Microbiologa e

Inmunologa I
Microbiologia veterinaria
Introduccin y
Generalidades
 Concepto
Estudio de microorganismos: bacterias
hongos y virus . Estructura, nutricin,
gentica, reproduccin clasificacin y
taxonoma con el propsito de conocer
sus bondades y patogenecidad y as
proponer alternativas de tratamiento y
control de enfermedades bacterianas ,
micoticas y vricas que conduzcan a la
profilaxis y prevencion de enfermedades
 HISTORIA DE LA MICROBIOLOGIA
Primer periodo : desde la antigedad hasta los
primeros microscopistas.
Segundo periodo: Lenta acumulacin de
observaciones, l675 hasta la mitad del siglo
XIX), descubrimiento de los microorganismos
por Leeuwenhoek .
Tercer periodo:Cultivo de Microorganismos hasta
finales del siglo XIX , donde las figuras de
Pasteur y Koch cristalizan a la Microbiologa como
ciencia experimental bien asentada.
 Cuarto periodo (Principios del siglo XX hasta
nuestros das) en el que los microorganismos
se estudian en toda su complejidad fisiolgica,
bioqumica, gentica, ecolgica, etc.,
Crecimiento de la Microbiologa, surgimiento
de disciplinas microbiolgicas especializadas
(Virologa, Inmunologa, etc), y la estrecha
imbricacin de las ciencias microbiolgicas en
el marco general de las Ciencia
 Antonie van Leeuwenhoek

Descubri los
microorganismos
en tejidos,
(1632-1723),

Comerciante Holands
 Fabric unos cuatrocientos microscopios
simples.
Lleg a obtener aumentos de casi 300
dimetros.
En 1675 descubri que en una gota de
agua de estanque pululaba una
asombrosa variedad de pequeas
criaturas a las que denomin
animculos.
En 1683 descubre las bacterias , por
lo que se considera el Padre de la
Microbiologa.
 Microscopio simple y compuesto

Microscopio simple Microscopio compuesto de

de Leeuwenhoeck Robert Hooke
 Robert Hooke (1635-1703) usando
microscopios compuestos, describi los
hongos filamentosos (1667)
En 1877 John Tyndall (1820-1893) aplic su
sistema de esterilizacin por calentamiento
discontinuo ( tindalizacin)
Ferdinand Cohn descubri las esporas
bacterianas.
Pasteaur en 1857 demostr que los agentes
de la fermentacin lctica eran
microorganismos.
Gracias a la fermentacin butrica, Pasteur
descubri la presencia de microorganismos
que se desarrollaban en ausencia de
oxgeno, (aerobiosis y anaerobiosis)
 Los primeros cultivos puros fueron
obtenidos por el miclogo Brefeld, quien
logr aislar esporas de hongos y
cultivarlas sobre medios slidos a base de
gelatina.
Por su menor tamao, este mtodo se
haca inviable para las bacterias.
Mtodo basado en diluciones: Lister, en
1878 realiz diluciones secuenciales de
cultivos mixtos, hasta lograr muestras en
las que exista una sola clula.
 Robert Koch

Koch emple rodajas de papa como sustrato

slido nutritivo sobre el que se podan desarrollar
colonias macroscpicas .
(1881) Loeffler aadi gelatina y compact el tpico
caldo de cultivo a base de carne.
En1882 Walter Hesse introdujo el agar-agar
(polisacrido extrado de algas rojas) como nuevo
agente solidificante.
En 1887 Petri,ayudante de Koch, utiliz las de
placas de cristal planas, que se conoce como Placas
de Petri.
 Abb en 1878 desarroll el objetivo de
inmersin en aceite
1875 Carl Weigert ti bacterias con
pirocarmn.
(Koch, 1877) El azul de metileno,
fuchsina, y el cristal violeta.
En 1882-1883 Ziehl y Neelsen desarrollan su
mtodo de cido-alcohol resistencia para teir
Mycobacterium tuberculosis.
En 1884 el patlogo dans Christian Gram
establece una tincin de contraste que permite
distinguir dos tipos bacterianos Gram + y
Gram
 En 1890 Loeffler logra visualizar flagelos
bacterianos por medio de su tcnica de
impregnacin argntica.
En 1840 Henle, plante la teora de que las
enfermedades infecciosas estn causadas por
seres vivos invisibles.
Pasteur en 1869 identific al protozoo
Nosema bombycis como el responsable de
epidemia.
C. Davaine, entre 1863 y 1868, encontr que
en la sangre de vacas afectadas aparecan
grandes cantidades de microorganismos a los
que llam bacteridios.
 Frasco con "cuello de cisne" de
Pasteur, con el que refut las ideas
sobre la generacin espontnea
EL SIGLO DE PASTEUR

