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EDGAR FERNÁNDEZ
TEMA No 3
BACTERIAS Y ARCHEOBACTERIAS
CÉLULA PROCARIOTA
TAXONOMÍA MICROBIANA
RANGOS TAXONÓMICOS
Importancia ambiental
En la naturaleza, los microorganismos forman parte de comunidades complejas,
que interaccionan entre sí y con el medio ambiente. La materia circula entre los
seres vivos y el medio en un sistema cerrado en el que parte de la energía se
pierde en forma de calor. Los organismos productores fijan el carbono inorgánico
en orgánico, mientras que los consumidores y los descomponedores
remineralizan el carbono orgánico.
Los microorganismos participan activamente en los ciclos biogeoquímicos:
Ciclo del carbono. En la fase aeróbica del ciclo del carbono intervienen
organismos productores (plantas y microorganismos con fotosíntesis oxigénica)
y consumidores (animales, plantas y microorganismos con respiración aerobia);
en anaerobiosis, los microorganismos descomponedores (bacterias y hongos)
remineralizan la materia orgánica por respiración anaerobia o fermentación. El
CO2 también puede ser utilizado en anaerobiosis por bacterias metanogénicas,
mientras que el metano producido por estas es remineralizado por bacterias
metanotrofas. En medios iluminados anaerobios es importante la actividad
productora de las bacterias fotosintéticas anoxigénicas.
MICROBIOLOGÍA ING. EDGAR FERNÁNDEZ
Ciclo del nitrógeno. Las conversiones del amonio entre los seres vivos se
resumen en una serie de actividades: Fijación de nitrógeno atmosférico en
moléculas orgánicas y amonio. Este proceso lo llevan a cabo exclusivamente las
bacterias (la enzima responsable es la nitrogenasa).
Amonificación. El amonio es un producto de excreción de muchos seres vivos;
puede ser degradado por bacterias amonificantes.
ambiente, con poco o ningún efecto sobre los seres humanos, la fauna y la
mayoría de los insectos beneficiosos, como por ejemplo, los polinizadores. Las
bacterias son herramientas básicas en los campos de la biología, la genética y
la bioquímica moleculares debido a su capacidad para crecer rápidamente y a la
facilidad relativa con la que pueden ser manipuladas. Realizando modificaciones
en el ADN bacteriano y examinando los fenotipos que resultan, los científicos
pueden determinar la función de genes, enzimas y rutas metabólicas, pudiendo
trasladar posteriormente estos conocimientos a organismos más complejos. La
comprensión de la bioquímica celular, que requiere cantidades enormes de datos
relacionados con la cinética enzimática y la expresión de genes, permitirá realizar
modelos matemáticos de organismos enteros. Esto es factible en algunas
bacterias bien estudiada. Por ejemplo, actualmente está siendo desarrollado y
probado el modelo del metabolismo de Escherichia coli. Esta comprensión del
metabolismo y la genética bacteriana permite a la biotecnología la modificación
de las bacterias para que produzcan diversas proteínas terapéuticas, tales como
insulina, factores de crecimiento y anticuerpos.
Importancia en la salud
Las bacterias patógenas son una de las principales causas de las enfermedades
y de la mortalidad humana, causando infecciones tales como el tétanos, la fiebre
tifoidea, la difteria, la sífilis, el cólera, intoxicaciones alimentarias, la lepra y la
tuberculosis. Hay casos en los que la etiología o causa de una enfermedad
conocida se descubre solamente después de muchos años, como fue el caso de
la úlcera péptica y Helicobacter pylori. Las enfermedades bacterianas son
también importantes en la agricultura y en la ganadería, donde existen multitud
de enfermedades como por ejemplo la mancha de la hoja, la plaga de fuego, la
enfermedad de Johne, la mastitis, la salmonela y el carbunco. Cada especie de
patógeno tiene un espectro característico de interacciones con sus huéspedes
humanos. Algunos organismos, tales como Staphylococcus o Streptococcus,
pueden causar infecciones de la piel, pulmonía, meningitis e incluso sepsis, una
respuesta inflamatoria sistémica que produce shock, vasodilatación masiva y
muerte. Sin embargo, estos organismos son también parte de la flora humana
normal y se encuentran generalmente en la piel o en la nariz sin causar ninguna
enfermedad. Otros organismos causan invariablemente enfermedades en los
seres humanos. Por ejemplo, el género Rickettsia, que son parásitos
intracelulares obligados capaces de crecer y reproducirse solamente dentro de
las células de otros organismos. Una especie de Rickettsia causa el tifus,
mientras que otra ocasiona la fiebre de las Montañas Rocosas. Chlamydiae, otro
filo de parásitos obligados intracelulares, contiene especies que causan
neumonía, infecciones urinarias y pueden estar implicadas en enfermedades
cardíacas coronarias. Finalmente, ciertas especies tales como Pseudomonas
aeruginosa, Burkholderia cenocepacia y Mycobacterium avium son
patógenos oportunistas y causan enfermedades principalmente en las personas
que sufren inmunosupresión o fibrosis quística. Las infecciones bacterianas se
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TAMAÑO
El tamaño de las bacterias oscila entre las 0.5 y 3 µm, pudiendo llegar en algunos
tipos a 10 µm. Las bacterias de interés médico tienen un tamaño entre 0.4 y 2
µm. Solo son visibles entonces, al microscopio óptico o microscopio electrónico.
Para observarlas con el microscopio óptico se usa el objetivo de inmersión
(100X), sumergiendo esta lente en una gota de aceite (aceite de inmersión) en
el preparado a observar. A modo comparativo, una célula eucariota mide más de
5 µm (un eritrocito tiene un diámetro de 7µm), mientras que un reovirus mide
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MORFOLOGÍA
La forma de las bacterias al microscopio está determinada por la rigidez de su
pared celular. Básicamente, se diferencian según su forma en cocos (esféricas
u ovaladas), bacilos (cilíndrica o de bastones; rectos o curvos), espirilos (espiral)
y vibrios (forma de comas).
Los cocos son microorganismos que pueden vivir formando agrupaciones
pudiendo presentar diferentes formas las cuales se detallan a continuación:
Diplococos
Son cocos que viven en parejas. Todos los diplococos son gram negativos. Un
diplococo patógeno típico de este grupo es la Neisseria gonorreae causante de
la gonorrea.
