Careeterioficas y propiedades del nuclee 89
Significado biológico
Antes de que se conociera la función del DNA,
una serie de observaciones permitieron formu-
lar las siguientes afirmaciones del significado
biológico del núcleo:
g. Es indispensable para la vida de la célula.
Su supresión causa la muerte celular.
Rige la diferenciación celular. Si un frag-
mento del alga Acerabularia que contenga
el núcleo se separa del resto del citoplas-
ma, este fragmento regenera el alga entera.
Si se trasplanta el núcleo de una especie de
Acetabularia (especie I con corola terminal)
al citoplasma enucleado de otra especie de
Aren/bu/aria (especie II sin corola), ésta ter-
mina convirtiéndose en la I.
Conserva su potencialidad en células di-
ferenciadas. En el desarrollo embrionario,
a partir de un núcleo (el del cigoto) se for-
man todas las células del individuo. Cada
célula y cada núcleo se especializan en un
sentido diferente. Sin embargo, los núcleos
conservan su potencialidad. Así, al tras-
plantar un núcleo de enterocito de rana a
un óvulo de rana cuyo núcleo se destruyó
por irradiación, se desarrolla un embrión de
rana normal (experimentos de donación
de Gurdon).
Esto ocurre porque el DNA nuclear codifica
el producto de la síntesis proteica celular (todas
las proteínas celulares incluidas las enzimas que
controlan el proceso de síntesis) y, al duplicarse.
permite la formación de células idénticas (divi-
sión celular). Este DNA es característico no dc
cada tipo celular, sino de todas las células de un
mismo individuo, por diferentes que éstas sean:
salvo excepciones (células germinales, poliploi-
des, anomalías cromosómicas, etc.), que serán
analizadas más adelante. La cantidad básica de
DNA (valor c) es constante para todas las célu-
las diploides normales de cada especie; así en
Mauricio Femandez
90 Estructure y espina:in geniCa
el hombre es de unos 6 pg mientras que en uro-
delos varía de 48 a 168 pg según la especie. En
general, aumenta con la escala evolutiva, salvo
en vertebrados, donde varía en gran medida (es
mucho mayor en los anfibios que en las aves,
por ejemplo).
Sin embargo, hay una considerable influen-
cia del citoplasma en la función nuclear. Así,
núcleos de huevos de rana trasplantados a hue-
vos enucleados de la misma especie desarrollan
embriones de esta especie; pero no prospera el
desarrollo si se u-asplántan a huevos enucleados
de otra especie. Núcleos de eritrocitos de pollo
(que habitualmente son inactivos) se vuelven
activos al trasplantados al citoplasma de otros
tipos celulares de la misma especie en cultivo,
como fibroblastos.
Componentes
Las células que se dividen siguen un ciclo celu-
lar, en el que se distinguen dos periodos: inter-
fase (con las fases Gi, S y G,) y mitosis (M) o
división celular (véase Etapas del ciclo celular,
en el capítulo 8).
El núcleo interfásico o núcleo propiamen-
te dicho consta de tres componentes bien dis-
tinguibles desde el punto de vista morfológico
(figura 3-1):
Cromatina. Corresponde al DNA y proteí-
nas asociadas, principalmente las historias.
La cromatina interfásica (o cromosomas
interfásicos) adopta dos configuraciones:
masas muy densas, dispuestas sobre todo en
la periferia nuclear (heterocromatina): y fi-
nas fibrillas distribuidas por todo el núcleo
(ericromatina).
Nucléob. Expresión de la síntesis de RNA
ribosómico.
Envoltura nuclear. Una doble membrana
formando una cisterna que separa el núcleo
del citoplasma.
Fotocopias e Impresiones color / BYN
El resto del núcleo, es decir, las sustancias
de fondo en las que se encuentran embebidos
la cromatina y el nucléolo, es el nucleoplas-
ma, también llamado carioplasnia o jugo nu-
clear, que constituye una fase acuosa en la
que se encuentran principalmente proteínas
no histónicas, asociadas o no a los ácidos nu-
cleicos y de las que se tratará a continuación en
el apartado Componentes de la cromatina. En el
nucleoplasma hay además enzimas, cofactores.
minerales y productos intermedios de la glu-
cólisis. Entre los componentes más detectados
están ATP. NAD, acetil-CoA, K. Na' y sobre
todo Ca" y Mg'.
