Artculos

Cncer de mama: HER2/neu, mtodos

diagnsticos y consideraciones clnicas

Integrante de grupo
Arteaga , Karla
Chamana , jakelina
Lescano ,Dani
Quispe , Nicol

INTRODUCCIN

CANCER:
Es un proceso de crecimiento y
proliferacin de clulas anormales
Aparece en cualquier lugar del
cuerpo

CANCER DE MAMA
El cncer de mama es frecuentemente en mujeres
mayores de 35 aos
Crecen sin control
Los ms frecuentes son: El carcinoma lobular y
carcinoma ductal
Marcadores molecular; mejora pronostico y permite
disminuir la muerte por esta enfermedad.

CANCER DE MAMA
Es la neoplasia resultado de
diferentes alteraciones gentica
de los protooncogenes.
Existen nuevos mtodos de
diagnostico: IHQ, FISH
El gen HER2/neu de mayor
importancia clnica, responde
mejor al tratamiento
combinando quimioterapia con
transtuzumad.

DESCRIPCIN DEL GEN HER2/neu

Los avances de la biologa molecular han aportado nuevos
blancos teraputicos para el diagnostico y tratamiento del
cncer.
El gen HER2/neu es un receptor del factor de crecimiento.
Esta localizado en el cromosoma 17
Existe 4 grupos de receptores relacionados al factor de
crecimiento
Tipo de receptor de
factor de crecimiento
HER1 (ErbB1 o EGFR)
AR. Epi, VGF
HER2/neu (ErbB-2)
HER3 (ErbB-3)
HER4 (ErbB-4)
herregulinas, -celulinas

Ligando
EGF, TGF-a, HB-EGF,
Receptor hurfano
Herregulinas
NRG2, NRG3,

DESCRIPCIN DEL GEN HER2/neu

Estos receptores se encuentran localizados en
la membrana plasmtica celular y cada uno
esta compuesto por un dominio extracelular de
unin a sustancias circulantes que se unen al
receptor y lo activan.
Estn involucradas en la divisin y proliferacin
celular.

DESCRIPCIN DEL GEN HER2/neu

Tras la
dimerizacin se
produce una
activacin de la
funcin tirosinaquinasa de la
porcin
intracelular de
receptor.

CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
El producto del oncogn HER2/neu es una diana
teraputica de mucha importancia.
La inmunohistoquimica por razones practicas es y
ha sido la tcnica de eleccin para la medicin de
la protena HER2/neu
La hibridacin fluorescente in situ (FISH) ha
mostrado tener mucha sensibilidad y especificidad.
Al administrar el transtuzumab como
neoadyudante en pacientes HER2/neu positivo, se
puede obtener una reduccin del tumor hasta un
40%.

MTODOS DE DETECCIN
DEL GEN HER2/NEU

Inmunohistoqumica (IHQ)
es

una tcnica semicuantitativa usada para la

cuantificacin de la expresin de protenas.
es la tcnica ms usada para detectar y
cuantificar la protena HER2/neu en primera
instancia.
Esta tecnica detecta receptores del HER 2 sobre
la membrana celular.
Este receptor es el blanco al cual se une el
agente teraputico trastuzumab, y, por lo tanto,
la sobreexpresin de esta protena debe predecir
la respuesta a este agente.

Variables que afectan los resultados

Fijacion.
Almacenamiento

de los tejidos .
Recuperacion antigenica.
Tipos de anticeurpos.
Sistema de medicion.

Resultados
La

interpretacin de los resultados de

inmunohistoqumica se basa en la
valoracin de la intensidad de la
coloracin de las membranas celulares y
el porcentaje de clulas tumorales
positivas.
Los resultados se reportan en una escala
de 0 a 3+ .

Hibridacin fluorescente in situ

(FISH)
Es

un metodo molecular citogenico.

Permite cuantificar numeros de copias de un gen.
Se usa en la investigacion de anormalidades en
genes y cromosomas.
Es considera actuamente el estandar de oro para
la evaluar la amplificacion del HER2 .
Tiene una sensibilidad y especificidad del 98% y
100%.

