FLUJO DE TRABAJO

Dilucin 1/10

Lectura e
interpretacin
automtica
4

11

2 Llenado

33
Incubacin

Dilucin mnima
requerida

Solucin madre
(1/10 )
Diluyente primario
Agua Peptonada

Aguar Estril

Diluyente
secundario

Volumen final en el
vial

Dilucin final
Rango

1 mL

(1/10 )

0.1 mL

(1/10 )

3 mL

3.9 mL

=
4 mL

=
4 mL

1/40

1/400

<10 a 49.000 UFC

<100 a 490.000
UFC

Otras Diluciones

Dilucin 1/4.000

Dilucin 1/40 muestras

ambientales

1ml

9ml
Dil.
10-1

Hisopo
Esponja

Dil.
10-20.1
ml

10ml
100ml

3.9 ml Agua
destilada
esteril

1ml
3 ml Agua
destilada
esteril

Dilucin

Diluci
n

.000

1/4

Rango <1000 a 4.900.000 ufc

Rango <10 a 49.000 ufc

3 PRINCIPIOS
ACTIVIDAD ENZIMATICA
Aparicin de fluorescencia
Negati
vo

Positiv
o

OXIDO REDUCCION
Aparicin de fluorescencia
Positiv
o

Negati
vo

ACIDIFICACION
Desaparicin de Fluorescencia

Negati
vo
pH 7

Positiv
o
pH 6

INTERFERENCIAS TEMPO
MUESTRAS ALTAMENTE COLOREADAS TURBIAS para TEMPO STA,
TC, CC y EB :

Concentrados de frutas de color fuerte (ejm. Mora)

Cocoa, chocolate, coca-cola
Especies (ejm. Pimienta)

INTERFERENCIAS TEMPO
MUESTRAS QUE TENGAN ENZIMAS para
TEMPO TVC y EC:

Viceras crudas, Moluscos crudos

Avellanas, Almendras y nueces
Productos ricos en Harinas Almidn, Mezclas de tortas listas para
usar
Sopas salsas deshidratadas.

INTERFERENCIAS TEMPO
Muestras de Alimentos
que presenten
oxidacin para TEMPO
STA, CC, TC y EB :

Championes Crudos frescos

Banano, manzanas, berenjena, alcachofa, aguacate,
etc.

La seal fluorescente se puede afectar durante el tiempo

de incubacin, debido a una reaccin de oxidacin.
Solucin: Si el lmite mnimo lo permite diluir ms.

Muestras de Alimentos que

contengan inhibidores
naturales TEMPO TVC :
Algunos T, caf, aj,
cebolla, organo, especies,
pimienta, productos altos en
sal, hierbas aromticas.

Muestras de Alimentos con pH

cido TEMPO STA, CC, TC y
EB :
Jugo de Frutas, Aderezos de
Ensaladas
El medio de cultivo contiene un
indicador de pH
fluorescente. Los
microorganismos objetivo
presentes en la tarjeta
asimilan los nutrientes
durante la incubacin, dando
como resultado una
disminucin en el pH y la
desaparicin de la
fluorescencia.
De este modo condiciones

INTERFERENCIAS TEMPO
Productos en POLVO TEMPO STA :
Productos deshidratados (por ej. leche en polvo, sopas
deshidratadas, mezclas de tortas, cereales, etc.)
analizados con una dilucin TEMPO de 1/40.Los productos
deshidratados diluidos a 1/40 disponen de un nivel alto
de slidos residuales y por consiguiente requieren un
protocolo especficamente adaptado.
Solucin: Realizar el montaje en la dilucin 1/400.

TIEMPOS CON TEMPO

Pesaje
Agua Esteril
muestra

Iniciar
incubacin
Llenado
Escanear
Tarjeta

Inicia
r
Lectu
ra

.
45 min.
15 min
TC/ST
(ISO 7218)
no ms de 2 horas
A
EB/CC/EC

24 h

26 h

27 h

22 h

26 h

27 h

TVC/LAB

40 h

46 h

48 h

YM

72h

75 h

76 h

Parametro

Refrigeracin
Reminder

Dilucin y rango de
enumeracin

Tiempo de
incubacin

Temperatura
incubacin

d=1/400
102 to 4,9 105

40-48 h

30C ISO
35C BAM (32C
Lacteos)

Despus incubation

22-28 h /
24-28h 40-48h

d=1/40
10 to 4,9 104

22-27 h

35C ISO

Antes incubation

d=1/40
10 to 4,9 104

24-27 h

30C ISO

Antes incubation

d=1/40
10 to 4,9 104

22-27 h

35C BAM
(32C lacteos)

Antes incubation

d=1/40
10 to 4,9 104

22-27 h

37C ISO
35C BAM

Despus incubation

d=1/400
102 to 4,9 105

40-48 h

30C ISO
35C Comp.

Despus incubation

d=1/40
10 to 4,9 104

24-27 h

37C ISO
35C BAM

Despus incubation

d=1/40
10 to 4,9 104

72-76 h

25C

No se recomienda
Realizar Verificacin

TEMPO TVC
Recuento de flora mesoflica aerbica total en
40-48 horas
TEMPO TC
Recuento de coliformes totales segn la
definicin de la ISO 4832 en 24 horas
TEMPO EC
Recuento de Escherichia coli en 24 horas
TEMPO
STA
Recuento de estafilococos coagulasa positivos
(Staphylococcus aureus) en 24 horas
TEMPO LAB
Recuento de bacterias cidolcticas en 40-48
horas
TEMPO YM
Recuento de levaduras y mohos en 72-76 horas
TEMPO
EB
Recuento de Enterobacteriaceae en 24 horas
.

ESTACIN DE
PREPARACIN

ESTACIN DE LECTURA