Estructura Y Función I: Carrera de Medicina

ESTRUCTURA Y FUNCIÓN I
Carrera de Medicina
Facultad de Ciencias de la Salud
Universidad Adventista del Plata
2024
Unidad 2.1 y 2.2
• Clasificación celular. Clasificación de Whittaker. Células
procariotas y eucariotas. Diferencias de su organización
celular. Micoplasmas, virus y viroides.
• Técnicas de observación y estudio en biología celular y
molecular. Microscopía. Microscopio óptico y electrónico.
Nociones de otros métodos de estudio en biología celular.
La célula
• Unidades estructurales y funcionales de
los organismos.
• Organismos uni- y pluricelulares.
• La mayoría muy pequeñas para ser vistas
con el ojo humano
• Técnicas de estudio: microscopias
Clasificación celular
• En base a la estructura celular
• En base al número de células
• En base a la nutrición
• Animales
EUCARIOTAS • Vegetales
(estructura más compleja) • Algas
• Hongos
• Eubacterias
PROCARIOTAS
• Arqueas
(estructura más simple)
• Cianobacterias (algas verde-azules antes del ME)
• Animales
EUCARIOTAS • Vegetales
(estructura más compleja) • Algas
• Hongos
• Eubacterias
PROCARIOTAS
• Arqueas
(estructura más simple)
• Cianobacterias (algas verde-azules antes del ME)
Célula eucariota
• 5-100µm
• Gran diversidad de
formas.
Célula eucariota
• 5-100µm
• Gran diversidad de
formas.
• Función especifica
• Algunas cambian de
forma muchas veces
(leucocitos).
Célula eucariota
• Presencia de
citoesqueleto
Célula eucariota
• Presencia de citoesqueleto
Célula eucariota
Célula eucariota
Localización de
componentes
del
citoesqueleto
por microscopia
confocal
Célula eucariota
• Posee numerosos
compartimientos
delimitados por
membranas simples
o dobles.
Célula eucariota
• Núcleo (ADN)
• Aparato de Golgi
• Retículo endoplásmico
• Endosomas
• Lisosomas (Degradación)
• Peroxisomas (Detoxificación)
• Mitocondrias (Energía)
• Plástidos (vegetales)
Célula eucariota
• Núcleo (ADN)
• Endosomas
Célula eucariota
• Núcleo (ADN)
• Endosomas
Célula eucariota
• Núcleo delimitado por la envoltura nuclear.
Célula eucariota
• Núcleo celular
• Envoltura nuclear
• 2 membranas
• Perforadas por orificios
• Poros nucleares
• Tráfico de moléculas
entre núcleo y citoplasma
Célula eucariota
• Núcleo celular
• Nucléolo
• Tamaño y cantidad
variable
• Síntesis de ARN
ribosomales
• Se asocian con proteínas
en el citosol
• Forman los ribosomas
Célula eucariota
• Ribosomas
• Tamaño (80s)
• Cantidad de proteínas
y ARN ribosomales
• 50% proteínas
ribosomales
• 50% ARNr
Célula eucariota
• Núcleo celular
• Cromosomas
• Múltiples
• ADN Lineal
• Asociado a proteínas
llamadas “histonas”
• Nucleosomas
Célula eucariota
• Núcleo celular
• Nucleosomas
• Empaquetamiento
• ADN humano 2m de
largo y núcleo 5µm
de diámetro
Célula eucariota
• Núcleo celular
• Nucleosomas
• Empaquetamiento
de diámetro
Célula eucariota
• Núcleo celular
• Nucleosomas
• Empaquetamiento
de diámetro
• Fibras de cromatina
Célula eucariota
• Núcleo celular
• Nucleosomas
• Empaquetamiento
de diámetro
• Fibras de cromatina
Célula eucariota
Célula eucariota
• Núcleo celular
• Cromatina
• Heterocromatina
• Más condensada
• Eucromatina
• Menos condensada
Célula eucariota
• Núcleo celular
• División celular
• Máximo
empaquetamiento
• Cromosomas
• Visibles con
microscopio óptico
Célula eucariota
• Núcleo celular
• Organismos Pluricelulares:
• Células germinales (1n)
• Células somáticas (2n)
• 2 pares de cromosomas
homólogos
• Uno del ovocito y uno del
