Acuaporinas:

canales
de
celulares
EXPOSITORES
SEVERINO ALEMN GUILLERMO
PAREDES FLORES ZOILA
REINA VIERA BLANCA
VALDERRAMA DANITZA
ORTIZ VALENZUELA KAREN
YUPANQUI VILA
ZAVALETA CASTILLO YANIRA
PEREDA REBAZA LUCERO
MONTALVO AQUINO ALEJANDRA
SALINAS MARIANELLA
RIOS VONDERHEYDE SARA

los
agua

Los primeros modelos

tericos
Estudi las
propiedades
osmticas de las
clulas vegetales y
animales
Charles Ernest Overton,
1895

Se crey que el agua poda atravesar

la membrana por difusin pasiva.

La difusin pasiva no
explicaba la permeabilidad
de los glbulos rojos y
clulas del tbulo renal.
La energa disipada por la
interaccin entre agua y
membrana se acercaba a la
del movimiento del agua en
solucin libre.
Se descubri tambin que el
paso del agua a travs de
estas membranas poda
bloquearse mediante
frmacos derivados de
compuestos mercuriales.

DESCUBRIMIENTO
DE LAS
ACUAPORINAS

El descubrimiento de la primera canal de agua en la

membrana celular, la acuaporina-1 (AQP1)
En el 2003 Peter Agre
obtiene el premio Nobel de
qumica
Durante sus trabajos de
purificacin de la protena de
32 kilodalton, encontraron un
polipeptido de peso
molecular inferior (28
kildalton) que copurificaba
con su protena de inters.
Hasta 1992 no descifraron la
funcin de la protena.
Denominada en un comienzo
CHIP28, mas tarde recibira e
nombre de AQP1
Se descubri tambin que la
permeabilidad al agua
dependiente de AQP1 se
inhiba mediante cloruro de
mercurio y que tal afecto se
reverta con agentes
reductores.

Agre y su equipo, de la
Universidad Johns Hopkins,
estudiaban en 1988 las protenas
de la membrana de los
eritrocitos.
La molcula de 28 kilodalton,
abundante en glbulos rojos y en
clulas del tubo proximal del
rin
En sus trabajos hallaron que los
ovocitos de la rana Xenopus laevis
inyectados con cantidades exiguas de
ARNm de AQP1 desarrollaban
permeabilidad a agua superior a la de
un ovocito control sin inyectar o
inyectado con agua.

La presencia de AQP1 justificaba

la elevada permeabilidad al
agua de la membrana del
hemate y de tubo prxima
renal.

Pero, cmo explicar

la reabsorcin de
agua dependiente
de la hormona
vasopresina en e
segmento ms distal
de la nefrona, e
tbulo colector y en
otros tejidos que no
poseen esta
protena?
La identificacin
molecular de AQP1
fue el detonante de
la bsqueda que
condujo al
descubrimiento de
las trece acuaporinas
que hoy se conocen
en humanos.
Lo primero que llamo la
atencin, al comparar la
secuencia de AQP1 con
las almacenadas en e
banco de genes, fue su
estrecha semejanza con
miembros de una
familia de protenas
integrales de
membrana(PIM)

AQP1 constan de
dos grandes
dominios: el
primero de un
lazo intracelular
y el segundo en
uno extracelular.

Se procedi luego a
la clonacin sucesiva
de otras
acuaporinas.Se
nombraron desde
AQP2 a AQP12; la
protena PIM se
denomin AQP0.

AQP1 comparte con

ellas varios
aminocidos en
determinadas
posiciones de la
secuencia: todo los
miembros de la familia
PIM mostraban el
triplete asparraginaprolina-alanina (NPA)
repetido dos veces.

De los tejidos donde

se sospechaba se
extrajo el ARN. A
partir de este se
obtuvo, por
transcripcion
inversa, el ADN
complementario.

Entre ellas, a protena Big

Brain de Drosophila, la
Nodulina26 de la semilla
del genero Glycine, el
transportador de glicerol
GLpF de Escherichia coli y
PIM, una protena de 26
kildalton que abunda en
el cristalino bovino, que
da nombre a la familia.

El grupo de Agre clono

las protenas AQP1,
AQP4, AQP5 y AQP6; el
Sei Sasaki, identifico las
secuencias AQP2, AQP7,
AQP8, AQP9, AQP9,
AQP10, AQP11 y AQP12.
En la identificacin de
AQP3 intervino uno de
los autores (Miriam
Echevarria).

EL PRIMER MODELO que describa la circulacin de agua a travs de la

membrana celular data de 1895. Segn este, el agua se pasaba por
difusin pasiva entre los lpidos(amarillo) que constituyen la
membrana(a). el estudio de la influencia del gradiente, la energa
disipada por la interaccin del agua con la membrana, el bloqueo de
compuestos mercuriales y la comparacin de membranas puramente
lipdicas con membrana biolgicas llevo a proponer la existencia de
protenas (rojo)especializadas en la formacin de poros hdricos(b).

Un reloj de arena:
El tamao de las acuaporinas suele
oscilar entre 250 y 300 aminocidos.
Se organizan en 6 segmentos de
estructura alfa-hlice que atraviesan
la membrana de lado a lado, unidos
por cinco lazos conectores. Dos de
los lazos se pliegan hacia la
membrana para formar el poro.
Resulta una zona estrecha que se
ensancha abrindose hacia ambos
lados.
A este proceso se le denomina un
reloj de arena, el cual pone en
contacto los tripletes de NPA para
formar el sitio ms estrecho del
poro.