- poca de brillantes personajes como Volta, Tyndall,

Cuvier y Darwin

- La ciencia biolgica y qumica permaneca sumamente

vinculada al quehacer mdico o a la bsqueda de los
secretos del universo.
PASTEUR
PRIMEROS AOS

- Nace el 27 de Diciembre de
1882 en Francia.

- Su padre un ex soldado de
Napolen, que tena preferencia
por la educacin para sus hijos.

- Es enviado a Paris por

insistencia de su profesor
Romanet
PASTEUR
PRIMEROS AOS

- En 1840 obtiene su bachillerato

y al ao siguiente es profesor
auxiliar (primer trabajo).

- Durante su estancia en Paris

acude maravillado a las clases de
Jean Baptiste Dumas en la
Sorbona.

- En 1846 empieza a trabajar en

el laboratorio de Antoine Balard
PASTEUR
LOS CRISTALES

En 1847 Pasteur
obtiene su
doctorado en
Qumica y al ao
siguiente trabaja en
la Universidad de
Estrasburgo.

-
PASTEUR
LOS CRISTALES

- Pasteur analiz los

cristales de Tartrato y
Paratartrato al microscopio.

- Consigui preparar
muestras de acuerdo a sus
caractersticas prediciendo
su capacidad de rotar la luz
polarizada

Posteriormente observ que un hongo degradaba el

tartrato pero solamente su forma D
PASTEUR
LA FERMENTACIN

- Inicialmente el proceso de la fermentacin era descrito

como un evento meramente qumico por Lavoisier y
Berzelius.

- En 1835 De la Tour haba descrito levaduras en algunos

fermentos.

- Schwann agreg arsnico al fermento y el proceso ces.

- Von Liebig propone que al morir la levadura libera

sustancias albuminoides que al vibrar transforman la glucosa
en etanol y dixido de carbono.
PASTEUR
LA FERMENTACIN

- Pasteur inici procesos de

cultivos de levadura a diferentes
temperaturas , pH y nutrientes.

- Encontr en la fermentacin
butrica la presencia de seres
anaerobios y prob como el paso
de una corriente de aire retrasa o
evita la fermentacin.

- Acua el trmino Aerobio y

Anaerobio.
PASTEUR
LA FERMENTACIN

- El vinagre se produca siempre con un inculo anterior

tanto en Francia como en Alemania.

- Pasteur propone que le proceso se debe a la Mycoderma

aceti

- Demuestra que es posible obntener el cido actico con

dicho microorganismo en una solucin con alcohol, sales y
amoniaco.

- Al analizar los toneles de produccin confirma su

hiptesis, la viruta estaba contaminada, al calentarla cesaba
la fermentacin.

- Pudo a partir de ese momento seleccionar cepas de

PASTEUR
LA FERMENTACIN

- Se saba que el vino aejo tena un buen sabor pero con

el tiempo esto era perjudicial.

- Pasteur saba que el oxigeno era un arma de doble filo.

- Logra encontrar la correlacin entre la forma de la

levadura y el estado del proceso de fermentacin.

- Asimismo previene de la contaminacin por otros

microorganismos.
PASTEUR
LA FERMENTACIN

- En 1871 visita Inglaterra y con su microscopio logra

predecir el final del proceso de fabricacin de la
cerveza.

- Analiza los barriles de cerveza malograda sin

encontrar inicialmente las bacterias causantes del mal
sabor.