Tetracocos
Son gram positivas. Los hábitats en los que se pueden encontrar son la piel
humana, productos lácteos no pasteurizados, cerveza contaminada.
Micrococos luteus vive en la piel humana y transforma el sudor en compuestos
con olor desagradable. La mayoría de los microorganismos de este grupo son
mesófilos, sin embargo existen algunas especies psicrófilas.
Streptococos
Las bacterias son los seres vivos más abundantes sobre la tierra, esto tiene su
fundamento, basado en los métodos de reproducción de las bacterias, que se
caracterizan por ser los más rápidos entre los seres vivientes.
Algunos nutrientes constituyen los bloques a partir de los cuales la célula elabora
macromoléculas estructurales y funcionales, mientras que otros sirven como
donadores de electrones (fuente de energía) y algunos más como aceptores
finales de electrones sin ser incorporados directamente al material celular. A
veces un mismo nutriente puede desempeñar todas las funciones, lo que
dependerá del tipo de microorganismo y de las condiciones ambientales. La
forma química específica bajo la cual los microorganismos adquieren el carbono,
nitrógeno, azufre, fósforo y oxígeno, así como su energía, es muy variable, lo
que determina que los microorganismos presenten múltiples tipos nutricionales.
Orgánico
Fotoorganoheterótrofo
-heterótrofo
Orgánico
-organo- Dióxido de
carbono Fotoorganoautótrofo
Luz -autótrofo
Foto- Orgánico
Fotolitoheterótrofo
-heterótrofo
Inorgánico
-lito- Dióxido de
carbono Fotolitoautótrofo
-autótrofo
Orgánico
Quimioorganoheterótrofo
-heterótrofo
Orgánico
-organo- Dióxido de
carbono Quimioorganoautótrofo
Compuestos -autótrofo
químicos
Quimio- Orgánico
Quimiolitoheterótrofo
-heterótrofo
Inorgánico
-lito- Dióxido de
carbono Quimiolitoautótrofo
-autótrofo
TEMPERATURA
La temperatura es una variable física que tiene una influencia marcada en la
actividad microbiana. Mediante esta variable se pueden conseguir diferentes
efectos en los microorganismos, como ser por ejemplo minimizar su crecimiento,
acelerar el mismo o eliminarlas.
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MICROORGANISMOS PSICRÓFILOS
Habitan entornos con temperaturas muy bajas, encontrándose sus temperaturas
óptimas para el desarrollo y crecimiento entre los 10° C y 20° C. Aunque ese es
el rango de temperaturas óptimas de los psicrófilos, la mayoría puede vivir sin
inconvenientes a cero grados centígrados e incluso temperaturas negativas. Un
ejemplo de éstos son las bacterias llamadas Flavobacterium. Pero eso no es
todo; en este caso, existen también los denominados psicrófilos extremos, los
cuales tienen temperaturas óptimas de 4° C y no sobreviven en temperaturas
mayores a los 14° C. Como ejemplo encontramos al género Polaromonas
Vacuolata, habitante de las aguas heladas de la Antártida.
MICROORGANISMOS PISCRÓTROFOS
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MICROORGANISMOS MESÓFILOS
Estos pueden crecer en temperaturas moderadas, mínima 10oC óptima 30 –
40oC y máxima 50 oC. La mayoría de los microorganismos patógenos
pertenecen a este grupo.
MICROORGANISMOS TERMÓFILOS
La característica de este grupo es que pueden crecer a temperaturas altas,
tienen una temperatura mínima de 45oC, una óptima de 55-70 oC y una máxima
de 90 oC. Las bacterias termófilas más conocidas son Bacillus
stearothermophilus (T máx 60ºC) que es un temófilo moderado (Gram positivo
próximo a Bacillus subtilis), Thermus aquaticus (T máx 70ºC) y Thermus
termophilus (T máx80ºC).
Todas estas bacterias termófilas son aerobias y heterótrofas.
Existen también los hipertermófilos que pueden crecer por encima de los 90oC,
en este grupo generalmente se encuentran las Arqueobacterias. El mayor límite
de la vida ha sido ampliamente reconocido como 113º Celsius, gracias a un
microbio llamado Pyrolobus fumari, que fue descubierto en 1997 dentro de una
fuente hidrotermal en el océano atlántico, 3650 metros bajo la superficie.
CLASIFICACIÓN DE LOS MICROORGANISMOS EN FUNCIÓN DEL pH
Los efectos del pH adverso afectan por lo menos dos aspectos de la célula
microbiana: el funcionamiento de sus enzimas y el transporte de nutrimentos
hacia la célula. La membrana citoplásmica de los microorganismos es
relativamente impermeable a los iones H+ y OH–; su concentración en el
citoplasma permanece razonablemente constante a pesar de amplias
variaciones que pueden ocurrir en el pH del medio circundante.
Cuando los microorganismos se ven en un ambiente por debajo o por arriba del
nivel de neutralidad, su habilidad para proliferar depende de su habilidad para
cambiar el pH ambiental a un rango más apropiado para ello, pues compuestos
clave como DNA o ATP requieren de un medio neutro.
Cuando se colocan en ambientes ácidos, las células deben evitar que los H+
entren o expulsarlos tan pronto como entran. Al estar en un medio ácido, la
actividad metabólica de la mayoría de los microorganismos provoca que el medio
o sustrato se vuelvan menos ácido, mientras que aquellos que creen en
ambientes con pH elevado tienden a bajar el pH del sustrato o medio.
El pH para el crecimiento óptimo de la mayoría de los microorganismos está
cercano a la neutralidad (pH = 6.6 a 7.5). Las levaduras pueden crecer en un
ambiente ácido y prosperan en un rango intermedio (4.0 a 4.5) aunque
sobreviven a valores entre 1.5 y 8.5. Los hongos toleran un amplio rango (0.5 a
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MICROORGANISMOS INDIFERENTES
Son microorganismos que no afectan al producto, usualmente todos los
alimentos sin procesar contienen una carga microbiana natural.
