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Programa de Entrenamiento
• BD Diagnostics – WH&C
Objetivo • Clases:
– Metodos y técnicas de
colección de especímenes
• Cualificar al – Procesamiento de muestras
participante en en BD PrepStain™
evaluación de – Morfología (didáctico)
laminillas de CBL
Citología de Base
Líquida • Revisión de laminillas
BD SurePath™ • Test de Evaluación
– Certificación
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Recolección de Muestras
• “El proceso BD SurePath™ inicia con personal cualificado usando . . .
• Dispositivos de tipo cepillo e.g., Rovers Cervex-Brush® , Rovers Cervex-Brush®
Combi ó
• Cepillo endocervical / Espátula de Ayre
e.g. Cytobrush Plus GT & Pap Perfect™ espatula”
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Transferencia de la Muestra
• Desprender el cabezal y colocarlo
dentro del Vial BD SurePath™
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“El Proceso de Enriquecimiento Celular” 1er prog centrifuga 2o prog centrifuga
2 min @ 200 rcf 10 min @ 800 rcf
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Operator’s Manual – PrepStain slide Processor – 780-06181-00 Rev B
Preparación y Tinción de laminillas
BD PrepStain™
Transferencia Automatica de muestras a las
Cámaras de sedimentación
Tinciones administradas
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Operator’s Manual – PrepStain slide Processor – 780-06181-00 Rev B
Enriquecimiento Celular
CARACTERÍSTICA BENEFICIO
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Morfología de BD SurePath™
• Características Generales
• Calidad de la Muestra
• NILM a Cancer
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Características Generales de
Morfología de BD SurePath™
CARACTERÍSTICA OBSERVACIÓN
Suspensión Celular (Base liquida) Células al azar
CLAVES ! ! ! Células de aspecto natural, mas
redondas y levemente mas
pequeñas
Areas de deposición celular Mínimos espacios vacíos
Uniformes & altamente pobladas
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Evaluación de Adecuación de la Muestra
• Guías recomendadas Bethesda edición 20141
• Celularidad
– Adecuada (+5,000 cels)
– Inadecuada ( <5,000 cells) Factores oscurecedores: > 75% =
Inadecuada
– Conteo recomendado del diámetro transversal : 8 - 9 cels* por HPF
5000 cells
1. Solomon D, Nayar R. The Bethesda System for Reporting Cervical Cytology. 4th edition. 2016. Springer-Verlag New York, Inc.
Nota: cambios aplican en muestras vaginales y POST – Radioterapia (+2,000 CELULAS)
* FN22 eyepiece/40x objective
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• Atrofia
• Reparación
• Radiación
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NILM = Negative for Intraepithelial Lesion or Malignancy
ECC’s
ECC’s
ECC’s ECC’s
ECC’s
ECC’s
Endocervicales & Metaplasticas
NOTA: Metaplasticas
recuerdan cels parabasales
NOTA: Metaplasticas
Dx Diferencial: ASC-H
HSIL
NILM: Atrofia con Patrón de Céls Solitarias
NILM: “Atrofia profunda” con Grupos, Cels Sueltas & Núcleos
desnudos
NILM: Vaginitis Atrófica
Reparación
Cambios Reactivos
Cels Endocervicales Reactivas
• Nucleos de bordes regulares,
lisos
• CBL: los grupos son mas
redondos y 3D
Reparación Típica versus Reparación Atípica
Típica Atípica
Reparación & Reparación Atípica
Halo Peri-Nuclear
SIN REFORZAMIENTO
NILM: Cambios por Radiación
• Policromasia
• Vacuolización
• Citomegalia
NILM Radiación: Multinucleación & Citomegalia
NILM: Micro Organismos
• Trichomonas vaginalis
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Organismos fúngicos consistentes con Candida spp
• Pseudo-Hifas
• Lanzas
• “Rouleaux”
• Brochetas
“Shish Kebab”
• NOTA: Cándida Glabrata o Torulopsis. NO FORMA PSEUDOHIFAS, y sus levaduras presentan halos En Pacientes
INMUNOCOMPROMETIDO
Trichomona vaginalis
• +PEQUEÑO
• Cometas
• Flagelos
• Gránulos
• Poli-Bolas
Cambios en flora, sugestivos de Vaginosis Bacteriana
“Clue Cells”
“COCO BACILOS”
Cubriendo cels escamosas
En fondos limpios
Herpes simplex virus
• Nucleo en vidrio esmerilado
• Reforzamiento de la periferia
Nuclear
• Inclusiones intranucleares con halo
(Cowdry A)
• 3 M’s (Multinucleación,
Moldeamiento y Marginación)
Herpes: Cambios tempranos
Bacteria consistent with Actinomyces spp.
• Organismos filamentosos de
angulos agudos
• Mas delgados y finos
• Menor inflamacion acompañante
Células Escamosas Atípicas
• ASC-US
• ASC-H
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ASC-US
• Las células pueden aparecer
más pequeñas
• Hay mayor proporción N/C
en dos dimensiones debido a
la fijación.
