EAP TECNOLOGIA

MEDICA
Esp. Laboratorio Clnico y
Anatoma
Patolgica
MISIN
Formar Tecnlogos Mdicos competentes, que contribuyan a la
promocin, prevencin y recuperacin de la salud de la poblacin,
capaces de realizar investigacin y desempearse en diferentes entornos
laborales.

VISIN
Ser reconocidos como una de las mejores escuelas formadoras de
Tecnlogos Mdicos, por la calidad de su formacin acadmica y de sus
egresados, reconocida ante organismos nacionales e internacionales.

SABERES PREVIOS:
- DESCRIBA A LOS ANTICUERPOS Y LOS
ISOTIPOS
- MENCIONE LOS CONCEPTOS DE LA
REACCIN ANTIGENO-ANTICUERPO

OBJETIVO:
- DESCRIBIR LA ACTIVACIN DE LOS
LINFOCITOS B
- DESCRIBIR LA SNTESIS DE LAS
INMUNOGLOBULINAS

Activacin de los
Linfocitos B
Sntesis de

Inmunoglobulin

ANTIGENO

BM

B
Th2
IL-2

IL-13
IL-4
IL-5

L O N

CP

IgM

IgG
IgE

INMUNOGLOBULINAS

IgA

ANTGENO

Un antgeno (del ingls antibody generation [generacin de

anticuerpos]) o inmungeno es una sustancia que
desencadena la formacin de anticuerpos y puede causar una
respuesta inmune.
La definicin moderna abarca todas las sustancias que pueden
ser reconocidas por el sistema inmune adaptativo, ya sean
propias o ajenas.
Los antgenos son usualmente protenas o polisacridos. Esto
incluye partes de bacterias (cpsula, pared celular, flagelos,
fimbrias, y toxinas), de virus y otros microorganismos.
Los lpidos y cidos nucleicos son antignicos nicamente
cuando se combinan con protenas y polisacridos.
5

ANTGENO
Los antgenos no-microbianos exgenos (ajenos al
individuo) pueden incluir polen, clara de huevo, y
protenas de tejidos y rganos trasplantados, o
protenas en la superficie de glbulos rojos
transfundidos.
Cada antgeno est definido por su anticuerpo, los
cuales interactan por complementariedad espacial.
La zona donde el antgeno se une al anticuerpo
recibe el nombre de eptopo o determinante
antignico, mientras que el rea correspondiente de
la molcula del anticuerpo es el paratopo.
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Antgenos

Es cualquier sustancia extraa capaz de

provocar una respuesta inmune.
Puede ser una clula extraa completa,
una bacteria o un virus, una protena o una
porcin de una protena.
Los marcadores distintivos en los antgenos
que generan una respuesta inmune son los
eptopes.

Antgenos y eptopos

Antgenos

Antgeno - Anticuerpo
Clsicamente antgeno es toda
molcula capaz de generar un Ac.
Actualmente, es cualquier molcula
capaz de unirse a un Ac independiente
si lo genera.
Las molculas que generan un
anticuerpo son llamados inmungenas.

Hapteno
Son molculas pequeas que no pueden
generar Ac.
Para generar Ac deben unirse a molculas
ms grandes llamadas carrier.
Una vez que se han generado Ac contra los
haptenos, stos pueden unirse a sus
anticuerpos.
Es una molcula antignica pero no
inmungena.

RECEPTORES PARA ANTIGENOS

BCR: Receptor para antgeno de

linfocitos B
TCR: Receptor para antgeno de
linfocitos T

COMPLEJO
TCR
Y
COMPLEJO
BCR

ESTRUCTURA Y FUNCIN DE Igs

INMUNOGLOBULINAS:
Son glicoproteinas que son sintetizadas por
los linfocitos B, y las clulas plasmticas.
Con la diferencia que los linfocitos B las
sintetizan y la incorporan como receptores
de antigenos en la membrana celular (BCR).
Las clulas plasmticas que derivan de los
linfocitos B activados las sintetizan y las
secretan a la circulacin sangunea (Ac).

ANTICUERPOS

Ag.