TEMA No. 4
CÉLULA EUCARIOTA
MOHOS, LEVADURAS, ALGAS, PROTOZOARIOS
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Eucariota es una palabra que viene del griego “eu” que significa verdadero y
“Karyon” núcleo, por tanto eucariota significa núcleo verdadero.
La célula eucariota es una estructura celular que involucra una gran diversidad
biológica, en esta se encuentran las células animales, vegetales, los hongos y
los protistas.
Esta se caracteriza por tener un núcleo diferenciado, es decir que su ADN y/o
ARN se encuentran delimitados del citoplasma por una membrana nuclear,
aspecto diferenciativo de las células procariotas, ya que en estas su núcleo está
libre en el citoplasma. A los organismos compuestos por células eucariotas se
los denomina eucariontes.
IMPORTANCIA
Como se dijo líneas arriba, la célula eucariota contempla una gran diversidad
biológica, en este curso se hará un enfoque solamente en microorganismos, de
esta forma centraremos nuestro estudio en mohos, levaduras, algas y
protozoarios.
Los hongos que contemplan a los mohos, levaduras, añublos y otros son uno de
los grupos que industrialmente tienen mucha importancia, principalmente los
mohos y levaduras.
Las levaduras se vienen utilizando desde hace miles de años para la fabricación
de pan y bebidas alcohólicas. La levadura que sin duda fue la primera y aún hoy
en día sigue siendo la más utilizada por el hombre es Saccharomyce
cerevisiae de la que se emplean diferentes cepas para la fabricación de cerveza,
vino, sake, pan y alcoholes industriales. Kluyveromyces fragilises una especie
fermentadora de la lactosa que se explota en pequeña escala para la producción
de alcohol a partir del suero de la leche. Yarrowia lipolytica es una fuente
industrial de ácido cítrico. Trichosporum cutaneum desempeña un importante
papel en los sistemas de digestión aeróbica de aguas residuales debido a su
enorme capacidad de oxidación de compuestos orgánicos, incluidos algunos que
son tóxicos para otras levaduras y hongos, como los derivados fenólicos.
Los hongos tienen una gran importancia económica, no tan sólo por su utilidad,
sino también por el daño que pueden causar. Los hongos son responsables de
la degradación de gran parte de la materia orgánica de la tierra, una actividad
enormemente beneficiosa ya que permite el reciclaje de la materia viva. Por otro
lado, los hongos causan gran cantidad de enfermedades en plantas y animales
y pueden destruir alimentos y materiales de los que depende el hombre.
orientales miso, shoyu y tempeh. Los hongos son también la fuente de muchos
enzimas comerciales (amilasas, proteasas, pectinasas), ácidos orgánicos
(cítrico, láctico), antibióticos (penicilina), quesos especiales (Camembert,
Roquefort) y, evidentemente, las setas, las cuales son macroscópicas y varias
son comestibles como el Agaricus bisporus y Agaricus campestris.
Por su parte las algas son un grupo de microorganismos que tienen una
importancia fundamental en la fotosíntesis, proceso en el cual la energía de la
luz se convierte en energía química en forma de azúcares. En un proceso
impulsado por la energía de la luz, se crean moléculas de glucosa (y otros
azúcares) a partir de agua y dióxido de carbono, mientras que se libera oxígeno
como subproducto. Las moléculas de glucosa proporcionan a los organismos
dos recursos cruciales: energía y carbono fijo (orgánico). Por lo tanto las algas
son definitivamente muy importantes para el equilibrio del medio ambiente. Sin
embargo la importancia de las algas no está limitada al medio ambiente, sino
también tienen importancia industrial.
Por un lado, el consumo de algas proporciona proteínas de alto valor biológico
y constituyen una valiosa fuente de aminoácidos, vitaminas y minerales,
entre ellos calcio, potasio, magnesio, zinc, hierro y yodo. El alga cianofícea
Spirulina constituye la base de un suplemento dietario consumido en todo el
mundo y caracterizado por su alto valor biológico.
Los hongos junto con las bacterias y las Archaea, son los principales agentes de
descomposición en el mundo. Los agentes de descomposición son los
responsables de oxidación de materia orgánica muerta, que devuelve al medio
ambiente los elementos inorgánicos que serían reciclados de nuevo por otras
formas de vida. Los hongos no tienen el amplio rango de características
metabólicas de las bacterias. La mayoría de los hongos tienden a habitar en
ambientes terrestres, aunque algunos prefieren sistemas acuáticos. Son
importantes en la descomposición de hojas, plantas muertas, árboles y otros
residuos orgánicos lignocelulósicos que se acumulan en el suelo.
MORFOLOGÍA
Las características morfológicas identifican a más de 50000 especies diferentes
de hongos, entre las que se incluyen a los mohos, levaduras, añublos, royas,
tizones, bejines y setas.
Excepto en algunas formas unicelulares, tales como las levaduras, los hongos
se componen de masas de filamentos. Un filamento único se denomina hifa y el
conjunto de hifas se denomina micelio. El micelio tiene, generalmente, una
anchura de 5 a 10 micras y puede estar ramificado. Sus paredes celulares
generalmente están compuestas por quitina, que no se encuentra ni en bacterias
ni en plantas superiores, pero se encuentra en la cubierta exterior dura de los
insectos.
CLASIFICACIÓN
MICROBIOLOGÍA ING. EDGAR FERNÁNDEZ
Los hongos se clasifican algunas veces en tres grupos principales. Eumicota que
son conocidos como hongos verdaderos, Mycophycomycota, que se
caracterizan por tener una etapa de motilidad como las amebas y otra de
producción de esporas similar a la de los hongos. La tercera clase es
Myxophycomycota, que es la de los líquenes a base de hongos que crecen junto
con las algas.
De estos tres grupos el más importante es el Eumycota u hongos verdaderos, ya
que en este grupo se encuentran la mayor parte de los hongos descubiertos.
Este grupo se subdivide en:
ASCOMICETOS
Son la clase mayor de hongos ya que contienen aproximadamente 30000
especies. Las hifas están divididas por paredes transversales o septos. Las
esporas se forman sexual o asexualmente y estas siempre suponen la formación
de un asco o pequeño saco que contienen ocho esporas. En este grupo se
encuentran las levaduras panaderas y cerveceras, los potentes añublos, los
agentes que causan la enfermedad del olmo holandés, los orígenes de muchos
antibióticos, los mohos negros corrientes descomponedores de nuestros
alimentos, mohos verdiazules y muchos hongos que reducen plantas muertas a
humus y digieren celulosas en basuras en descomposición.