espermatozoide
Célula eucariota
• Mitosis
• Mantiene el número de
cromosomas en las células
hijas.
• Múltiples etapas
Célula eucariota
• Meiosis
• Organismos pluricelulares
• Reproducción sexual
• Animales y vegetales
• Nuevas combinaciones
genéticas.
• Recombinación
Célula eucariota
• Diferencias entre células animales y vegetales
Célula eucariota
• Diferencias entre células animales y vegetales
Célula eucariota vegetal
• Pared celular
• Por fuera de la membrana
plasmática
• Formada por pectina,
celulosa y hemicelulosa
(HDC complejos)
• Resistencia a la presión de
turgencia (interna)
generada por la vacuola.
• Vacuola central
• Llenas de fluido.
• Ocupan 30-90% del
volumen celular.
• Funciones muy diversas
(almacenamiento,
degradación).
• Mantienen la “presión de
turgencia”.
• Vacuola central
• Llenas de fluido.
• Ocupan 30-90% del
volumen celular.
• Funciones muy diversas
(almacenamiento,
degradación, etc.).
• Mantienen la “presión de
turgencia”.
• Cloroplasto
• Dos membranas
• Dos compartimientos:
• Estroma
• Tilacoides
• Numero y tamaño varían
según el tipo celular y las
condiciones.
• Lugar de la fotosíntesis
• Ejemplos de organismos que tienen importancia en medicina.
• Protozoarios: parásitos intestinales, de sangre y tejidos.
• Hongos: agentes causantes de las micosis superficiales (afectan piel,
pelos, uñas) y micosis profundas (afectan órganos como pulmón,
cerebro).
Levadura Dermatofito
Célula procariota
• 1 a 10 µm de diámetro
• No posee envoltura nuclear.
• Cromosoma (ADN) circular desnudo
unido a la membrana plasmática.
• Ubicado en una zona llamada
“nucleoide”.
• En contacto con el resto del protoplasma.
• Elementos genéticos extracromosomales
circulares más pequeños.
• “Plásmidos” (genes de virulencia y/o R a
ATBs).
Célula procariota
• Membrana plasmática rodeada por una
pared celular (rígida).
• Protección mecánica.
• 2 partes:
• Interior: peptidoglicano (HDC +
péptidos)
• Exterior: membrana externa
• Separadas por el espacio periplásmico
Célula procariota
• Algunas tienen una cápsula (HDC) más
externa.
• Adhesión a superficies (“pegajosa”).
• Otras estructuras especializadas en la
superficie.
• Flagelo: desplazamiento
• Fimbrias: adhesión
• Pili: transferencia de ADN entre
bacterias (conjugación)
• Pili: locomoción
Célula procariota
• Ausencia de nucleolos.
• Ribosomas 70S (50S + 30S) dispersos en el
protoplasma.
• División por fisión binaria.
• Eubacterias: bacterias aerobias y anaerobias. Ej. agentes causantes de
enfermedades como Brucelosis, Tuberculosis, Gonorrea, Fiebre
Reumática, Gastroenteritis, etc.
Micoplasmas
• Bacterias ubicuas muy pequeñas (0,1-2,5µm)
• No visibles con microscopio de luz transmitida convencional
• Difíciles de cultivar fuera del huésped.
• Diagnóstico con métodos moleculares (PCR, ELISA)
• No poseen pared celular
• Causan enfermedades en humanos, animales y plantas
• Enfermedades genitales (M. genitalium)
• Neumonías (M. pneumoniae)
Procariotas Eucariotas
Envoltura nuclear NO SI
ADN Desnudo y circular Lineal y combinado con proteínas
Cromosomas Únicos Múltiples
Nucléolos NO SI
Division Fisión binaria Mitosis/Meiosis
Ribosomas 70S* (50S+30S) 80S (60S+40S)
Endomembranas NO SI
Mitocondrias NO SI
Cloroplastos NO SI
No celulósica (excepto
Pared celular Celulósica (células vegetales)
micoplasmas)
Citoesqueleto NO SI
*S es la unidad Svedberg de sedimentación que depende de la densidad y la forma de la molécula

