Tecnolgico de Estudios Superiores de Ecatepec

Divisin de ingeniera qumica y bioqumica

TRES DCADAS DE TRANSGNICOS

MATERIA:Temas selectos

PROFESORA: NERIA GONZALEZ MARIA ISABEL

ALUMNOS:

DANIELA DIAZ MILLAN

SALINAS SANCHEZ LEONARDO

PEREZ GONZALEZ JORGE OSVALDO

GRUPO: 3801

LA TRANSGNESIS VEGETAL

Los transgenia es una de las biotecnologas cuyo fin es la creacin de produccin

de organismos genticamente modificados OGM o GMO`S por sus siglas en ingles
Genetically Modified Organisms conocidos como transgnicos

INTRODUCCIN

En 2012 se cumplen tres dcadas desde que se resolvi el problema de la

transgnesis en vegetales

Gracias a esta tcnica se han podido conocer cosas tan sorprendentes como la
reaccin de una planta al tacto, cmo se fabrica una flor o cmo se transmiten
mensajes de alarma dentro de una planta o entre plantas individuales.

MEJORAS EN LAS PROPIEDADES AGRONMICAS

60% de la poblacin mundial adopt esta tcnica (transgnicos) 14, millones que
representa el 93,5 % eran pequeos agricultores, pases en los que la implantacin
ha crecido rpidamente
Espaa fue el primer pas europeo en cosechar transgnicos y sigue siendo el pas
europeo con mayor superficie sembrada de estos cultivos

GANTE , AGOSTO 1982

Mark Van Montagu y Jeff st.Schell

Mary-Dell Chilton , empresa Monsanto

Agrobacterium
tumefaciens

.
REVOLUCION VERDE
(1983)

Mark y Jeff haban descubierto

el secreto de la bacteria

El cual consista en

Introducir un
trozo de su
propio ADN
Luego establecieron que

este ADN se
integraba en un
cromosoma vegetal

Y ms tarde

los genes incluidos en dicho ADN se

expresaban en la planta

CONSIDERACIONES PRELIMINARES

La definicin de Biotecnologa abarca a todas las tecnologas

mediadas por un ser vivo o por partes de l, sean stas clulas o
protenas purificadas

Biotecnologa Molecular, que es aquella que implica el manejo de

las clulas y organismos a travs de su material gentico, el ADN,
en el tubo de ensayo.

la ingeniera gentica es una modalidad ms de mejora gentica

En lo que difieren la vieja y la nueva tecnologa es en el

repertorio gnico que se puede manejar la vieja (que se puede
manejar genes de la misma especie) la nueva (de cualquier
especia)

Clonacin

Se clona una molcula de ADN, una clula o un organismo si se

multiplican de forma idntica por cualquier procedimiento. La
clonacin, por tanto, no implica introducir alteracin gentica
alguna, aunque lo previamente alterado pueda ser clonado y lo
clonado pueda ser expresado transgnicamente. Para clonar un
gen, un tramo de ADN, una vez aislado, disponemos de mtodos
abiticos y biticos.

Funciones del gen: la informtica, que reside en el promotor, y la

arquitectnica, representada por la regin codificante. La
ingeniera gentica puede operar en el tubo de ensayo sobre
ambas regiones.

La capacidad de extraer, estudiar y modificar cada una de las

piezas que componen un ser vivo ha sido la llave de un avance
revolucionario del conocimiento biolgico, una poderosa
herramienta para averiguar los secretos de la maquinaria vital.
Las aplicaciones derivadas de este avance, que han seguido a
los descubrimientos bsicos sin solucin de continuidad, se
conocen, con el nombre genrico de Biotecnologa Molecular.

La introduccin de un gen aislado en una clula viva

denominado transformacinplantea al menos tres problemas:

1.

El de su acceso al interior de la clula.

1.

El de su replicacin (copiado) para transferirse a las clulas

descendientes de la transformada.

2.

El de su expresin (funcionamiento) en la propia clula

transformada y en sus descendientes.

