*el crecimiento de los microorganismos

(curva de crecimiento)
*ciclo celular
*crecimiento de poblacin
*cultivo de microorganismos

Primera segunda unidad semana 6

Mg. William Guzmn Snchez

Crecimiento de
Microorganismos
Despus de las reacciones de
polimerizacin en las que se fabrican
macromolculas
a
partir
de
monmeros las bacterias comienzan
a crecer y a dividirse por fisin
binaria transversal. El tiempo de
divisin varia as por ejemplo el E.
coli demora 20 minutos en dividirse.

Crecimiento de
Microorganismos

Crecimiento de Microorganismos

Descripcin

a) clula madre
b) alargamiento celular
c) invaginacin de la pared celular
d) formacin de la pared celular
transversal
e) separacion de las 2 clulas nuevas

Crecimiento de
Microorganismos

Crecimiento de
Microorganismos
El tiempo que una bacteria tarda
en convertirse en dos se
denomina tiempo de
generacin(TG). Por ejemplo,
Escherichia colirequiere alrededor
de 20 minutos para duplicarse en
un caldo nutritivo a 37C.

Crecimiento de
Microorganismos

Crecimiento de
Microorganismos

Crecimiento de
Microorganismos

Curva de Crecimiento

Si un cultivo bacteriano se
duplicase una vez cada 20
minutos y continuara
multiplicndose sin cesar durante
48 horas, una Escherichia coli
producira 2144bacterias.

Curva de Crecimiento

Sin embargo, por fortuna el

crecimiento bacteriano es
autolimitante. Aun en
condiciones ideales la mayora
de los cultivos bacterianos se
multiplican slo durante 3 a 5
horas.

Curva de Crecimiento

La detencin del crecimiento de

algunas bacterias inicia la
esporulacin. Esto da como resultado
la produccin de esporas
metablicamente inertes que son
resistentes a los cambios
fisicoqumicos.

Curva de Crecimiento
A: Fase de Rezago.
Este periodo consiste en la adaptacin de las clulas
microbianas a su nuevo ambiente. En esta fase, las clulas
microbianas se envuentran empobrecidas en cuanto a
metabolitos y enzimas, esto debido a las condiciones
desfavorables que representaba el cultivo previo.
Por lo anterior, en este lapso de tiempo se forman las
enzimas y los metabolitos intermedios hasta alcanzar las
concentraciones necesarias para reiniciar el crecimiento.
Este periodo se puede prolongar en el caso de que el medio
de cultivo previo y las condiciones actuales resulten tan
diferentes que las clulas sean genticamente incapaces
de sobrevivir, por lo que slo unas cuantas mutantes
podrn subsistir, y obviamente se requerir ms tiempo
para que stas se multipliquen lo suficiente y sea notorio el
aumento de clulas.

Curva de Crecimiento
C: Fase Exponencial.
Como el nombre lo indica, en esta fase las clulas se
encuentran en un estado de crecimiento sostenido.
Se sintetiza nuevo material celular a una tasa constante,
pero ste material es en s cataltico y la masa aumenta de
manera exponencial. Lo anterior continua hasta que uno o
ms nutrimentos se agoten, o hasta que se acumule tal
cantidad de metabolitos txicos que se inhiba el
crecimiento. El nutrimento limitante para los organismos
aerobios suele ser el oxgeno: cuando la concentracin
bacteriana es de aproximadamente 1 x 107 / ml es
necesario incrementar el ingreso de oxgeno mediante
agitacin o burbujeo; pero cuando la concentracin
alcanza 4 o 5 x 109 bacterias por ml, la tasa de difusin de
oxgeno no puede satisfacer las demandas aun en un
medio aireado, por lo que el crecimiento disminuye
progresivamente.

Curva de Crecimiento
E: Fase Estacionaria Mxima.
Como se explic en la descripcin de la fase anterior, ante
el agotamiento de nutrimentos en el medio o la
acumulacin de metabolitos txicos el crecimiento cesa
por completo despus de un periodo de decrecimiento en
la tasa de crecimiento, lo cual corresponde a la fase D o de
retraso.
No obstante, por lo general en esta fase se puede
observar recambio celular, lo cual se debe a que, aunque
existe una prdida lenta de clulas por muerte, dicha
prdida se compensa exactamente por la formacin de
nuevas clulas a travs de crecimiento y divisn. As, la
cifra de clulas viables se mantiene constante, aunque en
realidad en el conteo aumente poco a poco el nmero de
clulas, si se cuentan tambin las muertas.

Curva de Crecimiento
La duracin de esta fase depende de la naturaleza
del microorganismo y de las condiciones del medio.
F: Fase de Declinacin.
Esta fase, tambin conocida como fase de muerte,
representa el decremento de clulas debido al
aumento progresivo de la tasa de mortalidad, misma
que tarde o temprano alcanza un valor sostenido.
Por lo general, una vez que la mayora de las clulas
ha muerto, la tasa de mortalidad disminuye
bruscamente, por lo que un nmero pequeo de
sobrevivientes pueden persistir en cultivo por meses
o aos. Dicha persistencia puede deberse a que las
clulas consiguen crecer gracias a los nutrimientos
liberados por las clulas que mueren y se lisan,
observndose recambio celular.