BASIDIOMICETOS
Tienen estructura portadora de esporas conocida como basidio que produce las
basidiosporas. Incluye también muchos agentes de descomposición. Algunos de
ellos son responsables de destrucción de estructuras de madera, como postes,
traviesas de ferrocarril y otras. Algunas son parásitas y destruyen cosechas de
trigo y fruta. Otras son de tamaño macroscópico como las setas que tienen una
gran importancia industrial.
DEUTEROMICETOS
Este grupo incluye a todos los hongos que no tienen reproducción sexual. En
este grupo podemos encontrar especies queseras como las que se utilizan en la
producción de queso Camembert (Penicillium camemberti), queso Roquefort
(Penicillium roqueforti), queso Cheddar (Lactobacillus lactis ssp lactis),
Gouda (Lactobacillus lactis ssp cremoris), Parmesano, Manchego, etc., así
como algunos utilizados en la producción de antibióticos como la penicilina,
cefalosporinas (Cephalosporium acremonium)
Otros son parásitos de plantas y animales, incluyendo a los seres humanos
provocando enfermedades como la tiña y el pie de atleta.
OOMICETOS
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LEVADURAS
Las levaduras son microorganismos unicelulares eucariotas pertenecientes a los
ascomicetos. Tienen una nutrición esencialmente quimioorganoheterótrofa. Sus
hábitats favoritos son sustancias azucaradas como flores, cortezas de árboles,
frutos. En su gran mayoría son unicelulares pero algunas pueden formar
filamentos como la Cándida albicans. Se reproducen asexualmente en la mayor
parte de los casos sin embargo pueden hacerlo de forma sexual también. La
forma asexual más común en la reproducción de las levaduras es la gemación.
Hay especies simbiontes de animales, plantas y las hay aquellas que son
patógenas para el hombre. Algunas especies tienen gran importancia industrial
como las utilizadas en la producción de vinos, cervezas, antibióticos y otras.
MOHOS
Por otra parte son causantes de la putrefacción de los alimentos y son grandes
productores de micotoxinas, que son sustancias químicas venenosas. Existen
una gran diversidad de mohos, sin embargo son 5 las especies principalmente
productoras: Aspergillius, Penicillium, Fusarium, Claviceps y Alternaria.
En el cuadro siguiente se muestran las toxinas producidas por estos
microorganismos:
HONGO TOXINA
Aspergillius Aflatoxinas
Sterigmatocistina
Ocratoxina A
Fusarium Tricotocenos
Zearelenonas
Fumonisinas
Fusarina
Monoliformina
Penicillium Patolina
Citrilina
Ocartoxina A
Alternaria Alternariol
Ácido tennazónico
Claviceps Alcaloides
ALGAS
Las algas son un grupo muy diverso. Estos organismos acuáticos van desde
seres microscópicos unicelulares hasta organismos multicelulares que forman
grandes colonias muy grandes y vistosas. Las algas realizan una de las mayores
aportaciones de oxígeno al planeta; se estima que participan con cerca del 50%
de la fotosíntesis global. Actualmente el término alga se refiere a organismos que
tienen células con núcleo (Eucariontes) y se excluyen las algas-verde azules
pertenecientes al reino de las bacterias (Phylum Cyanobacteria) (Woese et al.
1990).
La mayoría de las algas son organismos acuáticos que viven en agua dulce o
marina, es posible encontrar algunas especies en hábitats muy diversos de
árboles, bancos de nieve y aguas termales. Existen ciertas algas que viven en
simbiosis con o dentro de animales, hongos y plantas, tal es el caso de los
líquenes en donde se juntan hongos y algas (Phylum cyanobacteria) y los
corales en donde se juntan celenterados y algas (Phylum dinoflagellata).
Las algas tienen una gran diversidad de formas, desde algas microscópicas
unicelulares flageladas o no flageladas hasta algas pluricelulares que pueden
llegar a medir más de 50 metros de largo.
La mayoría de las algas son organismos fotoautótrofos (del griego: photo = luz,
auto = mismo, trop = nutriente, o sea organismos que adquieren sus nutrientes
al realizar fotosíntesis). Poseen clorofilas, requieren de luz y minerales para su
crecimiento, su medio favorito de ph para el crecimiento está alrededor de 7 a 9.
MICROBIOLOGÍA ING. EDGAR FERNÁNDEZ
Las algas pueden estar suspendidas en el agua o fijas a un sustrato. Las algas
unicelulares comúnmente viven suspendidas o llegan a formar colonias y
filamentos ramificados y no ramificados.
Las macroalgas verdes, rojas y las algas pardas o cafés, están principalmente
asociadas a fondos principalmente rocosos, formando colonias de cientos o
miles de organismos. A este tipo de agrupaciones se les conoce como praderas
o bosques de macroalgas.
Son muchas las razones por la que las algas son importantes, además de su
papel principal como productor de oxigeno atmosférico y su influencia en
procesos globales como el cambio climático. Son productores primarios de
materia orgánica, es decir son de fundamental importancia en las cadenas
tróficas acuáticas, debido a su capacidad de catálisis de la fotosíntesis. Esta
propiedad hace que se constituyan en alimento para diferentes especies
acuáticas.
Uno de los usos principales por el ser humano de las algas es su consumo
directo, se extrae de los mares aproximadamente 40,000 toneladas al año. Una
de las cosechas de algas más importantes es la Porphyra (nori, en japonés),
alga con la que se prepara el sushi en Japón.
TIPOS DE ALGAS
La clasificación de las algas que permite conocerlas con mayor facilidad se basa
en si son unicelulares o multicelulares. Las multicelulares son por lo general
clasificadas en tres grupos, Chlorophyta (algas verdes), Phaeophyta (algas
pardas) y Rodophyta (algas rojas). Las unicelulares, generalmente llamadas
microalgas, son Chrysophyta, Diatomeas y Dinoflagelados.