Ovocitos de Rana: Xenopus laevis

Fueron
inyectados
con
cantidades reducidas de ARN
mensajero de acuaporina-1
(0.1-10 ng).
Mostraron una permeabilidad
al agua, superior a la de un
ovocito control no inyectado
o inyectado con agua.

FUNCIN Y
SELECTIVIDAD

El estudio de la funcin de un canal de agua entraa varias dificultades

Al tratarse de una molcula neutra , su flujo constituye un proceso silente
desde el punto de vista elctrico, Ya que no puede medirse con las tcnicas
de electrofisiologa clsica.
Para determinar la permeabilidad al agua de clulas animales suele
medirse el cambio de volumen celular que se produce cuando las clulas
pasan de un medio isosmtico a uno hipo o hiperosmotico

La identificacin molecular de los canales de agua se inicio mediante la extraccin de ARNm en tejidos
con alta permeabilidad al agua (Ejm: el rin) y la inyeccin del mismo en ovocitos de rana (Xenopus
Laevis)
Se venia recurriendo a los ovocitos de la rana para estudiar la expresin de numerosas protenas
En el caso de los canales de agua, ofrecan claras ventajas: eran clulas grandes con un volumen fcil de
medir y una baja permeabilidad intrnseca al agua.

La selectividad es elevada como la permeabilidad , no solo depende de la estrechez del

poro si no tambin de la hidrofobicidad de la superficie interna del canal .
De las 13 AQP de mamfero que se conoce , 4 de ellas forman el subgrupo de las
acuagliceroporinas (AQP3, AQP7, AQP9 Y AQP10) que son permeables tambin a la urea,
el glicerol y otros solutos de tamao reducido.

 TRANSPORTE

DE AGUA

Dentro del canal, las molculas de agua tienden puentes de hidrogeno entre s y
con las paredes del canal
Sin embargo, a medida que una molcula de agua se acerca a la parte mas
estrecha del canal, la intensa carga electrosttica positiva de la zona, creada por
los lazos que forman el poro va a provocar una reorientacin de la molcula de
agua que obliga a su tomo de oxigeno a tender puentes de hidrogeno con las dos
asparraginas del poro.
Primero la molcula de agua se une solo a uno de
esos aminocidos, permaneciendo unida por el
otro puente de hidrogeno a la molcula de agua
vecina
Luego se une a las dos asparraginas, rompiendo
as por completo la molcula de agua su conexin
con las otras molculas de agua en el canal
La imposibilidad de tender puentes de hidrogeno
con los aminocidos hidrofbicos que forman la
pared del canal favorece la permeabilidad

DISTRIBUCIO
N DE LAS
ACUAPORINA
S

LAS CLULAS DE NUESTRO CUERPO POSEEN

ACUAPORINAS
Clulas principales
del tubo colector
renal
AQP2, AQP3 y AQP4

Los astrocitos y
clulas gliales de
zonas cerebrales
AQP4

El ojo, el rin, el pulmn, el tracto gastrointestinal

o las glndulas secretoras.

rganos que tienen alto

trasiego de agua

Presentan varias de estas

protenas

En el cerebro
Hay escases de flujo de agua a
travs de la membrana celular

Presencia y distribucin
limitada de AQP

AQP1, AQP4,
AQP9

AQP2 y AQP6 no intervienen en la composicin de la

membrana celular.

Tras su sntesis la
AQP2
Permanece como
una protena
de membrana en
vesculas
intracelulares

Hormona
antidiurtica
Arginina
vasopresina

Las vesculas se
fusionan con
la cara apical de las
clulas
principales del tubo
colector renal
Las clulas exponen en
la
Membrana la protena
responsable
del aumento de
permeabilidad
al agua en dicho tbulo

AQP1
Distribucin ubicua en toda la
membrana

AQP3 y AQP4
Membrana basolateral

AQP5
Glndulas secretoras y en la
cara apical de otros epitelios.

AQP6
Protena intracelular
Se aloja en vesculas que
permanecen en el interior
de la clula

AQP8

AQP9

Reside en vesculas
intracelulares as como en la
cara apical de las clula acinares
del pncreas

Parte basolateral de la
membrana

AQP10
Duodeno y yeyuno

PATOLOG

Numerosos trastornos se han asociado con una

distribucin aberrante de las acuaporinas en un
rgano determinado.
AQP1 es responsable de la reabsorcin de casi
80% del agua en el tbulo renal.
El en cerebro, AQP1, participa en la produccin
de liquido cefalorraqudeo. En el pulmn, la
expresin de AQP1 aumenta al nacer y en
presencia de corticoesteroides.
Determinadas mutaciones en el gen AQP2 se han
relacionado con las nefropatas .

Individuos con mutaciones en el gen de AQP2

padecen una forma severea de Diabetes
Nefrognica Inspida (NDI) con herencia recesiva y
pueden llegar a liberar hasta 20 L de orina por da.
La difusin de la cuatro acuaporinas que se
expresan en el tracto respiratorio ( AQP1, AQP3,
AQP4 y AQP5) podra guardar relacin con el asma,
edemas pulmonares u otras patologas asociadas a
homeostasis del agua pulmonar.
Se han identificado mutaciones en el gen que
codifica para AQP0 con herencia dominante que
ocasionan cataratas en nios pequeos.

La identificacin de grandes perturbaciones en el

gen de AQP0 en individuos con catarata
congnita severa sugiere que polimorfismos ms
sutiles podran ser factores de riesgo que
contribuyan a la precipitacin de las cataratas,
mucho ms comunes en individuos mayores.
Tambin se ha comprobado que mutaciones en el
gen de AQP3 producira reabsorcin de agua
hacia la sangre y secrecin de agua a la trquea.