Se discute si hay un citoesqueleto en el nú-
cleo. Además de los componentes de la lámina
nuclear de los que se tratará más adelante, se
habla de una matriz nuclear o armazón nuclear.
Esta matriz sería la trama fibrosa (se han ob-
servado filamentos de aproximadamente 10 nm
de espesor) que queda en el núcleo tras elimi-
nar los ácidos nucleicos y las proteínas unidas
a ellos (ribonucicoproteínas y desoxirribonu-
cleoprotcínas) y los lípidos. Dicha matriz con-
tiene proteínas difíciles de aislar, las cuales
regularían la replicación y transcripción del
DNA. Algunas de estas proteínas unen entre
sí unas determinadas secuencias no codifi-
cantes del DNA. ricas en A y T, denominadas
regiones asociadas a la matriz (MAR) y pa-
recen intervenir en moldear los plegamientos
de la cromatina (figura 3-6).
En el núcleo en mitosis o división se ha
perdido esta organización: la envoltura nuclear
y cl nucléolo han desaparecido y la cromatina.
siendo esencialmente igual, cambia de aspec-
to para configurar los cromosomas mitóticos o
cromosomas propiamente dichos. Cada cromo-
soma presenta dos cromátidas iguales. unidas en
un punto denominado constricción primaria o
centrómero (figura 3-8).
Estructura de la cromatina.
El cromosoma
Componentes de la cromatina
La cromatina es el componente más abundante
del núcleo y está constituida por DNA, unido
principalmente a unas proteínas denominadas
historias (figura 3-1). La cromatina, tanto la del
núcleo en interfase como la que forma el cro-
mosoma durante la mitosis, se tiñe con colo-
rantes básicos (figura 1-9A) y, de acuerdo con
su naturaleza de ácido nucleico. absorbe la luz
ultravioleta (de 260 nm de longitud de onda).
También muestra una reacción positiva frente a
las siguientes pruebas citoquímicas específicas
para DNA:
El test de Feulgen. Esta técnica fue uno de
los primeros análisis citoquímicos de am-
plia utilización para teñir de manera selec-
tiva DNA (sin teñir el RNA) (figura I -9D).
El primer paso consiste en hidrolizar el
RNA mediante una dilución ácida débil de
CIH, mientras que el DNA sólo es elimi-
nado en parte. El principal efecto sobre el
DNA es la liberación de las bases púricas,
quedando libres los radicales aldehídos de
las pentosas. En un segundo paso, estos
radicales dan la reacción de Schiff al ser
tratados con leucofuscina, y se demuestra
así el DNA.
Tinción con verde metilo-pironina. El
verde metilo tiñe el DNA mientras que la
pironina tiñe el RNA. Con esta técnica
la cromatina y cromosomas quedan teñidos
en verde.
Tratandento enzirnatico con nucleasas.
La DNAasa disuelve la cromatina en su ma-
yor parte permaneciendo intacto el RNA.
Lo contrario ocurre en el tratamiento con
RNA ata.
Cel: 264 4386732
 Estructura de la amotina El tramosoma 91
92 Estructura y expresión llémea

DNA en la cromatina se denomina genoma. El genoma •

El DNA es una doble hélice, de casi 23 nm

de ancho, como demostraron Watson y Crick
utilizando difracción de rayos X. Cada cadena
consiste en la repetición de un grupo formado
por los tres siguientes elementos: base, pentosa
y radical POt. Hay cuatro bases en cl DNA:
dos bases púricas: adenina (A) y guanina (G);
dos bases pirimidínicas: timina (T) y citosina
(C) (figura 3-2). La pentosa es la 2'-desaárribo-
sa (los carbonos de la pentosa se designan con
apóstrofe para distinguidos de los de las bases).
Cada base se une al carbono 1 de la pentosa. La
unión base + pentosa forma un desoxinucicó-
sido. Hay cuatro desoxinucleósidos: desoxia-
denosina, desoxiguanosina, desoxittmidina y
desoxicitidina. Cada desoxinucleósido se une
al grupo PO.; en el carbono 5' de la pentosa.