MICROBIOLOGÍA ING. EDGAR FERNÁNDEZ
Las algas pardas son las que comúnmente forman los bosques marinos en zonas
templadas y árticas. Este grupo es netamente marino y abarca aproximadamente
1.500 especies. Por lo general, son muy grandes (macroalgas) representadas
por los géneros Laminaria, Macrocystis y Nerocystis. La coloración se
considera que está dada por un pigmento accesorio llamado fucoxantina, en
función de su cantidad pueden ser más oscuras o más claras.
Diatomeas
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Dinoflagelados
Son muy conocidas porque algunas especies pueden ser bioluminiscentes y, en
la oscuridad, generan un patrón de luminiscencia característico en determinados
océanos. Se considera que existen en promedio 2.000 especies, las cuales se
pueden distribuir en diferentes hábitats, como lo son aquellos a temperaturas
menores a 0 °C. En este grupo se encuentran la mayoría de algas que tienen
endosimbiosis con otros organismos, también se agrupan algunas otras que
secretan toxinas, las cuales pueden ser letales para peces y
determinados vertebrados.
PROTOZOARIOS
Comúnmente conocidos también como protozoos, son microorganismos
unicelulares, protistas, heterótrofos, tienen la capacidad de fagocitar, como
depredadores, cazan algas, bacterias, y microhongos unicelulares o
filamentosos, por esta cualidad su presencia es muy deseable en tratamientos
de depuración de aguas servidas. Habitan usualmente ambientes acuáticos, se
los encuentra tanta en aguas saladas como dulces, sin embargo también se los
puede encontrar en el suelo. Suelen ser saprófitos pero también son parásitos.
Los protozoos tales como los parásitos de malaria (Plasmodium spp.),
trypanosomes y leishmania son también importantes como parásitos y
simbiontes de animales multicelulares.
Sus tamaños pueden variar oscilando entre 10 a 50 micras, por lo que
observarlos con un microscopio no suele tener complicaciones.
La reproducción puede efectuarse de diferentes formas, asexual por bipartición,
sexual por isogametos o por conjugación intercambiando material genético.
RIZÓPODOS O SARCODINOS
Son protozoos ameboides los cuales se desplazan por medio de falsos pies
formados por deformación del citoplasma y su membrana citoplasmática
MICROBIOLOGÍA ING. EDGAR FERNÁNDEZ
Éste es el grupo tradicional que más se identifica como grupo natural en las
clasificaciones modernas con la categoría de filo. Aparecen rodeados de unas
estructuras celulares en forma de vellosidades denominadas cilios y presentan
una estructura interna compleja pero análoga a los flagelos.
El paramecio (género Paramecium) es un representante muy popular del grupo.
Además, los cilios son filamentos cortos y muy numerosos que con su
movimiento provocan el desplazamiento de la célula.
FLAGELADOS O MASTIGOFOROS
Se distinguen por la posesión de uno o más flagelos. Los flagelos son filamentos
más largos que los cilios cuyo movimiento impulsa a la célula. Suelen
presentarse en un número reducido. Las formas unicelulares desnudas (sin
pared celular), dotadas de sólo uno o dos flagelos, representan la forma original
de la que derivan todos los eucariontes.
ESPOROZOOS O APICOMPLEXA
Parásitos con una fase de esporulación (división múltiple) y sin mayor movilidad.
Hay varios grupos distintos sin mayor relación y no son todos protistas, sino que
también hay animales y hongos. El ejemplo más conocido es el plasmodio
(género Plasmodium), causante de la malaria y que pertenece al grupo de los
apicomplejos, grupo más conocido que suele reservar para sí el nombre
de Sporozoa.
Una vez incubada la enfermedad los síntomas podrían ser los siguientes:
- Malestar general.
- Cefalea
- Cansancio muy intenso.
- Molestias abdominales.
- Dolores musculares.
- Fiebre.
- Escalofrios.
- Cólicos.
- Diarrea.
- Fatiga.
- Flatulencia excesiva.
- Dolor rectal durante la defecación (tenesmo).
- Pérdida de peso.
Se transmite por:
Agua o alimentos contaminados con heces. Por ejemplo al utilizar excrementos
humanos como fertilizantes.
De una persona a otra por contacto con el área bucal o rectal de una persona
que haya sido infectada.
TOXOPLASMOSIS
Se transmite por:
Ingesta de carne mal cocinada o cruda.
Transfusiones de sangre.
Contacto con heces de gatos.
ENFERMEDAD DEL SUEÑO
Esta enfermedad está causada por el protozoo Trypanosoma brucei
rhodesiense y el Trypanosoma brucei gambiense. El T. brhodesiense
produce la forma más grave de la enfermedad.
Se transmite al ser humano por la mosca tsé tsé.
Se transmite por:
Picadura mosca tsé tsé.
MAL DE CHAGAS
MICROBIOLOGÍA ING. EDGAR FERNÁNDEZ
Las células eucariotas son aquellas células que tienen un núcleo organizado con
una envoltura celular (membrana) que lo aísla del resto de la célula. También se
dice que tienen un "núcleo de verdad".
Estas células forman parte de los tejidos de organismos multicelulares como los
hombres y los animales. Poseen múltiples orgánulos.
Las Células de los animales, de los vegetales, de los hongos y los protistas son
todas eucariotas.
MICROBIOLOGÍA ING. EDGAR FERNÁNDEZ
anabolismo y catabolismo.
RIBOSOMAS
Partículas constituidas por ARNr y proteínas.
ENVOLTURA NUCLEAR
Comprende la membrana exterior del núcleo que mantiene la continuidad con el
Retículo endoplasmático.
Está constituido por sacos discoidales apilados, como mínimo en número de tres,
rodeados por pequeñas vesículas. El aparato de Golgi se encarga de
modificación de sustancias sintetizadas en el RER mediante agregaciones de
restos de carbohidratos para conseguir la estructura definitiva.
LISOSOMAS
Son organelos rodeados por membranas. Contienen enzimas hidrolíticas
pudiendo hidrolizar proteínas, grasas, polisacáridos y ácidos nucleicos.
Degradan material intracelular de origen externo (heterofagia) o interno
(autofagia) que llegan a ellos. Es decir, se encargan de la digestión celular.
