VPH

TCNICAS MOLECULARES PARA EL

DIAGNOSTICO E INMUNIZACIN
MODULO DE COLPOSCOPIA
HGR1
D R RE V IL L A M B GYO / D R D EL G A D O R 4 GYO

TCNICAS MOLECULARES PARA EL DX

Introduccin:
VPH anogenital es la ETS mas comnmente
transmitida en EUA
Aproximadamente 20,000,000 de personas infectadas y
6.2 millones ms son infectados cada ao
La gran mayora es asintomtico y se resuelve en un
lapso de 1-2

TCNICAS MOLECULARES PARA EL DX

Introduccin:
La persistencia de VPH de bajo y alto riesgo puede
ocasionar lesiones en perine / pene / ano / vulva /
vagina / crvix
El tipo 6-11 causa el 90% de los condilomas
El tipo 16-18 causa el 70% de todos los casos de
cncer anogenital

TCNICAS MOLECULARES PARA EL DX

Introduccion
CaCu.- Carcinoma invasivo q se origina en la zona de transformacin
Mas comn.- Cel escamosas
Segunda causa de muerte por Ca en mujeres a nivel mundial
Tercer causa mas comn de muerte en mujeres
70-80% Carcinoma de cel escamosas
10-15% adenocarcinoma

TCNICAS MOLECULARES PARA EL DX

Introduccin
Tipos de Virus
Alto riesgo
16-18-31-30-35-39-45-51-56-58-59-68-73-82 (33-34-52-67-69)
Probables 26-53-66

Bajo riesgo
6-11-40-42-43-44-54-61-70-72-81

TCNICAS MOLECULARES PARA EL DX

Dx

Sospecha

Cribado

Colposcopia

Molecular

TCNICAS MOLECULARES PARA EL DX

Importancia
Diagnostica
Tratamiento
Pronostica

Por lo tanto: La clave para una

acertada evaluacin del riesgo
a desarrollar CaCu es la
informacin precisa del VPH

TCNICAS MOLECULARES PARA EL DX

Mtodos mas utilizados
Captura de hbridos de segunda generacin (CH2)
Reaccin en cadena de polimerasa (PCR)

Marcadores biologicos

CH2
Hibridacin utilizando sondas de RNA
Deteccin de:
16-18-31-33-35-39-45-51-52-56-58-59-68

La captura se realiza con un Ac conjugado con FA

CH2
Sensibilidad 96-98%
Limitacin de reporte:
solo es + o
No permite distinguir el tipo viral

Falsos negativos 1-8%

CH3
Deteccin: 18-45 o 16-31-35
Uso adicional de sonda de oligonucleotidos de
captura con biotina

PCR
Sensibilidad y Especificidad variable:
Juego de oligonucleotidos empleados
Tamao del fragmento amplificado
Habilidad de detectar mltiples tipos virales

PCR
AMPLICOR HPV test
Prueba cualitativa in
vitro
Amplificacin de
ADN mediante PCR e
hibridacin (CH2)
Alta sensibilidad
para LIEAG

Linear Array HPV

Genotyping
Sensibilidad 98%
Especificidad 99%
Amplifica la
secuencia especifica
de la regin L1(PCR)
Hibridacin con
sonda especifica para
tipificacin individual
de 37 genotipos

LINEAR ARRAY HPV GENOTYPING

Genotipos:
6-11-16-18-26-31-33-35-39-40-42-45-51-52-53-54-55-5658-59
61-62-64-66-67-68-69-70-71-72-73-81-82-83-84-IS39CP6180

UTILIDAD DE LAS TCNICAS DE

DIAGNOSTICO DE VPH
Tamizaje primario (estrategia preventiva de
desarrollo de lesiones preinvasivas y CaCu
Tamizaje junto con la citologa
Confirmacin de citologas no concluyentes
ASC-US y LIEBG
En los casos en que la colposcopia falla en
detectar lesiones causantes de la citologa
anormal

UTILIDAD DE LAS TCNICAS DE

DIAGNOSTICO DE VPH
Determinar la persistencia de genotipos de alto
riesgo asociados con la progresin de lesiones
cervicales y carcinognesis cervical
Establecer la efectividad de un tratamiento
Detectar genotipos especficos previos y
posteriores a la aplicacin de la vacuna
Adenocarcinoma