La unión desoxinucleósido + fosfato forma un
carbono 3'. Ambas cadenas se disponen en sen-
tido contrario: esto es, son antiparalelas. En la
doble hélice, las bases se disponen enfrentadas
humano se extiende unos 3 X 109 pb. Comprende
alrededor de 21000 genes que codifican proteínas,
•
9000 que no codifican y 20000 que no se expresan.
desoxinuclehtido. Hay cuatro desoxinucleóti- siguiendo un patrón: A con T y C con G.
dos: desoxiadenosín monofosfato, desoxigua-
nosín monofosfato, desoxiiirnidin monofosfato
Cada región del DNA que produce una mo-
lécula de RNA funcional se denoniina gen. Cada
Una célula puede expresar entre 10000 y 15000
genes, que. en el hepatocito, son responsables de la •
e
gen puede tener mira de 100000 pares de bases formación de aproximadamente 10(00 proteínas
y desoxicitidín monofosfato. La longitud de
0), aunque hay genes de hasta dos millones de pb. diferentes, de las que algunas pueden encontrarse
cada desoxinucleótido es 1/3 nm. La unión entre
La totalidad de la información génica contenida repetidas haga un millón de veces.
desoxinucleótidos para formar la cadena o hebra
de DNA es por la unión del PO:- de un desoxi-
nucleótido con el carbono 3' de la desoxirribo-
sa del siguiente: de Modo que el P041- une los
carbonos 5' y 3' de las pentosas. Esto implica
que cada cadena tiene una polaridad: en uno de
sus extremos queda un fosfato unido al carbo-
no 5' de la pentosa y en el otro queda libre el

H O

0-P=o
H,
51-Tal Doscoárbosa
4 1* 0=P-0
41/4 marra
411 Guanos
.c
O Tima
PASE
o
0= P-0 Camina
06
Nucle0SoMaS dispuestos helicoicialmenie (casta seis se completa una vuelta)
OPO
o BABE Protemas de unión al DNA especificas de secuencias determinadas
DesannucleOstrb
0=11-0
Desoxinucleóbdo

N1-, O NH2
9
á N H Regiones de DNA hiperSenSibles a la digeshon con DNAasa
N C-Cit N- C -H
'
bH I 0 CH ir Figura 3-3. A: Estructura de la cadena de nucleosomas. Las histonaS H2A, 020. H3 y H4 se organizan en ap
C / Har4,C% y C -..„ / octárneros, de unos 10 nm de diámetro, sobre los que se enrolla la doble hélice de DNA formando los nucleo.
N N
somas. La histona H1 une los nucleosomas para formar las fibras de cromatina de 30 nm. Unión de los e
Menina H GUAllina l
H
nucleosomas mediante la histona H1 para formar la fibra de cromatina de 30 nm. Los nucleosomas se disponen
Bases Trina Camina formando una hélice cuyo periodo se repite cada seis nucleosomas. e: Vista transversal de la fibra de 30 nm.
En determinadas regiones del DNA quedan espacios entre los nucleosomas donde se intercalan proteínas de W
Figura 3-2 Estructura molecular del DNA.
unión al DNA.

Mauricio Feo rfliez Fotocopias e Impresiones color / BYN Cel: 264 4386732
••••••••••••••••••••••••••••••••••
Las historias son pequeñas proteínas con una pro-
Porción muy alta de aminoácidos cargados posi-
tivamente. Hay cinco historias: la Hl y las cuatro
historias nucleosórnicas; éstas son: la 112A (129
aminoácidos y 14 kDa), la H28 (125 aminoáci-
dos y 13.8 kDa), la 1-13 (135 aminoácidos y 15.3
kDa) y la 114 (102 aminoácidos y 11.3 kDa).
Las cuatro historias se reúnen para dar lugar a un
tetrámero. Dos tetrámcros se unen para formar
un octámero, que forma una esfera de aproxi-
madamente 10 x 10 nm, alrededor de la cual se
enrolla el DNA, constituyendo el nucleosama o
unidad básica de la estructura de la cromatina
(figura 3-3A). La estructura de las histonas nu-
cleosómicas se ha mantenido muy constante en
la evolución: sin embargo, existen variantes mi-
noritarias de estas histonas (excepto de la 114)
que se insertan en regiones específicas.
La histona 111(244 aminoácidos y 23 kDa)
es muy heterogénea en la evolución, y se encuen-
tran varios tipos diferentes en la misma célula.
Cada H I presenta una región globular central
y dos extremos o colas (carboxilo y amino). El
ensamblaje de las histonas Hl en la fibra de cro-
matina es necesario para el plegamiento helicoi-
dal de la fibra.
Las histonas son proteínas básicas, pero la
afinidad de la cromatina por los colorantes bá-
sicos se debe a que el DNA se encuentra en ele-
vada proporción (50% DNA, 50% histonas) y,
como se ha dicho, rodeando a las historias.
