t " | Universidad Catolica CORSO C) CaN Carey =) (Ue l gett: Diagnostico Molecular — José Miguel Carpio Carpio PhD (c) for Telr RL Ceeen ee al ely eT Tera) Mean a ead rete eee arate eee ada Peace) AREQUIPA - 20232 INTRODUCCIONi ' CULTIVO CELULAR Conjunto de técnicas que permiten el mantenimiento de las células in vitro, conservando al méximo sus propiedades fisioldgicas, bioquimicas y genéticas. El cultivo de células y 6rganos aislados del organismo constituye una via para resolver problemas biolégicos. Las células fuera del organismo no estén reguladas por el sistema nervioso ni endocrino, comportandose totalmente independiente, En condiciones nutriives y ambientales adecuadas se convierten en unidades auténomas, ideales para el estudio de la estructura y comportamiento de las células vivientes.INFORMACION IMPORTANTE + Control de factores + Estrictas condiciones de fisicoquimicos y ‘asepsio. fisiolégicos del_medio + Altos costos para en el que se cultivan las producir una pequefia células. cantidad de células. + Los células en cultivo + Perdida irreversible de fomurpen lng :coneettucien. las propiedades homogéneo, evitendo la funcionales de las heterogeneidad que se célulos. doen cnimoles de 7 + Problemas de experimentacion, inestabilidad genética + Etapa inicial de un experimento _(Etepa cuando se realizan varios pases. Pre-Clinica).TIPOS DE CULTIVOS CELULARES : = ; LINEA CELULAR 3 CULTIVOS PRIMARIOS. Cultivo celular que tiene lo capacidad de multiplicarse in Cultivo de células, tejidos u vitro, establecido a partir de un @ —_Srganos tomados directamente subcultive primario del organismo y puestos a crecer en un medio artificial.CULTIVOS PRIMARIOS Y LINEAS CELULARES CRECIMIENTO EN MONOCAPA: Las células se adhieren al sustrato, creciendo y dividiendose en una unica capa celular {monocapa). Ejm: Células Fibroblasticas y de tipo Epitelial. CRECIMIENTO EN SUSPENSION: Las celulas se multiplican en medio liquido sin adherirse a ningin sustrato. Ejm: Células Sanguineas (Linfocitos).vores MAC ECD ULE] aka Fase Gaseosa - Lo supervivencia de las celulas depende de la TEMPERATURA presencia de oxigeno y dioxido de carbone disuelto + Temperaturas por encima en el medio de cutive de la._—_— optima, DESTRUYEN o la célula + Temperaturas por deboio eee de la optima, son Maodinatae? CONTROL DE LOS TOLERADAS POR la FISIOLOGICAS DEL MEDIO MEDIOS blu. DE CULTIVO + Control de esterilidad + 97°C es la temperatura optima control de ES crecimiento y citotoxicidad. + Conservacion de los medios.EL LABORATORIO DE CULTIVO CELULAR + Area limpia destinada al trabajo con cultivos celulares. + Area de preparacién y esterilizacion de medios de cultivo, reactivos y soluciones. + Area de lavado y preparacién del material + Se recomienda que el laboratorio sea Nivel II 0 Ill de Seguridad.| ed IMPLEMENTACION DE UN LABORATORIO DE CULTIVO CELULAR + Cabina de Bioseguridad Clase II-A + Incubadora de CO2. + Centrifugas refrigeradas + Microscopio Invertido + Microcentrifugas * Criocongeladora + Contador de Células + Tanques de Nitrégeno Liquido + Congeladora a -80°C + Refrigeradora 4-8°C + Pipeteadores automatics * pHmetroDE LOS CULTIVOS CELULARES CELULARES 3D A ORGANOS EN CHIPS + Los cultivos 3D van a ser fundamentales para entender las interacciones y el comportamiento de las. celulas @ fs Es un sistema de microfluido que recrea la microarquitectura y —_—~ @S ms funciones de un organo humano vivo, (aCULTIVOS CELULARES 3D Provienen de células madre pluripotentes (PSC), células madre de tejido neonatal o células madre ‘adultas, los cuales se autoorganizen en celulas funcionales diferenciadas y progenitoras que se ‘asemejan a sus contrapartes in vivo. co f D we 3D cell culture handbook - ThermoFiA Las células madre pluripotentes (PSC), derivadas de células sométicas, pueden diferenciarse en capas germinales. B. Las células madre adultas estén pre comprometidas con sus linajes por el érgano del que proceden. ‘3D cell culture handbook - ThermoFisher ScientificIMICROINGENIERIA DE LOS ORGANOS EN CHIP ® POMS chan! (WE vomrane POMS wall, See : . - : TRO CoB? Trends in Cell Biology, 2011(A HUMAN BREATHING LUNG-ON-A-CHIP Un pulmon Humano que respira en un Chip Trends in Cell Biology, 2011Taras nett, x Human Organs-on-Chips for Virology rou te omar amen eevee Mea, 2 CelPress FEVIEWS. # (a) Virus tm Epitneiam Membr Endothel Identfeation of drug- >) resistant strain by viral ‘genome sequencing (8) Passage(P) 1 2 aPf ah aie