- Utiliza hipofosfito, bisulfito para eliminar

microorganismos.
PASTEUR
LA FERMENTACIN

- De regreso a Pars propone el uso del calor (55C) para

mejorar la conservacin del vino.

- Prueba su mtodo en una planta experimental bajo la

supervisin de qumicos y catadores
PASTEUR
POLMICA DE LA GENERACIN ESPONTNEA

- La pugna entre la generacin espontnea y la biognesis

permaneca latente en el debate entre los experimentos de
Spallanzani y Needham

- Schwann (1837) pas aire por potasa custica o lo calentaba

y no creca nada en el matraz.

- Experimentos semejantes realiz Von Dusen con aire

arrastrado por cido sulfrico o filtrado por un algodn
PASTEUR
POLMICA DE LA GENERACIN ESPONTNEA

- Pasteur ingresa al debate, observando que la

esterilizacin es mejor en un medio cido detect bacterias
en tapones de algodn
PASTEUR
POLMICA DE LA GENERACIN ESPONTNEA

- Su clebre experimento con el matraz de cuello de cisne

es impulsado por Balard
PASTEUR
POLMICA DE LA GENERACIN ESPONTNEA

- Hervia y sellaba matraces para luego repetir el

experimento en diferentes lugares y analizar la
contaminacin. Comprob que exista un aire estril en
algunos lugares.

- En 1872 el experimento de Bastian de cultivos en orina

lleva a Pasteur a idear un mtodo de esterilizacin al calor
hmedo (Pasteurizacin)

- Luego recibe el apoyo del ingls Tyndall que haba

conseguido aislar un aire pticamente vaco. Surge un
nuevo mtodo la tyndalizacin.
PASTEUR
LOS GUSANOS DE SEDA

- La infeccin que provocaba

manchas oscuras y la muerte
de los gusanos se haba
extendido por casi todo el
mundo.

- Solamente el anlisis
minucioso de Pasteur le
permiti predecir lo resultados
de cada puesta de huevos.
PASTEUR
TEORA MICROBIANA DE LA ENFERMEDAD

- Trabajos pioneros de
Lister, Nightingale y
Koch.

- Demuestra Pasteur que

las enfermedades
puerperales eran un
error por falta de
limpieza
PASTEUR
TEORA MICROBIANA DE LA ENFERMEDAD

- La rabia es su primer gran desafo al poder aislarla.

- Sin embargo consigue cultivar al causante en tejido

nervioso de perros (in vivo)

- Encuentra resistencia contra el clera en gallina

expuestas a la enfermedad

- Atena cultivos de carbunco a altas temperaturas y de

rabia por monos
PASTEUR
TEORA MICROBIANA DE LA ENFERMEDAD

- Los frascos de Roux inspiran

a Pasteur.

- El filtro de potasa atena al

factor de la rabia.