INMUNIZACIN

INMUNIZACIN
Generalidades
virus inactivados (recombinante)
Comercialmente en Mxico / US
Bivalente / Cuatrivalente (partculas de virus vivos
atenuados VLPs [virus like particles] [capside L1])
Usados para estimular actividad inmunitaria de serotipos
HPV presentados en la vacuna

INMUNIZACIN
Generalidades
Bivalente: 16-18, vacuna recombinante (HPV2; Cervarix)
contienen VLPs 16-18
Cuadrivalente: 6-11-16-18, vacuna recombinante (HPV4;
Gardasil ) contienen VLPs 6-11-16-18

INMUNIZACIN
En EUA la poblacin cubierta: 36.9%mujeres (1926) / 5.9% hombres (19-26)

 Usos:
Prevencin de enfermedad causadas por VPH en mujeres
y hombres entre los 9 26
LIEBG / LIEAG / Cancer cervical

HPV2 (Cervarix)

LIEBG / LIEAG / Cancer cervical / VaIN grado 2-3 / AIN

grado 1-2-3 / cncer anal / Condiloma acuminado
HPV4 (Gardasil)

INMUNIZACIN
Administracin:
IM
No debe utilizarse otras vas de aplicacin
Aplicacin en zona de deltoides superior / cara anterolateral del muslo
La aplicacin es con la aguja en 90 y el tamao debe individualizarse de acuerdo al IMC
Agitarse previo a la aplicacin, debe quedar uniformemente blanco/turbio el liquido
Desechar la vacuna si contiene partculas, esta descolorida y no presenta las caractersticas
adecuadas despus de la agitacin de la vacuna
No diluir
No mezclar con otras soluciones o vacunas
Se puede aplicar simultneamente con otras vacunas y los puntos de inyeccin deben estar separados al
menos por una pulgada de distancia

INMUNIZACIN
Dosis:
Paciente femenino 9 18 aos (HPV2; Cervarix):
3 dosis, cada dosis de 0.5 ml, dependiendo el fabricante las dosis
subsecuentes son entre 1 a 6 meses de la primer dosis.
ACIP, AAP y otros recomiendan que la primer dosis sea entre los
11/12, la segunda dosis del 1-2 mes de la primer dosis y la
tercera a los 6 meses de la primer dosis (al menos 12 semanas
despus de la segunda dosis y al menos 24 semanas despus de la
primera dosis)
Est indicada la aplicacin en pacientes de 13 o ms en las
que no se cumpli el esquema

INMUNIZACIN
Dosis
Paciente Fem-Masc entre 9-18 (HPV4; Gardasil):
3 dosis, cada dosis de 0.5 ml, dependiendo el fabricante las dosis
subsecuentes son entre 2 a 6 meses de la primer dosis.
ACIP, AAP y otros recomiendan que la primer dosis sea entre los
11/12, la segunda dosis del 1-2 mes de la primer dosis y la tercera
a los 6 meses de la primer dosis (al menos 12 semanas despus de
la segunda dosis y al menos 24 semanas despus de la primera
dosis)
Est indicada la aplicacin en pacientes de 13 o ms en los
que no se cumpli el esquema

INMUNIZACIN
Dosis:
Paciente fem entre 18-26 (HPV2; Cervarix):
3 dosis, cada dosis de 0.5 ml, dependiendo el fabricante
las dosis subsecuentes son entre 1 a 6 meses de la
primer dosis.
Aplicacin en pacientes mayores de 19 en las que
no se aplic el esquema correctamente

INMUNIZACIN
Dosis
Paciente Fem-Masc entre 18-26 (HPV4; Gardasil):
3 dosis, cada dosis de 0.5 ml, dependiendo el fabricante las
dosis subsecuentes son entre 2 a 6 meses de la primer
dosis.
Aplicacin en mujeres de 19-26 y hombres de 19-21 en
los que no se aplic el esquema correctamente
Aplicacin en hombres de 22-26 en las que no se
aplico el esquema correctamente y tuvieron relacin
homosexual o estn inmunocomprometidos