• Hay redondamiento pues no
hay aplanamiento contra la
laminilla.
• Tienen un halo poco definido
ASC-US
• Lámina engrosada de células
cohesivas.
• Focalmente núcleos crecidos,
citoplasma anaranjado.
• Vacuolas citoplasmáticas mal
formadas
• Binucleación.
• Seguimiento: LIBG
ASC-US
• Mujer perimenopáusica.
• Algunas con leve hipercromasia.
• Leve aumento N/C.
• Binucleación ocasional, halos.
• No se observan
microorganismos.
• Seguimiento: HPV y citología (-).
ASC-US
• Mujer posmenopáusica.
• Células parabasales.
• Atipia focal.
• Casi siempre son VPH (-)
ASC-US
• Nucleo 2.5 a 3 veces de una c. Intermedia
• Contornos levemente irregulares
• Falta de aplanamientos
ASC-US
• Bi / Multinucleación
• Halos mal definidos (Koilocitosis incompleta)
ASC-US
• Relación N:C
• Bi-nucleacion
• Leve hipercromasia
ASC- H
• Celulas pequeñas con Grandes Nucleos
• Iregularidades Nucleares
• Pueden agruparse
Lesión Intraepitelial de Bajo Grado
• LSIL
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LIEBG = LSIL
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LSIL
• Coilocitos.
• Condensación del citoplasma
alrededor de la periferia.
• La hipercromasia es menos
evidente en citología en base
líquida.
• Unica diferencia con la
citología convencional.
LIEBG
• Crecimiento nuclear.
• Hipercromasia.
LSIL: Hojas de Cels
LSIL: Note el incremento del tamaño Nuclear
• LEIAG
• LEIAG con extensión glandular endocervical
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LIEAG = LAG = HSIL
• Se ve con mayor frecuencia células anormales dispersas y no en sicicios o
láminas.
• Las células aisladas pueden estar presentes en los espacios vacíos entre los
grupos celulares.
• Están presentes relativamente pocas células anormales.
• Las células suelen ser bastante pequeñas y pueden ser confundidas con
histiocitos o células endometariales.
• Los núcleos pueden ser normocromáticos o aún hipocromáticos, pero todas las
otras características de alto grado están presentes.
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LEIAG: Cels Sueltas
Grupo sincicial.
Sobreposición.
Hipercromatismo. • LBC!!!Grupos saturados e hipercromáticos
Buscar células sueltas. • Bordes externos aplanados
Bx: LAG con penetración glandular. • “Whirling” Remolino al centro
LAG con penetración glandular
• Grupo de células
fusiformes que se sueltan,
recuerdan el estroma
endometrial.
• Las células muestran
extemos cónicos.
• Cromatina atípica y
contornos nucleares
irregulares más acorde con
LAG.
• Compara con endometrio.
LAG
• Grupo tridimensional.
• Semeja endometrio.
• El núcleo es pequeño.
• Cromatina atípica y
contornos nucleares
irregulares.
LAG
• Mayor cantidad de
citoplasma.
• Debe de diagnosticarse
cuidadosamente
• Buscar más células de
alto grado.
Cels Endocervicales: simil a LEIAG
Patrón en
Panal de
abeja
Cels Endocervicales o Alto grado ?
RESPUESTA
Arreglo en Panal ?
LEIAG
LEIAG
ASC-H
LEIAG con extensión Glandular
•Nucleolos presentes
•Hendiduras
•Formas columnares
•Grupos Llenos Hipercromaticos
LEIAG con extensión Glandular
• En sincicios.
• Mover el foco para ver
diferentes planos.
ASC-US en atrofia
• Seguimiento: negativo
Carcinoma Escamoso / Epidermoide
NO QUERATINIZANTE QUERATINIZANTE
• Menor cantidad de material. • Perlas corneas
• Grupos con formas
redondeadas.
• Diátesis tumoral presente pero
sutil.
• Se ve “colgando” de los grupos
tridimensionales.
Carcinoma epidermoide
• 59 años
• Posmenopáusica, con
sangrado.
• Nucléolo prominente.
• Distribución de la
cromatina anormal.
• Células malignas sueltas.
• Diátesis en el fondo.
Carcinoma Escamoso - Pleomorfismo
Diferentes fondos
Inflamatorio Lubricante
Carcinoma epidermoide
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Celulas Endocervicales: Orientacion
En punta
Cercos
Panal de abeja
Células endocervicales normales con
“efecto del cepillo”
• Por una toma vigorosa.
• Células uniformes.
• Cromatina finamente
granular.
• Bordes citoplasmáticos
bien definidos.
Metaplasia Tubaria
• empalizada
• Hipercromasia
• Cilios
Metaplasia Tubaria
• Pseudoestratificacion
• Nucleos Redondos a ovales
• Hipercromasia
• Cromatina finamente granular: y distribucion
uniforme.
