PROTEOLIPOSOMAS

PROTEOLIPOSOMAS
Son vesculas que se forman utilizando
diferentes
fosfolpidos
mediante
distintos procedimientos, pero el ms
comn es tomando una cierta
cantidad de fosfolpidos, se les coloca
en una solucin adecuada a los
estudios que se desean realizar y se
les somete a un tratamiento variable
segn
la
preparacin
requerida,
utilizando ultrasonido, es decir una
vibracin de muy alta frecuencia que
tiene como objetivo fundamental
dispersar a las molculas en el lquido,
y
producir
finalmente
vesculas,
formadas por una doble capa de
fosfolpidos, con una cavidad lquida
en su interior, estas vesculas tienen la

FUNCIONES
Los proteoliposomas permiten llevar a cabo
estudios estructurales y funcionales de protenas
aisladas, en un medio biomimtico, en ausencia
de otras molculas.
pueden incorporar protenas perifricas o
integrales. Estas ltimas, en la mayora de casos,
necesitan de surfactantes para ser purificadas y
para mantener su estabilidad en solucin. Las
protenas integrales, no se integran en la
estructura del liposoma de forma espontnea,
sino que debe realizarse un proceso de disrupcin
lipdica, dando lugar a micelas mixtas fosfolpidosurfactante, para integrar a las protenas.

ESTRUCTURA
La estructura de bicapa esfrica del proteoliposoma se reconstituye mediante la
reduccin de la concentracin del surfactante en solucin, hasta su prctica
eliminacin. Para la realizacin de este proceso de disrupcin y posterior
reconstitucin de las vesculas, es necesario establecer parmetros tales como
el tipo y concentracin de surfactante a utilizar, la proporcin ptima de
protena a incorporar, la velocidad de extraccin del surfactante, o el proceso a
seguir para reconstituir el proteoliposoma.

TECNICAS
El estudio de las protenas reconstituidas
en proteoliposomas puede llevarse a
cabo empleando tcnicas indirectas
(fluorescencia de determinadas sondas
fluorescentes) y directas (microscopa de
fuerza atmica).
Algunas sondas fluorescentes, tales como
HHC, permiten estudiar las variaciones de
potencial electrosttico de superficie
debidas a la composicin lipdica o a la
integracin de protenas en la membrana.
Otras sondas, como TMA-DPH o DPH,
permiten el estudio de la reconstitucin
de las protenas de membrana, dando
lugar a los proteoliposomas

La microscopa de fuerza atmica (AFM),

permite la realizacin de estudios
estructurales detallados, debido a su
elevada resolucin. Adems, presenta la
ventaja, frente a otras nanotecnologas,
que permite hacer estudios biolgicos en
medio lquido, e incluso el seguimiento y
observacin de procesos dinmicos en
tiempo real.