INMUNIZACIN
Dosis
Pacientes con enfermedad heptica o renal no hay dosis
establecida
Pacientes geritricos la seguridad y eficacia no esta
establecida

INMUNIZACIN
Limitaciones, precaucin y efecto adverso:
Contraindicaciones: hipersensibilidad a cualquier componente de la
vacuna
Precaucion:
Alergia a la levadura
Alergia al latex

Sincope
Efectividad limitada ya que no protege contra otros tipos de VPH, no
sustituye el tamizaje por lo que adems se deber continuar con el
screening

INMUNIZACIN
Limitaciones, precaucin y efecto adverso:
Puede utilizarse en pacientes ya infectados por virus de
VPH
No se utiliza para el tratamiento de las verrugas genitales
activas
No se utiliza para el tratamiento de Lesiones precancerosas
La duracin de la inmunidad no esta determinada

INMUNIZACIN
Limitacin, precauciones y efectos adversos:
La aplicacin de la vacuna en patologas concomintantes
debe ser individualizada debido a la recurrencia, proceso
agudo o severidad de la patologa concomitante.
ACIP afirma que la vacuna contra el VPH se puede
administrar a los individuos apropiados para su edad con
enfermedades agudas menores como diarrea o una
infeccin respiratoria leve del tracto superior (con o sin
fiebre) , pero recomienda diferir la vacunacin en
pacientes con enfermedad aguda moderada o grave (con
o sin fiebre).

INMUNIZACIN
Limitacin, precauciones y efectos adversos
Puede utilizarse en individuos con enfemedades
autoinmunes
Categora B en el embarazo
Se desconoce la distribucin de la vacuna en la leche
materna

INMUNIZACIN
Limitaciones, precaucin, efectos adversos:

Reacciones en el sitio de inyeccin

Dolor
Enrojecimiento
Tumefaccin
Fatiga
Mialgias
Artralgias
Cefalea
Sntomas gastrointestinales

Estrogens or
progestins

No evidence to date that hormonal contraceptives

alter immunologic response to HPV vaccine

INMUNIZACIN
Hepatitis B (HepB)
vaccine

Concomitant administration of 3-dose vaccination

series of HPV4 (Gardasil) and HepB vaccine
(Recombivax HB) (at different injection sites)
during the same health-care visits in women 1624
years of age did not decrease antibody response to
either vaccine and did not increase incidence of
clinically important adverse effects compared with
administration during separate visits

May be administered
concomitantly (using different
syringes and different injection
sites)

Immunosuppressive agents (e.g., alkylating

agents, antimetabolites, corticosteroids,
radiation)

Potential for decreased antibody

response to vaccines

Meningococcal vaccine

MCV4 (Menactra): Concomitant administration

with HPV4 (Gardasil) (at different injection sites)
in adolescents 1017 years of age did not decrease
antibody response to either vaccine compared with
administration during separate visits (1 month
apart); subjects also received Tdap
(Adacel);safety profiles were similar except for
increased incidence of swelling at HPV4 injection
site when all 3 vaccines administered
concomitantlyMCV4 (Menveo): Concurrent
administration with HPV4 (Gardasil) and Tdap
(Boostrix) in adolescents 11 through 18 years of
age did not interfere with immune response to
meningococcal antigens;systemic adverse
reactions were more frequent in those receiving
HPV4, Tdap, and MCV4 concomitantly compared
with those receiving MCV4 alone

May be administered
concomitantly (using different
syringes and different injection
sites)

Tetanus toxoid and

reduced diphtheria
toxoid and acellular
pertussis vaccine
adsorbed (Tdap)

Concomitant administration of HPV4 (Gardasil)

and Tdap (Adacel) (at different injection sites) in
adolescents 1017 years of age did not decrease
the antibody response to either vaccine compared
with administration during separate visits (1 month
apart); subjects also received MCV4
(Menactra).Safety profiles were similar except for
an increased incidence of swelling observed at
HPV4 injection site when all 3 vaccines
administered concomitantly

May be administered
concomitantly (using different
syringes and different injection
sites)

