Divisin de Ciencias Biolgicas y de

la Salud
DRA: lvarez Cisneros Yenisey Merit
UEA: Biologa Molecular

Tema: Vectores De Clonacin

Integrantes:
Daz Gonzlez Snchez Yanelli
Monserrat
Hernndez Ramrez Hctor Cirilo
Loyo Martnez Alondra Fernanda
Sols Arzate Alejandro.

Trabajos en : Gentica, Biologa celular, se

materializaron en los laboratorios de:

Antecedentes

Herbert
Boyer

Paul Berg

Stanley N.
Idearon tcnicas para la localizacin, el aislamiento, laCohen
preparacin y el
estudio de pequeos segmentos de ADN procedentes de cromosomas.
Se discuti el uso de plsmidos como vectores de clonacin de segmentos
de ADN individuales.

T
cn
ic
as

Vectores de Clonacin.

Han hecho posible la

genmica y la proteomica: Es
decir estudio de genes y
protenas a nivel celular

Clonacin.

Estudios han transformado la

investigacin en:

ra.
u
t
l
icu
r
g
A

na
Medici

Ecologa

Es una copia
idntica
Clon
Relacin

Clonacin

Separacin de un gen especifico o de un

fragmento de DNA, para unirse a una
molcula pequea , para despus poderse
replicar, creando mltiples copias del DNA.

Se tiene 5 etapas principales

Cortar el DNA en Lugares precisos.

Clonacin

Seleccin de una pequea molcula de DNA capaz

de auto replicarse. ( estos DNA se denominan
Vectores de clonacin )
Unin covalente de dos fragmentos de DNA
Traslado del DNA del tubo de ensayo a una clula
husped.
Seleccin e identificacin de las clulas husped que
contiene el DNA recombinante.

 Qu es un vector de
clonacin?
Es una molcula pequea de ADN que puede replicarse de
manera autnoma en un husped. ( clula bacteriana o de
levaduras )
Se utilizan en la clonacin por que pueden
seguir su desarrollo normal a pesar de que
secuencias
adicionales
de
ADN
sean
incorporados en su material gentico.

Se auto replican utilizando la maquinaria de la

clula husped.

Plsmidos

Algunos Ejemplos de
Vectores.
Bacterifag
os

Csmidos

PLSMIDOS

Molculas circulares de ADN de doble cadena

que se replican de modo extracromosmico en
bacterias

En ellos se encuentran genes que le confiere al

organismo que los posee resistencia a algunos
antibiticos.

Clonacin utilizando el fago

lambda como vector.
Se extrae el DNA de una
preparacin de fago lambda
y se elimina el grupo
central de genes por
tratamiento con una enzima
de restriccin. El DNA a
clonar se corta con la
misma enzima y se liga
entre los brazos del
cromosoma de lambda.
Luego se empaqueta el
cromosoma recombinante
dentro de las protenas del
fago para formar un virus
recombinante. Este virus
puede infectar clulas
bacterianas y replicar su
cromosoma, incluido el
inserto de DNA.

Bacterifagos
Son virus que infectan a las
bacterias, constituidos segn su ncleo
de ADN o ARN y una cubierta proteica.

Presentan cola y son incapaces de

replicarse autnomamente por lo que
necesitan infectar a la clula para
poder hacerlo.

El ms utilizado es el bacterifago
lambda por ser eficiente para
introducir sus bases pares de DNA
en la bacteria.

Puede ser usado como vector para

clonar fragmentos de DNA.

CSMIDOS
Son bsicamente plsmidos.
Emplean la habilidad de las
partculas infecciosas del
bacterifago lambda para
empaquetar piezas lineales de
ADN e introducirlas en las
bacterias.
Cromosomas artificiales
Son vectores que se reproducen
Levadura.
de igual manera que los plsmidos
en las bacterias.
Es un tipo de vector de clonacin .
Permite clonar hebras de ADN de gran tamao
Capaz de replicarse en el husped (levadura comn
usada en panadera ).
Cuenta con una estructura semejante a los
cromosomas de levadura normal.

Tipos de vectores de clonacin utilizados en E. coli

Tipo de vector

Mtodo de
introduccin en
E. coli

Mtodo de
propagacin

Plsmidos:
modificados por
tcnicas de DNA
recombinante

Transformacin;
las clulas se
vuelven
competentes para
incorporar el
plsmido
recombinante;
una vez
transformadas las
clulas se
seleccionan
mediante un
marcador
seleccionable

Replicacin del
plsmido tamao
del fragmento
hasta 15.000 pb

Bacterifago

Infeccin con
fagos

Replicacin del
fago

Tamao del
fragmento de
DNA que se
puede clonar

Hasta 23.000 pb

En conclusin

Los vectores de clonacin nos ayudan a

obtener segmentos de ADN idnticos, esto se
tiene que llevar a cabo con especficas
encimas utilizadas en la tecnologa del ADN
recombinante, es una forma fcil de conocer
e investigar los procesos y la molcula de
ADN, ha permitido la identificacin de genes
implicados en muchos procesos biolgicos.
En general, el resultado es una amplificacin
selectiva de un gen o fragmento de ADN
particular

PALABRAS CLAVE:

Edonucleasas de restriccin
DNA ligasa
Vector de clonacin
Plsmido
Bacterifago
Csmido

GRACIAS POR SU
ATENCIN