Categoras de procesos de reparacin: prevencin de errores,
reversin del dao, reparacin por escisin y reparacin
postreplicativa
1. Prevencin de errores: Sistema que en dao oxidativo del
DNA por presencia de radicales superxido, los cataliza en
perxido, y la enzima catalasa convierte a ste en agua
(Suoperxido dismutasa)
2. Reversin directa del dao: Fotodmeros de pirimidina, pueden
ser reparados por Fotoliasa. Transferasas de grupos alquilo,
revierten lesiones, retirando grupos alquilo aadidos a la posicin
O-6 de la guanina por accin de mutgenos como la
nitrosoguanidina y el etilmetanosulfonato
 Mecanismos biolgicos de reparacin
3. El sistema general de reparacin por escisin, rompe un enlace
fosfodister, a cada lado produciendo la escisin de un
oligonucletido. El hueco, se rellena por sntesis reparadora que
queda sellado por una ligasa. En procariotas se eliminan 12 a 13
nucletidos en eucariotas 27 a 29. Tambin se produce la
reparacin por escisin de bases , que se lleva a cabo por
glicosidasas (rompen enlaces N-glucosdicos). Ejem: Glicosidasa
de uracilo, que elimina uracilo del RNA (desaminacin
expontnea de citosina) si no se repara, se pueden producir
transiciones C---T.
4. Reparacin postreplicativa: reconocimiento de lesiones
despus que el DNA se ha replicado. Ejm: Sistema de reparacin
de emparejamiento (Reconocimiento, determinacin de base
incorrecta +, escisin y relleno)
 Xeroderma pigmentosa: Una enfermedad por
reparacin defectuosa del DNA
UV: dmeros pirimdicos, peligrosos en
piel. Enzimas reparadoras en ind.
normales, no en Xeroderma. Errores de
replicacin, dan lugar a sustituciones
Enfermedad comienza los primeros 10
aos, a la aparicin de pecas, le sigue
tumores cutneos. Pueden desarrollar
neoplasias malignas, que en ocasiones
provoca la muerte antes de los 20.
Enzimas: endonucleasa, exonucleasa,
polimerasa y ligasas. Codificadas por al
menos 7 genes, una mutacin en alguna
provoca XP
Otras enf. S de Bloom, de Cockayne,
ataxia telangiectasia, anemia de Fanconi.
 Mutaciones espontneas y las
enfermedades humanas
Enfermedades humanas: Cambios de base, delecciones e inserciones;
otras por delecciones o duplicaciones de secuencias repetidas:
1)encefalopatas mitocondriales: Kearns-Sayre (deficiencia del
SOXFM), 2) Enfermedad de Fabry: delecciones o duplicaciones
cortas, que originan mutacin del gen alfa-galactosidasa
Mecanismo comn: Repeticiones de trinucletidos (CGG situado en el
gen FMR-1, 29 repeticiones es la ms comn, produce una variacin
del nmero de residuos de arginina
Explicacin de expansiones de repeticin: emparejamiento errneo
deslizado durante la replicacin
La atrofia muscular espinal y bulbar ligada al X (E. De Kennedy):
Repeticin CAG, ligada al gen que determina receptor de andrgenos
(normales 21, afectados entre 40 y 52
Otra: Distrofia miotnica: CTG en extremo 3 del transcrito (normales
5 copias, afectados leves con 50 copias, graves ms de 1,000)