El kit de PathVysion
usado para medir el HER2/neu contiene dos
sondas.
una se une al locus del gen HER2/neu, localizado
en el cromosoma 17q11.2-q12.
la segunda se une a la regin centromrica del
cromosoma 17.
Se debn contar 20 nucleos de celulas tumorales
invasoras en interface.

El kit INFORM
determina

el nmero absoluto de seales

HER2/neu.
Se considera que el gen estaba amplificado
cuadno el valor ers mayor a 4.0.
Se recomiendo para determinar que un tumor
sea positivo par la amplificacion de HER2 FISH
de Path Vysion deeb ser mayor a 2.2.

Resultados
Los

resultados con menos de 4,0 copias del gen

HER2/neu por ncleo o una proporcin total de
seales menor a 1,8 es un resultado equivoco
que requiere de una accin adicional para el
reporte final

Hibridacin cromognica in situ

(CISH)
es el mtodo ms recientemente descrito para la deteccin de la
amplificacin de HER2/neu. Este mtodo combina caractersticas de
las tcnicas de FISH e inmunohistoqumica.
La CISH, al igual que la FISH, permite cuantificar el nmero de copias
de un gen, identificar traslocaciones en los cromosomas y hacer
conteos cromosmicos.
La diferencia radica en que la CISH usa reacciones convencionales
con peroxidasas a partir de tejidos fijados en formol o embebidos en
parafina
La esencia de la CISH radica en la habilidad de poder marcar el cido
nucleico a partir de la unin de sondas de hibridacin in situ a
secciones especficas del cido nucleico complementario en la
muestra,

 Tanner

y colaboradores publicaron el primer

estudio donde comparaban la CISH y la FISH
para la deteccin de HER2/neu. Estos autores
usaron un kit de primera generacin y no
obtuvieron una buena sensibilidad

 La

tcnica de CISH contempla otras ventajas

adicionales: reactivos menos costosos, seales
permanentes en las placas histolgicas

en tiempo real (PCR real time)

La reaccin en cadena de la polimerasa
inventada por Kary Mullis en 1983, es una tcnica para la
amplificacin de secuencias de cido desoxirribonucleico
in vitro, a partir de una secuencia conocida
El producto que se obtiene al finalizar la reaccin es una gran
cantidad de DNA con alto grado de pureza.

 La

PCR se fundamenta en la propiedad natural

del DNA polimerasa para duplicar el DNA por
elongacin de cadenas complementarias, al
iniciar la sntesis a partir de unos iniciadores, o
primers, que indican el inicio y el final de
fragmento a duplicar.

La tcnica usa ciclos de alta temperatura

(95C-denaturacin) para separar las cadenas de DNA
recin formadas

ciclos de baja temperatura (55C-alineamiento) para

dejar que vuelvan a unirse nuevamente a las polimerasas

y ciclos de temperatura media (72C-extensin) para

que el DNA polimerasa duplique estas nuevas cadenas usando
los deoxidonucletidos trisfosfato (dNTPs) aadidos a la
reaccin y necesarios para obtener una rplica exacta de la
cadena original

 En

el caso de la cuantificacin de la expresin del

gen HER2/neu, la plataforma de PCR en tiempo
real ms usada es la del kit LightCycler, de
Roche Corporation

el

cual emplea primers y sondas de hibridacin

especficas. En la reaccin de PCR se amplifica un
fragmento de

112

pb del gen HER2/ neu y

otro de 133 pb de un gen de expresin
constitutiva de referencia (gastrina), a partir del
DNA genmico humano, usando primers
especficos.

Para la determinacin de la tasa de amplificacin de HER2/neu, se emplea un software que mide la fluorescencia
emitida por el DNA amplificado, donde se realiza una
cuantificacin relativa

Consideraciones clnicas, implicaciones

teraputicas y recomendaciones