CUANTIFICACIN DEL METABOLISMO EN EL SUELO

RESUMEN La magnitud de la mineralizacin del carbono est directamente relacionada con el contenido de carbono orgnico del suelo, la liberacin del CO2 es proporcional al nivel de materia orgnica. La mineralizacin del carbono se ve afectada por diversos factores como el clima, tipo de suelo, agua, tipo de respiracin (aerbia o anaerbia) El metabolismo de suelo esta directamente relacionado con el contenido de materia orgnica (Orjuela B H 1989), En el experimento se encontr que en suelo esterilizado a capacidad de campo y sin residuo vegetal ( T3) su metabolismo fue reducido una posibilidad es que el suelo estaba en condiciones de anegamiento (mayor de capacidad de campo) con bajo contenido de materia orgnica. El suelo esterilizado (T2) muestra un comportamiento en el metabolismo mayor que el suelo estril a capacidad de campo y con aserrn. La tasa de evolucin del CO 2 fue mayor en el tratamiento mezclado con hojas (T5), posiblemente porque la presencia de este material orgnico fresco es de ms fcil descomposicin que el aserrn ( T4), ya que este ltimo esta compuesto por celulosa y lignina, estos son barreras fsicas de difcil descomposicin. Palabras claves. CO2, mineralizacin, respiracin, titulacin, oxidacin, reduccin, metabolismo, microorganismos, anaerobio, aerbio, clima, materia orgnica. INTRODUCCIN

La determinacin de la biomasa microbial a travs de la estimacin de toda su poblacin en el suelo, es un proceso largo y difcil, por estos motivos, los esfuerzos se han dirigido a tratar de determinar la actividad total de los microorganismos, empleando otros procedimientos. Para ello se parte de la base de una actividad metablica alta se caracteriza por una alto consumo de oxigeno y una elevada produccin de CO2 o del O2 que evolucionan a partir de una determinada cantidad de suelo. Resulta un buen ndice de la actividad microbial en el suelo. (Orjuela B H 1989) la magnitud de la mineralizacin del carbono est directamente relacionada con el contenido de carbono orgnico del suelo, la liberacin del CO2 es proporcional al nivel de materia orgnica Una correlacin igualmente alta se ha encontrado en el porcentaje de humus y la toma de O2. La mineralizacin del carbono se ve afectada por diversos factores, puede ser mejor en condiciones aerbicas, ya que se hace necesario la presencia de O2 libre para una mxima produccin de CO2, cuando es anaerobia adems de CO2 se forma metano, cidos orgnicos y alcoholes. (Orjuela B H 1989) El objetivo del presente informe es medir el metabolismo aerbico en el suelo para determinar la cantidad de CO2 producido en el tiempo. MATERIALES Y MTODOS El experimento se realiz en el laboratorio de qumica de suelo de la facultad de agronoma En la universidad nacional de Colombia. Se pesaron 50 g de suelo tamizado por tratamiento y este se coloco en frascos de 500 ml: al tratamiento 1 no se coloco suelo, al 3 se agrego agua hasta

llegar a capacidad de campo. A cada tratamiento se introdujo un frasco pequeo que contena 10 ml de NAOH 1N. Para determinar la evolucin de CO2 en el tiempo se vaco el contenido de los frascos de 10 ml en un erlenmeyer, se agrego 2 ml de BaCl2 al 2%, luego se coloco una gota de fenoftaleina como indicador, se realizo una titulacin con HCl a 0.35N. Despus de cada titulacin se reemplazo se coloco una alicuota de 10 ml de NAOH 1N, se taparon los tratamientos con vinipel. Se realizaron tres mediciones a los 5, 8 y 12 das. T1BA: Blanco absoluto, sin suelo T2 SE: Suelo esterilizado T3 SesRV: Suelo esterilizado sin residuo vegetal T4 SEA: Suelo esterilizado con aserrn T5 SEH: Suelo esterilizado con hojas RESULTADOS Y DISCUSIN El metabolismo de suelo esta directamente relacionado con el contenido de materia orgnica (Orjuela B H 1989), en la tabla No 2 y en al grfica No 1 se registra la evolucin y el comportamiento del CO2 en el tiempo Tabla No 1. Resultados obtenidos titulacin Tiempo Tratamientos (Das) BA SE SesRV SEA (ml) (ml) (ml) (ml) 5 19 23 21.5 20.5 8 19.5 23.5 23.2 24.5 12 19 24.2 24.5 22.1 en al

SEH (ml) 25 24 25.3

Tabla No 2 mg de CO2 (molar) Tiempo (Tratamiento BA) *normalidad (Das) de HCl (0.35) *22 = mg de CO2 (molar) SE SesRV SEA1 SEH