Forma secretada
Ag.
Ig Ab

Clula plasmtica

Forma de membrana (BCR)

INMUNOGLOBULINAS SRICAS

IgM

IgE

900 kDa

200 kDa

IgM

IgE

IgA

IgG
IgA

160 kDa

IgA1, IgA2

IgG

150 kDa

IgG1, IgG2, IgG3, IgG4

Caractersticas bioqumicas
Clase

PM

Velocidad
sntesis

Ig G
Ig A
Ig M
Ig D
Ig E

150,000
160,000
900,000
180,000
280,000

28
10
7
0.016
0.0005

Vida
media
(das)

(%)
Contenido
carbohidr
atos

30
8
10
0.4
--

2.5
10
11
10
10

Estructura de la Ig

Cadenas Pesadas:
Cadenas Ligeras:

Tipos de cadenas pesadas

Tipo

PM
50,000
70,000
55,000
52,000
70,000

Isotipo
Ig G
Ig M
Ig A
Ig D
Ig E

ISOTIPO
Las cadenas pesadas determinan las clases y sub clases de
inmunoglobulinas (Isotipo)

IgG: Tiene cadena pesada gamma, tiene 4 sub clases,

gamma 1,2,3,4.
IgA: Tiene cadena pesada , tiene 2 sub clases, 1, 2.
IgM: Tiene cadena pesada .
IgD: Tiene cadena pesada delta
IgE: Tiene cadena pesada
Se denomina isotipo a las distintas clases y
subclases de inmunoglobulinas que posee un
individuo

Inmunoglobulina

DOMINIOS DE Ig
Son regiones globulares que se encuentran en las
distintas cadenas de Igs.
Cadenas livianas L, se distinguen 2 dominios, uno
variable (VL), y uno constante (CL).
Cadenas pesadas H, se distinguen 4 dominios, uno
variable (VH), y tres constantes (CH).
Las clases IgM, IgE tienen 4 dominios constantes
(CH)
En la regin amino terminal todos los isotipos tienen
una regin de hipervariabilidad, que corresponde al
sitio de combinacin con el antigeno denominado
paratopo o idiotipo. Esta constituido por regiones
determinantes de complementariedad. (CDR)

FORMACION DEL SITIO DE UNION A Ag POR PLEGAMIENTO DE CDRs

Inmunoglobulinas
Regin Variable

Regin Constante

Porcin terminal
amino N.
Muestra una amplia
variacin de secuencia
de amino-cidos.
Regin que encaja con
los antgenos.
Epitope: Sitio del
antgeno que
reacciona con la Ig.
Paratope: Area de la
Ig que interacta
especficamente con el
epitope del antgeno.

Porcin terminal
carboxilo C.
Muestra una secuencia
invariable de aminocidos.
No intervienen en el
reconocimiento
especfico del antgeno.
Intervienen en la
fijacin del
complemento,
transferencia
placentaria de
anticuerpos,
opsonizacin.

Propiedades
Clase

Fijacin
del C

Transf.
placen
taria

Presencia
en LCR

Sensibili
zacin
cutnea

Ig G
Ig M
Ig A
Ig D
Ig E

+
+
-

+
-

+
+
-

+
+

mucosa

Sntesis
en el
feto

Opsoniz
acin

+
-

+
-

+
-

Secrecin

Distribucin

Funciones

Respuesta inmune

ENFERMEDAD
INFECCIOSA

HISTORIA NATURAL

RESPUESTA
SECUNDARIA

RESPUESTA
PRIMARIA
HORIZONTE
CLINICO

AGENTE

AGENTE

SEMANAS

Inmunoglobulina G
Son las ms abundantes (70%).
Posee capacidad neutralizante,
precipitante, de fijar
complemento, de unirse a clulas
NK y a macrfagos.
Atraviesa membranas biolgicas.
Tiene los subtipos IgG1, IgG2,
IgG3 e IgG4.

ACCIN DE PEPSINA Y PAPAINA EN MLECULA DE

IgG

Inmunoglobulina M
Representan el 5 a 10%.
Son los que ms rpido se forman
Posee capacidad neutralizante,
precipitante, aglutinante, de fijar
complemento, de activar la respuesta
inmune.
No atraviesa membranas biolgicas.

Inmunoglobulina M

Inmunoglobulina A
Posee capacidad neutralizante y precipitante.
Se une a zonas secretoras.
Se encuentra en la leche materna.

ESTRUCTURA DE IgM E IgA

Secuencias adicionales no globulares en el extremo
carboxiterminal de la cadena pesada.

Cadena J, sintetizada por la clula plasmtica, participan en polimerizacin

(IgM) y (IgA)
IgM es pentamerica y IgA es dimerica
IgA posee una pieza secretora, que es sintetizada por las clulas epiteliales
de la mucosa y que la adquiere al atravesar la mucosa y pasar hacia el
lumen. Esta pieza secretora le confiere resistencia a la digestin por las
enzimas proteoliticas de la mucosa.

J
Chain

C4

Secretory
Piece

J
Chain

IgA Atravesando la clula epitelial

Inmunoglobulina D
Concentracin muy baja.
Se encuentra como receptor
en la superficie del linfocito B.