En el núcleo de los espermatozoides de mu-
chas especies, las histonas son sustituidas en
forma parcial o total por otras proteínas también
básicas, llamadas protaminas, ricas en arginina
y lisina y de menor peso molecular que las tris-
tonas (4 kDa).
En menor proporción hay otras proteínas,
como las proteínas ácidas del tipo fosfoproteí-
nas, que son abundantes en la eucromatina. Las
proteínas ácidas se caracterizan por su rápida
velocidad de recambio (turn-over) y porque se
Mauricio Fernandez
Estructura de la cnamatina. El cromosoma
sintetizan durante todo el ciclo celular, a dife-
rencia de las histonas que sólo se sintetizan en el
periodo S. Muchas de estas proteínas ácidas for-
man complejos con las histonas, actuando como
ehaperonas (modeladoras) de &nonas para me-
jorar la formación del octámero sin ser parte del
producto final, por toque también se denominan
factores de ensamblaje de la cromatina (CAE).
Estos factores se unen a determinadas histonas
para promover el ensamblaje de la cromatina en
la replicación del DNA. Por ejemplo, mientras la
CAF-1 se une a las histonas 113 y 114, otra pro-
teína CAF, conocida como nucleoplasmina, la
hace con las historias H2A y 1-12B. La CAF- I
también interacciona con el llamado antígeno
nuclear de proliferación (PCNA), complejo de
mantenimiento del Mcm o abrazadera desli-
zante, que participa en la replicación del DNA
fijando la DNA polimerasa y desplazándola a lo
largo del DNA.
Otro grupo de proteínas cromosómicas no
histónicas (las hay ácidas, básicas y neutras) son
las HMG (grupo de alta movilidad electroforéti-
ca). con más de 20 tipos diferentes. Las HMG- I
y HIVIG-2 se encuentran sólo en el núcleo (en
una proporción aproximada de una molécula
por cada 15 nucleosomas) y están implicadas en
la replicación, desenrollando la doble hélice de
DNA. Las proteínas ILMG-14 y 11540-17, además
de encontrarse en el núcleo (en una proporción de
una molécula por cada 10 nucleosomas) donde
se relacionan con la regulación de la transcrip-
ción, también están en el citoplasma.
Otras proteínas que se unen al DNA son diver-
sas enzimas, entre las que se pueden citar la DNA
polimerasa, RNA polimerasa, nucleósido trifos-
fara.sa y la historia acetilasa (acetilasa de histonas).
En el nucleoplasma existen también otras
proteínas que no están unidas ni al DNA ni al
RNA; se denominan residuales y parecen estar
más bien relacionadas con la matriz nuclear.
Están también las enzimas relacionadas con el
metabolismo de los ácidos nucleicos y las pro-
teínas reguladoras génicas.
Fotocopias e Impresiones color / BYN
93 94 Estructura y expresión Retoca
Cromatina interfásica
Organizacion del DNA y proteirias
oit la interfac•P
La estructura fina de la cromatina en la in-
terfase resultó bastante difícil de precisar. El
examen de cortes de células con el microsco-
pio electrónico añadió poca información a la
proporcionada por el microscopio óptico. La
cromatina seguía siendo una masa densa en
la que era difícil apreciar una organización.
Lo más que se podía hacer, en los primeros
tiempos de la microscopia electrónica, era
medir el diámetro de las fibrillas en la eucro-
marina y tratar de relacionar estos valores con
los de la doble hélice de DNA (2.5 nm) (figura
3-2). Los dos tipos de fibrillas más constantes
que aparecían en los cortes medían alrededor
de 10 nm y de 30 nm de diámetro. Estos da-
tos fueron confirmados después empleando
cromosomas o cromatina interfásica in toro
en vez de cortes (figuras 3-4A y 3-413). Esta
técnica consiste en dispersar la cromatina en
una interfase aire-agua, donde las fuerzas de
tensión superficial separan las fibras. Para im-
pedir la fragmentación causada por la dese-
cación se reemplaza el agua por CO, líquido
(a gran presión). A temperaturas superiores a
la crítica para el CO, (31 °C) éste pasa a gas
sin cambios en el volumen. Siguiendo esta
técnica, DuPraw (1970) pudo estudiar núcleos
de embriones de abeja, en cuyos poros nuclea-
res se veían terminar fibras de cromatina. A
partir de estas observaciones se concluyó que
la cromatina (o cromosoma interfásico) estaría
constituida por una larga doble hélice de DNA
que, al asociarse a las proteínas, sobre todo
histonas, formaría una fibra de casi ID nm de
diámetro: pero. a su vez, esta libra sufriría una
serie de plegamientos dando lugar a la fibra
de 30 nm. Por último, plegamientos ulteriores
más complejos llevarían a la formación de fi-
bras más gruesas. de diámetros variables.
