Bacteriología

Generalidades de microbiologa 1
MICROBIOLOGA

MAG. FREDDY ORIHUELA VILLAR
MICROBIOLOGA
Estudio de microorganismos:
O Visibles a travs del microscopio
O Tamao en m (10
-6
m)
MICROBIOLOGA
Bacterias BACTERIOLOGA
Hongos MICOLOGA
Virus VIROLOGA
Parasitos PARASITOLOGA

CLASES DE MICROORGANISMOS
MICROORGANISMOS
Ejemplos de patologas
BACTERIA
Infecciones urinarias, Diarrea
Tuberculosis, Difteria, Tetanos
HONGOS Micosis, Tinea
VIRUS HIV, Hepatitis C,B, Rubeola
PARASITOS
Toxoplasmosis, Malaria, Tenia
(gusanos en cinta)
MICROORGANISMOS
Hongos :

O Hongos miceliales
(dermatofitos, hongos filamentosos)
Ej : Penicillium, Aspergillus

O Levaduras
Ej: levaduras para fermentacin (Saccharomyces),
polvo de hornear
Ej.: Candida, Cryptococcus
Tamao: 10 m
Virus:
- Tamao < 0.1 m
- DNA o RNA
- Sin enzimas: necesitan las del husped (Ojo:
retrotranscriptasa)
- Reproductcin por replicacin

Bacterias:
- Tamao: 1 m
- DNA y RNA
- Enzimas: biosntesis
- Reproduccin por fisin

MICROORGANISMOS
1.2 ESTUDIO DE BACTERIAS
DONDE?
En humanos :
En el ambiente :
Flora Normal
= Flora Comensal
Saprfitos
Donde ?
Suelo
Aire
Agua
Alimentos
En el medio ambiente:
DONDE ?
SI
Boca
Orejas
Tracto respiratorio
Tracto intestinal
Tracto genital
Piel....
NO

Sangre
Lquido cefaloraqudeo
(LCR)
Orina
EN PERSONAS SANAS
Flora Normal:
Contacto con ambiente
Siempre esteril :
Cavidades cerradas
PATOGENIA
OPatgenos estrictos:
O Multiplicacion y diseminacin dentro del organismo
O Resistencia al sistema inmune
O Secrecin de enzimas: lesiones en tejidos del
husped
O Secrecin ocasional de toxinas
En pacientes infectados:
PATOGENIA

La bacteria no abandona el sitio de infeccin. Es su
toxina la que se disemina en el organismo y causa la
enfermedad

Ej.: - Clostridium tetani (tetanos)
- Corynebacterium diphteriae (difteria)

Intoxicacin alimentaria:
- Staphylococcus aureus
- Clostridium botulinum
Botulismo: ingestin de alimentos en los que C. botulinum ha
desarrollado su toxina (no eliminatada en el tracto digestivo)
paralisis despus de ataque neuromuscular

Bacterias toxignicas
O Patgenos oportunistas:
Qu bacterias?
Bacterias Saprfitas o de flora normal
Generalmente no patgenos
Cundo?
Immunodepresin del husped
Rotura de la barrera natural
Ej : E. coli, presente en flora normal y potencial causante de
infecciones urinarias, septicemia
PATOGENIA
PATOGENIA: EJEMPLOS
O Estreptococos,
Enterococos
O Neisseria
O Corynebacteria
O Anaerobios...

Enterobacteriaceae
O Enterococos
O Levaduras
O Anaerobios...
O Streptococcus A, Neumococos
O Corynebacterium diptheriae
O Staphylococcus aureus
O Haemophilus influenzae

O Salmonella, Shigella
O E. coli, Yersinia, Campylobacter
O Vibrio cholerae
O Toxina : Clostridium, S. aureus
CAVIDAD OROFARNGEA:
TRACTO DIGESTIVO:
BACTERIAS PATOGENAS
FLORA NORMAL
Staphylococcus epidermidis
Corynebacteria
Propionibacterium acnes...

Lactobacillus
Anaerobios
Flora cutnea...
(Mycoplasma)
Staphylococcus aureus
Streptococcus A
Pasteurella
Bacillus...