• En base al número de células
• Bacterias Poca o ninguna

UNICELULARES • Protozoarios diferenciación de células
• Algas
MULTICELULARES • Animales Diferenciación de distintos

• Vegetales tipos de células
• Hongos Citoplasma continuo

ESTRUCTURA CENOCÍTICA
• Algunas algas plurinucleado
• FOTOTROFOS: usan luz solar

FUENTE DE ENERGIA
• QUIMIOTROFOS: usan energía química
• AUTOTROFOS: usan CO2 u otros compuestos

FUENTE PRINCIPAL inorgánicos
DE CARBONO
• HETEROTROFOS: usan compuestos orgánicos
• Ejemplos de combinaciones:
• Fotoautótrofo: mayoría de vegetales, algas y bacterias fotosintéticas.
• Fotoheterótrofo: grupo de bacterias rojas y verdes.
• Quimioautótrofo: algunos grupos de bacterias.
• Quimioheterótrofo: animales, protozoarios, hongos y algunas
bacterias.
La clasificación de Whittaker
• Robert Whittaker (1920-1980)
• Ecólogo Norteamericano
• Comprobó que los hongos no eran plantas (1959)
• Clasificó los seres vivos en 5 REINOS
• Monera, Protista, Fungi, Plantae y Animalia
La clasificación de Whittaker
PROCARIOTAS EUCARIOTAS
Agentes biológicos infecciosos no celulares
• Virus
• Viroides
• Priones
Virus
• Muy pequeños (30-300nm).
• NO son células verdaderas pero las infectan.
• Tienen algunas propiedades celulares: Autorreproducción, herencia,
mutación.
• Poseen material genético (ADN, ARN) envuelto en estructuras de
proteínas.
• No poseen maquinaria de síntesis de proteínas.
• Dependen de las células del huésped para su replicación
• Se activan (reproducen) cuando ingresan a la célula huésped.
Virus
• Virus de células eucariotas
• Clasificación según material genético:
(retrovirus)
Virus
• Bacteriófagos
• Virus de ADN que infectan bacterias.
• Material genético generalmente en la “cabeza”
• Se adhieren a la célula por su “cola”
• Le inyectan su ADN
• Lisan la célula huésped
• Se liberan los nuevos fagos
Viroides
• Menor complejidad genética y estructural que los virus
• No poseen ni proteínas ni lípidos
• Moléculas de ARN de cadena simple circular de 246-375 nt´s.
• Infectan células vegetales (papa, cítricos, coco) Potato spindle tuber viroid (PSTVd)
Priones
• Partículas proteicas “mal plegadas” se acumulan en el cerebro.

• El plegamiento anormal provoca daño cerebral y los demás síntomas.
• Muy resistentes a la inactivación por agentes físicos y químicos.
• Se detectan por estudio histopatológico (biopsia de cerebro).
• Producen las Encefalopatías espongiformes (neurodegenerativas).
• NO tienen cura y son MORTALES.
Priones
• Enfermedad del Kuru.

• Tribu Fore (Papúa Nueva Guinea).
• Comían los restos de sus difuntos.
• Niños y mujeres más afectados pues comían el cerebro.
• Perdida de coordinación y control de los músculos.
Técnicas de observación y estudio en biología
celular y molecular
• MICROSCOPIAS
• OTROS METODOS DE ESTUDIO