50 45 mg de CO2 (molar) 40 35 30 25 20 15 10 5 0

EVOLUCIN DE DE CO2 EN EL SUELO

5 8 12

30.8 16.3 30.8 28.5 40.04 42.4

11.6 38.5 23.9

46.2 34.7 48.5

En suelo esterilizado a capacidad de campo y sin residuo vegetal ( T3) su metabolismo fue reducido durante los das de estudio, una posibilidad es que el suelo estaba en condiciones de anegamiento (mayor de capacidad de campo) con bajo contenido de materia orgnica. El suelo esterilizado (T2) muestra un comportamiento en el metabolismo mayor que el suelo estril a capacidad de campo y con aserrn. La tasa de evolucin del CO2 fue mayor en el tratamiento mezclado con hojas (T5), posiblemente porque la presencia de este material orgnico fresco es de ms fcil descomposicin que el aserrn ( T4), ya que este ltimo esta compuesto por celulosa y lignina, estos son barreras fsicas de difcil descomposicin. Los componentes de la pared celular de las partes leosas de las plantas estn constituidas por polisacaridos, cutinas y suberina, estos son muy estables y de descomposicin ms lenta, impidiendo la degradacin y haciendo ms lenta el proceso metablico ene le suelo. (Coyne M 1999) Las hojas tienen mayor contenido de agua, sus tejidos estn formados por compuestos ms simples como la hemicleulosa, tejidos suculentos que son ms rpidamente metabolizados por los microorganismos.
SEH SE SEA SesRV

6 Das 9

12

15

CUESTIONARIO 1. Que importancia tiene la cuantificacin del CO2 en la fertilidad del suelo. En la bsqueda de energa los microorganismos se alimentan de compuestos orgnicos reducidos, como resultado son la fuerza motriz que subyace en el ciclo del carbono, y este ltimo impulsa todas las reacciones de los ciclos de los nutrientes en los que interviene los elementos orgnicos como el azufre, Nitrgeno, fsforo. (Coyne M 1999) El CO2 es la fuente de carbono para varios tipos de metabolismo de los microorganismos (fotoauttrofos, quimiauttrofos, fotohetertrofos), la cantidad y disponibilidad es un ndice del metabolismo de los microorganismos, al descomponer algunas sustancias orgnicas que al ser mineralizadas van a desprender sus elementos constitutivos, (N2, Mg, P, entre otros) es un elemento esencial para las plantas, Por esto cuantificar el CO2 en el suelo es fundamental para conocer que tan rico en nutrientes es el suelo, la disponibilidad de estos y la riqueza de organismos que se encuentran en el suelo 2. Que sustancias qumicas podra sustituir el material vegetal utilizando en esta prctica. Se puede utilizar perxido de bario que aporta oxigeno para la respiracin de microorganismos, el bario se combina con el CO2 que se produce para formar

Grfica No 1 Evolucin del CO2

El tratamiento se contamino, posiblemente esto altero los resultados

carbonatos (Orjuela B H 1989) Una posibilidad para hacer este ensayo es utilizando sustancias bioqumicas como enzimas como deshidrogenasa, fosfatasa, amilasa, celulasa, nitrogenasa, enzimas proteoliticas. Adems para conocer el trabajo de microorganismos especficos se puede recurrir a la medicin de procesos igualmente especficos como la conversin de amonio, nitrato. Denitrificacin, oxidacin de azufre a sulfato. (Orjuela B H 1989) Acido crmico. 3. Explique brevemente que es la respiracin aerbica anaerbica y cuales son los aceptores de electrones en cada caso.
Fotosintesis CH2O Respiracin CH4

como ltimo aceptor de electrones para generar energa. Los protones son trasladados del interior al exterior de la membrana celular. (Coyne M 1999) Tabla No 3. Tipos de metabolismo en el suelo.
Tipo Aceptor de Donador de metablico electrones electrones Aerbica O2 Orgnico Fe2 NH4 Mn Anaerobia NO3 NO-2 SO4 Orgnico NH4 Orgnico Organismo La mayora de procariotas Hongos y animales Procariotas

Fuente: (Coyne M 1999) Investigue en que otra forma se podra cuantificar el CO2 proveniente del suelo. Mencione otras tcnicas.
4.

Aerobio
CO2 Metantrofos Metanognesis Respiracin Fermentacin CH2O CH4 Metanognesis (Metangenos)

Anaerobio
Fotosintesis

Fig. 1 tipo de metabolismo en el suelo Fuente: (Coyne M 1999) Respiracin Anaerobia: Es un proceso metablico mediante el cual los electrones son transferidos de un compuesto reducido generalmente orgnico a una molcula aceptora. Los ms comunes son el carbonato, nitrato y sulfato. (Coyne M 1999) Respiracin Aerbica: Es un proceso metablico donde se utiliza la oxidacin de una fuente de energa orgnica o inorgnica acoplada a la reduccin de O2