Gonococos
Streptococcus B
Gardnerella vaginalis
Treponema pallidum
Haemophilus, Chlamydia...
PIEL:
CAVIDADES GENITALES:
BACTERIAS PATOGENAS FLORA NORMAL
PATOGENIA
MORFOLOGA
COCOS
BACILOS
COCO-BACILOS
CARACTERSTICAS DE AGRUPAMIENTO
COCOS
BACILOS
diplococos cadenas grupos
diplobacilos
cocobacilos
ESTRUCTURA

membrana citoplasmtica
Pared
celular
citoplasma
DNA
ribosomas
capsula (facultativa)
flagelos
(facultativos)
MOVILIDAD
1- Sin flagelos:
Bacterias inmviles
3- Muchos flagelos:
bacterias mviles
Movimiento:

2- Un flagelo:
bacterias mviles
Movimiento:
REQUERIMIENTOS NUTRICIONALES

Requerimientos bsicos
Para la sntesis de los distintos constituyentes de la bacteria
C, N, O, H, sales minerales...

Requerimientos de azcares
Para los requerimientos energticos de la bacteria
glucosa , lactosa

Requerimiento de factores de crecimientos
Para el desarrollo de las bacterias de difcil crecimiento
vitaminas, aminoacidos...

REQUERIMIENTOS RESPIRATORIOS
Oxgeno requerido Aerobios

Menor cantidad de O
2
Microaerfilos
requerida

Sin oxgeno Anaerobios

CO
2
requerido Capnfilos
MULTIPLICACION
Division cada
20 minutos
MULTIPLICACION
Velocidad de multiplicacin depende de la temperatura:
Temperatura
37C 4C
65C
Velocidad
1.3 EL LABORATORIO DE
BACTERIOLOGA CLNICA
OBJETIVO
Encontrar el tratamiento adecuado para el
paciente

?
Cmo?
OAislamiento de la bacteria responsable de la
infeccin
OIdentificar esta bacteria
OProbar la resistencia a los diferentes antibiticos
LOS DIFERENTES PASOS EN EL
DIAGNOSTICO BACTERIOLOGICO
Recoleccin de la muestra
Examen microscpico
Cultivo
Identificacin
Tests de sensibilidad antibitica
RECOLECCION DE LA MUESTRA
LCR= Lquido cfalo-raqudeo
RECOLECCIN DE MUESTRA
MUESTRA MODO DE
RECOLECCIN
PATOLOGA
Orina

Infecciones urinarias
Heces Diarrea
Intoxicacin
alimentaria
Genital Hisopado Vaginitis, cervicitis,
prostatitis,
uretritis,ETS
Supuracin Hisopado o jeringa Absceso, lquido
peritoneal,
Infecciones de piel

Muestra polimicrobianas:

Muestras : cutaneas
digestivas
vaginal, uretral
Tracto respiratorio...
Observacin de muchos tipos bacterianos

Muestras monomicrobianas:

Muestras : LCR, sangre, orina

Observacin de un nico tipo bacteriano

Slo patgeno
Flora normal +
Patgeno

Condiciones de recoleccin

O Uso de material estril
O Desinfeccin del sitio de recoleccin antes de la
toma de muestra
(Ej: Limpiar localmente antes de recolectar la muestra de orina)


Inocular la muestra inmediatamente
o
Usar medio de transporte

POR QU?
Las bacterias son microorganismos vivientes! Es
necesario:
1- Mantenerlos viables
2- Evitar su multiplicacin

CUNDO? Los laboratorios que estn lejos del sitio de
recoleccin: recoleccin al pie de la cama del paciente

TRANSPORTE DE MUESTRAS
TRANSPORTE DE MUESTRAS
Si la inoculacin en el medio de cultivo no es inmediata,
Almacenamiento de las muestras durante el transporte:
4C
37C y/o medio de transporte
?
Orina, heces
Muestras genitales, LCR, sangre, pus
Sin multiplicacin
bacteriana
Posibilidad de
bacterias lbiles
Posibilidad de
bacterias
anaerobias
El medio de transporte previene la desecacin de las muestras
EXAMEN MICROSCPICO
EXAMEN MICROSCPICO

Presencia y conteo de bacterias
Morfologa y caracteristicas de agrupamiento
Movilidad
Citologa: observacin de clulas
Ej.: Leucocitos (signo de infeccin)
1 Examen directo
Primer paso
1 gota entre porta y cubreobjeto :
Lente de x 40, (seco)
INTERES:
Gram +
Violeta
Gram - Rosa
2 Tincin de GRAM
Es la tincin ms comnmente usada en bacteriologa

