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CienciaDirecta
La intersección de la expresión del gen de la cápsula, la
hipermucoviscosidad y la hipervirulencia enKlebsiella
pneumoniae
Kimberly un caminante1y Virginia L Miller1,2
Durante -30 años, dos grupos distintos de aislados clínicos de
Klebsiella pneumoniaehan sido reconocidos. Las cepas clásicas
(cKp) generalmente se aíslan de pacientes con cierto grado de
inmunocompromiso y no son virulentas en modelos de
infección en ratones, mientras que las cepas hipervirulentas
(hvKp) están asociadas con infecciones invasivas adquiridas en
la comunidad y son altamente virulentas en modelos de
infección en ratones. La hiperproducción de cápsula y un
fenotipo de colonia hipermucoviscosa se han asociado
fuertemente con la hipervirulencia de las cepas hvKp. Estudios
recientes han comenzado a dilucidar la relación entre la
expresión génica de la cápsula, la hipermucoviscosidad y la
hipervirulencia. Además, se han identificado genes asociados
con la hiperproducción de cápsula y la hipermucoviscosidad
en cepas de hvKp en algunos aislados de cKp. Sin embargo, no
está claro cómo la adquisición de estos genes afecta la
virulencia de los aislados de cKp.
direcciones
1Departamento de Microbiología e Inmunología de la Universidad de Carolina
del Norte, Chapel Hill, Estados Unidos
2Departamento de Genética de la Universidad de Carolina del Norte, Chapel Hill,
Estados Unidos
Autor para correspondencia: Miller, Virginia L (vlmiller@med.unc.edu)
Opinión actual en microbiología2020,48:95–102
Esta revisión proviene de una edición temática sobreAlumnos de Stanley Falkow
Editado porDenise MonackyIgor Brodski
https://doi.org/10.1016/j.mib.2020.01.006
1369-5274 /a2020 Elsevier Ltd. Todos los derechos reservados.
Introducción
Durante más de un siglo,Klebsiella pneumoniaeha sido reconocido como
un patógeno humano responsable de una variedad de infecciones
diferentes, sin embargo, los factores bacterianos que contribuyen a estas
diferentes presentaciones de enfermedades no estaban claros. Sin
embargo, dos avances recientes en el campo han proporcionado un
camino a seguir para formular y enfocar preguntas para futuros estudios
mecanicistas. La primera es la diferenciación de dos grupos.
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de cepas actualmente de importancia clínica. El segundo es la
aplicación de la secuenciación del genoma completo y el análisis
bioinformático de grandes grupos deK. pneumoniaeson. Varias
críticas excelentes deK. pneumoniaeenfermedades,
epidemiología, factores de virulencia y patogenia han sido
publicados recientemente [1-,2-,3-], por lo que no entraremos en
los detalles de estos aspectos deK. pneumoniaebiología aquí y
en su lugar se centrará en la relación entre cápsula,
hipermucoviscosidad e hipervirulencia.
Durante los últimos 30 años, dos grupos diferentes deK.
pneumoniaede particular preocupación han circulado - cepas
hipervirulentas (hvKp) que son sensibles a carbapenem y cepas
clásicas (cKp) que frecuentemente son resistentes a carbapenem
(CR) [1-,3-,4]. Las cepas de cKp generalmente se asocian con
infecciones nosocomiales o infecciones en un entorno de atención a
largo plazo, lo que sugiere que es necesario cierto grado de
compromiso inmunológico para que estas cepas causen la
enfermedad. Para estas cepas CR-cKp, hay pocas opciones de
tratamiento disponibles y, aunque se ha utilizado colistina, están
surgiendo cepas que también son resistentes a la colistina.5]. Los
análisis bioinformáticos de grandes conjuntos de cepas han sido
fundamentales para ayudar a definir los genes relacionados con la
hipervirulencia (genes asociados a hv); éstos incluyenrmpA, rmpA2,
iroBCDN, iutA, iucABCDyybtgenes [6,7,8-,9,10-,11]. Estos genes
asociados con hv a menudo están codificados en un plásmido de
virulencia grande y altamente conservado como pLVPK, pero
algunas cepas tienen los genes asociados con hv codificados en el
cromosoma como parte de un elemento ICE.12–14]. Los genes
asociados mencionados anteriormente codifican tres sistemas de
sideróforos diferentes: salmoquelina (iroBCDN),aerobactina (iuta,
iucABCD)y yersiniabactina (ybtgenes). Las cepas cKp solo producen
enterobactina y ocasionalmente yersiniabactina. Sin embargo, la
producción de múltiples sideróforos está fuertemente asociada con
la hipervirulencia y los estudios en ratones han demostrado una
contribución de estos sideróforos a la patogénesis.14–20].rmpA (
regulador de la mucoide proteína A) yrmpA2codifican reguladores
transcripcionales que parecen jugar papeles similares mejorando la
producción de la cápsula.7,8-,12,21–23] (consulte la sección sobre
reguladores Rmp para obtener más información sobrermpA/A2).
Cepas deK. pneumoniaeque son hipermucoviscosas (HMV) se
asociaron tempranamente con hipervirulencia; Las mutaciones que
resultan en la pérdida de este fenotipo HMV también resultan en
una reducción de la virulencia.8-,21,24-,25-,26,27]. El ensayo que se
utiliza con más frecuencia para determinar el fenotipo HMV es una
prueba de hilo positivo, en la que un asa que toca una colonia tirará
de un "hilo" de > 5 mm (Caja 1). Sin embargo,
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96Alumnos de Stanley Falkow
Recuadro 1 Ensayos para la producción de cápsulas y fenotipos de virulencia
dependientes de la cápsula
Contenido de ácido urónico (AU).El AU es un componente de muchas cápsulas, a
menudo en forma de ácido glucurónico o ácido galacturónico. Se determina con mayor
frecuencia mediante un ensayo colorimétrico.
Expresión del gen de la cápsula (cps).Supervisado con frecuencia mediantelacZo
gfpreporteros transcripcionales a los tres promotores definidos en el cpslugar
geométrico (Figura 1). qRT-PCR también se usa y está ganando popularidad.
Mucoide.Una prueba rápida para la mucoide es laprueba de cuerdas,donde se
usa un lazo o un palo para tocar una colonia en un plato y, cuando se levanta,
una cuerda conecta el palo y la colonia. Para ser considerado hipermucoviscoso
(HMV), la cuerda debe alcanzar al menos 5 mm, ¡sin embargo, estas cuerdas
pueden estirarse varios cm! Otra prueba es laensayo de sedimentacionLas cepas
de HMV no sedimentan bien tras la centrifugación. Este es un ensayo
visualmente satisfactorio ya que el sobrenadante resultante permanece turbio,
mientras que las cepas no mucoides forman gránulos compactos con
sobrenadantes aclarados. Este puede ser un ensayo algo cuantificable si la OD600
del sobrenadante se mide y se compara con la OD600de la cultura de partida.
Resistencia al suero.La cápsula confiere protección contra la destrucción mediada por el
complemento. Las bacterias viables se determinan después de la exposición y se
comparan con la entrada para evaluar la capacidad de una cepa para resistir la muerte.
