ESCUELA DE MEDICINA

GENETICA MEDICA

3 SEMANA

CROMATINA Epigentica
Cesar A. ique Carbajal

Gentica Mdica : Cromatina -Epigentica

Escuela de Medicina-USAT

Qu hay detrs de estas enfermedades?

Epigenetic impact on neuropsychiatric disorders Human Molecular Genetics: http://hmg.oxfordjournals.org/

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CUESTIONARIO

1.-Cmo se organiza el ADN en cromatina? 2.- Formas de cromatina en interfase. Caractersticas de cada una de ellas. 3.- .-Qu modificaciones epigenticas existen para regular el estado funcional de la cromatina?. Explique cada una de ellas.

4.- Explique algunas consecuencias clnicas de la alteracin de las modificaciones en las histonas.
5.- Cmo se organizan los cromosomas humanos? Tipos de cromosomas.

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ESTRUCTURA DE LA CROMATINA

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ADN asociado a protenas

ADN protegido de lesiones; ms estable ADN organizado

Control de las diferentes funciones celulares

- Expresin gnica - Replicacin - Recombinacin - Segregacin cromosmica, etc.

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ADN relajado y superenrrollado

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Niveles de compactacin del ADN Eucaritico

10-11 nm

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CROMATINA-NUCLEOSOMA
Cromatina = ADN duplex + protenas Histonas(bsicas) + *protenas NO histonas+(cidas y ms grandes) + * ARN+ Nucleosoma: Unidad organizacional de la cromatina

lisina

arginina

+ 146 pb = 1.65 vueltas

Octmero de histonas (CORE) SDS-PAGE

- Tetrmero de H3 y H4 (H3/H4) - 2 Dmeros de H2A y H2B (H2A-H2B)

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Rol de la H1 en la organizacin de la cromatina

Experimento de Thoma; Koller y Klag (1979)

Tallo H4 Tallo H2B Tallo H2A Tallo H3

Tallo H2A

Tallo H4

Tallo H2B

Tallo H3

Colas N-terminales de histonas interviene en la formacin de la fibra de 30 nm

Las colas de histonas son blancos de modificaciones posttraduccionales

Modelo solenoide de la fibra de cromatina de 30 nm

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CROMATINA EN EL NCLEO EUCARIOTA

Observaciones al microscopio electrnico

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CROMATINA EN EL NCLEO EUCARIOTA

Observaciones al microscopio electrnico

Cromatina densa cerca de la envoltura nuclear es sujetada a la lmina nuclear

Cromatina difusa en el nucleoplasma

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CROMATINA EN EL NCLEO EUCARIOTA

Dos formas de cromatina en interfase: EUCROMATINA Estructura menos condensada, compuesta mayormente por fibras de 30 nm. HETEROCROMATINA - Forma altamente condensada.
- Constitutiva(Nunca transcribe :centrmeros y telmeros) y facultativa( eucromatina que se heterocromatiniza: cromosoma X inactivo en mujeres).

- Incluye protenas adicionales.

- Genes no expresados(silenciados) en la mayora de los casos; repetidos( en tandem) de secuencias cortas.

- Mantenimiento de telmeros y centrmeros de cromosomas.

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EL GENOMA EUCARITICO Y SU EXPRESIN

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Modificaciones epigenticas de la cromatina

1.- Remodelamiento local de los nucleosomas para la transcripcin

SWI/SNF

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Modificaciones epigenticas de la cromatina

2.- Acetilacin de histonas (Lisinas de H3 y H4)
- La ms frecuente - En el citoplasma: x la HAT B (Histone AcetylTransferase B) y prepara histonas para su incorporacin en los nucleosomas. Los grupos acetil son removidos en el ncleo. - En el Ncleo: x la HAT A, activa la transcripcin integrando vas de seales en el control del ciclo celular, diferenciacin, reparacin y apoptosis.

- Ocurre tanto en el citoplasma como en el ncleo.

La acetilacin de histonas del core est asociado con el ensamblaje de los cromosomas en la replicacin

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Modificaciones epigenticas de la cromatina

2.- Acetilacin de histonas
Modelo de la participacin de la histona desacetilasa (HDAC1) en la represin de la transcripcin

TRANSCRIPCIN

TRANSCRIPCIN Silenciamiento transcripcional

La acetilacin de histonas H3 y H4 est asociado con la activacin o inactivacin del transcripcin del gen

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Modificaciones epigenticas de la cromatina

3.- Fosforilacin de Histonas( serina de H3) y Metilacin de Histonas( Lisina de H3 y H4) - X Metil-transferasas Acta en coordinacin con la acetilacin - Establecen el Cdigo de Histonas

EUCROMATINA
(Metilacin de la lis4 de H3 y Acetilacin de lis 9 y 14 de H3)
Unido

HETEROCROMATINA
(DesMetilacin de la lis4 de H3 y DesAcetilacin de lis 9 y 14 de H3)
Unido

Bromodominio

Cromodominio

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Modificaciones epigenticas de la cromatina

4.- Metilacin del ADN - Catalizada x metil-transferasas CpG - DNMT3A
P

- DNMT3B Metilacin de novo

(CpG q no estaban previamente metilados)

DNMT1 Significado Biolgico Durante la replicacin del ADN metila las cadenas viejas mas no las nuevas
- Silenciamiento gnico a nivel de la transcripcin en la diferenciacin celular (es reversible) - Mecanismo de defenza contra elementos mviles del genma - Mecanismo estabilizador de la cromatina cespecialmente a nivel de heterocromatina pericentromrica

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DESREGULACIN DE LA MODIFICACIONES EPIGENTICAS

Rol de la Metilacin en el Cncer
Silenciamiento
transcripcional

Falla del gen MEPCP2( codifica protenas de unin a metilasas de citosinas)

Sndrome de Rett
(Enfermedad neurolgica hereditaria)

Desaminacin de C metiladas

Hipermetilacin puntual de genes supresores tumorales

Hipometilacin global del genoma

Complejos modificadores de la cromatina

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CH3

p
G

(HOTPOTS)

NORMAL

ANORMAL

NH2
CH3

TP53

TP53

p
G

p53 (Supresor tumoral)

P53 alterada