Usada para clasificar bacterias

EXAMEN MICROSCPICO

Tincin de Gram: Principio
Basado en la diferencia de permeabilidad de la pared celular bacteriana
1 Violeta de Genciana o Cristal - Violeta
Atraviesa la pared celular y colorea toda la bacteria
2 Solucin iodada o Lugol
Favorece la fijacin del colorante
3 Decoloracin con alcohol acetona
Bacterias Gram (-) pierden su color
Bacterias Gram (+) permanecen violetas
4 - Fucsina o safranina
Coloracion de bacterias Gram (-) en rosado
Re

EXAMEN MICROSCPICO
Objetivo x 100 con aceite de inmersin
3 Otras tinciones:

Coloracin con azul de metileno
Para visualizar bacterias intraleucocitarias
Ej : gonococos
Giemsa
Para parsitos sanguneos o intracelulares
Ziehl - Neelsen
for Mycobacteria
Naranja de acridina
Fluorescencia para muestras con bajo recuento
bacteriano
EXAMEN MICROSCPICO
CULTIVO
CULTIVO
Agar Nutritivos
Atmsfera correcta
Temperatura correcta
Para obtener un crecimiento bacteriano, es
necesario:
Cumplir con los requerimientos bacterianos en
lo que se refiere a:
CULTIVO
Eleccin del medio de cultivo correcto:
O Depende de la bacteria que ser buscada
O depende de la muestra
?
Medio Selectivo?
Medio
enriquecido?
Medio bsico?
Medio
Cromognico?
CULTIVO
Diferentes tipos de medios de cultivo

Medio bsico: nutrientes mnimos

Medio enriquecido: medio bsico+ factores de
crecimiento (Ejemplo: sangre)

Medio selectivo: Adicin de antibiticos u otros

Medios cromognicos: Adicin de sustratos cromognicos
que conducen a la aparicin de
colonias coloreadas
Los medios pueden ser selectivos y enriquecidos, o selectivos y
cromognicos

Crecimiento en medio slido:

En una placa
Las bacterias inoculadas en una superficie de agar nutritivo
se multiplicarn y formarn una agrupacin visible al ojo
desnudo:

colonia = 1 milln de bacterias
= 20 generaciones

PARA AISLAMIENTO
CULTIVO
CULTIVO
Ej.: Caldo cerebro corazn, caldo tripticasa soya...
Crecimiento en medio lquido:

Caldo
Las bacterias son colocadas en un caldo nutritivo donde se
multiplicarn, y se observar un enturbiamiento en el medio
(visible al ojo desnudo).
eLos caldos de cultivo no permiten diferenciar un crecimiento
polimicrobiano de uno monomicrobiano.

PARA ENRIQUECIMIENTO
CULTIVO: Ejemplos
Orina :

Heces :

Muestra
genital :
CPS ID 3
Agar Sangre
Campylosel Yersinia CIN BCP Hektoen
Mac Conkey Sangre ANC Chocolate
Selenito
Candida ID 2
Eleccin de la temperatura adecuada:

- Bacteria : 37C
- Hongos : 30C
30C 37C
Incubador?
CULTIVO
Diferentes tipos de respiracin
1
2 3 4
CULTIVO
1 Aerobios estrictos

Requiere la presencia de Oxgeno
Su energa es obtenida a travs de una metabolismo
oxidativo: respiracin
Ej: Pseudomonas, Micobacterias

2 Anaerobios facultativos

Desarrolla con o sin oxgeno pero la mayor parte de la
energa producida proviene de la fermentacin
Ej: Enterobacteriaceae

CULTIVO
3 Anaerobios estrictos
Slo pueden desarrollar en ausencia de Oxgeno, ya que es
txico para este tipo de bacterias. Toda la energa producida
proviene de la fermentacin (metabolismo fermentativo)
Ej.: Fusobacterium, Eubacterium

4 Bacterias microaerfilas
Prefieren una atmsfera con cantidad reducida de O2
Ej.: Campylobacter, Mycoplasma

5 Bacterias Capnfilas
Algunas bacterias prefieren atmsferas enriquecidas en CO2,
es esencial para otros.
Ej.: Neisseria gonorrhoeae
CULTIVO
Elegir la atmsfera adecuada:

- Aerobios
- Aero-anaerobios

- Bacterias -aerfilos

- Anaerobios

- Bacterias capnfilas
generador de
microaer
generador de anaer
sin generador
generador de CO2
Jarra
CULTIVO
CULTIVO
1
2
3
4
Tiempo
Recuento
bacteriano
Fases de crecimiento Bacteriano
24Hrs 48Hrs
CULTIVO
Fases del crecimiento bacteriano:

1. Fase de latencia:
Metabolismo reducido: adaptacin de la poblacin bacteriana a las
nuevas condiciones de cultivo.

2 Fase de crecimiento exponencial
Crecimiento extremadamente activo.

3 Crecimiento negativo y fase estacionaria
Comienzo de acumulacin de productos txicos, disminucin de los
nutrientes disponibles.

4 Fase de Declinacin
Autolisis bacteriana

IDENTIFICACION
IDENTIFICACION DE BACTERIAS
Requerimientos : Obtener un cultivo puro (si la muestra
es polimicrobiana)

Primer paso : AISLAMIENTO

Inoculacin del germen en un agar nutritivo
1 bacteria 1 colonia

Aislamiento
1
4
3
2
Aislamiento
1
4
3
2

Segundo paso: IDENTIFICACION
Las bacterias se clasificacan de acuerdo con:
O Familia
O Gnero
O Especies
Ejemplo: Micrococcaceae
Staphylococcus
aureus
Ejemplo: Enterobacteriaceae
Escherichia
coli

E. coli
S. aureus
Examen microscpico:
O Cocos o bacilos
O Caractersticas de agrupamiento
O Gram + o Gram -

Observacion de colonias en las placas:
Tamao, color, aspecto, olor (!)
Hemlisis en agar sangre
(Streptococci... )


-Hemolisis : hemlisis parcial
(halo verdoso alrededor de la colonia)
Ej. : Pneumococci

-Hemolisis : hemlisis total
(halo transparente alrededor de la colonia)
Ej. : Streptococci grupo A, B ...

-Hemolisis : no hemolisis
Ej. : Enterococcus faecalis, faecium
HEMOLISIS
Tests de Orientacion:
Deteccin de enzimas respiratorias

Catalasa : Destruccin de perxido de hidrgeno
2 H
2
O
2
2 H
2
O + O
2

catalasa

Oxidasa : TMPD oxidized TMPD
incoloro oxidasa rosa-violeta
(TMPD = N Tetra metil - para - fenilen - diamina)

Resultados de tests de Orientacion:
O Morfologa
O Gram
O Catalasa, oxidasa
widefinirn la familia o el gnero, y nos permite elegir
la tira de identificacin correcta

Ejemplos :
O Cocos, Gram +, Catalasa + Staphylococci
O Cocos, Gram +, Catalasa - Streptococci
O Bacilos, Gram -, Oxidasa - Enterobacteriaceae

Estudio de caractersticas bioqumicas:
Estudio del metabolismo bacteriano (enzimas...)

Ejemplo :

Enzima
Cambio de Color
pH
TEST (+)
Sin enzima
TEST (-)
Glucosa
Fermentacion de glucosa
Produccin de cido

Metabolismo de glcidos
Oxidacin o fermentacin de azcares:
glucosa, lactosa, sacarosa, arabinosa...

Metabolismo de protenas
Protenas: gelatina, leche, sangre...
proteasas, ureasa, desaminasas, decarboxilasas

Metabolismo de lpidos
lipasa, lecitinasa...

PRUEBAS BIOQUMICAS
Aplicaciones

OMedios de identificacin en tubos

OTiras de identificacin

Ej : Galera API, ID 32, tarjetas VITEK 1 / 2
26
27
30
29
28
1
2
5
4
3
16
17
20
19
18
21
22
25
24
23
11
12
15
14
13
6
7
10
9
8
Estudio de caractersticas antignicas
Reaccin inmonolgica: antgeno - anticuerpo
Ac fijos a partculas de ltex
Aglutinacin en presencia del antgeno correspondiente
(bacteria...)