Este ensayo es una forma conveniente de evaluar los atributos de virulencia
dependientes de la cápsula.in vitro.
Modelos de cultivo de tejidos.La cápsula bloquea la adherencia a las células en cultivo y
evita la fagocitosis. Los ensayos de cultivo de tejidos se utilizan para medir las bacterias
adherentes e intracelulares y se pueden realizar con líneas celulares transformadas o
células primarias. Al igual que el ensayo de resistencia sérica, estos ensayos son una
forma relativamente rápida y económica de evaluar las propiedades de virulencia
dependientes de la cápsula.in vitro.
Modelos de animales.Hay varios modelos de ratón deKlebsiella infección
utilizada para estudiar mutantes de la cápsula, incluida la sepsis (inyección
intraperitoneal), neumonía (inoculación intranasal o intratraqueal) y
colonización gastrointestinal (gavaje oral). Estos modelos se han aplicado
ampliamente para evaluar la supervivencia de ratones (dosis única durante
varios días), LD50(múltiples dosis durante varios días), o carga bacteriana
(UFC/órgano).
la prueba del hilo no es cuantitativa y puede verse influenciada por
las condiciones de cultivo, la edad de la colonia y la técnica del
usuario. El umbral para definir una prueba de hilo positivo (5 mm) es
bastante bajo y las cepas hvKp conocidas pueden producir "hilos" de
> 40 mm. Además, un estudio reciente destinado a identificar
biomarcadores que distinguen hvKp de cKp encontró que la
prueba de la cuerda era un predictor de hipervirulencia menos
preciso que varios marcadores genéticos.28]. Una prueba más
cuantitativa que a veces se usa para evaluar el fenotipo HMV es
el ensayo de sedimentación (Caja 1). Este ensayo tiene el
potencial de distinguir no solo el HMV de las cepas positivas que
no son del HMV, sino también el potencial de definir las cepas
intermedias del HMV.
TodosK. pneumoniaecepas producen una cápsula de polisacárido
extracelular necesaria para la virulencia.1-] y se han identificado más
de 130 tipos de cápsulas diferentes en Klebsiella [11]. Las cepas de
hvKp tienden a producir más cápsula (como se define usando un
ensayo de ácido urónico [UA] [Caja 1]) que las cepas cKp y los
primeros estudios asociaron esta producción de hipercápsulas con
el gen asociado a hvrmpA (o
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el gen estrechamente relacionadormpA2) [7,8-,12,21,22]. HvKp con
mutaciones enrmpA,u otros genes que afectan la producción de
cápsulas en hvKp, generalmente pierden el fenotipo HMV y
muestran una fuerte reducción en la virulencia cuando se prueban
en ratones [8-,23,24-]. Por lo tanto, el fenotipo HMV se asoció
fuertemente con la cantidad de producción de cápsulas a pesar de
un informe inicial que sugería que HMV no requiere una producción
excesiva de cápsulas.8-]. El informe reciente de una mutación en un
gen que codifica un regulador transcripcional (RmpC) que reduce la
expresión de la cápsula (cps)genes y la producción de cápsula, pero
no afecta el fenotipo HMV, proporciona la indicación más clara hasta
la fecha de que el fenotipo HMV no requiere hiperproducción de
cápsula [25-]. Sin embargo, las mutaciones que impiden la
producción de cápsulas también provocan la pérdida de HMV.21,24-,
25-], lo que subraya un vínculo entre la cápsula y HMV.
En modelos de ratón de infección (Caja 1), las cepas hvKp son
virulentas incluso a bajas dosis de inoculación [24-,29–31]
mientras que las cepas cKp no son [32,33]. Como se mencionó
anteriormente, las cepas de hvKp típicamente no han sido CR y
CR-cKp no han sido virulentas en un huésped
inmunocompetente. Sin embargo, en los últimos años se han
informado CR-hvKp y CR-cKp que han adquirido genes
asociados con la hipervirulencia (designados aquí como hv-CR-
cKp).34–40,41-,42-,43-]. En casi todos los casos donde se
probaron, estos aislamientos fueron considerados HMV por la
prueba de hilo. Hasta la fecha, la mayoría de CRK. pneumoniae
con genes asociados hv parece ser hvKp que ha adquirido un
plásmido que codifica una carbapenemasa. Aunque en la
mayoría de estos informes no se realizaron pruebas de
virulencia, la tipificación de secuencias multilocus para
determinar el tipo de secuencia de cepa (ST) y/o el tipo de
cápsula (tipo K) indicó que estas cepas provienen de ST o tipos K
fuertemente asociados con hvKp. En informes de hv-CR-cKp, los
genes asociados a hv se codificaron en plásmidos de virulencia
similares a pLVPK que se encuentran típicamente en hvKp. En la
mayoría de estos informes, no se probó la función de los genes
asociados con hv o el efecto de estos genes sobre la virulencia
de estas cepas. Sin embargo, en los casos en los que se probó
esto, la adquisición de genes asociados a hv no siempre fue
suficiente para conferir una virulencia comparable a la de las
cepas hvKp.41-,43-]. La fuerte asociación de HMV con la
producción de cápsulas y la asociación de HMV y cápsula con la
virulencia facilitan la comprensión de la regulación decps
expresión y el vínculo entrecpsexpresión y HMV importante
para determinar qué se requiere para que una cepa CR-cKp se
vuelva hipervirulenta. Aquí destacamos lo que se sabe
actualmente sobre HMV,cpsexpresión y preguntas sin respuesta
sobre HMV y virulencia.
Cepas usadas enKlebsiellaestudios de cápsula
En el campo deK. pneumoniaeregulación de la cápsula, la
mayoría de la investigación se ha realizado utilizando cuatro
cepas hipervirulentas. NTUH-K2044 [44] y CG43 [45] fueron
aislados de abscesos hepáticos piógenos. La cepa Kp52145
se considera una cepa de referencia para el K2
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tipo de cápsula [46] y el derivado KPPR1S de ATCC 43816 se
originó a partir de un paciente con neumonía [29,47]. De estas
cuatro cepas, una (NTUH-K2044) es del tipo cápsula K1 mientras
que las otras tres son del tipo cápsula K2, y cada una se
encuentra en diferentes grupos ST. CG43, Kp52145 y NTUH-
K2044 portan plásmidos de gran virulencia que confieren
hipervirulencia, y NTUH-K2044 y KPPR1S portan un ICE
cromosómicoKpelemento que es similar a una porción del
plásmido de virulencia y codifica genes asociados con la
hipervirulencia. Los métodos comunes utilizados para
caracterizar los fenotipos asociados a la cápsula se describen en
Caja 1.
Reguladores globales
fosforescente rcs
La fosforescencia Rcs es un sistema complejo de transducción
de señales que se encuentra en muchas bacterias Gram-
negativas. Se compone de RcsC (sensor quinasa), RcsD (histidina
fosfotransferasa), RcsB (regulador de respuesta), RcsA (proteína
auxiliar) y RcsF (lipoproteína de membrana externa) [48]. RcsB y
RcsC se identificaron por primera vez por su papel en la
expresión del gen del ácido colónico enEscherichia coli [49].
