REGULACIN DE LA EXPRESIN GNICA

1. Introduccin.

La cantidad de protenas que produce un gen activo por unidad de tiempo vara para poder satisfacer las necesidades de la clula. De hecho de todos los genes que posee un organismos solo unos pocos se expresan en un momento dado. El nivel de expresin de los genes variar segn las condiciones ambientales, el nivel de diferenciacin de la clula etc. Dado el alto coste energtico que conlleva la sntesis de protenas parece lgico que este proceso est finamente regulado. Esta regulacin se puede dar a nivel de transcripcin o de traduccin Existen dos categoras mayoritarias de regulacin, negativa y positiva. En un sistema de regulacin negativa existe un inhibidor o represor celular que evita la transcripcin y para iniciar la transcripcin se necesita un antagonista del inhibidor que generalmente se llama inductor. En un sistema de regulacin positiva una molcula efectora activa un promotor (no se tiene que anular ningn inhibidor). La regulacin positiva y negativa no son excluyentes, muchos sistemas estn regulados tanto positiva como negativamente. Un sistema degradativo puede estar regulado tanto positiva como negativamente. En una ruta biosinttica el producto final normalmente regula negativamente su propia sntesis.

2. Sistema del opern lac. Un ejemplo claro de regulacin de la expresin gentica en procariotas, es el que ocurre en el opern lac. En E. Coli se requieren dos enzimas para la metabolizacin de la lactosa, la lactosa permeasa, una enzima de membrana que permite el transporte de la lactosa al interior celular y la beta-Galactosidasa, que cataliza la ruptura del enlace beta-1,4 entre la galactosa y la glucosa. La lactosa se degrada mediante rutas catablicas para la obtencin de energa, pero si en el medio no hay lactosa estas dos enzimas no son necesarias. La expresin de estas dos enzimas es inducible por lactosa. Cul es el mecanismo de esta regulacin?

El sistema de utilizacin de lactosa por E. coli consta de dos clases de componentes (Figura 1). Genes estructurales que codifican las enzimas betagalactosidadas (gen LacZ), permeasa (gen Lac Y) y transacetilasa que solo se utiliza en el metabolismo de ciertos beta-galactosidos diferentes de la lactosa (gen Lac A), necesarias para el transporte y degradacin de lactosa. Y genes reguladores, el gen Lac I, el promotor lac P y el operador Lac O y el sito CRP. Menos el Lac I, el resto de genes componen una regin del DNA que denominamos opern lac.

- El gen Lac I sintetiza una protena llamada represor o inhibidor que se une al operador Lac O de forma que cuando la RNA polimerasa se una al promotor no pueda continuar la transcripcin. De tal forma que el sistema se encuentra normalmente reprimido y las protenas necesarias para metabolizar la lactosa no se sintetizan (Figura 2a). En presencia de lactosa, sta se une al represor cambindolo y haciendo que no tenga afinidad por el operador (acta como inductor), cuando esto ocurre el operador queda libre y la RNA polimerasa puede realizar la transcripcin de los genes. (Figura 2b).

Figura 2. Regulacin de la transcripcin del opern Lac. (a) Ausencia de lactosa. (b) Presencia de lactosa.

No obstante, se observ adems que en presencia de lactosa y glucosa en el medio de cultivo no haba expresin de las protenas. Esto parece lgico porque si hay glucosa la bacteria no necesita recurrir a la degradacin de lactosa como fuente de carbono, de tal forma que la glucosa deba regular de algn modo el proceso. En que consiste la regulacin por glucosa? El efecto de la glucosa est mediado por el AMPc y una protena llamada protena receptora de cAMP (CRP) o protena activadora de catabolitos.

La protena CRP tiene sitios de unin para el ADN y para el AMPc. El complejo AMPc-CAP se une a una zona cercana al promotor lac, y favorece la unin de la ARN polimerasa al promotor, aumentando la transcripcin hasta 50 veces (Figura 3). Se ha demostrado que el AMPc y la CAP contribuyen a al iniciacin de la transcripcin, ayudando al reconocimiento del sitio de iniciacin por la ARN polimerasa.

Figura 3. Regulacin de la transcripcin del opern Lac. Presencia de lactosa y ausencia de glucosa.

Los niveles de AMPc estn muy relacionados con la concentracin de glucosa, a altas concentraciones de glucosa los niveles de AMPc son bajos, lo que impide que ste se una a la protena CRP, de esta forma la ARN-Pol no puede colocarse en el promotor y se impide la transcripcin de los genes metabolizadores de lactosa. La funcin CRP-AMPc favorece la unin de la ARN polimerasa y acta como un efector o regulador positivo.

El AMPc y la CRP estn implicados en la regulacin de muchos operones, especialmente los que codifican enzimas para el metabolismo de otros azucres. De forma que se superponen dos regulaciones, la positiva por el efector glucosa y la negativa por el inductor lactosa que contrarresta el efecto inhibidor del represor sintetizado por LacI. El opern solo se expresa en presencia de lactosa y ausencia de glucosa.

Sistema + Lactosa + Lactosa - Lactosa - Lactosa + glucosa - glucosa + glucosa - glucosa

Expresin + -