- usando colonias aisladas
- o usando directamente las muestras.
Ventaja: rapidez (reaccin inmediata)

latex con
Acs
AGLUTINACION
bacteria
Identificacin en medios cromognicos:

Identificacin directa de bacterias en la placa: colonias
coloreadas
O Para muestras comunes
O Para baterias frecuentemente
encontradas

Ej.: CPS ID 3 Urina (E.coli, Proteus, Strepto. D)

Inters: ahorro de tiempo y dinero
Identificacion usando biologa molecular:

Identificacion de bacterias por fragmentos de DNA
especficos
usando colonias
o directamente usando la muestra

Ej : Gen Probe Mycobacteria, Gonococci, Chlamydia...

Interes : Especificidad, ahorro de tiempo
PRUEBAS DE SENSIBILIDAD
Objetivo:
Encontrar un tratamiento
efectivo para el paciente
Recuperacin
rpida
PRUEBAS DE SENSIBILIDAD ANTIBITICA

1. Estudio In vitro de la actividad antibitica sobre una
bacteria aislada
Se realiza slo sobre patgenos
(no, sobre flora normal)

2. Interpretacin In vivo de la actividad antibitica:

Riesgo potencial del xito o falla del tratamiento

ANTIBIOTICOS
agentes antibacterianos
1928: Descubrimiento de la penicilina por
Sir A.Fleming

Origen:
- biologico: desarrolladas por microorganismos:
hongos, bacterias
- Qumico: producidos por sntesis

Accin: variable dependiendo de la familia de ATB
- inhibicin de la sntesis de la pared bacteriana
- alteracin de la membrana citoplasmtica
- accin sobre la sntesis proteica
- inhibicin de la sntesis de cidos nucleicos

ANTIBIOTICOS
Los resultados que se informan a los
mdicos se clasifican como:

S Sensible
R Resistante
I Intermedio
Bacteria Sensible: S
O Bacterias que no crecen en presencia del ATB
O El tratamiento con ese ATB resultar exitoso

Bacteria Resistente: R
O Bacterias que crecen en presencia del ATB
O El tratamiento con ese ATB resultar en falla

Intermedio: I
O Resultado Intermedio
O xito del tratamiento in vivo variable

RESULTADOS
Resistencia bacteriana
Natural:
Resistencia siempre encontrada en la msima especie bacteriana:
Mecanismo conocido
Ej.: Proteus mirabilis resistente a Tetraciclina

Adquirida:
Resistencia adquirida por una mutacion gentica, traspaso desde otra
bacteria, adquisicin de plsmidos, etc
Mecanismo presente slo en algunas cepas de dicha especie.

Debido a la posible presencia de resistencias adquiridas,
los tests de sensibilidad deben ser realizados para cada
bacteria identificada
Estudio de la CIM:

CONCENTRACION MINIMA INHIBITORIA
La menor concentracin de ATB capaz de inhibir el desarrollo visible de
la cepa estudiada.

Mtodo de dilucin en medio lquido

0 0,5 1 2 4 8

Concentracin antibitica (g/ml)
MIC = 1g/ml
Ej :
Difusin en Agar (discos)
Galeras ATB
Tarjetas de sensibilidad Vitek
Diferentes tcnicas

Tcnica de difusin en agar
Uso de un disco de papel de filtro impregnado
en el antibitico que se desea estudiar

O Inocular total la superficie del gar con una
suspensin antibitica.
O Colocar los discos sobre la superficie de la
placa.
O Los ATBs difundirn en el gar.

Despus de una incubacin por 20 hs., la
zona de inhibicin de crecimiento aparecer
alrededor del disco. El tamao de la zona es
proporcional al valor de CIM.
Media de los dimetros de
inhibicin para cada
antibitico
Este dimetro se
corresponde con el valor
de la CIM
El diametro define el
informe como S, R, I
dependiendo de los
dimetros oficiales dados
por comites de expertos
A
F
E
D
C
B
G
H
Para poder ser confiable, el mtodo debe estar
estandarizado

ESTANDARIZACION DE:

- inculo: cantidad de bacterias
- Agar Mueller-Hinton: composicin del medio
- Espesor del agar: difusin del ATB
- Carga antibitica del disco

Galerias ATB:
Cada ATB (A, B, C,
D) es evaluados en
2 concentraciones
diferentes (c y C)
c C
D
C
B
A
0
Control de crecimiento
S
R
I
S
= Sin crecimiento
bacteriano
= Crecimiento
bacteriano