Poco después, elKlebsiellaSe encontró que los homólogos de
RcsA y RcsB funcionan de manera similar cuando se expresan
enE. coli [50,51], y enK. pneumoniae [23,52]. Ahora se sabe que
RcsB se dimeriza con RcsA y se une a una secuencia de ADN
llamada caja RcsAB para activar la expresión del gen capsular en
varios organismos bacterianos.48,53]. Se ha demostrado la
regulación directa a través de la unión de RcsAB al ADN para el
promotor más aguas arriba de los tres operones de cápsula
caracterizados, ubicado aguas arriba degalón /ORF1 (Figura 1) [
53]. En las cepas CG43 y KPPR1S,rcsBlos mutantes han reducido
cps expresión, niveles reducidos de UA y precipitados
herméticamente [21,25-]. Se han informado tendencias similares
encps expresión y niveles de AU enrcsmutantes de la cepa
NTUH-K2044 [54]. Además, el KPPR1SDrcsBcepa se atenúa en
un modelo de neumonía murina [25-].
Proteína receptora de AMPc (PCR)
Se ha demostrado que la PCR reprimecpsexpresión en
CG43 y NTUH-K2044 [55,56]. En CG43, expresión de los
trescpspromotores se incrementó en elDcrptensión, y
Figura 1
galF PAP2 wzi wza wzb wzc
gtg1
Esquema del lugar geométrico de la cápsula en KPPR1S. Los tres promotores caracterizados se indican aguas arriba degalón (también conocido comoorf 1-2), wzi (orf 3-15)y
manC (orf 16-17).Los genes en azul oscuro están altamente conservados entre los diferentes tipos de cápsulas; los que están en azul claro son específicos del tipo de cápsula y
los que están en azul oscuro pueden variar según los precursores de azúcar que componen la cápsula. Orfs 12 y 13 parecen ser exclusivos de Klebsiella.
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Walker y Miller 97
Se demostró que la PCR se une directamente a lawziyhombreC
regiones promotoras. No se identificó ningún sitio de unión de
CRP aguas arriba degalóny unión de CRP a lagalónpromotor no
fue probado. Se sabe que CRP reprimercsa expresión, por lo
que se especuló que el aumento de la transcripción de lagalón
promotor en elDcrpcepa fue una consecuencia del aumento de
los niveles de RcsA. La adición de glucosa a los medios de
crecimiento resultó en un aumentocps expresión mientras que
los niveles altos de AMPc (a través de mutación o adición directa
a los medios) dieron como resultado una disminucióncps
expresión. En NTUH-K2044, elDcrpel mutante había aumentado
la mucoviscosidad y producía más AU que la cepa parental.
Ratones inoculados por inyección intraperitoneal con elDcrpLa
cepa tuvo una tasa de supervivencia mejorada en comparación
con las inoculadas con la cepa parental, lo que sugiere que la
virulencia de este mutante está atenuada. sin embargo, elDcrp
cepa tiene un defecto de crecimiento y lacrp Es probable que la
mutación afecte la expresión de un gran número de genes.
Como se podría predecir que el aumento de la producción de
cápsulas aumentaría la virulencia, la atenuación de la DcrpLa
cepa puede ser, al menos en parte, una consecuencia de la tasa
de crecimiento reducida y los efectos pleiotrópicos en la
expresión génica.
Impacto de los niveles de hierro encpsexpresión a través de Fur e IscR
El impacto de la homeostasis del hierro encpsla expresión
génica se ha investigado en la cepa CG43. Fur es un regulador
transcripcional sensible al hierro en elenterobacteriasy fue
identificado como desempeñando un papel encpsregulación
cuando se encontró que obligaba a una región aguas arriba de
larmpA promotor y reprimir su expresión [21]. losDpeloLa cepa
fue tan resistente a la sedimentación como la cepa original y
produjo más AU, mientras que una cepa que sobreprodujo Fur
formó gránulos compactos tras la centrifugación y produjo
niveles de AU comparables a los de la cepa original. Un estudio
posterior mostró que la transcripción dercsaaumentado en elD
pelotensión, que también podría contribuir a la elevación cpsla
expresion genica [57]. Este estudio incluyó un análisis decps
regulación y mostró niveles elevados de expresión de los tres
promotores en elDpelomutante y demostró que la elevadacpsla
expresión requiere RmpA y RcsA. Por lo tanto, el impacto de Fur
en los niveles de la cápsula es probablemente una acción
indirecta mediada por RmpA y RcsA.
wzy wzx orf12 orf13 wcaJ tierra hombreCBo ugd
o wbaP rmlBADC
Opinión actual en microbiología
Opinión actual en microbiología2020,54:95–102
98Alumnos de Stanley Falkow
IscR es otro regulador transcripcional sensible al hierro que
controlacpsexpresión. IscR se identificó como un represor de
genes que codifican proteínas de ensamblaje de grupos de
hierro-azufre, y se une a un grupo [2Fe-2S] [58]. UnDiscr
mutante en elK. pneumoniaecepa CG43 había disminuido los
niveles de UA, y ligeramente disminuidocpsexpresión de la
galónyhombreCpromotores [59]. Se identificó una caja IscR
aguas arriba degalóny se demuestra que está sujeto a IscR; esta
unión dependía de la secuencia de ADN de la caja IscR y de los
residuos de cisteína en IscR que se creía que coordinaban el
grupo [2Fe-2S]. Estos investigadores demostraron además que
elDiscrel mutante era más susceptible de ser eliminado por el
suero humano normal, un fenotipo asociado con una cápsula
reducida.
IscRi está activo cuando se une a Fe y, por lo tanto, activacps expresión
cuando los niveles de hierro son suficientes. En contraste, Fur ejerce su
actividad represiva sobrecpsexpresión (indirectamente) cuando los
niveles de hierro son suficientes y alivia esta represión cuando los niveles
de hierro son bajos. Así, parece queKlebsiellaha adquirido mecanismos
para garantizar que la producción de cápsulas se mantenga al menos en
un nivel basal independiente de la disponibilidad de hierro, al mismo
tiempo que permite alteraciones en la producción de cápsulas en
respuesta a concentraciones extremas de hierro.
Los reguladores Rmp
RmpA y RmpA2
RmpA fue identificado como un regulador del fenotipo
mucoide en 1989.8-]. Tiene un dominio de unión al ADN de
tipo LuxR, pero la porción N-terminal es exclusiva de
Klebsiella.losrmpAEl gen está ubicado en el cromosoma o en
un plásmido de gran virulencia y se encuentra
predominantemente solo en cepas que poseen un fenotipo
HMV. La correlación entrermpAy HMV/hv es muy alta, y la
presencia dermpAse encuentra entre un conjunto de genes
propuestos como biomarcadores para identificar posibles
cepas de hvKp.28,60]. Se ha demostrado que RmpA activa
cpsexpresión génica en numerosas cepas [7,21,25-], y activar
su propia expresión [25-], pero no se ha publicado evidencia
de regulación directa. Se demostró que RmpA interactúa
con RcsB, y se postula que RmpA puede sustituir a RcsA, lo
que lleva a la activación de genes capsulares en ausencia de
RcsA.21].