La dificultad del estudio residía en explicar
cómo se dispone la doble hélice de 2.5 nm y su
relación con las proteínas para formar primero
la fibra de 10 nm y, después, la de 30 nm. Un
paso importante en la respuesta fue el descu-
brimiento de la estructura y organización de las
histonas a partir de los estudios de Kombag,
Noll, Olins y otros investigadores, desde 1974.
Estos investigadores desarrollaron una técnica
que consiste en inducir la tumefacción de los
núcleos hasta producirse la ruptura de la envol-
tura nuclear y la dispersión de la cromatina, que
es teñida con contraste negativo o sombreado
metálico. Con esta técnica, las fibras de cro-
matina presentan una secuencia de glóbulos de
aproximadamente 10 nm de diámetro, separa-
dos cerca de 14 nni entre sí. y unidos por un fi-
lamento de DNA de casi 2.5 nm. A los glóbulos
se les denominó nucleosomas y a la hilera de
glóbulos cadena de nucleosomas o nucleofi-
lamento (figuras 3-4C y 341)). Los nucleoso-
mas o glóbulos corresponden a los oetárneros
de histonas y el DNA que se enrolla alrededor,
dando algo menos de dos vueltas (147 pares
de bases). La doble hélice del DNA abandona
el octámero para formar el filamento de cone-
xión con el siguiente octámero (40 a 80 pares
de bases). Esta unidad repetitiva de aproxima-
damente 200 pares de bases se ha demostrado
en células de organismos muy diferentes, por
lo que representa una característica constante.
Este empaquetamiento del DNA, de 2.5 mn de
espesor, para formar la fibra de cromatina de 10
nm de grosor, supone un acortamiento de casi
ocho veces.
La estructura del octámero es como sigue.
Cada una de las cuatro histonas nucleosómicas
(1-12A, 1128, 113 y 114) presenta un extremo ex-
tendido (rico en aminoácidos cargados positi-
vamente como lisina y arginina) por el que se
une al DNA, y otro extremo más compacto por
el que se une al extremo compacto de las otras
tres histonas (figura 3-3A). Así pues, cada te-
n-amero tiene una "región central" (la unión de
Ce!: 264 4386732
 9.3 Estructura y expreSiOn Senira
Estructura de la cromatina. El cromosoma 95
los cuatro extremos compactos de las histonas)
y cuatro "colas" Has cuatro extremos distendi-
dos). Alrededor de cada tetrámero discurre una
vuelta de la doble hélice de DNA. La unión de
ambos tetrámeros forma el nucleosoma comple-
to. Cada octámero es una unidad fija, es decir,
no se desplaza por la cadena.
Esta fibra de 10 nm o cadena de nucleoso-
mas corresponde a la cromatina desespiralizada,
tal como se encuentra en el momento de activi-
dad funcional; es decir, en la replicación o en la
transcripción (figuras 3-4C y 34D).
La unión de la histona H I al nucleosoma for-
ma el cromatosoma. que cambia la configuración
de la fibra (figura 3-3C). La histona 111 se une a
dos regiones distintas de la doble hélice del DNA:
al conector entre dos nucleosomas contiguos
y a la región central del nucleosoma. Esta unión
aproxima ambas regiones y disminuye la longi-
tud del DNA conector; por lo tanto, los nucleo-
somas se acercan y la cadena de nucleosomas se
pliega, quedando enmascarada su configuración
globular y dando lugar a la fibra de 30 nm. Esta
fibra constituye una unidad de empaquetamien-
to del DNA y supone un acortamiento de la fibra
de 10 mil de unas seis veces (figura 34E). Este
plegamiento se ha explicado de diversos modos.