Concentraciones crticas

Para cada antibitico, los comits internacionales de sensibilidad
antibitica fijan un rango crtico para saber si el ATB ser efectivo
in vivo o no ( a las dosis teraputicas)

C : Concentracin crtica Mxima
c : concentracin crtica Mnima

Concentraciones fijadasde acuerdo con la farmacocintica:
- unin a protenas,
- penetracin a varios sitios de accin,
- absorcion, metabolismo, y excrecin

Cepa sensible: MIC < c
El antibiotico testeado es activo sobre esa bacteria

Cepa con sensibilidad Intermedia: c < MIC < C
Las bacterias no seran afectadas por tratamientos en
dosis habituales, pero pueden verse afectadas por
altas dosis intravenosas o tratamientos locales.
Rango de riesgo

Cepa resistente: MIC > C
La bacteria resiste a las ms altas concentraciones de
ATB. El antibitico no ser activo in vivo.

Mtodos automatizados:
Estudio del crecimiento bacteriano en un medio
lquido o semislido en presencia de una o varias
concentraciones de antibitico

- ATB Expression
- mini API
- VITEK 1 and VITEK 2
26
27
30
29
28
1
2
5
4
3
16
17
20
19
18
21
22
25
24
23
11
12
15
14
13
6
7
10
9
8
1. MUESTRA
2. EXAMEN MICROSCOPICO
Examen Directo
Gram
3. CULTIVO
4. TESTS DE ORIENTACION
Catalasa
Oxidasa
5. IDENTIFICACION
Manual : GALERAS API
Semi-automticos: ATB Expression - mini API
Automatizacin total: VITEK1 y VITEK2
6. PRUEBAS DE SENSIBILIDAD ANTIBITICA
Difusin en agar (discos)
Medio semislido (galeras ATB)
Medios lquidos (tarjetas VITEK1 Y VITEK2)

RESUMEN
1.4 Principales muestras
Principales muestras en bacteriologa
1 - Orina
2 - Materia fecal
3 - Muestras genitales
Seguimiento de acuerdo con las
infecciones esperadas
INFECCIN URINARIA
INFECCIN URINARIA
Presencia de bacterias en orina
(normalmente estril)

Pathologa = cistitis, pielonefritis ...
Orina: es la muestra ms frecuentemente
recibida en el lab de bacteriologa
80% en mujeres
INFECCIN URINARIA
Bacterias patgenas:
O Escherichia coli
O Proteus
O Enterococcus faecalis
O Klebsiella
O Pseudomonas
O otross ....

La distribucin de las bacterias difiere entre pequeos
laboratorios y laboratorios de hospitales.
S. saprophyticus
Streptococcus B
Diagnstico de laboratorio:

Recuento:
Cantidad significativa de bacterias: >10
5
bacterias / ml
Presencia de leucocitos: indican inflamacin
Presencia de glbulos rojos: si hay lesin de la mucosa
del tracto urinario
Identificacin
Prueba de sensibilidad ATB

Con tratamiento antibitico efectivo:
esterilizacin de la orina en menos de 48 hs
INFECCIN URINARIA
INFECCIN URINARIA
Da 1
Da 3
Da 2
Colonias
- Aspecto de la
orina
- Cultivo
Inoculacin:
1- Tiras de
identification
2- Tests de
sensibilidad
WResultados
- Examen
microscpico
Identificacin
Tests de sensibilidad
Cultivo estril:
Resultado negativo
DIARREA INFECCIOSA
FLORA INTESTINAL NORMAL
Bacterias comensales

Flora residente:
O E.coli, otras Enterobacteriaceae
O Enterococci, Lactobacilli, levaduras, anaerobios...