Routes

Parenteral

Dosage Forms

Injectable
suspension, for
IM use

Strengths
20 mcg of HPV
type 16 L1 and
20 mcg of HPV
type 18 L1
protein per 0.5
mL

Brand Names

Cervarix

Manufacturer

GlaxoSmithKline

Human Papillomavirus Bivalent (Types 16 and 18) Vaccine, Recombinant:

Routes

Dosage Forms

Strengths

Brand Names

Manufacturer

20 mcg of HPV
type 6 L1, 40
mcg of HPV type
11 L1, 40 mcg of
HPV type 16 L1,
and 20 mcg of
Injectable
HPV type 18 L1
suspension, for protein per 0.5
Parenteral
IM use
mL
Gardasil
Merck
Human Papillomavirus Quadrivalent (Types 6, 11, 16, 18) Vaccine,
Quadrivalent:

 De la Fuente-villareas D et all, Biologia del virus de papiloma humano y tecnicas de

diagnostico, Med Un 2010;12(49):231-238
Rodriguez Isalas M. Diagnostico molecular del papilomavirus humano: nuevos desafios
en un escenario diferente, Enf Infec Microb Clin 2012;30(5):223-224
Gutierrez-Rojo R. Utilidad de las tecnicas moleculares de deteccion de VPH en el control
y prevencion del CaCu, AMATGI, 2011; 3(5)
Merck & Co. Gardasil(human papillomavirus quadrivalent [types 6, 11, 16, 18] vaccine
recombinant) prescribing information. Whitehouse Station, NJ; 2013 Mar.
Siddiqui MA, Perry CM. Human papillomavirus quadrivalent (types 6, 11, 16, 18)
recombinant vaccine (Gardasil).Drugs. 2006; 66:1263-71.
Villa LL, Costa RL, Petta CA et al. Prophylactic quadrivalent human papillomavirus (types
6, 11, 16, and 18) L1 virus-like particle vaccine in young women: a randomised doubleblind placebo-controlled multicentre phase II efficacy trial.Lancet Oncol. 2005; 6:271-8.

 Schmiedeskamp MR, Kockler DR. Human papillomavirus vaccines.Ann Pharmacother.

2006 Jul; 40:1344-52 .
Centers for Disease Control and Prevention. HPV vaccine information for cliniciansfactsheet. 2012Jul. From CDC website . Accessed 2013 Jan 11.
Reinis M. Technology evaluation: HPV vaccine (quadrivalent), Aventis Pasteur
MSD/CSL.Curr Opin Mol Ther. 2004; 6:206-11.
Ault KA. Vaccines for the prevention of human papillomavirus and associated
gynecologic diseases: a review.Obstet Gynecol Surv. 2006; 61:26-31S.
Dunne EF, Markowitz LE. Genital human papillomavirus infection.Clin Infect Dis.
2006; 43:624-9.
GlaxoSmithKline. Cervarix(human papillomavirus bivalent [types 16 and 18]
vaccine, recombinant) prescribing information. Research Triangle Park, NC; 2012
Aug .

 Centers for Disease Control and Prevention. Sexually transmitted diseases treatment
guidelines, 2010.MMWR Morb Mortal Wkly Rep. 2010; 59(No. RR-12):1-110
Centers for Disease Control and Prevention. Quadrivalent human papillomavirus vaccine:
recommendations of the Advisory Committee on Immunization Practices (ACIP).MMWR
Recomm Rep. 2007; 56 (RR-2):1-24.
American Academy of Pediatrics. Policy statement: HPV vaccine recommendatoins.Pediatrics.
2012; 129:602-5
American Academy of Pediatrics. 2012 Red Book. Report of the Committee on Infectious
Diseases. 29th ed. Elk Grove Village, IL: American Academy of Pediatrics; 2012.
Centers for Disease Control and Prevention. Epidemiology and prevention of vaccinepreventable diseases. 12th ed. Washington DC: Public Health Foundation; 2012. Available at
CDC website
National Center for Immunization and Respiratory Diseases. General recommendations on
immunization --- recommendations of the Advisory Committee on Immunization Practices
(ACIP).MMWR Recomm Rep. 2011; 60:1-64.