Microscopías
• MICROSCOPIO OPTICO
• Desarrollado a fines del s.XVI (“Microscopio compuesto”)
• Parte mecánica
• Parte óptica
Microscopías
• MICROSCOPIO OPTICO
• Desarrollado a fines del s.XVI (Microscopio compuesto)
• Parte mecánica
• Parte óptica
Microscopio óptico
• Parte mecánica
• Pie
• Subplatina
• Platina
• Columna
• Tubo
Microscopio óptico
• Parte mecánica
• Pie
• Subplatina
• Platina
• Columna
• Tubo
• Encendido
• Regulación de luz
Microscopio óptico
• Parte mecánica
• Pie
• Subplatina
• Platina
• Columna
• Tubo
Microscopio óptico
• Parte mecánica
• Pie
• Subplatina
• Platina
• Columna
• Tubo
Microscopio óptico
• Parte mecánica
• Pie
• Subplatina
• Platina
Tornillos macro y
• Columna micrométricos
• Tubo (enfoque)
Microscopio óptico
• Parte mecánica
• Pie
• Subplatina
• Platina
• Columna
• Tubo
Microscopio óptico
• Parte óptica
• Oculares
• Objetivos
• Condensadores
• Sistema de iluminación
Microscopio óptico
• Parte óptica
• Oculares
• Objetivos
• Condensadores
Microscopio óptico
• Parte óptica
• Oculares
• Objetivos
• Condensadores
Microscopio óptico
• Parte óptica
• Oculares
• Objetivos
• Condensadores
Microscopio óptico
• Parte óptica
• Oculares
• Objetivos
• Condensadores
Uso del microscopio óptico
• Video enseñando a reconocer los componentes de un microscopio
óptico, cómo enfocar y su cuidado.
• ¡¡Importante saberlo para los trabajos prácticos!!
Microscopio óptico
• Preparación de muestras
• Preparados sin teñir (en fresco)
• Especímenes transparentes o naturalmente coloreados (glóbulos rojos)
observados directamente.
Microscopio óptico
• Preparación de muestras
• Preparados teñidos
• Fijación: preservar morfología y composición química
✓Química
✓Física: congelación rápida
• Inclusión: confiere consistencia. Previa deshidratación
• Corte: obtención de delgadas laminas que permitan el paso de la luz
✓Microtomo (fijación química)
✓Criostatos o vibrátomos (fijación por congelación).
• Coloración, montaje y observación
Otros tipos de microcopia óptica
• Microscopía de Campo Oscuro
• Microscopía de Contraste de Fase y de Interferencia
• Microscopía de Fluorescencia
• Microscopía Confocal
• Microscopía de Polarización
Microscopía de Campo Oscuro
• Basada dispersión de la luz a nivel de interfases
• Se ilumina oblicuamente el objeto
• Se usa un condensador especial
• Para identificar algunos microorganismos de forma
característica (Treponema pallidum) en fresco
• Diagnóstico rápido de Sífilis
Microscopías de contraste de fases y de
interferencia
• Permiten estudiar material sin teñir y por lo tanto, células vivas.
• Usa objetivos y condensadores especiales y baja iluminación.
Microscopías de contraste de fases y de
interferencia
• Transforman las diferencias de densidad de los componentes celulares
en diferencias de amplitud de onda (luminosidad).
• Se convierten en imágenes visualizables.
Microscopía de contraste de fases y de
interferencia
• Acoplamiento a videocámara de alta
resolución.
• Transferencia de las imágenes a una
computadora.
• Procesamiento digital de la señal.
• Disminución señal/ruido.
• Estudio de estructuras muy pequeñas
• Seguimiento de procesos rápidos en
tiempo real.
Microscopía de contraste de fases y de
interferencia
• Comparación con microscopio de luz transmitida
Microscopía de Fluorescencia
• Fuente de iluminación (de mercurio o halógeno) emite luz ultravioleta
que tiene muy corta longitud de onda.
• Esta va a estimular a fluorocromos (ej. isotiocianato de fluoresceína)
• Emiten energía en forma de luz visible.
• Detectar antígenos celulares eucarióticos especialmente delicados (ej.
citoesqueleto, antígenos virales, etc.).
• Localización moléculas en una célula.
• Mayor sensibilidad y especificidad.
Microscopía de Fluorescencia
Citoplasma de células
infectadas con VRS
Espiroquetas
Autoanticuerpos
antinucleares
Microscopía confocal
• Variante de la microscopia de fluorescencia pero de mayor resolución.
• Delgado haz luminoso de luz láser monocromática estable de alta
intensidad.
• El detector sólo recoge la fluorescencia de la región enfocada.
• Elimina las imágenes desenfocadas que se observan en microscopía
de fluorescencia común.
• Las imágenes bidimensionales se obtienen y almacenan en forma
digital.
• Reconstrucciones 3D a partir de múltiples imágenes 2D apiladas
Porción de hoja de tabaco