Inicialmente se descubrió que RmpA2 regulacpsexpresión en el
K. pneumoniaecepa Chedid, una cepa tipo cápsula K2 [23]. losrmpA2
El gen recibió este nombre después de que la secuenciación revelara
que codificaba una proteína más larga que la clonada originalmente.
rmpAde Kp52145 [23]. La alineación de las secuencias codificantes
de RmpA y RmpA2 de varias cepas revela que comparten
aproximadamente un 80 % de identidad. Algunas cepas, como
NTUH-K2044 y Kp52145, contienen un truncado rmpA2pero se
desconoce si estos codifican proteínas funcionales. En CG43, elD
rmpA2cepa no es HMV pero no muestra mucho cambio encps
expresión [21,22]. Sin embargo cuandormpA2está sobreexpresado,
cpsla expresión aumentó, por lo que solo puede afectar la
transcripción bajo ciertas condiciones.
Opinión actual en microbiología2020,54:95–102
Hasta donde sabemos, CG43 es la única cepa conocida que
tiene proteínas RmpA y RmpA2 funcionales.
RmpC
Al examinar el papel de RmpA encpsregulación en KPPR1S,
se observó que había un gen vecino predicho para codificar
otra proteína con un dominio de unión a ADN de tipo LuxR.
La eliminación de este gen,rmpc, resultó en una reducción
de la expresión decpspromotores y producción reducida de
cápsula similar a la observada para elrmpAmutante Sin
embargo, a diferencia delrmpAmutante, esta cepa sigue
siendo HMV [25-]. Este es el primer informe de un mutante
con cápsula reducida que sigue siendo HMV. También se
determinó que sería cotranscrito conrmpA.losDRmpC cepa
se atenúa en el modelo de neumonía, pero el fenotipo no es
tan grave como mutantes comoDrmpAy Dkvraque no son
HMV pero tienen disminuciones similares encps expresión
como laDRmpCmutante [25-]. Por lo tanto, parece que HMV
puede ser un atributo de virulencia más importante que la
producción de altos niveles de cápsula.
Reguladores de la familia MarR
KvrA
KvrA es elK. pneumoniaehomólogo de SlyA, un regulador de la
virulencia enSalmonela.KvrA, junto con KvrB, se identificó como
contribuyente a la virulencia a través de una pantalla que
apuntaba específicamente a los genes que se predijo que
codificaban los reguladores de la familia MarR.24-]. losDkvra
mutante es esencialmente avirulento en el modelo de neumonía
en ratones, y se encontró que no era HMV y tenía reduccióncps
expresión de lahombreCygalónpromotores Posteriormente,
también se demostró que KvrA regula la expresión delrmpA
promotor [25-], perocpsexpresión génica en elDkvra tensión no
pudo ser restaurada por la expresión dermpAen un plásmido.
Esto sugiere que KvrA puede afectar la expresión delgalóny
hombreCpromotores independientemente de su efecto sobre
rmpA.KvrA se encuentra en las cepas cKp y hvKp, pero no
parece controlarcpsexpresión en la cepa clásica KPNIH1, un
aislado ST258 [24-]. Sin embargo, un KPNIH1kvramutante tiene
un defecto de colonización, lo que sugiere que hay otros genes
regulados por KvrA que potencialmente contribuyen a la
patogénesis.
Todavía no se sabe si KvrA se une directamente a larmpAo cps
promotores La función de esta clase de reguladores similares a
MarR que incluye SlyA y RovA consiste en desreprimir el
silenciamiento génico mediado por H-NS (revisado en [61]). Hay
un informe sobre el papel de H-NS en un aislado clínico (K39, no
HMV) dondecpsexpresión, los niveles de AU y la
mucosviscosidad se elevaron en unhnsmutante [62]. Por lo
tanto, es tentador especular que el papel de KvrA en cpsla
transcripción es como un desrepresor del silenciamiento
mediado por H-NS.
KvrB
KvrB es elK. pneumoniaehomólogo de EmrR. EnE. coli, EmrR
reprime la bomba de salida de fármacos EmrAB [63]. los
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Figura 2
Pelo
rmplugar
RmpA KvrA
RcsAB KvrB
cpslugar
kvg /
Kvh
RmpC
PCR
H-NS iscr
Opinión actual en microbiología
Matriz compleja de regulación de la cápsula. Cada forma representa un regulador
transcripcional diferente que se sabe que contribuye de alguna manera a la
expresión de los genes biosintéticos de la cápsula. Si se conoce o se supone
lógicamente, la dimerización se indica mediante dobletes. El grosor de la flecha
indica el impacto relativo del regulador: cambio de pliegue pequeño y delgado en la
cepa mutante; cambio de pliegue más grueso y más grande en la cepa mutante. Las
flechas indican activadores y las líneas en forma de T indican represores. Las líneas
sólidas indican que se ha demostrado la unión directa para al menos uno de loscps
promotores, y las líneas discontinuas indican que no se ha probado la unión directa.
Las proteínas en cursiva se han caracterizado en un soloK. pneumoniaecepa
mientras que las demás se han caracterizado en al menos 2 cepas.
Los genes que codifican los homólogos de EmrAB se codifican
aguas abajo de KvrB, y el contexto genético es el mismo que en
E. coli,sugiriendo que este locus funciona de manera similar en
K. pneumoniae.Además, el homólogo de EmrR en una cepa
uropatógena deE. coli,llamado MprA, es necesario para la
expresión de la cápsula [64]. ADkvrBmutante se atenuó en el
modelo de neumonía en ratones, pero los niveles de
colonización en los pulmones y el bazo fueron mucho más altos
que para otros mutantes comoDkvrayDrcsB [24-,25-]. Esta DkvrB
mutante no es HMV y ha reducidocpsexpresión, los cuales
probablemente contribuyen a su defecto de virulencia. Además,
al igual que KvrA, se descubrió que KvrB regula larmpA
promotor. Pero a diferencia de KvrA, el efecto de KvrB encpsEs
probable que la expresión sea únicamente a través de su acción
en elrmpApromotor comocpsla expresión fue restaurada en el
DkvrBllevar tensiónrmpAen un plásmido [25-].
Otros reguladores
Sistemas de dos componentes KvgAS y KvhAS
Tanto las cepas cKp como hvKp codifican homólogos del sistema de
dos componentes Evg/BvgAS, denominado KvhAS [sesenta y cinco].