Inicia inoculaciones en perros

PASTEUR
TEORA MICROBIANA DE LA ENFERMEDAD

- A pesar de numerosos debates

inicia la vacunacin de seres
humanos

- En 1886 haban 2490 vacunados en

Francia

- Luego utilizara con xito vacunas

contra el Carbunco y la erisipela del
cerdo
Permtanme darles un consejo que siempre he intentado
seguir en mi propio trabajo: el permanecer el mayor tiempo
posible con el mismo tema. Creo que el secreto del xito es
el esfuerzo prolongado. Mediante la perseverancia en un
tema de investigacin se llega a obtener lo que me inclino a
llamar el instinto de la verdad
 Pilares de la Microbiologia
Medica
Luis Pasteur y Robert Koch
Iluminacin del microscopio, fruto de la colaboracin entre
Koch y Abbe
Objetivo de inmersin, fruto de la colaboracin
entre Koch y la Industria ptica Carl Zeiss
Ilya Ilich Mechnikov
 El zologo ruso Ilya Ilich Mechnikov (1845-
1916), haba realizado observaciones sobre la
fagocitosis en estrellas de mar y pulgas de agua,
En 1883, su Teora de los fagocitos, tras
estudiar fenmenos de englobamiento de
partculas extraas por los leucocitos de conejo
y de humanos.
Inform que existan fenmenos de eliminacin
de agentes patgenos por medio de clulas
devoradoras (fagocitos) que actuaban en
animales vacunados contra el carbunco, y
explic la inmunizacin como una habituacin
del husped a la fagocitosis.
 HITOS EN LA HISTORIA DE LA MICROBIOLOGIA
1908 Paul Ehrlich Bala magica .
Quimioterapia
1919 J. Bordet . Inmunidad
1929 A. Fleming. Penicilina
1944 O. Avery ADN material
gentico de transformacin.
1953 J.Watson y Crick Estructura ADN
1966 F. Rous Virus y cancer
1969 M. Delbruck Patogenesis viral
 1975. G. Kholer
Anticuerpos monolonales
1986. E. Ruska
Microscopio electronico
1993. k. Mullis
Reaccion en cadena de Polomerasa.
1996. P Doherty
Infeccion viral
1997. S. prusiner Teora del Prion
 ESTRUCTURA Y FUNCION DE
LA CLULA BACTERIANA
Termino bacteria.
Latin Bacterium= bastn
Clula Procariotica
 Eukaryotic cell Prokaryotic cell
(e.g. animal)
Flagellum
Rough endoplasmic Cell membrane Nucleoid Cell wall
reticulum
Nucleus

Gram +

Pili
Gram -
Granule
Capsule
Cytoplasm Cell (inner) membrane Outer membrane
Mitochondria Ribosomes Cell wall
 DIFERENCIAS PROCARIOTAS EUCARIOTAS

PROPIEDAD PROCARIOTA EUCARIOTA

NUCLEO Sin membrana nuclear Con membrana nuclear

Pared celular Peptidpglucano quitina

Mitocondrias no si

Esteroles No ( excepto micoplasma) si

Citoplasma No diferenciado citoesqueletico

Inclusiones Celulares varios Reticulo, Ap. de golgi,

mitocondrias, lisosomas,
divisin Fisin binaria Mitosis, meiosis

Endosporas Si No

tamao 0.5-10 micrometros > 10 micrometros

cromosomas varios Uno o dos

 Futuro de la microbiologa
Se perfila una direccin hacia la citologa,
gentica, Bioqumica a nivel molecular.
Las bacterias son capaces de sintetizar
protenas
Aumenta la fertilidad del suelo
Biorremediacion: degradacin de
sustancias toxicas.
Exobiologia Estudio de vida extraterrestre.
 Antibioticos y resistencia microbiana
Perfeccionamiento sobre gentica
microbiana.
Se introdujo en E coli K-12 el gen productor
de insulina y produccin industrial.
Produccin industrial por tcnicas de ADN
recombinante
Utilizacin en probioticos .
FORMA AGRUPAMIENTO
Y
TAMAO DE LAS
BACTERIAS
Tamao: Invisibles al ojo humano, se miden en
m que equivale a 10mm-3, varan dependiendo
de las especies entre menos de 1 m y 250 m,
siendo lo ms habitual entre 1 y 10 m.

En las clulas bacterianas la relacin

superficie- volumen celular es muy alta lo que
permite la entrada de muchos nutrientes para
alimentar a un pequeo volumen con una alta
actividad metablica.
 Muy Pequeas ( 0.3 us): Micoplasmas,
Rickettsias y Chlamydias.
Pequeas: Brucella, Pasteurella,
Haemophilus
Medianas ( 1.1- 1.5 us) : E. coli, Proteus,
Pseudomonas
Grandes ( 50 us- 0.5 mm) : Spirochaetas,
Bacillus , Clostridium
 La forma de una bacteria esta
determinada por la rigidez y composicin
de su pared celular.