Verde: Pared celular
Rojo: Núcleo
• Permite observar estructuras de tamaño menor a la resolución de un
microscopio óptico común (citoesqueleto).
• Puedo observar especímenes gruesos enteros vivos
• Permite observar estructuras de tamaño menor a la resolución de un
microscopio óptico común (citoesqueleto).
• Puedo observar especímenes gruesos enteros vivos
Larva de pez zebra

de 1mm de largo
• Se puede seguir procesos biológicos largos como la división celular
usando una videocámara acoplada.
Verde: microtúbulos
Amarillo: ADN
Microscopia de polarización
• Se usa un microscopio de campo claro al que se le agregan 2 filtros
polarizadores de la luz
• Se basa en el comportamiento de los componentes celulares y los
tejidos, ante la luz polarizada.
• Si el material es isotrópico, la propagación de la luz polarizada ocurre
en él con la misma velocidad, cualquiera sea la dirección del plano de
incidencia.
• En cambio, en un material anisotrópico, la velocidad varía según la
dirección que se considere.
• Birrefringencia (brillante)
Micrografía de cartílago hialino Tomado de

Laboratorio de Investigaciones Histológicas
Aplicadas. Universidad Nacional del Litoral.
Santa Fe, Argentina.
• Utilizado para el diagnóstico histopatológico, con el fin de detectar
algunas sustancias anormales, cuerpos extraños o sustancia amiloide.
Paciente con amiloidosis sistémica

A la izquierda con tinción de rojo
Congo los depósitos son de color
rojizo o naranja intenso. A la
derecha la muestra es visualizada al
microscopio de luz polarizada.
600x. Tomado de Arias L.
Nefropatología (104).
Microscopia electrónica
• Poder de resolución mucho mayor que el microscopio óptico
• Permite conocer directamente la ultraestructura de las células
• Fundamento
• En lugar de un rayo de luz usa un haz de electrones acelerados por un
potencial eléctrico (alto voltaje).
• Los haces de electrones pueden ser “enfocados” por electroimanes
hacia la muestra, del mismo modo que un rayo de luz es refractado al
atravesar una lente.
• Todo el sistema debe estar en alto vacío (presión negativa).
• Microscopia electrónica de transmisión (TEM)
• Microscopia electrónica de barrido (SEM)
• Fundamento
MO TEM SEM
• Diferencias con el microscopio óptico
• El límite de resolución es tan bajo, que la
imagen final puede ampliarse mucho más
que en el MO.
• En el ME la imagen se debe principalmente
a la dispersión de los electrones.
• El ME tiene mayor profundidad de foco.
Microscopia electrónica de transmisión
• Limitaciones
• El material biológico a usar debe ser
extremadamente fino (< 1-2µm).
• Corte con ultramicrótomo (micro
cuchillas de diamante).
• Debe fijarse, deshidratarse y teñirse con
sales de metales pesados.
• Ejemplos
• Ejemplos
• Ejemplos
• Ejemplos
• Ejemplos
• Ejemplos
• Ejemplos
• Ejemplos
• Ejemplos
• Ejemplos
• Ejemplos
• Ejemplos
• Ejemplos
• Ejemplos
Microscopia electrónica de barrido
• Permite observar la superficie de las muestras
• Deben ser conductoras
• Cobertura con metales conductores como el oro.
• La imagen se obtiene debido a la detección de
los electrones «devueltos» por la muestra.
• Se generan imágenes con una resolución entre
4-20 nm y una gran profundidad de campo
(permite distinguir los más mínimos detalles).
• Ejemplos
Células de la sangre
Cabeza de espermatozoide
• Ejemplos
cultivo celular de
neuronas de la
corteza cerebral de
rata en apoptosis
Eritrocito
infectado por
micoplasmas
Comparación SEM y TEM
Comparación SEM y TEM
Otros métodos de estudio
• Criofractura y Congelación-grabado (Freeze-etching)
• En combinación con TEM y/o SEM.
• Estudio de la estructura de las membranas celulares.
• Se congela el tejido rápidamente (-196 °C) y se fractura con un
elemento cortante.
• Se aplica una fina capa de metal (platino) sobre la superficie.
• Se disuelve el tejido y se observa la replica hecha con el metal con el
microscopio electrónico
• Cristalografía de rayos X
• Estudio de la estructura 3D de
biomoléculas en estado cristalino
• Proteínas (solas o en complejos
proteicos).
• ADN/ARN.
• Complejos proteína/ADN o
proteína/ARN.
• Estructura → FUNCIÓN
• Otras técnicas para determinar estructura 3D de biomoléculas
• Resonancia magnética nuclear (RMN)