Las cepas hvKp tienen un segundo par de Evg/BvgAS
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Walker y Miller 99
Recuadro 2 Una propuesta a laKlebsiellacomunidad
La metodología utilizada para definir la producción de cápsulas, HMV e
hipervirulencia ha variado significativamente de un estudio a otro, lo que hace
que las comparaciones directas entre cepas sean un desafío. En estudios que
examinancpsla regulación transcripcional, algunas formas de regulación de la
cápsula (reportero o qRT-PCR) y la cuantificación de los niveles de UA son
bastante constantes entre los estudios, pero el medio de crecimiento y las
condiciones varían. En los informes de cepas hv-CR-cKp recientemente aisladas,
el HMV se evalúa principalmente mediante la prueba del hilo y rara vez se
examinan los niveles de la cápsula y la virulencia. Las evaluaciones de HMV han
oscilado entre cualitativas (prueba de hilo o imágenes de cultivos centrifugados)
y cuantitativas (ensayo de sedimentación). Los estudios de virulencia en ratones
también han sido variables (verCaja 1). Si bien este tipo de variaciones no son
inusuales, ya que los laboratorios a menudo favorecen un conjunto particular de
ensayos, esto dificulta la extrapolación de análisis entre cepas. Esto se complica
aún más por el grado recientemente reconocido de variación genómica entre
cepas deK. pneumoniae.A medida que se aíslan más cepas que tienen genes
asociados tanto a CR como a hv, existe una mayor necesidad de comprender los
mecanismos que confieren hipervirulencia. El desarrollo y la aplicación de un
conjunto consistente de ensayos acelerará los avances y facilitará la evaluación
de los riesgos potenciales asociados con estos nuevos aislamientos. Por lo tanto,
proponemos, como mínimo, los siguientes ensayos para evaluar la producción
de cápsulas, la hipermucoviscosidad y la hipervirulencia:
- La cápsula debe cuantificarse utilizando el ensayo UA
- El HMV debe cuantificarse utilizando el ensayo de sedimentación.
- La virulencia debe medirse en ratones utilizando un modelo de ratón compatible
con el origen de la cepa (es decir, modelo de sepsis para un aislado de sangre,
modelo de neumonía para un aislado de pulmón, etc.)
Al evaluar aislados de cKp potencialmente hipervirulentos, se debe
tener en cuenta la determinación de la escala de virulencia (es decir,
¿la cepa es más virulenta que los aislados clásicos típicos? ¿Se ha
vuelto hipervirulenta o tiene un fenotipo de virulencia intermedia?).
homólogos, denominados KvgAS, y un gen vecino que
codifica otro regulador de respuesta denominado KvhR. En
la cepa CG43, KvhR parece jugar un papel tanto encps
expresión y HMV, y KvgA parece afectar solo a HMV. Pérdida
dekvhano pareció afectar ni a HMV ni acpsexpresión, pero
sobreexpresandokvharesultó en una reducción de ambos
fenotipos. La naturaleza exacta de cómo estos sistemas
están involucrados en la cápsula y HMV aún no se ha
explorado. El hecho de que tanto KvhR como KvgA afecten al
HMV y solo se encuentren en hvKp sugiere que se justifica
una mayor investigación para comprender su posible
contribución a la hipervirulencia.
Pantalla TraDIS
En un estudio reciente, Dormanet al.utilizaron propiedades de
sedimentación para examinar una biblioteca de transposones
en busca de genes que contribuyan a fenotipos de cápsula
alterados.66-]. Encontraron 19 reguladores transcripcionales, 13
de los cuales se propusieron para aumentar la producción de
cápsulas. Entre los 19 se encontraban RmpA y RcsB, y también
identificaron H-NS, KvrA y KvrB, así como una serie de otros
reguladores sin un papel conocido previamente en la síntesis de
cápsulas. Con todos menos RcsB, queda por determinar cuál de
estos reguladores actúa directamente en los promotores de la
cápsula.
Opinión actual en microbiología2020,54:95–102
100Alumnos de Stanley Falkow
Observaciones finales
Tantos reguladores de cápsula. . .
Resumen de la literatura sobre la regulación transcripcional de
K. pneumoniaeLos genes de la cápsula revelan que hay
numerosos reguladores que probablemente funcionen para
garantizarcpsexpresión se activa cuando es necesario (Figura 2).
Si bien aún no se ha demostrado que la mayoría de estos
reguladores actúen directamente encpspromotores, la
abundancia de reguladores que contribuyen acpsregulación es
un indicador de cuán crítica es la cápsula paraK. pneumoniae
supervivencia. Lo que complica los análisis de la regulación de la
cápsula es que ha sido difícil extrapolar los resultados de una
cepa a otra debido a la variabilidad en los métodos utilizados y
las diferencias en el contenido de genes reguladores entre las
cepas (verCaja 2). Además, es necesario evaluar la(s) función(es)
de estos reguladores en el contexto de otros mutantes
reguladores para determinar una serie de factores críticos,
como la regulación directa frente a la indirecta, si participan en
una cascada reguladora y si existe cooperación. regulación.
Pero, ¿qué causa realmente el HMV y cuál es el vínculo entre el
HMV y la hipervirulencia?
Los datos generados sobre HMV han sido de cepas de hvKp,
pero el enfoque principal ha estado en la expresión de la
cápsula con menos énfasis en el papel de los reguladores
transcripcionales que confieren HMV. Esto se debe en gran
parte a la suposición de que el fenotipo HMV es una
consecuencia de la sobreproducción de cápsulas. Sin embargo,
recientemente informamos sobre un regulador que afectacps
expresión pero no HMV, lo que indica que la sobreproducción
de cápsula no es un requisito para HMV [25-]. Los mutantes que
tienen una pérdida completa de la cápsula parecen ser
incapaces de alcanzar HMV comohombreCel mutante que
sobreproduce RmpA sigue sin ser HMV (observaciones
personales). Por lo tanto, es probable que el fenotipo HMV se
deba a una combinación de cápsula y algo más. Aunque el HMV
depende de la presencia de la cápsula, el HMV y la cápsula
deben considerarse de forma independiente además de
investigar el vínculo que los conecta.
Finalmente, se debe poner más énfasis en la cuantificación
de HMV y la evaluación de la virulencia de los aislados
clínicos hv-CR-cKp (verCaja 2). A medida que se aíslan,
caracterizan y secuencian más cepas de hv-CR-cKp, los datos
genéticos se pueden usar para identificar genes que se
correlacionan con HMV e hipervirulencia. Los análisis
genómicos y fenotípicos facilitarán la comprensión de qué
causa que una cepa se vuelva HMV e hipervirulenta. Esta
información también será fundamental para determinar si la
capacidad de adquirir HMV y/o hipervirulencia es
dependiente del tipo de cápsula, y será importante para
evaluar los riesgos asociados a las cepas cKp que adquieren
genes asociados a HMV e hipervirulencia en cepas hvKp.
Conflicto de intereses
Nada declarado.
Opinión actual en microbiología2020,54:95–102
Expresiones de gratitud
Un agradecimiento especial a S. Falkow por brindarme exactamente el equilibrio
correcto de apoyo e independencia para que me desarrolle como científico (VLM).
Este trabajo fue apoyado por una subvención de los Institutos Nacionales de Salud
(R21 AI132925) a V. Miller.
Referencias y lecturas recomendadas
Los artículos de particular interés, publicados dentro del período de revisión, se
han destacado como:
- de especial interés
- - de interés pendiente
1. Paczosa MK, MecsasJ:Klebsiella pneumoniae:yendo en el
-- ataque con una defensa fuerte.Microbiol Mol Biol Rev2016, 80:
629-661.
Excelente y completa revisión deK. pneumoniaebiología y patogenia.
2. Martín RM, Bachman MA:Colonización, infección y
- genoma accesorio deKlebsiella pneumoniae.Microbiol infectante de células
frontales2018,8:1-15.
Excelente revisión que destaca las conexiones entre el potencial de virulencia y
el genoma accesorio.
3. Russo TA, Marr CM:hipervirulentoKlebsiella pneumoniae.clin
- Microbiol Rev2019,32e00001-19.