VACUOLAS Y VESÍCULAS
Las vacuolas son pequeñas vesículas de las células de los hongos y de las
plantas que permiten el almacenamiento de distintas sustancias, como azúcares
o agua. La fusión de diversas vesículas permite el desarrollo de las vacuolas,
cuyo contorno se encuentra delimitado mediante la membrana plasmática.
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PEROXISOMAS
Los peroxisomas son orgánulos citoplasmáticos muy comunes en forma de
vesículas que contienen oxidasas y catalasas. Como la mayoría de los
orgánulos, los peroxisomas solo se encuentran en células eucariotas.
Los peroxisomas son esenciales en el metabolismo lipídico, en especial en el
fraccionamiento de los ácidos grasos de cadena muy larga, para su completa
oxidación en las mitocondrias, y en la oxidación de la cadena lateral del
colesterol, necesaria para la síntesis de ácidos biliares; también interviene en la
síntesis de ésteres lipídicos del glicerol (fosfolípidos y triglicéridos) e
isoprenoides; también contienen enzimas que oxidan aminoácidos, ácido úrico y
otros sustratos utilizando oxígeno molecular con formación de agua oxigenada.
MITOCONDRIAS
Son organelas cuya estructura consta de dos membranas una externa lisa y una
interna fuertemente plegada en forma de crestas, el mayor desarrollo de la
membrana interna está relacionado con la síntesis de ATP. En estas organelas
se completa la degradación de las moléculas orgánicas y se libera la energía
contenida en sus enlaces, por el proceso de respiración celular que consume
oxígeno.
PLÁSTIDOS
Se encuentran solo en las células de plantas y algas, poseen dos membranas
como las mitocondrias. Se los clasifica de acuerdo a su contenido y función:
Leucoplastos: Contiene almidón, proteína o aceites y están presentes en
estructuras de almacenamiento como los tubérculos.
Cromoplastos: Presentes en flores y frutos, contienen pigmentos (carotenoides).
Cloroplastos: Contienen clorofila y en ellos se lleva a cabo el proceso de
fotosíntesis.
CITOESQUELETO
Es un conjunto de proteínas filamentosas distribuido en el interior del citoplasma
celular.
Conforman un andamiaje que se conoce como citoesqueleto.
Las funciones del citoesqueleto son:
- Mantener la organización de la célula y sus organelas.
- Permitir movimientos y cambios de forma de las células.
- Dirigir el tránsito intracelular.
MICROTÚBULOS.-
Son largos tubos huecos formados por dímeros de proteínas globulares llamadas
tubulinas.
Son importantes en el transporte de vesículas y organelas en el citoplasma,
participan de la división celular en los movimientos de los cromosomas, son
componentes de los cilios y flagelos, estructuras responsables de la locomoción
de muchas células.
MICROFILAMENTOS. -
TEMA No. 5
NUTRICIÓN MICROBIANA
DIETA
Normalmente esta palabra es mal entendida ya que usualmente se cree que
dieta es un régimen alimenticio utilizado con la finalidad de perder peso, si bien
es correcto este uso, la palabra dieta es básicamente todo lo que se consume a
diario. En ese sentido todas las personas tienen una dieta, aunque esta en la
mayor parte de los casos es una dieta desordenada ya que normalmente no se
conoce la cantidad de calorías que esta aporta, tampoco se conoce el porcentaje
de nutrientes y tipos que aporta la misma. Es así, que los microorganismos tienen
también una dieta, ya que cada uno de los microorganismos que existen en el
medio ambiente requieren de nutrientes particulares para poder sobrevivir y
ejercer sus efectos.
METABOLISMO
El término metabolismo se refiere al conjunto de reacciones químicas que tiene
lugar en la célula, y tiene tres funciones específicas a saber:
MACRONUTRIENTES
Son un grupo de elementos los cuales son requeridos en cantidades
considerables (g/l) para que un ser vivo pueda obtener lo que necesita para vivir.
Son nutrientes que se los requiere en pequeñas cantidades, pero no por eso
dejan de ser importantes, su deficiencia en muchos casos conduce a mal
funcionamiento de los organismos y en el caso de microorganismos podría
conducir a muerte o inhibición.
En este grupo se encuentran el manganeso, zinc, cobalto, molibdeno, níquel y
cobre son partes de enzimas y cofactores.
CLASES DE NUTRIENTES
- Universales (es decir, aquellos que son requeridos por todos los
procariotas): agua, CO2, fosfatos y sales minerales
- Particulares
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- Factores de crecimiento
NUTRIENTES UNIVERSALES
AGUA
DIÓXIDO DE CARBONO
FÓSFORO
SALES MINERALES
Las sales minerales son la fuente de aniones (p. ej. el Cl -) y de cationes para la célula.
Los siguientes cationes, concretamente, se necesitan en cantidades relativamente
grandes: K+, Mg++, Ca++, Fe++.
NUTRIENTES PARTICULARES
NITROGENO Y AZUFRE
Estos nutrientes pueden ser obtenidos por las células en formas combinadas
inorgánicas oxidadas como ser nitratos y sulfatos y en formas reducidas como
ser amonio, sulfuros, aminoácidos, etc.
FACTORES DE CRECIMIENTO
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MEDIOS DE CULTIVO
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Se utiliza como agente gelificante para dar solidez a los medios de cultivo. En el
agar bacteriológico el componente dominante es un polisacárido que se obtiene
de ciertas algas marinas y que presenta la indudable ventaja de que a excepción
de algunos microorganismos marinos, no es utilizado como nutriente. Un gel de
agar al 1-2% se licua alrededor de los 100ºC y se gelifica alrededor de los 40-
45ºC, dependiendo de su grado de pureza.
EXTRACTOS
Su preparación consiste en que ciertos órganos o tejidos animales o vegetales
(por ejemplo carne, hígado, cerebro, semillas, etc.) son extraídos con agua y
calor y posteriormente concentrados hasta la forma final de pasta o polvo. Estos
preparados deshidratados son a menudo empleados en la elaboración de los
medios de cultivo. Los más utilizados son el extracto de carne, de levadura y el
de malta.