• Cryo-EM
• Moléculas en solución
• Condiciones más parecidas a la célula
• Menor resolución que cristalografía
• Cultivo celular
• Para estudio de células vivas.
• Aplicaciones:
✓Cáncer
✓Enfermedades virales
✓Estudios bioquímicos y estructurales
• Cultivo celular
• Tipos:
✓Primarios (tejido se disgrega y se cultivan sus células individuales)
✓Secundarios (células cultivadas a partir de cultivos primarios)
✓Líneas celulares (células adaptadas a crecer indefinidamente en
medio de cultivo)
• Cultivo celular
• Tipos:
• Cultivo celular
• Medio rico con todos los nutrientes necesarios.
• Peligro de contaminación con microorganismos
indeseados (micoplasmas).
• Condiciones de esterilidad muy estricta.
• Cuarto de cultivo separado.
• Cabina de flujo laminar (genera ambiente estéril dentro).
• Seguridad adicional si trabajos con virus que infectan a
humanos.
• Cultivo celular
• Medio rico con todos los nutrientes necesarios
• Peligro de contaminación
• Condiciones de esterilidad estricta
• Cuarto de cultivo separado
• Cabina de flujo laminar
• Citoquímica
Identificar y localizar compuestos químicos dentro de la célula usando
microscopía óptica.
• Histoquímica
Idem. a nivel tisular (tejidos).
• Ejemplos:
✓Lípidos (Sudán)
✓Proteínas (PAS, Gomori)
✓Carbohidratos (PAS amilasa)
✓ADN (Feulgen)
• Citoquímica
• Ej. Mieloperoxidasa (enzima) en células de la sangre.
• Histoquímica
• Ej. Técnica de PAS (todo lo que tenga HDC)
• Si combino citoquímica e histoquímica con el uso de anticuerpos
específicos que reconozcan y marquen ciertas biomoléculas.
• Inmunocitoquímica
• Inmunohistoquímica
➢Métodos directos
➢Métodos indirectos
✓Microscopía óptica (común o fluorescencia)
✓Microscopía electrónica
• Radioautografía
• Marcación de componentes celulares
(ADN, ARN, proteínas) con
radioisótopos.
• Emiten partículas radioactivas
• Detección mediante una película
fotográfica sobre un corte de tejido
• Localizar material radiactivo en los
tejidos. Proteína GAD67 marcada radioactivamente
en zona subventricular en cerebro de
embrión de rata.
• Citometría de flujo
• Células específicas se “marcan” con anticuerpos
fluorescentes.
• Mezcla de células se pasa por el equipo.
• Pasan una a una en fila por un tubo muy delgado
• Una luz laser incide sobre cada una y el detector
mide la señal.
• Se mide cuantas tienen la marca fluorescente.
• O cuantas tienen cierta propiedad física
(dispersión de la luz)
• Separar y/o cuantificar poblaciones celulares
específicas que posean ciertas moléculas en su
superficie o ciertas características físicas.
• Cuantificar linfocitos CD4+ y CD8+ en pacientes
con VIH-SIDA.
• Hemograma
• Centrifugación diferencial
• Fraccionamiento celular
• Aislar sus distintos componentes
• Pasos:
• Ruptura química o física del tejido
• Disolución en solución de sacarosa (osmolaridad) VELOCIDAD
• Serie de centrifugaciones a velocidades crecientes del
sobrenadante generado en el paso anterior
Obtener el
coeficiente de
sedimentación (S)
• Electroforesis
• Separación de biomoléculas mediante un campo
eléctrico.
• Proteínas: gel de poliacrilamida y tinción con azul
de coomasie o Ag2NO3
✓SDS-PAGE: separación por PM (tamaño)
✓2D-PAGE (IEF+SDS-PAGE): separación por punto
isoeléctrico y PM (tamaño).
• ADN/ARN: gel de agarosa y tinción con bromuro