Revisión exhaustiva de la epidemiología, genómica y patogenia de hvKp.
4. Sellick JA, Russo TA:Volviéndose hipervirulentoKlebsiella pneumoniae
en la pantalla de radar.Curr Opin en Infect Dis2018, 31http://
dx.doi.org/10.1097/QCO.0000000000000464.
5. Liu YY, Wang Y, Walsh TR, Yi LX, Zhang R, Spencer J, Doi Y, Tian G,
Dong B, Huang Xet al.:Aparición del mecanismo de resistencia a la
colistina mediado por plásmidos MCR-1 en animales y seres
humanos en China: un estudio de biología microbiológica y
molecular.Lancet Infect Dis2016,dieciséis:161-168.
6. Wyres KL, Wick RR, Gorrie C, Jenney A, Follador R, Thomson NR, Holt KE:
Identificacion deKlebsiellaloci de síntesis de cápsulas a partir de datos
del genoma completo.Genómica microbiana2016,2:1-15.
7. Hsu CR, Lin TL, Chen YC, Chou HC, Wang JT:El rol de Klebsiella
pneumoniae rmpAen la síntesis de polisacáridos capsulares y
revisión de la virulencia.Microbiología2011,157:3446-3457.
8. Nassif X, Fournier JM, Arondel J, Sansonetti PJ:Mucoide
- fenotipo deKlebsiella pneumoniaees un factor de virulencia codificado por
plásmidos.Inmune a infecciones1989,57:546-552.
Este es el primer informe dermpAy su papel en el fenotipo
hipermucoviscoso.
9. Yu VL, Hansen DS, Ko WC, Sagnimeni A, Klugman KP, Gottberg von A,
Goossens H, Wagener MM, Benedi VJ:Características de virulencia de
Klebsiellay manifestaciones clínicas deK. pneumoniaeinfecciones del
torrente sanguíneo.Infecciones emergentes2007, 13:986-993.
10Holt KE, Wertheim H, Zadoks RN, Baker S, Whitehouse CA,
- - Dance D, Jenney A, Connor TR, Hsu LY, Severin Jet al.:Análisis
genómico de diversidad, estructura poblacional, virulencia y
resistencia antimicrobiana enKlebsiella pneumoniae,una amenaza
urgente para la salud pública.Proc Natl Acad Sci EE. UU.2015,112:
E3574-E3581.
Artículo histórico que proporciona análisis genómicos de una colección grande
y diversa deK. pneumoniaeaislamientos. Este estudio demostróK. pneumoniae
se puede dividir en tres especies distintas, que hay un gran genoma accesorio
y que hay un conjunto distinto de genes asociados con las cepas de hvKp.
11Follador R, Heinz E, Wyres KL, Ellington MJ, Kowarik M, Holt KE,
Thomson NR:la diversidad deKlebsiella pneumoniaepolisacáridos
de superficie.Genómica microbiana2016,2:1-15.
12Chen YT, Chang HY, Lai YC, Pan CC, Tsai SF, Peng HL: Secuenciación
y análisis del plásmido de gran virulencia pLVPK deKlebsiella
pneumoniaeCG43.Gene2004, 337:189-198.
www.cienciadirecta.com

13Lam MM, Wyres KL, Duchêne S, Wick RR, Judd LM, Gan YH, Hoh CH,
Archuleta S, Molton JS, Kalimuddin Set al.:Genómica de
poblaciones de hipervirulentosKlebsiella pneumoniaeclonalgroup
23 revela una emergencia temprana y una rápida diseminación
global.comuna nacional2018,9:1-10.
14Lam MMC, Wick RR, Wyres KL, Gorrie CL, Judd LM, Jenney AWJ, Brisse
S, Holt KE:Diversidad genética, movilización y propagación del
elemento móvil ICEKp codificador de yersiniabactina en Klebsiella
pneumoniaepoblacionesGenómica microbiana2018, 12:1-14.
15.Hsieh PF, Lin TL, Lee CZ, Tsai SF, Wang JT:Los sistemas de adquisición de
hierro inducidos por suero y TonB contribuyen a la virulencia en
Klebsiella pneumoniaecausando un absceso hepático piógeno
primario.J infectar enfermedad2008,197:1717-1727.
dieciséis.Bachman MA, Miller VL, Weiser JN:La lipocalina 2 de la mucosa tiene
efectos proinflamatorios y secuestradores de hierro en respuesta a la
enterobactina bacteriana.patógeno PLoS2009,5:e1000622.
17Bachman MA, Lenio S, Schmidt L, Oyler JE, Weiser JN: La
interacción de la lipocalina 2, la transferrina y los sideróforos
determina el nicho de replicación deKlebsiella pneumoniae
durante la neumonía.mBio2012,3e00224-11.
18Bachman MA, Oyler JE, Burns SH, Caza M, Lepine F, Dozois CM, Weiser JN:
Klebsiella pneumoniaeyersiniabactina promueve la infección del tracto
respiratorio a través de la evasión de la lipcalina 2.Inmune a infecciones
2011,79:3309-3316.
19Yu WL, Ko WC, Cheng KC, Lee CC, Lai CC, Chuang YC: Comparación
de prevalencia de factores de virulencia paraKlebsiella
pneumoniaeabscesos hepáticos entre aislados con serotipos
capsulares K1/K2 y no K1/K2.Diagnosticar microbiol Infect Dis
2008,62:1-6.
20Russo TA, Olson R, MacDonald U, Metzger D, Maltese LM, Drake EJ,
Gulick AM:La aerobactina media la virulencia y explica el
aumento de la producción de sideróforos en condiciones
limitantes de hierro por hipervirulencia (hipermucoviscosa)
Klebsiella pneumoniae.Inmune a infecciones2014,82:2356-2367.
21Cheng HY, Chen YS, Wu CY, Chang HY, Lai YC, Peng HL:RmpA
regulación de la biosíntesis de polisacáridos capsulares en
Klebsiella pneumoniaeCG43.J bacteriol2010,192:3144-3158.
22Lai YC, Peng HL, Chang HY:RmpA2, un activador de la biosíntesis de
la cápsula enKlebsiella pneumoniaeCG43, regula K2cps expresión
génica a nivel transcripcional.J bacteriol2003, 185:788-800.
23Wacharotayankun R, Arakawa Y, Ohta M, Tanaka K, Akashi T, Mori M,
Kato N:Mejora de la síntesis de polisacáridos extracapsulares en
Klebsiella pneumoniaepor RmpA2, que muestra homología con
NtrC y FixJ.Inmune a infecciones1993,61:3164-3174.
24Palacios M, Miner TA, Frederick DR, Sepúlveda VE, Quinn JD,
- Walker KA, Miller VL:Identificación de dos reguladores de la
virulencia que se conservan enKlebsiella pneumoniae cepas clásicas
e hipervirulentas.mBio2018,9e01443-18. Primer estudio para
identificar reguladores conservados de la familia MarR (KvrA y KvrB) que
afectan la virulencia en las cepas cKp y hvKp.
25Walker KA, Miner TA, Palacios M, Trzilova D, Frederick DR,
- - Broberg CA, Sepúlveda VE, Quinn JD, Miller VL:AKlebsiella
pneumoniaeel mutante regulador ha reducido la expresión de
la cápsula pero retiene la hipermucoviscosidad.mBio2019,10
e00089-19.