En el modelo del solenoide, propuesto por Finch
y Klug y confirmado por las imágenes obteni-
das por Barban liamkalo. el nueleofilarnento
presentaría un enmllamiento helicoidal en el
que cada vuelta tendría seis nucleosomas: es
decir, cada uno de ellos habría girado 60° respecto
. al anterior en la cadena (figura 3-38). La asimetría
s.: Núcleo interfásico entero (sin cortes), tras un tratamiento de esparcido de la cromatina, obser-
de la molécula de Hl confiere una polaridad a la
vado con el microscopio electrónico. Se aprecian fibras de cromatina que salen del núcleo (N) y se extienden
por el citoplasma (C). x6000. : Detalle de un núcleo como el anterior en el que se pueden medir fibras de fibra, lo que determinará una orientación respec-
10 nm y de 30 nm. x27500, M'orografía de E Lampert. Humangenebk 1971: 13:285.:: Cadena de nucleo-
somas de eritrocito de salamandra observada con contraste negativo. x180000. D: Cadena de nucleosomas
de eritrocito de pollo. La cromatina se ha extendido sobre agua, desecada al punto crítico y sombreada
to a los extremos 5' y 3' del DNA.
En la organización del DNA junto a las bis-
tonas intervienen otras proteínas, algunas de las
Con carbono y platino. Se observan esferas de 10 nm (octámeros de histonas) unidas por un fino filamento.
cuales ya han sido mencionadas, así como las que
x350000. C y D Micrograffas de D. E Olins y A. L. Olins. Reproducidas de D. W. Farreen: A Textbook of His-
tology. 11 ea., Saunders. Philadelphra 1986. E: Abra de cromatina de 30 nm. Imagen obtenida como en la regulan la actividad de la cromatina y de las
figura anterior. X160000. Micrografia de Barbera Hamkalo. r: Cromosoma metalásico tratado con sulfato de que trataremos a continuación.
dextrano y heparina. para eliminar las histonas. La doble hélice de DNA forma bucles que nacen y vuelven a Algunas regiones del DNA (de hasta algu-
una matriz (M) formada por proteínas no histonicas. x100000. Micrografía dei. R. Paulson y U. K. Laernmli.
nos miles de nueleótidos) carecen de nucleoso-
Reproducido de D. W. Fasveett: A Textbook of Histology, 11 ea., Saunders. Philadelphia, 1986.
Mauricio Fernandez Fotocopias e Impresiones color /BYN
mas. Esto se ha puesto de manifiesto utilizando •
la enzima malease, micrococo!, que destruye el 1 ,
DNA que se extiende entre dos °Mineros con-
secutivos, dejando inalterado el enrollado sobre
el octámero. Estas regiones carentes de nucleo-
•
•
somas por lo general corresponden a las regio- •
nes reguladoras de cada gen (figura 3-3D).
Utilizando otro método de estudio de la cro-
matina. consistente en el tratamiento de las cé-e
lulas con sulfato de desvaino y heparina (para
eliminar las histonas) y purificación en gra- •
diente de sacarosa. en 1977. Paulson y Laem-
mli en cromosomas y Hancock en núcleos en
interfase, encontraron un armazón de proteínas e
no histónicas (la matriz nuclear antes referida)
del que emergían bucles, correspondientes a la e
doble hélice de DNA sin histonas (figura 3-4F), e
Los bucles son, por tanto, nucleofilamentos
que, al perder las histonas, despliegan el DNA.
La longitud de los bucles variaba entre 7 pm y
33 µIn (entre 20 000 y 100000 pb aproximada- 41
mente), con un valor promedio de unos 25 pm
de longitud (aproximadamente 75 000 pb).
Cada bucle sería un dominio de DNA y podría •
representar a un gen.
•
Regulador) de la actividad
•
de la cromatina
En mamíferos se ha visto que el DNA de algu-
nos genes inactivos está mucho más metilado •
•
que el de los genes activos. Cuando estos genes
son activados, pierden parte de la metilación. •
Las decisiones de inactivación (metilación) o a
activación (desmetilación) se toman por pro-
teínas reguladoras génIcas, que reconocen se- •
oteadas reguladoras del DNA de unas cinco
a 10 bases. e
Además, entre las proteínas que determinan a
cómo y cuándo es accesible el DNA para la trans-
cripción están las histonas nucleosómicas cuyas •
colas pueden sufrir modificaciones covalentes
reversibles como la acetilación de las lisinas, la
mono. di y trimetilación de las lisinas y la fosfo- e
Cel: 264 4386732
•••••••••••••••••••••••••• •••• ••••
rilación de serinas. También hay que tener en
cuenta la existencia de variantes de histonas ya
mencionadas. Este marcaje de las histonas de-
'amaina la unión de proteínas específicas para
cada situación y es lo que se ha denominado
código de las histonas.