Inmunoglobulina E
En gran cantidad en personas alrgicas.
Su vida media es de 24 a 48 horas.

Transformacin linfocitos B
Requiere 2 seales para poderse
activar y transformar en clula
plasmtica :
1a = Contacto con el Ag
2a = Ayuda del linfocito T :
IL-4, IL-5, IL-6, TGF-b

(Factor de crecimiento y Transformacion Beta)

Unin CD40 / CD40 ligando

Linfocito B = CPA

Linfocito B = CPA

Linfocito B = CPA

Linfocito B = CPA

Ag
IL-1

Th
HLA II

Ag

TCR/CD3

CD4

CD25

IL-2

IL-2

IL-4

Th

CD40
Lig

CD40

Transformacin linfocitos B
Al recibir estas seales:

Se inhibe su apoptosis (expresa bcl-2)

Se enva RNAm a partir del DNA del
ncleo para iniciar sntesis de
protenas (Inmunoglobulinas)

Transformacin linfocitos B
Crece el aparato productor y el
metabolismo celular = aumenta el
retculo endoplsmico y mitocondrias
El linfocito B ahora puede producir y
liberar protenas a gran escala

Linfocito B

Watson y Crick 1953

Rosalind Franklin

Rosalind Franklin, una mujer de personalidad

fuerte, mantuvo aqu una relacin compleja
con Maurice Wilkins, quien mostr sin su
permiso sus imgenes de difraccin de rayos
X del ADN a James Watson y Francis Crick.
Ninguna otra inspiracin fue tan fuerte como
sta para la publicacin por ellos, en 1953, de
la estructura del ADN, tal como ellos mismos
reconocieron.
En febrero de 1953, a la edad de 33 aos,
Rosalind escribi en sus notas de trabajo "la
estructura del ADN tiene dos cadenas". Para
ese entonces, ella tambin saba que la
molcula del ADN tiene sus grupos fosfato
hacia afuera y que existe en dos formas.

Bases pricas y pirimdicas

Estructura del DNA

Duplicacin del DNA

Replicacin del DNA

DNA

RNA
Protena

Traduccin RNAm en
ribosomas

RECOMBINACIN
DNA

65

27

CH1

D J

CH1

D J

TRANSCRIPCION

CH2

CH3

CH2

CH3

NUCLEASA, LIGASA

RECOMBINACION SOMATICA II

CH1

NUCLEASA, LIGASA

RECOMBINACION SOMATICA I

CH2

CH3

CH2

CH3

Desoxirribonucleotidiltransferasa
RNA

CH1

D J

SPLICING
RNA

D J

CH1

CH2

TRADUCCION

VH

CH1

CH2

CH3

CH3

IgG
REGION
VARIABLE

CORRELACION GENES-REGIONES ESTRUCTURALES

65

VH

27

JH

CDR1
CDR2
CDR3

C1

REGION
CONSTANTE

C1

C2

C2

C3

C3

RNA

CDR1
40 VL
5

CDR2
CDR3

JL
C

CDR1
30 VL
4

RNA PROTEINA

CADENA
LIGERA

CDR2
CDR3

JL
C

RNA

PROTEINA

CADENA
LIGERA

PROTEINA

CADENA
PESADA

CDR: REGION DETERMINANTE DE LA COMPLEMENTARIDAD

Sntesis de Ig

Transcripcin de

RNAm en los
ribosomas del
retculo
endoplsmico
Transporte y
excrecin de Ig

Seleccin Clonal
El Ag induce
proliferacin de
la clona B capaz
de reconocerlo.
Esta clona
produce Ig
especficas para
unirse al Ag.

Teora de la Diversidad
Existe mayor nmero de
inmunoglobulinas con diferente
especificidad ( 108 ) que genes para
sintetizar cadenas de
inmunoglobulinas

Genes de regiones variables

Regin variable:

Interaccin VH y VL
Cadenas pesadas:
3 genes (V D J)
Cadenas ligeras:
2 genes (V J)
Opciones genes VDJ para VH:
V = 80
D = 30
J=6

Teora de la Diversidad

Recombinacin

Mutaciones somticas
Agregacin espontnea de nucletidos

Especificidad de linfocitos B
Una vez formada la combinacin VDJ se
mantiene esta especificidad para siempre en
ese linfocito B : receptor e Ig producidas
Solo va cambiando el isotipo de cadenas
pesadas pero unidos al mismo VDJ