de etidio.
• Electroforesis
• Separación de biomoléculas mediante un
campo eléctrico.
• Proteínas: gel de poliacrilamida y tinción con
“azul de coomasie” o Ag2NO3
✓2D-PAGE (IEF + SDS-PAGE): separación por punto
• ADN/ARN: gel de agarosa y tinción con

bromuro de etidio.
• Electroforesis
• Separación de biomoléculas mediante un campo
eléctrico.
• Proteínas: gel de poliacrilamida y tinción con azul
de coomasie o Ag2NO3
✓2D-PAGE (IEF+SDS-PAGE): separación por punto
• ADN/ARN: gel de agarosa y tinción con bromuro

de etidio (fluorescente).
• Cromatografía
• Detección, separación y
purificación de biomoléculas.
• Cromatografía Liquida:
compuestos de medio/alto PM.
• Cromatografía Gaseosa:
compuestos de bajo PM.
• Acoplamiento a espectrómetros
de masa para mayor sensibilidad
de detección.
• Análisis molecular del ADN e Ingeniería genética
• Conjunto de técnicas que nos permiten estudiar los genes.
• Métodos basados en la hibridación de los ácidos nucleicos

(desnaturalización y renaturalización).
✓Northern Blot: permite medir los niveles de un ARN determinado.
✓Southern Blot: permite medir el numero de copias de un ADN
determinado y/o ver la estructura de un determinado gen.
• Métodos de secuenciación del ADN
• Permiten “leer” el código genético de las moléculas de ADN.
• Qué información “codifican”.
• Predecir la función de las mismas.
• Métodos basados en ADN recombinante
• Manipular ADN/ARN in-vitro y luego insertarlo en una célula.
✓PCR (reacción en cadena de la polimerasa): hacer múltiples
copias de un fragmento de ADN in-vitro.
✓Enzimas modificadoras del ADN: permiten cortar y pegar
fragmentos de ADN distintos entre sí (“recombinación” in-vitro).
• Estudiar la función de los genes.
• Métodos basados en ADN recombinante
Izquierda: ratón normal

Derecha: ratón modificado genéticamente con un gen defectuoso involucrado en la reparación del ADN
BIBLIOGRAFIA PARA ESTUDIO
• Powerpoint (Campus virtual)
• Libro De Robertis (Campus virtual)

✓Capitulo 1: Clasificación celular
✓Capitulo 23: Técnicas de observación y estudio en biología celular y
molecular
martin.mayta@uap.edu.ar

Estructura Y Función I: Carrera de Medicina

Cargado por

Información del documento

Título original

Derechos de autor

Formatos disponibles

Compartir este documento

Compartir o incrustar documentos

Opciones para compartir

¿Le pareció útil este documento?

¿Este contenido es inapropiado?

Copyright:

Formatos disponibles

Estructura Y Función I: Carrera de Medicina

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

ESTRUCTURA Y FUNCIÓN I

ADN Desnudo y circular Lineal y combinado con proteínas

Cromosomas Únicos Múltiples

Division Fisión binaria Mitosis/Meiosis

Ribosomas 70S* (50S+30S) 80S (60S+40S)

*S es la unidad Svedberg de sedimentación que depende de la densidad y la forma de la molécula

• Bacterias Poca o ninguna

MULTICELULARES • Animales Diferenciación de distintos

• Hongos Citoplasma continuo

• FOTOTROFOS: usan luz solar

• AUTOTROFOS: usan CO2 u otros compuestos

• Partículas proteicas “mal plegadas” se acumulan en el cerebro.

• Enfermedad del Kuru.

• OTROS METODOS DE ESTUDIO

• Desarrollado a fines del s.XVI (“Microscopio compuesto”)

• Desarrollado a fines del s.XVI (Microscopio compuesto)

Porción de hoja de tabaco

Larva de pez zebra

Micrografía de cartílago hialino Tomado de

Paciente con amiloidosis sistémica

• Resonancia magnética nuclear (RMN)

• ADN/ARN: gel de agarosa y tinción con bromuro

• ADN/ARN: gel de agarosa y tinción con

• ADN/ARN: gel de agarosa y tinción con bromuro

• Métodos basados en la hibridación de los ácidos nucleicos

Izquierda: ratón normal

• Libro De Robertis (Campus virtual)

También podría gustarte