Una forma de cuantificar el CO2 es con el mtodo de tapas, colocadas sobre el terreno para medir la tasa de evolucin del CO2. Se introduce un aro varios cm en el suelo y se coloca la tapa sobre l, esta debe incluir una membrana divisoria para extraer peridicamente muestras de gas almacenarlas y analizarlas en el laboratorio en un cromatografo de gases para as analizar el cambio en la concentracin de CO2 en el tiempo. Si se conoce el volumen de la tapa del suelo y el rea recubierta se puede averiguar el nivel de CO2 por rea de suelo unitaria. (Coyne M 1999) La respiracin hace referencia al consumo de O2 y la produccin de CO2 por organismos aerbicos. A medida que el O2 se reduce, se produce agua. (Coyne M 1999) La funcin respiratoria desarrollada por los organismos del suelo puede ser utilizada como ndice de la actividad microbiana. Midiendo la cantidad de CO2

que se produce en una muestra de suelo (Rapeport E H 1965) El mtodo de la cuantificacin de CO2 por va respiromtrica fue desarrollado por Garassini, Florenzano y Favilli la finalidad de este procedimiento es medir la cantidad de CO2: Al pasar una corriente de aire sin CO2 a travs de una determinada cantidad de suelo en estudio y determinar el tiempo que es necesario para hacer virar una solucin titulada de hidrxido de bario conteniendo fenoftaleina como indicador. El aparato utilizado se compone de un tubo de vidrio con un tubo de ensayo, un erlenmeyer y un frasco pequeo. El tubo grande lleva 2 tapones aforados uno en cada extremo en el fondo del mismo se coloca lana de vidrio y sobre estas perlas de vidrio para aumentar la porosidad del suelo y facilitar el paso del aire que arrastrara el CO2 por la respiracin microbiana que se produce en el terreno. En el tubo de ensayo se colocan 10 ml de agua destilada sin CO2 par lavar el aire utilizado en la operacin; el erlenmeyer contiene una solucin de potasio al 10 % para retener el CO2 del aire que se hace burbujear. El aparato se pone en marcha conectndolo en una bomba de vaco regulando la entrada del aire. (Garassini et al 1965) Existe otra alternativa para medir el CO2 que es el frasco biomtrico es un diseo tipo cerrado y compacto, tiene la ventaja de que el alcali que absorbe el CO2 se puede retira y reemplazar, sin exponer el sistema a contaminacin con el CO2 en la atmsfera. (Orjuela B H 1989) Combustin hmeda. Mtodo volumtrico La materia orgnica se convierte a CO2 mediante el tratamiento con una mezcla de cido crmico y cido sulfrico y el CO2 se absorbe en hidrxido de sodio estndar. El hidrxido de sodio no convertido en carbonato de sodio se determina a continuacin por titulacin del

hidrxido de sodio, seguida de la precipitacin del carbonato, como carbonato de bario. (Chapman H D, Parker F P 2000) Mtodo de Walkey / Black. El carbono orgnico se oxida por medio de cido crmico caliente. A la muestra se le da una cantidad dada de calor, en un bao de cido sulfrico. El cido crmico no utilizado en la oxidacin del carbono orgnico se determina mediante la titulacin de sulfato ferroso de amonio (Chapman H D, Parker F P 2000) . Como varan las cantidades de CO2 producidas segn los diferentes climas y usos del suelo.
5.

Cualquier factor ambiental que afecte las actividades de los organismos del suelo puede influir en la descomposicin de residuos orgnicos entre estos factores incluye la humedad, temperatura, pH, O2, nutrientes orgnicos y la arcilla. La descomposicin de la materia orgnica es ms rpida en regiones tropicales que en zonas templadas en parte porque hace ms calor y porque la materia orgnica presenta una actividad metablica ms elevada durante perodos ms prolongados. La calidad de los sustratos tambin tiene efecto sobre la descomposicin. 2/3 del carbono aadido al suelo se pierde durante el primer ao. S la relacin C: N es mayor de 20 a 30: 1 la inmovilizacin del nitrgeno es el resultado, pero otra consecuencia de Nitrgeno es que podra haber una cantidad inadecuada de nitrgeno para sostener la descomposicin. La complejidad estructural es determinante en la descomposicin, el contenido de lignina desacelera este proceso (Coyne M 1999)

6. Describa paso a paso como se llegan determinar numricamente los clculos del punto anterior. CONCLUSIONES RECOMENDACIONES Y

Universidad de Nario. Pasto Colombia. 447 p Rapeport E H 1965. Progresos en biologa del suelo. Monografas. Universidad Nacional del sur. Baha blanca Argentina. 715 p.

Un ndice del metabolismo en el suelo es la determinacin de carbono orgnico del suelo, este refleja la actividad microbial que hay en el sustrato y el nivel de fertilidad del suelo, ya que el primer paso para el metabolismo es la descomposicin, si no hay degradacin de materia orgnica, no hay liberacin de elementos indispensables para la planta, por ende la fertilidad del suelo estar muy afectada. Con el mtodo utilizado en la prctica es posible establecer la riqueza microbiana de una muestra de suelo de una manera sencilla y simple. Para obtener resultados ms exactos es aconsejable repeticiones por tratamiento (en al medida de lo posible) para obtener datos ms confiables y disminuir el margen de error. BIBLIOGRAFA Coyne M 1999. Microbiologa del suelo: Un enfoque exploratorio. Ed paraninfo. Madrid Espaa. 416 p. Chapman H D, Parker F P 2000. Mtodo de anlisis para suelos, plantas y aguas. Ed Trillas Mxico. 195 p. Garassini et al 1965. Determinacin de la actividad microbiana del suelo por va respirometrica. Universidad central de Venezuela. 6p Orjuela B H 1989. El suelo: Una visin sobre sus componentes biorgnicos. Ed