Especificidad linfocitos B

Regin VH

IgM IgD

IgG
IgE

IgA

Switch de Isotipos

Los genes que codifican para el isotipo

se encuentran junto al VDJ y van
cambiando por proximidad al recibir
estmulos del linfocito T (IL-4 y CD40
ligando)
As se logra que siempre se mantenga
unida la misma cadena VDJ
(especificidad) sin importar el isotipo
de Ig que se produzca

Switch de Isotipos

IgM

IgG

Respuesta primaria / secundaria

Se obtiene as una secuencia en la
produccin de Ig : primero IgM, despus IgG
y despus IgA o IgE
La primera vez que se encuentra al Ag la
respuesta es con IgM y las siguientes veces
la respuesta ser ms eficiente, ms rpida y
predominantemente con IgG

Ag

IgM

Ag

IgG

CD40 L

IgA

IL-4

IgE

Respuesta primaria / secundaria

Respuestas Primaria / Secundaria

 Recombinacin de genes de
regin variable en cadena pesada
Unin a cadena o cadena
Recombinacin de genes de
regin variable en cadena ligera
Unin a cadena o cadena
Integra cadenas H y L
Receptor de membrana
IgM en respuesta primaria
Cambio de isotipo

 Durante la
proliferacin
clonal, la
clula
plasmtica
producir
diferente
isotipo
dependiendo
de las
citocinas del
microambien

Ag

IgA

CD40 L
IL - 5
TGF-

Mucosas

Ag

IgE

CD40 L
IL - 4

IL - 10

IL - 13

IgG 4

GENERACIN DE
DIVERSIDAD BCR Y TCR

LA GRAN INCOGNITA
Cmo pueden los linfocitos reconocer cada uno de los posibles
agentes susceptibles de invadir a un animal?
Cmo responder a nuevos antgenos producto de mutaciones
durante la rpida evolucin de los microorganismos?
La capacidad de la respuesta adaptativa de responder,
especificamente,a un enorme nmero de antgenos extraos
implica la existencia de un gran nmero de linfocitos diferentes
cada uno con su propio receptor TCR o BCR antgeno especfico,
diferente al de otro clon.
Qu determina la posibilidad de que un BCR o TCR pueda unir un
antgeno?
Esta capacidad est determinada por la forma de su sitio de
combinacin con el antgeno, la que depende del plegamiento de
sus cadenas polipeptdicas y por lo tanto de las secuencias
aminoacdicas de estas ltimas.
La secuencia de aminocidos de una protena est determinada
por la secuencia de bases del ADN que codifica para esa protena.

LA UNIN MS FUERTE ENTRE UN AG Y SU

RECEPTOR OCURRE CUANDO SUS
FORMAS SE COMPLEMENTAN
PERFECTAMENTE Y SE GENERAN
MLTIPLES UNIONES NO COVALENTES.
SIN EMBARGO, LOS AG PUEDEN UNIRSE A
RECEPTORES AUNQUE NO SE
COMPLEMENTEN PERFECTAMENTE, PERO
LA FUERZA DE UNIN SE REDUCIR

RECEPTORES TCR Y BCR NO HAN EVOLUCIONADO

PARA LIDIAR CONTRA DETERMINADAS
ESTRUCTURAS MICROBIANOS ; ESE ES EL PAPEL DE
LA INMUNIDAD INNATA.
POR EL CONTRARIO, EL REPERTORIO DE TCRs Y
BCRs ES TAN DIVERSO, QUE AL MENOS ALGUNO DE
ESTOS RECEPTORES SE UNIRA A CUALQUIER
ANTIGENO INDIVIDUAL

FAMILIAS DE GENES PARA INMUNOGLOBULINAS

La clave para generar diversidad de receptores radica

que se requieren mltiples genes para codificar cada
cadena peptdica de un receptor.
Varios genes codifican para c/regin variable, y que
uno codifica para la regin constante. Un gen de
regin C puede combinarse con un gran nmero de
diferentes genes de regin V para generar una cadena
completa de receptor. Por lo tanto, solo es necesario
tener genes para las regiones V y combinarlos con el
gen de la regin C apropiada para generar toda una
gama de receptores.
Posteriormente cadenas livianas y pesadas se
ensamblan en diferentes combinaciones (asociacin
combinatoria)

CADENA
LIVIANA DE
INMUNOGL
OBULINA

DELECION DE GENES NO
DESEADOS

CADENA
PESADA DE
INMUNOGL
OBULINA

Inmunoglobulina
No todos los
anticuerpos son
Gammaglobulinas

Inmunoglobulina

Las inmunoglobulinas son sustancias

con capacidad de anticuerpo