Transgnesis

Las tcnicas del ADN recombinante estn contribuyendo no slo

a la elucidacin de los mecanismos fisiolgicos bsicos de las
plantas a nivel molecular sino tambin a aumentar la variabilidad
disponible para la mejora gentica, ya que ahora tenemos una
metodologa para aislar un gen de cualquier origen (vegetal,
animal, bacteriano o incluso sinttico), podemos producirlo en
gran cantidad en una bacteria, y podemos reinsertarlo en la
especie vegetal que interese. La herramienta bsica del
mejorador de plantas, la hibridacin sexual, puede ser ahora
complementada con la transferencia de pequeos fragmentos de
ADN conteniendo uno o varios genes, sin requerir deretrocruzamientos largos y costosos.

El principal objetivo de la transgnesis vegetal sera, por tanto,

insertar establemente un ADN concreto en el genoma nuclear de
una clula vegetal capaz de dar lugar a una planta transformada
completa. Transformacin sin regeneracin o regeneracin sin
transformacin estable no serviran nuestros propsitos.

Muchas clulas vegetales son totipotentes y pueden

ser estimuladas a regenerar plantas completas in
vitro, va organognesis (formacin de brotes) o
embriognesis, siempre que en el medio de cultivo se
mantenga un balance nutricional y hormonal
apropiado.

Estas clulas totipotentes (competentes) habrn de

ser identificadas para poder ser transformadas y los
procedimientos de regeneracin sern diseados
para minimizar el stress genmico que podra
conllevar la aparicin de anomalas cromosmicas y/o
genticas en las plantas regeneradas (variacin
somaclonal).

Los vectores utilizados para la transformacin de

plantas deben llevar genes marcadores que
permitan seleccionar (genes seleccionables) y/o
reconocer
las
clulas
transformadas
(genes
delatores).

Estos genes, dominantes y generalmente de origen

microbiano, se ponen bajo el control de promotores
eucariticos fuertes que sean funcionales en las
plantas. Los genes marcadores selectivos (Tabla I),
codifican protenas cuya actividad enzimtica
permite el crecimiento celular en presencia de
antibiticos o herbicidas, bien porque destoxifican al
agente selectivo (KanamicinaR, FosfinotricinaR) o
porque codifican enzimas que manteniendo sus
propiedades catalticas no interaccionan con dicho
agente (GlifosatoR). Para que la seleccin sea
efectiva, las clulas vegetales sin transformar deben
ser susceptibles a concentraciones relativamente
bajas del correspondiente agente selectivo.

Mtodos basados en el plsmido Ti de

Agrobacterium tumefaciens

Estos mtodos de transformacin utilizan vectores derivados de los

megaplsmidos de la bacteria fitopatgena Agrobacterium
tumefaciens

transfiere a la planta que infecta el ADN situado entre los bordes

izquierdo y derecho (LB, RB) del llamado T-DNA.

Agrobacterium infecta a la mayora de las plantas dicotiledneas y a

algunas monocotiledneas, produciendo tumores

la transferencia e integracin en el genoma de la planta del pequeo

fragmento del TDNA (ADN de transferencia) del plsmido Ti.

una corresponde a ambos extremos del T-DNA (LB y RB) que

consisten en una repeticin directa casi perfecta de 25 pb

Estos plsmidos
presentan dos regiones
esenciales para la
movilizacin e
integracin del T-DNA
en las clulas
vegetales

Una corresponde a ambos

extremos del T-DNA (LB y RB)
que consisten en una repeticin
directa casi perfecta de 25 pb
(5TGACAGGATATATTGGCGGGTA
AAC3)

Llamada regin Vir (virulencia)

que puede actual en trans y
que se requiere para que la
escisin, transferencia e
integracin del T-DNA sean
efectivas.