REQUERIMIENTOS

Cultivo de Microorganismos
Un medio de cultivo es una solucin
acuosa (bien como tal, o bien
incorporada a un coloide en estado de
gel) en la que estn presentes todas
las sustancias necesarias para el
crecimiento de un(os) determinado(s)
microorganismo(s). Los medios de
cultivo se pueden clasificar, en primera
instancia, en tres grandes tipos:

Cultivo de Microorganismos

1) Medios complejos o indefinidos: su

composicin qumica exacta se desconoce, ya
que son el producto de realizar infusiones y
extractos de materiales naturales complejos:
Ejemplos:

Digeridos
Digeridos
Digeridos
Digeridos

crudos de extracto de carne

de extracto de levadura
de peptona de carne o de soja
de casena (de la leche).

Cultivo de Microorganismos
2) Medios sintticos o definidos: se obtienen
disolviendo en agua destilada cantidades
concretas de distintas sustancias qumicas
puras, orgnicas y/o inorgnicas. La composicin
concreta de un medio sinttico depender de la
bacteria que queramos cultivar: lgicamente, un
medio definido para una bacteria con grandes
capacidades biosintticas ser ms sencillo que
el medio definido de otra bacteria con menores
posibilidades biosintticas. En la tabla siguiente
se dan las composiciones de sendos medios
sintticos para dos bacterias diferentes.

Cultivo de Microorganismos
3) En tercer lugar, podemos fabricar un tipo de medio mezcla
de los anteriores, denominado medio semisinttico: llevan
algunas sustancias qumicas cuya naturaleza y cantidad
conocemos, junto con sustancias de naturaleza y composicin
indefinidas.
Cualquiera que sea el tipo de medio, de los tres que acabamos
de citar, podemos elaborar dos tipos de versiones, segn su
estado aparente:
medios lquidos (por ejemplo, los dos de la tabla)
medios slidos: derivan de los lquidos simplemente aadiendo
a la solucin nutritiva un coloide en estado de gel, que solidifica
(da consistencia) a esta solucin.
En los primeros tiempos de la Bacteriologa slo se conoca como
sustancia gelificante incorporable a los medios la gelatina. Sin
embargo, presenta muchos inconvenientes, ya que funde a 25oC
(por encima de esta temperatura el medio se lica), y adems,
muchas bacterias presentan gelatinasas que hidrolizan la
gelatina.

Cultivo de Microorganismos

El gelificante ms usado es el agar-agar, extrado de

algas rojas (p. ej. Gelidium), del cual existen
versiones ms o menos purificadas (las ms puras
estn ms enriquecidas en el polisacrido agarosa;
son las que se emplean para los medios definidos,
con objeto de evitar la introduccin de sustancias
"contaminantes" inadvertidas que falseen las
interpretaciones sobre el comportamiento nutricional
de la bacteria). El agar presenta la gran ventaja de
que una vez gelificado, no funde hasta cerca de los
100oC, lo que permite su uso para la inmensa
mayora de bacterias, que son mesfilas. Un
comportamiento notable del agar es que una vez
fundido (a 100C), no gelifica (solidifica) hasta los
45C. En este margen de temperatura hasta el lmite
de solidificacin de 45C se dice que el agar est en
sobrefusin.

Cultivo de Microorganismos

Para cultivar ciertas bacterias (sobre todo los quimioautotrofos)

se suele recurrir a un gelificante inorgnico, el silicagel o gel
de slice.
Finalmente, introduciremos otra serie de conceptos relativos a
medios de cultivo, que al igual que los anteriores, sern tratados
con la suficiente amplitud en las sesiones de clases prcticas:

Medios selectivos son aquellos que permiten seleccionar un

tipo (o unos pocos tipos) de microorganismos. En el laboratorio
se emplean mucho medios selectivos slidos que incorporan
ciertas sustancias que inhiben el crecimiento de ciertas
bacterias, pero permiten el crecimiento de otras. (P. ej. medios
que llevan violeta cristal inhiben el crecimiento de bacterias
Gram-positivas.

Medios diferenciales son aquellos que permiten distinguir a

simple vista dos o ms tipos de bacterias en funcin de su
distinto comportamiento respecto de algn nutriente del medio.
Ese comportamiento diferencial se traduce normalmente en un
viraje de color de una sustancia indicadora presente en el
medio.

Cultivo de Microorganismos
Ejemplos:
en el medio EMB (eosina-azul de metileno) ciertos tipos
metablicos de bacterias producen cambios de color y
precipitacin de sales cuando producen cidos por fermentacin
de ciertas fuentes de carbono.
El medio llamado agar-sangre lleva un 5% de sangre de caballo
o carnero, lo cual revela la capacidad (y el tipo) de hemolisis de
ciertas bacterias.
Algunos medios son simultneamente selectivos y
diferenciales.
P. ej., el agar de MacConkey, que el alumno manejar en la
segunda tanda de prcticas. Se trata de un medio de color
rosado y transparente, que posee, entre otras sustancias,
lactosa, peptonas, el colorante vital rojo neutro, sales biliares y
violeta cristal.