Este estudio demuestra quermpAes el primer gen de un operón que codifica
un regulador adicional decpsexpresión, RmpC. Una mutación en RmpCda
como resultado una reduccióncpsexpresión génica y cápsula reducida, pero
tiene niveles de hipermucoviscosidad de tipo salvaje. Este es el primer mutante
caracterizado que demuestra que la hiperproducción de cápsula no es un
requisito para la hipermucoviscosidad.
26Yu WL, Ko WC, Cheng KC, Lee HC, Ke DS, Lee CC, Fung CP, Chuang
YC:Asociación entrermpAymagagenes y síndromes clínicos
causados porKlebsiella pneumoniaeen Taiwan.J Exp Med2006,42:
1351-1358.
27Colmillo CT, Chuang YP, Shun CT, Chang SC, Wang JT:Un nuevo gen
de virulencia enKlebsiella pneumoniaecepas que causan absceso
hepático primario y complicaciones metastásicas sépticas.J Exp
Med2004,199:697-705.
www.cienciadirecta.com
Walker y Miller 101
28Russo TA, Olson R, Fang CT, Stoesser N, Miller M, MacDonald U,
Hutson A, Barker JH, La Hoz RM, Johnson JRet al.:Identificación de
biomarcadores para diferenciación de hipervirulentosKlebsiella
pneumoniaedel clásicoK. pneumoniae.J Clin Microbiol 2018,56
e00776-18.
29Lawlor MS, Hsu J, Rick PD, Miller VL:Identificacion deKlebsiella pneumoniae
determinantes de virulencia utilizando un modelo de infección
intranasal.Mol Microbiol2005,58:1054-1073.
30Cortés G, Borrell N, de Astorza B, Gómez C, Sauleda J, Albertı́ S:
Análisis molecular de la contribución del polisacárido capsular y la
cadena lateral O del lipopolisacárido a la virulencia deKlebsiella
pneumoniaeen un modelo murino de neumonía.Inmune a
infecciones2002,70:2583-2590.
31Lawlor MS, Handley SA, Miller VL:Comparación de las respuestas del
huésped al tipo salvaje ycpsbmutanteKlebsiella pneumoniae
infeccionesInmune a infecciones2006,74:5402-5407.
32.Xiong H, Carter RA, Leiner IM, Tang YW, Chen L, Kreiswirth BN,
Pamer EG:Distintas contribuciones de neutrófilos y CCR2
+ monocitos al aclaramiento pulmonar de diferentesKlebsiella
pneumoniaeson.Inmune a infecciones2015,83:3418-3427.
33.Rosen DA, Hilliard JK, Tiemann KM, Todd EM, Morley SC, Hunstad DA:
Klebsiella pneumoniaeFimK promueve la virulencia en la neumonía
murina.J infectar enfermedad2016,213:649-658.
34.Cejas D, Fernández Canigia L, Rincón Cruz G, Elena AX, Maldonado I,
Gutkind GO, Radice MA:Primer aislado de KPC-2- productor
Klebsiella pneumoniaesecuencia tipo 23 de las Américas.J Clin
Microbiol2014,52:3483-3485.
35.Yao B, Xiao X, Wang F, Zhou L, Zhang X, Zhang J:Características
clínicas y moleculares del hipervirulento (hipermucoviscoso)
multiclon resistente a carbapenémicosKlebsiella pneumoniae
aislados en un hospital terciario en Beijing, China.Int J Infect Dis
2015,37:107-112.
36.Turton JF, Payne Z, Coward A, Hopkins KL, Turton JA, Doumith M,
Woodford N:Genes de virulencia en aislados deKlebsiella
pneumoniaedel Reino Unido durante 2016, incluidos los tipos
hipervirulentos K1-ST23 y “no hipervirulentos” ST147, ST15 y ST383
con gen carbapenemasa positivo.J Med Microbiol2018,67:118-128.
37. Liu BT, Su WQ:Secuenciación del genoma completo del serotipo K1
ST23 productor de NDM-1 hipervirulentoKlebsiella pneumoniaeen
China.J Med Microbiol2019,68: 866-873 http: // dx.doi.org/10.1099/
jmm.0.000996.
Karlsson M, Stanton RA, Ansari U, McAllister G, Chan MY, Sula E, Grass
JE, Duffy N, Anacker ML, Witwer MLet al.:Identificación de un
hipervirulento productor de carbapenemasasKlebsiella
pneumoniaeaislar, Estados Unidos.Agentes antimicrobianos
Quimioterapia2019,63http://dx.doi.org/10.1128/AAC.00519-19
e00519-19.
39. Harada S, Aoki K, Ishii Y, Ohno Y, Nakamura A, Komatsu M, Tateda K:
Aparición de hipervirulentos productores de IMPKlebsiella pneumoniae
Portar un plásmido de virulencia similar a pLVPK.2019 http://dx.doi.org/
10.1016/j.ijantimicag.2019.05.007.
40Wei DD, Wan LG, Deng Q, Liu Y:Aparición de productores de KPC
Klebsiella pneumoniaeclon hipervirulento del serotipo capsular K1
que pertenece a la secuencia tipo 11 en China continental.
Diagnosticar microbiol Infect Dis2016,85:192-194.
41.Zhang Y, Zeng J, Liu W, Zhao F, Hu Z, Zhao C, Wang Q, Wang X,
- - Chen H, Li Het al.:Aparición de un carbapenémico hipervirulento
resistenteKlebsiella pneumoniaeaislado de infecciones clínicas en
China.J infectar2015,71:553-560.
Un informe inicial de aislados de CR-hvKp y CR-cKp con genes asociados a hv;
estas cepas hv-CR-cKp no fueron virulentas en modelos de sepsis en ratones,
lo que subraya la necesidad de una caracterización fenotípica más detallada de
las supuestas cepas hv-CR-cKp.
42.Gu D, Dong N, Zheng Z, Lin D, Huang M, Wang L, Wai-Chi Chan E,
- - Shu L, Yu J, Zhang Ret al.:Un brote fatal de ST11 hipervirulento
resistente a carbapenemKlebsiella pneumoniaeen un hospital
chino: un estudio epidemiológico molecular.Lancet Infect Dis2018,
18:37-46.
Este informe describe aislados de cKp con algunos genes asociados a hv
codificados en un plásmido grande con regiones homólogas a pLVPK. Estas
cepas tenían un fenotipo de resistencia en PMN similar a hvKp.
Opinión actual en microbiología2020,54:95–102
102Alumnos de Stanley Falkow
43.Huang YH, Chou SH, Liang SW, Ni CE, Lin YT, Huang YW,
- Yang CT:Aparición de un hipervirulento productor de XDR y
carbapenemasasKlebsiella pneumoniaetensión en Taiwán.
Quimioterapia antimicrobiana J2018,73:2039-2046
Este informe describe una cepa de cKp con virulencia intermedia en un modelo de
sepsis en ratones. Esta cepa contiene un plásmido novedoso que codifica muchos
genes asociados.