La enfermedad agalla de la corona, el crecimiento tumoral

es debido a la expresin de al menos tres genes que dirigen
la sntesis de las fitohormonas auxinas y citoquininas.

continan creciendo, sin necesidad de aadir hormonas al

medio de cultivo in vitro, en presencia de carbenicilina que
inhibe el crecimiento de Agrobacterium sin daar a las
clulas vegetales

En el T-DNA, que se ha integrado en el genoma de la planta

receptora, tambin se encuentran genes para biosntesis de
opinas

Esta bacteria puedeutilizar como fuente de C y de N (una

clara ventaja selectiva sobre otras bacterias del suelo),
debido a que el plsmido original fuera de su T-DNA tiene
genes que permiten el catabolismo de las opinas.

Mutaciones en la regin Vir suelen abolir la formacin de tumores

ya que impiden la transferencia del T-DNA desde el plsmido
bacteriano al cromosoma vegetal.

Cuando se separan en dos plsmidos distintos, el T-DNA y la regin

de virulencia, las cepas conservan todas sus propiedades, lo
que indica que los genes de virulencia actan en trans. Esta
regin Vir est compuesta de seis genes (vir A, B, D, G, C y
E). El vir A codifica un producto de la membrana interna de
Agrobacterium, que es un quimiorreceptor de acetosiringona.

Este compuesto orgnico es excretado al medio por las clulas

vegetales heridas y ejerce una quimiotaxis positiva sobre A.
tumefaciens. La protena Vir A fosforila a la de vir G que as activa
la transcripcin de los otros genes Vir. Un suceso temprano en el
proceso de transferencia del T-DNA es la formacin de una mella
en un sitio concreto del borde derecho (entre la 3 y la 4 base del
cordn inferior), inicindose as la liberacin de ADN
monocatenario en direccin 53 hacia el borde izquierdo, en un
proceso similar al de la conjugacin bacteriana.

El gen vir D codifica una endonucleasa que produce las mellas en

las secuencias bordes. El gen vir E codifica una protena con
afinidad por ADN de cordn sencillo que estabiliza y protege el TDNA en su transporte al ncleo vegetal. Adems de los genes del
plsmido Ti, existen genes en el cromosoma de Agrobacterium que
afectan a la virulencia, relacionados con sntesis de protenas de 14
pared, de glucanos, de fibrillas de celulosa, etc., que pudieran
tener un papel ms general en interacciones bacteria-planta. Este
tipo de genes tambin se encuentran en otras bacterias del suelo.

Para transferir genes a plantas mediante Agrobacterium, hoy en

da se utiliza la llamada estrategia de vectores binarios

Como vir puede actuar en trans esto puede permitir q vaya a un

plasmido distinto al q contiene

De esta manera los genes forneos se pueden introducir e

integrar en la planta mediante co-cultivo de la bacteria con
fragmentos de hoja u otros tejidos. Posteriormente, los genes
marcadores ayudarn al reconocimiento y seleccin de las
clulas transformadoras durante el proceso de regeneracin hasta
planta completa

Transformacin mediante la pistola de

genes: el mtodo biolstico.

son mtodos fsicos capaces de transferir ADN a cualquier clula o tejido

vegetal con el nico requerimiento de proteger a este ADN de degradacin
mecnica o ataque de nucleasas. Entre estos, el ms utilizado es el
llamado mtodo biolstico o de la pistola de genes que est diseado
para transformar clulas completas que forman parte de un rgano o
tejido, las cuales se bombardean utilizando microproyectiles de oro o
tungsteno coloidales (1-3 m) recubiertos de ADN y altamente acelerados
15 mediante cargas explosivas (plvora), descargas elctricas a alto
voltaje, expansin de gases a alta presin (helio), o aire comprimido.

Actualmente es el procedimiento ms utilizado, sobre todo en aquellas

especies recalcitrantes a la transformacin, ya que posibilita bombardear
rganos o tejidos muy jvenes y delicados sin que pierdan su capacidad
regenerativa. Con esta tecnologa en los ltimos cinco aos se han
obtenido cereales transgnicos (trigo, cebada, arroz, maz, centeno, avena
y sorgo) tradicionalmente consideradas especies recalcitrantes.