PEPTONAS
Son mezclas complejas de compuestos orgánicos, nitrogenados y sales
minerales, que se obtienen por digestión enzimática o química de proteínas
animales o vegetales (soja, caseína, carne, etc.). Las peptonas son muy ricas en
pépticos y aminoácidos, pero pueden ser deficientes en determinadas vitaminas
y sales minerales.
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FLUIDOS CORPORALES
Con frecuencia es necesario añadir a los medios de cultivo de algunos patógenos
sustancias como sangre completa, sangre desfibrinada, plasma o suero
sanguíneo, sobre todo para conseguir el primer aislamiento a partir del
hospedador. La sangre no puede ser esterilizada, y por tanto debe de ser
obtenida en condiciones asépticas directamente de un animal sano, y adicionada
al medio de cultivo después de que este haya sido auto clavado. Los fluidos
corporales no solo aportan factores de crecimiento sino que también aportan
sustancias que neutralizan a inhibidores del crecimiento de algunas bacterias.
Un ejemplo podría ser la catalasa presente en las células sanguíneas destruye
el peróxido de hidrógeno que algunas bacterias que no poseen este enzima
acumulan como producto del metabolismo del oxígeno.
SISTEMAS AMORTIGUADORES
Para mantener el pH dentro del rango optimo del crecimiento bacteriano a veces,
es necesario añadir algunos componentes al medio de cultivo. Debido a que la
mayoría de las bacterias son neutrófilas, se suelen emplear sales del tipo de los
fosfatos bisódicos o bipotásicos u otras sustancias como las peptonas para
prevenir la desviación del pH.
INDICADORES DE PH
AGENTES REDUCTORES
Con el objetivo de crear en los medios de cultivo condiciones que permitan el
desarrollo de los gérmenes microaerófilos o anaerobios se añaden estos agentes
reductores siendo, los más empleados la cisteína y el tioglicolato entre otros.
AGENTES SELECTIVOS
La adición de determinadas sustancias a un medio de cultivo puede convertirlo
en selectivo. Así, por ejemplo, la adición de cristal violeta, sales biliares, azida
sódica, telurito potásico, antibióticos, etc., a la concentración adecuada hará que
actúen como agentes selectivos frente a determinados microorganismos.
Son aquellos medios que son el resultado de un proceso biológico natural. Todos
los alimentos pueden ser considerados medios de cultivo naturales. La leche y
la carne son con siderados como los mejores medios de cultivo de este grupo.
MEDIOS ARTIFICIALES
En este grupo se encuentran aquellos medios que han sido procesados en una
instalación industrial, generalmente estos medios vienen deshidratados listos
para su rehidratación. Ejemplos de estos medios el Agar malta, agar micófilo,
agar PCA, agar saboraud dextrosa, etc.
MEDIOS SEMISÓLIDOS
Estos medios tienen una consistencia gelatinosa, cualquier medio líquido se lo
puede transformar en un medio semisólido mediante la adición de agar en una
proporción de 0.5-0.9% en peso. Se usan para estudiar la motilidad de las
bacterias. Ejemplos: Agar MIO, Agar SIM.
MEDIOS SÓLIDOS
Los medios sólidos tienen generalmente agar–agar como agente solidificante,
espesante o gelificante. El agar-agar es una sustancia hidrofílica de carácter
coloidal procedente de diversas especies de algas marinas, especialmente del
género Gelidium, que tiene la propiedad de formar un gel. Químicamente el agar-
agar es un polisacárido de cadena larga, dependiendo de su tamaño el poder
gelificante.
MEDIOS SINTÉTICOS
Son medios en los que la composición cualitativa y cuantitativa se conoce
perfectamente.
MEDIOS COMPLEJOS
Estos medios contienen ingredientes cuya composición no se conoce
exactamente. Los medios que contienen extractos ya sea de carne, peptona o
de levadura son considerados medios complejos. La utilidad de estos medios
radica precisamente en su composición que al ser tan diversa ofrece
posibilidades para l crecimiento de diferentes tipos de microorganismos al mismo
tiempo.
MEDIOS DIFERENCIALES
Son medios comunes o mejorados, con adicción de ciertas sustancias que ponen
de manifiesto determinadas propiedades bioquímicas, inherentes a algunas
especies bacterianas, como por ejemplo: producción de gas, H2S, de ácidos, de
sustancias alcalinas, acción proteolítica, acción lipolítica, etc.
Estas sustancias o indicadores permiten diferenciar rápidamente una especie
microbiana de otra semejante; por este motivo se denominan medios indicadores
o diferenciales. Ejemplo: Agar Baird Parker, Agar Rambach, etc.
El agar Mac Conckey se utiliza para el aislamiento e identificación de
Escherichia coli. Es un medio mejorado ya que tiene cristal violeta y sales
biliares que inhiben el desarrollo bacterias Gram positivas.
MEDIOS DE MANTENIMIENTO
Método
El método utilizado consiste en el recuento en placa de las colonias formadas.
Principio
La técnica se basa en contar las “unidades formadoras de colonias” o UFC
presentes en un gramo o mililitro de muestra. Se considera que cada colonia que
desarrolla en el medio de cultivo de elección después de un cierto tiempo de
incubación a la temperatura adecuada, proviene de un microorganismo o de un
agregado de ellos, de la muestra bajo estudio; ese microorganismo o
microorganismos son capaces de formar la colonia, es decir una UFC. Para que
las colonias puedan contarse de manera confiable, se hacen las diluciones
decimales necesarias de la muestra, antes de ponerla en el medio de cultivo.
Resultado
La prueba es considerada positiva cuando hay formación de colonias.
Recomendaciones
• El medio de cultivo no debe fundirse más de una vez, y debe mantenerse
en baño de agua regulado a 45 °C, durante el tiempo suficiente para que
alcance esta temperatura, y hasta su utilización.
• El tiempo transcurrido desde el momento en que la muestra se incorpora
al diluyente, hasta que finalmente se adiciona el medio de cultivo a las
cajas, no debe exceder de 20 minutos.
Procedimiento
La selección de las cajas que se toman en cuenta para los cálculos es muy
importante para la confiabilidad de los resultados; a continuación se
especifican las reglas generales para seleccionarlas, pero conviene enfatizar
que la selección de cajas obedece a criterios: • lógicos (elegir las que están
en rango), • estadísticos (considerar los duplicados y el mayor número posible
de datos) y • funcionales (a falta de datos representativos, tomar los mejores
disponibles).