Flora de trnsito: provenientes de la comida
O Staphylococci, Bacillus, Pseudomonas ...
DIARREA INFECCIOSA
Bacterias patgenas:
Salmonella
Shigella
Campylobacter
Escherichia
Yersinia
Vibrio ...

e La diarrea no es siempre es causada por bacterias:
virus y parsitos tambin son causas frecuentes

Examen macroscpico:
- Consistencia y aspecto de las heces

Examen microscpico:
- Deteccin de glbulos rojos y leucocitos
- Deteccin de bacterias mviles (Campylobacter, Vibrio..)
- Tincin de Gram: deteccin de un desbalance en la flora
DIARREA INFECCIOSA
Da 1
Da 3
Da 2
Colonias
- Examen
microscpico
- Cultivo
Si hay scolonias
sospechosas, inocular:
1- Tiras de ID
2- Tests de sensibilidad
WResultados
- Aspecto de la MF
Identificacin
Tests de
sensibilidad
Sin colonias
sospechosas:
cultivo negativo
DIARREA INFECCIOSA
INFECCIONES GENITALES
Flora normal:
O Lactobacilli, Staphylococci, Corynebacteria,
Anaerobios...

Flora patgena:
O Bacteria : N. gonorrhoeae, Treponema pallidum
(syphilis), Mycoplasma, Chlamydiae, Candida
albicans ...
O Virus : Herpes genital
O Parsitos : Trichomonas vaginalis

Muy patgenos en embarazadas:
O Listeria, Streptococcus B
En mujeres:
- vaginitis, uretritis, cervicitis, salpingitis ..
- lesiones : chancro, lceras

En hombres:
- sindrome uretrogenital
- Lesiones de piel y mucosas
- Prostatitis
- Portador asintomtico
PATOLOGAS:
Examen macroscpico
- Aspecto de la muestra

Examen microscpico:
- Deteccin de GR, leucocitos y clulas epiteliales
- Deteccin de microorganismos mviles (Trichomonas)
- Deteccin de bacterias intracelulares (Gonococci)
- Tincin de Gram: deteccin de un desbalance en la flora
- Cantidad de bacilos de Doderlein (Lactobacilli)
Da 1
Da 3
Da 2
Colonias
- Examen
microscpico
- Cultivo
WResultados
Identificacin
Tests de
sensibilidad
Si hay scolonias
sospechosas, inocular:
1- Tiras de ID
2- Tests de sensibilidad
Sin colonias
sospechosas:
cultivo negativo
Infecciones adquiridas en el hospital 48hs despus de
la admisin:
infecciones urinarias, neumona, infecciones despus de una
ciruga...
Microorganismos resistentes al medio y a los ATBs
comnmente usados
Los ms frecuentes:
E. coli, S.aureus, Enterococos, Pseudomonas aeruginosa, Serratia,
Klebsiella, Acinetobacter, Enterobacter, Candida...
multirresistentes