44.Wu KM, Li LH, Yan JJ, Tsao N, Liao TL, Tsai HC, Fung CP, Chen HJ, Liu
YM, Wang JTet al.:Secuenciación del genoma y análisis
comparativo deKlebsiella pneumoniaeNTUH-K2044, una cepa que
causa absceso hepático y meningitis.J bacteriol2009, 191:
4492-4501.
45.Chen YT, Chang HY, Lai YC, Pan CC, Tsai SF, Peng HL: Secuenciación y
análisis del plásmido de gran virulencia pLVPK deKlebsiella
pneumoniaeCG43.Gene2004,337:189-198.
46.Lery L, Frangeul L, Passet V, Frangeul, Almeida AS, Bialek-Davenet S,
Barbe V, Bengoechea JA, Sansonetti P, Brisse Set al.: Análisis
comparativo deKlebsiella pneumoniaegenomas identifica una proteína
de la familia de la fosfolipasa D como un nuevo factor de virulencia.
BMC Biol2014,12:1-29.
47.Broberg CA, Wu W, Cavaloci JD, Miller VL, Bachman MA: Secuencia
completa del genoma deKlebsiella pneumoniaecepa ATCC 43816
KPPR1, un mutante resistente a la rifampicina comúnmente utilizado en
estudios de biología molecular, genética y animal. Anuncio del genoma
2014,2e00924-14.
48.Wall E, Majdalani N, Gottesman S:La compleja cascada regulatoria
de Rcs.Annu Rev Microbiol2018,72:111-139.
49.Gottesman S, Trisler P, Torres-Cabassa A:Regulación de la síntesis
de polisacáridos capsulares enEscherichia coliK-12:
Caracterización de tres genes reguladores.J bacteriol1985, 162:
1111-1119.
50Allen PM, Fisher D, Saunders JR, Hart CA:El papel del polisacárido
capsular K21b deKlebsiellay del polisacárido de ácido colánico
estructuralmente relacionado deEscherichia colien la resistencia a
la fagocitosis y la destrucción del suero.J Med Microbiol 1987,24:
363-370.
51.Wacharotayankun R, Arakawa Y, Ohta M, Hasegawa T, Mori M, Horii
T, Kato N:Involucrado enrcsBenKlebsiellaSíntesis de la cápsula K2
enEscherichia coliK-12.J bacteriol1992,174:1063-1067.
52.McCallum KL, Whitfield C:losrcsagen deKlebsiella pneumoniaeO1:
K20 participa en la expresión del antígeno K (capsular) específico
de serotipo.Inmune a infecciones1991,59:494-502.
53.Wehland M, Bernhard F:La caja RcsAB: caracterización de un nuevo
operador imprescindible para la regulación de
Biosíntesis de exopolisacáridos en bacterias entéricas.J Biol
Chem2000,275:7013-7020.
54.Peng D, Li X, Liu P, Zhou X, Luo M, Su K, Chen S, Zhang Z, He Q, Qiu J
et al.:Regulación transcripcional degalónpor RcsAB afecta la
formación de polisacáridos capsulares enKlebsiella pneumoniae
NTUH-K2044.Res de microbios2018,216:70-78.
55.Lin CT, Chen YC, Jinn TR, Wu CC, Hong YM, Wu WH:Papel de la represión
de catabolitos de carbono dependientes de cAMP en capsular
Opinión actual en microbiología2020,54:95–102
biosíntesis de polisacáridos enKlebsiella pneumoniae.Más uno
2013,8:e54430.
56.Ou Q, Fan J, Duan D, Xu L, Wang J, Zhou D, Yang H, Li B: Participación de la
proteína receptora de AMPc en la formación de biopelículas,
producción de fimbrias, biosíntesis de polisacáridos capsulares y
letalidad en ratones deKlebsiella pneumoniaeserotipo K1 que causa
absceso hepático piógeno.J Med Microbiol2017,66:1-7.
57.Lin CT, Wu CC, Chen YS, Lai YC, Chi C, Lin JC, Chen Y, Peng HL:Fur
regulación de la biosíntesis de polisacáridos capsulares y
sistemas de adquisición de hierro enKlebsiella pneumoniae
CG43.Microbiología2011,157:419-429.
58.Schwartz CJ, Giel JL, Patschkowski T, Luther C, Ruzicka FJ, Beinert H, Kiley
PJ:IscR, un factor de transcripción que contiene un grupo de Fe-S,
reprime la expresión deEscherichia coli genes que codifican proteínas
de ensamblaje de grupos Fe-S.Proc Natl Acad Sci EE. UU.2001,98:
14895-14900.
59.Wu CC, Wang CK, Chen YC, Lin TH, Jinn TR, Lin CT:Regulación IscR de
la biosíntesis de polisacáridos capsulares y sistemas de
adquisición de hierro enKlebsiella pneumoniaeCG43.Más uno
2014,9:e107812.
60Yu F, Lv J, Niu S, Du H, Tang YW, Pitout JDD, Bonomo RA, Kreiswirth
BN, Chen L:Análisis de PCR multiplex para la detección rápida de
Klebsiella pneumoniaecepas resistentes a carbapenem (tipo de
secuencia 258 [ST258] y ST11) e hipervirulentas (ST23, ST65, ST86 y
ST375).J Clin Microbiol2018,56 e00731-18.
61.Stoebel DM, Libre A, Dorman CJ:Anti-silenciamiento: superación de la
represión de la transcripción mediada por H-NS en bacterias entéricas
gramnegativas.Microbiología2008,154:2533-2545.
62.Ares MA, Fernández-Vázquez JL, Rosales-Reyes R, Jarillo-Quijada
MD, Bargen von K, Torres J, González-y-Merchand JA, Alcántar-
Curiel MD, la Cruz De MA:La proteína nucleoide H-NS controla las
características de virulencia deKlebsiella pneumoniaeregulando la
expresión de pili tipo 3 y el polisacárido de la cápsula.Microbiol
infectante de células frontales2016,6:1-13.
63.Lomovskaya O, Lewis K, Matin A:EmrR es un regulador negativo de
laEscherichia colibomba multirresistencia EmrAB.J bacteriol1995,
177:2328-2334.
64.Goh KGK, Phan MD, Forde BM, Chong TM, Yin WF, Chan KG, Ulett GC,
Sweet MJ, Beatson SA, Schembri MA:Descubrimiento en todo el genoma
de los genes necesarios para la producción de cápsulas por
uropatógenosEscherichia coli.mBio2017,8e01558-17.
sesenta y cinco.Lin CT, Huang TY, Liang WC, Peng HL:Los reguladores
de respuesta homólogos KvgA, KvhA y KvhR regulan la síntesis de
polisacáridos capsulares enKlebsiella pneumoniaeCG43 en una
envasadora coordinada.J Bioquímica2006, 140:429-438.
66.Dorman MJ, Feltwell T, Goulding DA, Parkhill J, Short FL:los
- red reguladora de cápsulas deKlebsiella pneumoniaedefinido por
densidad-TraDISort.mBio2018,9e01863-18.
Este informe describe un método innovador para la detección de alteraciones en la
mucoviscosidad de un gran conjunto de transposones mutantes. Se identificaron muchos
genes conocidos por afectar la mucoviscosidad, así como nuevos genes.
www.cienciadirecta.com