REPLICACIN DEL DNA

Es el mecanismo que permite al DNA duplicarse (es decir, sintetizar una copia idntica). De esta manera de una molcula de DNA nica, se obtienen dos ms "clones" de la primera. Gracias a la complementariedad entre las bases que forman la secuencia de cada una de las cadenas, el DNA tiene la importante propiedad de reproducirse idnticamente, lo que permite que la informacin gentica se transmita de una clula madre a las clulas hijas y es la base de la herencia del material gentico.

Replicacin de DNA. La doble hlice es desenrollada y cada hebra hace de plantilla para la sntesis de la nueva cadena. La DNA polimerasa aade los nucletidos complementarios a los de la cadena original.

MODELOS DE REPLICACIN
En cada una de las molculas hijas se conserva una de las cadenas originales, y por eso se dice que la replicacin del DNA es semi-conservadora.

a) Conservadora. Se sintetiza una molcula totalmente nueva, copia de la original. b) Dispersora, o dispersante. Las cadenas hijas constan de fragmentos de la cadena antigua y fragmentos de la nueva. c) Semiconservadora (modelo correcto). En cada una de las molculas hijas se conserva una de las cadenas originales.
Tres posibles modelos de replicacin. a) Conservadora, b) Dispersora, c) Semiconservadora (mecanismo real)

SECUENCIALIDAD
LA REPLICACIN AVANZA EN FORMA DE HORQUILLA Debido a que en la clula ambas cadenas de la doble hlice de DNA se duplican al mismo tiempo, stas deben separarse para que cada una de ellas sirva de molde para la sntesis de una nueva cadena. Por eso, la replicacin avanza con una estructura en forma de horquilla .

Tres posibles modelos de replicacin. a) Conservadora, b) Dispersora, Semiconservadora (mecanismo real)

c)

BIDIRECCIONALIDAD
El movimiento de la horquilla es bidireccional en la mayora de los casos, es decir, a partir de un punto se sintetizan las dos cadenas en ambos sentidos, que avanza en direccin a la regin de DNA no duplicado dejando atrs los dos moldes de DNA de cadena simple donde se est produciendo la replicacin.

En la mayora de los casos la replicacin es bidireccional. No obstante, la replicacin se puede considerar, de forma general, bidireccional.

SEMIDESCONTINUIDAD
La replicacin siempre se produce en sentido 5' 3', siendo el extremo 3'-OH libre el punto a partir del cual se produce la elongacin del DNA. Esto plantea un problema, y es que las cadenas tienen que crecer simultneamente a pesar de que son antiparalelas, es decir, que cada cadena tiene el extremo 5' enfrentado con el extremo 3' de la otra cadena. Por ello, una de las cadenas debera ser sintetizada en direccin 3' 5'. Este problema lo resolvieron los cientficos japoneses Reiji Okazaki y Tsuneko Okazaki en la dcada de 1960, al descubrir que una de las nuevas cadenas de ADN se sintetiza en forma de trozos cortos que, en su honor, se denominan fragmentos de Okazaki.

Su longitud suele variar entre 1000 y 2000 nucletidos en las bacterias y entre 100 y 400 nucletidos en eucariontes.

DNA POLIMERASAS
La DNA polimerasa es la enzima que cataliza la sntesis de la nueva cadena de DNA a partir de desoxirribonucletidos y de la molcula de DNA plantilla o molde que es la que ser replicada. La enzima copia la cadena de nucletidos de forma complementaria (A por T, C por G) para dar a cada clula hija una copia del DNA durante la replicacin.

MODO DE OPERACIN: En cada horquilla de replicacin, la DNA polimerasa y otras enzimas sintetizan dos nuevas cadenas de DNA que son complementarias respecto a las 2 cadenas originales.

Su longitud suele variar entre 1000 y 2000 nucletidos en las bacterias y entre 100 y 400 nucletidos en eucariontes.

FUNCIN CORRECTORA
Adems de participar en la elongacin, desempean una funcin correctora y reparadora gracias a su actividad exonucleasa 3', que les confiere la capacidad de degradar el DNA partiendo de un extremo de ste. Es importante que existan estos mecanismos de correccin ya que de lo contrario los errores producidos durante la copia del DNA daran lugar a mutaciones. Las fosfodiesterasas o nucleasa s son enzimas hidrolasas que ca talizan la ruptura de los enlaces fosfodister, como por ejemplo los que se establecen en los cidos nucleicos entre la pentosa de un nucletido y el grupo fosfato de otro.

Funcin correctora exonucleasa 3' 5' de las DNA polimerasas.

PROCESO GENERAL
La helicasa rompe los puentes de hidrgeno de la doble hlice permitiendo el avance de la horquilla de replicacin. La topoisomerasa impide que el DNA se enrede debido al super-enrollamiento producido por la separacin de la doble hlice. Las protenas SSB se unen la hebra discontinua de DNA, impidiendo que sta se una consigo misma. La DNA polimerasa sintetiza la cadena complementaria de forma continua en la hebra adelantada y de forma discontinua en la hebra rezagada. La RNA primasa sintetiza el cebador de RNA necesario para la sntesis de la cadena complementaria a la cadena rezagada. La DNA ligasa une los fragmentos de Okazaki.

INICIACIN

Para que pueda formarse la horquilla de replicacin es necesario que las dos cadenas se separen para sintetizar el cebador y el DNA de la cadena de nueva sntesis. Para ello el DNA debe desenrollarse y el punto de partida viene determinado por una secuencia especfica de nucletidos conocida como origen de replicacin. Protena iniciadora: desnaturalizacin del DNA y (Adenina y Timina)
reclutamiento de protenas. replicacin aparece en naranja. El origen

de

ELONGACIN
En el siguiente paso, la holoenzima DNA Pol III cataliza la sntesis de las nuevas cadenas aadiendo nucletidos sobre el molde. Esta sntesis se da bidireccionalmente desde cada origen, con dos horquillas de replicacin que avanzan en sentido opuesto. Cuando el avance de dos horquillas adyacentes las lleva a encontrarse, es decir, cuando dos burbujas se tocan, se fusionan, y cuando todas se han fusionado todo el cromosoma ha quedado replicado.

Enzimas que participan en la replicacin: helicasa, protenas SSB, topoisomerasa, RNA primasa, Holoenzima DNA Pol III

ELONGACIN
Puesto que la holoenzima ADN Pol III necesita de un extremo 3'-OH libre, es necesario que una RNA primasa catalice la formacin de un fragmento corto especfico de RNA llamado cebador, que determinar el punto por donde la DNA polimerasa comienza a aadir nucletidos. Pero debido a la unidireccionalidad de la actividad polimerasa de la DNA Pol III, que slo es capaz de sintetizar en sentido 5 3', la replicacin slo puede ser continua en la hebra adelantada; en la hebra rezagada es discontinua, dando lugar a los fragmentos de Okazaki.

Hebra rezagada: sntesis de cebadores, unin de fragmentos de Okazaki y eliminacin de los cebadores

TERMINACIN
Terminacin de los genomas lineales

El final de la replicacin se produce cuando la DNA polimerasa III se encuentra con una secuencia de terminacin (secuencia ter). Se produce entonces el desacople de todo el replisoma y la finalizacin de la replicacin.