El personal del hospital juega un rol muy importante
en la diseminacin de la epidemia
INFECCIONES HOSPITALARIAS
1.5 PRINCIPALES FAMILIAS DE
BACTERIAS
Clasificacin simplificada
COCOS
BACILOS
GRAM - GRAM +
- Staphylococci
- Streptococci
- Neisseria
- Listeria
- Corynebacteria
- Enterobacteriaceae
- No Enterobacteriaceae
- Haemophilus
- Campylobacter
ESTAFILOCOCOS
Cocos Gram + en grupos, Catalasa +
20% de las bacterias aisladas en la rutina
Principales especies:
O Staphylococcus aureus
O Staphylococcus epidermidis
O Staphylococcus saprophiticus
Patogenicidad:
O Supuraciones, infecciones urinarias, septicemia, neumona,
endocarditis, meningitis
O Intoxicaxin por alimentos
Muestras:
O pus, orina, hisopado farngeos, MF, LCR, sangre
Medios de cultivo:
O No-selectivos: Agar sangre
O Selectivos: Agar manitol salado
Cocos Gram + en cadenas, Catalasa -
9% de las bacterias aisladas en rutina
Principales especies y patogenia:
- Streptococcus pyogenes (A) : angina
- Streptococcus agalactiae (B) : meningitis de los RN
- Enterococcus faecalis, facium (D) : infecciones urinarias
- Streptococcus pneumoniae : otitis, neumona meningitis
- Streptococci spp: endocarditis
Muestras:
- orina, farngeos, esputo, muestras genitales, LCR, sangre
Medio de cultivo:
- No-selectivos: agar sangre
- Selectivos: Columbia CNA
Atmsfera de CO2 o ANA
ESTREPTOCOCOS
Bacilos Gram -, Oxidasa -
60% de los aislamientos de rutina
Saprfitos o bacterias comensales (tracto digestivo...)
Principales gneros:
- Escherichia coli , Klebsiella, Proteus, Providencia
- Citrobacter, Enterobacter, Serratia
- Salmonella, Shigella, Yersinia
Patogenia: variada
Muestra:
- Todo tipo
Medio de cultivo:
- No-selectivo: Agar lactosa prpura
- Selectivos : Mac Conkey, Drigalski
ENTEROBACTERIACEAE
= No fermentadores de glucosa
Bacilos Gram - , Oxidase +/-
6% de los aislamientos
Bacterias saprofitas: patgenos oportunistas
Principales gneros:
- Pseudomonas aeruginosa
- Stenotrophomonas maltophilia, Acinetobacter : Ox -
- Aeromonas, Chryseobacterium, Pasteurella
- Vibrio cholerae
Patogenia:
- Infecciones urinarias, supuraciones, septicemia, meningitis...
Muestras:
- orina, genitales, pus, sangre, LCR
Medio de cultivo:
- No selectivos : Agar lactosa purpura
- Selectivos : Mac Conkey, Drigalski
NO ENTEROBACTERIACEAE
Bacilos Gram -, Oxidase +
Bacterias muy mviles
Fuente de contaminacin: pjaros, pollo, cerdo
Contaminacin por ingestion de alimentos contaminados con
suelos
Patgenos oportunistas
- Helicobacter pylori : lcera gstrica
- Campylobacter coli, jejuni, fetus :
Infecciones intestinales, septicemia...
Muestra:
- heces, sangre
Medio de cultivo:
- No-selectivos : Agar sangre
- Selectivos : Campylosel
Atmsfera microaerfila
CAMPYLOBACTER
Bacilos Gram +, en letras chinas, Catalasa +
Flora normal de piel y mucosas
Grmenes ambientales: patgenos oportunistas
- Corynebacterium diphtheriae (patgeno estricto): Difteria
- Corynebacterium urealyticum : infecciones urinarias
- Corynebacterium jeikeium : endocarditis, septicemia
Muestras:
- orina, hisopados farngeos, pus, sangre
Medios de cultivo:
- No-selectivos: agar sangre
CORINEBACTERIAS
Bacilos Gram +, Catalasa +
Bacterias ambientales: patgenos oportunistas
Principal especie:
- Listeria monocytogenes
Patogenia:
- Intoxicacion alimentaria (leche, queso crudo, carne...)
- Meningitis, encefalitis, abortos, septicemia...
Muestras:
- Sangre, LCR, (muestras genitales)
Medios de cultivo:
- No selectivos: agar sangre (-hemlisis)
LISTERIA
Diplococos Gram -, Oxidasa +
- Neisserias comensales: tracto respiratorio
- Patgenos estrictos:
Neisseria gonorrhoeae (Gonococos) : infeccin genital
Neisseria menigitidis (Meningococos) : meningitis, septicemia
Muestras:
- genitales, LCR, sangre
Medios de cultivo: bacterias fastidiosas
- No-selectivos: agar chocolate
- Selectivos: agar chocolate VCAT3 Atmsfera de CO2
NEISSERIA
Cocobacilos Gram -, Oxidasa +
Flora Normal: comensales de rinofarnge
Principales especies:
- Haemophilus influenzae
- Haemophilus parainfluenzae
Patogenia:
- Otitis, respiratorios, ocular, infecciones genitales,
meningitis, septicemia...
Muestras:
- farngeos, esputo, muestras genitales, LCR, sangre
Medio de cultivo: bacterias fastidiosas
- No-selectivos: agar chocolate
- Selectivos: agar chocolate Haemophilus
Atmsfera de CO2
HAEMOPHILUS
ANAEROBIOS
Bacilos o cocos Gram - Gram +, (algunos
esporulados)
Bacterias ambientales o flora normal (bucal,
vaginal, intestinal, cutnea)
Principales gneros:
- Clostridium
- Bacteroides
Patogenia:
- Pus, peritonitis, neumonia, abscesos, infecciones genitales,
septicemia...
Muestras:
- pus, genitales, sangre...
Medios de cultivo:
- No-selectivos: Agar sangre, Schaedler
- Selectivos: Schaedler Neo-Vanco agar

Atmsfera anaerbica

Bacteriología

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