Proteínas reguladoras génicas transportan
las enzimas que modifican estas histonas a una
ubicación determinada del DNA. Estas enzi-
mas, denominadas escritoras de códigos, se
desplazan a lo largo de la cadena extendiendo
el marcaje, impulsadas por otras proteínas de-
nominadas lectoras de códigos. Para evitar que
el marcaje se extienda hasta el extremo del cro-
mosoma existen proteínas barrera que frenan la
propagación (figura 3-5).
HoteroOromatina y eucromatina
Aunque los términos heterocromatina y eucm-
maiina los propuso Heitz en 1928, para referirse
a segmentos de cromosomas mitóticos que apa-
recían intensamente teñidos (heterocromáficos)
menos teñidos (eucromáticos), su aplicación
posterior fue al núcleo en imerfase visto con el
microscopio electrónico, para distinguir entre la
cromatina dispuesta laxamente (eucromatina) y
la que se encuentra formando masas densas ho-
mogéneas (sobre todo en la periferia nuclear) en
las que no se pueden apreciar fibras (heterocro-
matina) (figura 3-1).
La cucromatina es la cromatina desespira-
lizada. Comprende las cadenas de nucleosomas
que forman la fibra de Hl nm de diámetro (que
es la forma transcripcionalmente activa de la
cromatina) y también estas cadenas replegadas
helicoidalmente para formar las fibras de 30 nm
(figura 3-6). En células de mamífero se calcula
que alrededor de 50% del genoma está en forma
de eucromatina.
La heterocromatina (el restante 50%)
corresponde a cromatina muy espiralizada
Mauricio Femandez
Estructura de te °torna.% El cromosoma 97 98 Estructure y expresión gema
condensada. Esto causa su intensa tinción y que algunas de las bandas características de te las técnicas de bandeo o bandeo cromosómi-
su replicación más tardía pues, para hacerlo, cada cromosoma (pericentroméricas, teloméri- co (véase más adelante), podrían corresponder
necesita descondensarse y ese proceso ocurre cas e intercalares) puestas de manifiesto median- a heterocromatina constitutiva. Hoy día parece
mientras la cromatina ya descondensada se está
replicando. Es transcripcionalmente inactiva
pues la condensación hace que el DNA no sea
accesible a las proteínas activadoras de los genes.
El DNA está altamente n'afilado en las citosinas,
lo que se relaciona con su inactividad, muchas
de las histonas 1-13 y 114 están metiladas, y
muchas histonas 1-14 se encuentran también
desacetiladas.
La hete-rocromatización requiere numerosas
proteínas adicionales, en especial las proteínas
HPI (heterochromarin protein /). La localiza-
ción preferencial de la heterocromatina bajo la
envoltura nuclear puede deberse a la interac-
ción de HP1 con la lámina nuclear 13 (véase más
adelante). Esta localización periférica concen-
tra los elementos activos en la porción central
del núcleo, permitiendo que eucromatina acti-
va se replique y transcriba con una eficiencia
máxima.
La gran cantidad de heterocromatina se
explica porque todas las células del organismo
contienen la dotación génica completa, pero
cada tipo celular sólo utiliza en cada momento
una pequeña parte de esos genes: los que co-
difican proteínas estructurales (necesarias para
cualquier tipo celular) y los que codifican las
proteínas específicas de la función concreta de
ese tipo celular.
Se pueden distinguir dos tipos de heterocroma-
tina: constitutiva y facultativa.
Heterocromatina constitutiva. Siempre está E
condensada en la interfase, en ambos cromoso-
mas homólogos y en todas las células de cada F Iglir Propagación del código de histonas. Proteínas reguladoras génicas anclan las enzimas que modi-
fican las histonas (enzimas escritoras de códigos). las cuales modifican el nucleosoma adyacente. is C: La incor-
individuo de la especie de que se trate, Constitu-
poración de una proteína lectora de códigos traslada las enzimas escritoras al nucleosoma siguiente. D: Nuevas
ye de 10 a 20% de la heteisaiumatina. Buscan- proteínas lectoras se van incorporando y propagando así las modificaciones de los nucleosomas a lo largo de la
do su localización en los cromosomas, se pensó cadena de DNA. : La propagación se intenumpe al encontrar una proteína barrera.
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