Las bacterias poseen una de las tres

formas fundamentales: esfrica, cilndrica
o espiral.
comparacin entre el tamao de una bacteria tpica como Escherichia
coli (0.5 x 2 m) y el de una clula eucariota).
FORMA
 PARED CELULAR
ESTRUCTURA DEL PEPTIDOGLICANO
Macromolcula que rodea a bacterias
proporcionando resistencia mecnica y
confiriendo la forma.
Formada por un polmero complejo: murena,
mucopeptido, mucocomplejo de Park , o
pptidoglucano que recubre completamente
la clula.
Formado por cadenas glucosdicas en que se
repite una unidad elemental de N-
cetilglucosamina
 unida por un enlace glicosdico 14 a
cido N-acetil-murmico.
Las unidades elementales estn entre s
mediante enlaces glicosdicos 14.
Las cadenas glucosdicas estn
orientadas de forma paralela y estn
unidas entre s mediante puentes
peptdicos formados por cadenas de
aminocidos que estn unidos al resto de
cido N-acetilmurmico
Sntesis de peptidoglucano
Membrana externa de Lipopolisacridos y
Protenas (LPS)
cidos teicoicos presente en las gram +
 Membrana bacteriana
Formada por una bicapa lipdica. fosfolpidos
y no se encuentran esteroles (salvo en el
caso de los micoplasmas).Esto diferencia
claramente las membranas bacterianas de las
de clulas eucariticas que s tienen esteroles
en sus membranas
FUNCIONES DE LA MEMBRANA INTERNA
1.- Barrera de permeabilidad selectiva
2.- Soporte ordenado de sistemas
enzimticos
Membrana Citoplasmatica
 Mesosomas: Invaginaciones de membrana
tipo vesicular o concntrico, intervienen en
la divisin y formacin de la pared celular
y en replicacin del ADN. Sintetiza
exoenzimas del tipo lactamasas.
Citoplasma Bacteriano: Solucin acuosa de
sales, 70% agua, CH, aa, vit,coenzimas
Contiene: Mesosomas, genoma
bacteriano,ribosomas, inclusiones
citoplasmaticas, sin mitocondrias ni
cloroplastos

 Ribosomas: Sntesis proteica, son mas

pequeas que las eucariotas. Existen entre
500 a 50,000 de acuerdo al crecimiento
celular. Se conectan por una larga
molecula de ARNm de nominados
Polirribosomas o Polisomas
Inclusiones Bacterianas:
o Grnulos de Polisacaridos: Glucgeno,
almidn.Ejm: Bacillus, Salmonella, E.coli
o Inclusiones lipidicas:Acido poli-beta-
hidroxibutirato Ejm:
Mycobacterium,Bacillus, Spirillum
 Grnulos de Cianoficina: Polipeptidos con
arginina y acido aspartico Ejm:
cianobacterias.
Carboxisomas: Enzima ribulosa 1,5
difosfatocarboxilasa necesario para
bacterias utilizan CO como unica fuente
2

de carbono Ejm: Cianobacterias, Bact.

Nitrificantes, y de azufre.
Grnulos Metacromaticos: Polifosfato
inorgnico en bacterias ricas en fosfatos.
Metacromasia=Se tie diferente al
colorante
 Grnulos de Azufre: Oxidan Sulfuro a
sulfato, almacenan azufre Ejm: Bacterias
anaerobias.
Magnetosomas: Partculas de magnetita,
hierro convierten la clula en un dipolo
magntico.
Vacuola de Gas: flotan en el agua Ejm:
fotgrafas, halobacterias y clostridium
Genoma Bacteriano: Material gentico,
ADN, genforo,cromosoma etc.
 CPSULA

Dispuesto de modo compacto alrededor de

la superficie celular formados por
polisacaridos forma el antgeno K.
antifagocitario
SLIME: Capa mucosa, sustancia laxa
alrededor de la clula . Factor de adherencia
Estructura de un flagelo de una bacteria Gram-negativa
Esquema de los flagelos periplsmicos de las espiroquetas
 PILIS Y FIMBRIAS
Fimbrias: bastante cortas y numerosas
hasta 1000 por clula. Es hereditaria
favorece la adherencia, inicia la infeccin
( adhesinas)
Pilis: Apndices celulares de 1 a 10,
intervienen en la conjugacin bacteriana, se
comportan como adhesinas, inducen
sntesis de anticuerpos Ejm. Dichelobacter
nodosus
Micrografa electrnica que muestra las partes principales de una endospora
Salida de la nueva clula vegetativa al final de la germinacin.

Observar la rotura de las cubiertas