• Fondo limpio
Metaplasia Tubaria: Cilios
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NILM: Celulas Endometriales Benignas
• Glándulas
endometriales
tubulares o con
formas geométricas.
• El estroma se
encuentra adyacente
generalmente.
Células Atípicas Endocervicales
Adenocarcinoma in-situ
Adenocarcinoma Endocervical
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Células glandulares atípicas en
base líquida
• Las células son más redondeadas.
• Los grupos son más tridimensionales con células
apiladas, siendo difícil observar las células en el
centro de los grupos.
Células endocervicales atípicas
• Células glandulares
reactivas asociadas a DIU.
• Crecimiento nuclear,
nucléolo, citoplasma
vacuolado.
• En ausencia de historia se
puede diagnosticar como
células endocervicales
atípicas.
Células Atípicas Endocervicales
• grupos llenos
• Hipercromasia
AIS
Referencia: Cels Normales en Perspectiva
• Hileras
• empalizada
• Hipercromasia
• N:C incrementado
Células Atípicas Endocervicales
Apoptosis
Mitosis
Biopsy: AIS
Células endometriales atípicas
• La hipercromasia nuclear
es más evidente.
• El nucléolo también es más
evidente.
• Mujer de 64 años con
sangrado.
• Seguimiento:
adenocarcinoma
endometrial grado 1
Adenocarcinoma in situ en base líquida
• Rosetas
• Pseudostratificacion
• N:C incrementado
• Nucleo OVALADO
• Cromatina en “sal & pimienta”
• “Feathering” = Plumaje
Adenocarcinoma in situ
• Mujer de 25 años.
• Pseudoestratificación.
• Protusión.(a)
HSIL AIS
Adenocarcinoma
Adenocarcinoma endocervical
invasor en base líquida
• Los grupos tienen a ser densos, esféricos y tridimensionales. En las porciones
centrales el núcleo es casi totalmente obscurecido.
• Es más frecuente ver células aisladas.
• La cromatina es más vesicular con distribución irregular de la cromatina y cromatina
clara.
• El nucléolo es más prominente.
• La diátesis es menos aparente y consiste en agregados de material proteináceo e
inflamatorio, se ve pegado a la superficie de las células o de los grupos “diátesis
pegajosa”.
• También se observa como un fino “algodón de azucar”
Adenocarcinoma invasor
• Grupos densos
sobrepuestos.
• Difícil ver el detalle
nuclear.
Adenocarcinoma EC Invasor
Diatesis
• Hojas 2-D
• Cels sueltas – solas - individual
• Citoplasma Granular / vacuolado
• Irregularidades en Memb Nuclear
• Prominente nucleolo
Adenocarcinoma Endocervical
Diatesis
• Arquitectura glandular.
• Núcleo crecido.
• Cromatina irregular.
• Nucléolo muy aparente.
• Contornos citoplasmáticos
bien definidos
• Dx diferencial con
reparación.
Adenocarcinoma endometrial en
base líquida
• Grupos tridimensionales y
papilas.
• Núcleo grande con
cromatina finamente
granular.
• La diátesis tumoral es
menos frecuente y se ve
finamente granular,
“pegajosa” a los grupos o
en forma aislada.
Adenocarcinoma endometrial
• Citoplasmas
vacuolados llenos de
polimorfonucleares.
Céls Atípicas Glandulares
Céls Atípicas
Endometriales
Adenocarcinoma Endometrial
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Cambios por Dispositivo Intra Uterino
NILM de Comparacion
Adenocarcinoma Endometrial
Neutrofilos Engullidos
Biopsy: Grade II
Adenocarcinoma Endometrial
Papillary Serous
Adenocarcinoma Endometrial
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Adenocarcinoma de colon
metastásico a cérvix
• Estructura columnar
puede confundir con
adenocarcinoma
endometrial.
• Presencia de materia
fecal.
Carcinoma de mama lobulillar
metastásico a cérvix
• En una citología
atrófica
• Pequeños grupos de
células.
• Citoplasmas
vacuolados.
• Receptores a
estrógenos (+)
Cancer Metastásico
Ovario
Mama
Cancer Metastásico
T. de Falopio
Ca de Páncreas en fondo
atrófico
Educational & Technical References
• Demay MR. The Pap Test. 2005. ASCP press, Chicago. Pgs 109-152
• Fadare O, Ghofrani M, Chacho MS, Parkash V. The significance of benign endometrial cells
in cervicovaginal smears. Adv anat pathol. 2005 sept;12(5):274-87
• Solomon,d, Nayar R. The Bethesda System for reporting cervical cytology 4th
edition. 2016. Springer-verlag. Ny, NY.
• Wilbur dc, Mulford dk, Sickel jz,Atkison KM. An Approach to Endocervical Atypia: Normal
Pathology and Mimickers of Pathology. Cytopathology 1997 (vol 2); ASCP reviews in
pathology. ASCP press, Chicago. Pgs 115-143.
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GRACIAS!
jorge.garcia.aleman@bd.com
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