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Las reglas para seleccionar las cajas para los cálculos son las siguientes:
1. Se consideran “representativas” las cajas que tienen un número de
colonias dentro del rango de sensibilidad del método, en este caso, entre 25
y 250 UFC.
2. Una vez seleccionadas las cajas y hechos los promedios correspondientes,
se aplica el factor de dilución, que es el inverso y se redondea el número a 2
cifras significativas (o dígitos) y potencias de 10. Cuando el tercer dígito del
promedio es 4 o menor, se omite dejando el número de 2 cifras significativas.
Por ejemplo, si en una caja se cuentan 312 UFC, se debe reportar como 31
X 101 porque el tercer dígito es 2 y se redondea al segundo dígito. Cuando el
tercer dígito es 5 o superior, el segundo dígito se redondea al siguiente, por
ejemplo si en una caja se cuantifican 199 UFC se reportará como 20 x 10 1
UFC, porque el tercer dígito es superior a 5.
3. Cuando las 2 placas de una dilución contienen un número de colonias
características dentro del rango de sensibilidad del método, se promedian los
números y se multiplica por el inverso de la dilución.
4. Cuando hay una placa con crecimiento extendido, no se consideran ésta
ni su duplicado.
5. Cuando una de las 2 placas de una dilución es representativa y la otra no,
se consideran ambas y se promedian.
METODO
PRINCIPIO
La determinación de microorganismos coliformes totales por el método del
Número más Probable (NMP), se fundamenta en la capacidad de este grupo
microbiano de fermentar la lactosa con producción de ácido y gas al incubarlos
a 35°C 1C durante 48 h., utilizando un medio de cultivo que contenga sales
biliares. Esta determinación consta de dos fases, la fase presuntiva y la fase
confirmativa. En la fase presuntiva el medio de cultivo que se utiliza es el caldo
lauril sulfato de sodio el cual permite la recuperación de los microorganismos
dañados que se encuentren presentes en la muestra y que sean capaces de
utilizar a la lactosa como fuente de carbono. Durante la fase confirmativa se
emplea como medio de cultivo caldo lactosado bilis verde brillante el cual es
selectivo y solo permite el desarrollo de aquellos microorganismos capaces de
tolerar tanto las sales biliares como el verde brillante.
PROCEDIMIENTO
Toma de Muestras
Las muestras para el análisis bacteriológico, se deben tomar en frascos
muestreadores que se hayan lavado con extremo cuidado y esterilizado.
En su interior añadir, previo a la esterilización, 0,1 mL de solución de Na 2S2O3
(tiosulfato de sodio) al 10%, por cada 120 mL de muestra con el propósito de
neutralizar la acción del cloro que pudiera contener la muestra, cubriendo
además el tapón del frasco hasta el cuello con papel aluminio.
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Antes de efectuar los cultivos, la botella con la muestra y las diluciones, deben
ser agitadas vigorosamente, con movimientos hacia arriba y hacia abajo.
Diluciones
• A partir de cada uno de los tubos que han resultado positivos en la prueba
presuntiva, agitándolos previamente para homogeneizar, inocular con
tres asadas tubos conteniendo caldo Lactosa Bilis Verde Brillante (BVB).
• Incubar durante 48 ± 3 h a 35 ± 0,5 °C.
• Examinar los tubos a las 18 ± 1 h y 48 ± 3 h de incubación y anotar el
número total de tubos que presenten formación de gas en cualquier
cantidad.
• Dentro de 48 ± 3 h constituye un ensayo confirmativo positivo.
CRECIMIENTO MICROBIANO
El crecimiento microbiano se refiere a un aumento de la cantidad de individuos
que contiene una población microbiana. Para que exista este aumento es
necesario un aporte adecuado de nutrientes para que las células sinteticen
diferentes componentes celulares que darán lugar al proceso reproductivo de la
misma, este proceso de captación de nutrientes se da por diferentes
mecanismos de transporte a través de la membrana celular.
CURVA DE CRECIMIENTO O HISTORIA DEL DESARROLLO
La curva de crecimiento denominada también historia del desarrollo o ciclo de
crecimiento son las etapas por la que los microorganismos atraviesan en el
transcurso de sus vidas. Como ya se mencionó anteriormente para que pueda
darse este proceso, es necesario que existan condiciones adecuadas, esto
implica condiciones nutricionales adecuadas (macro y micronutrientes
adecuados), condiciones fisicoquímicas adecuadas (temperatura, ph, actividad
de agua, presencia o ausencia de oxígeno).
Las fases por las que atraviesan los microorganismos son las siguientes: Fase
de retardo, latencia o LAG, fase exponencial, fase estacionaria y fase de muerte.
FASE DE LATENCIA
Es una fase que inicia cuando los microorganismos son introducidos en un nuevo
medio de cultivo. Es una etapa que se caracteriza porque no existe reproducción,
en esta los microorganismos simplemente se adaptan a las nuevas condiciones
del medio. La duración de esta fase es variable y es muy determinante para el
éxito o fracaso de una operación. La duración depende de varios factores:
factores nutricionales, factores fisicoquímicos que ya se explicó anteriormente
pero además afecta también la edad y el tamaño del inóculo.
Cuando se menciona edad del inóculo se hace referencia a la etapa donde se
encuentran los microorganismos en la curva de crecimiento es decir si se
encuentra en la fase de retardo, exponencial, estacionaria o de muerte. La mejor
etapa para utilizar a los microorganismos como inóculo es cuando se encuentran
en la fase exponencial, es en esta cuando la fase de latencia durará muy poco
tiempo. En cambio si se usan microorganismos que se encuentran en la fase
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Por otra parte otro factor que determina o incide en la duración de la fase de
latencia, es el tamaño del inóculo. Se recomienda que el tamaño del inóculo este
comprendido entre el 3-10% del volumen a fermentar.
MÉTODOS DIRECTOS
Estos métodos requieren preparaciones limpias exentas de partículas extrañas.
MÉTODOS INDIRECTOS
MÉTODOS INDIRECTOS
Son métodos que miden el número de bacterias viables (que no equivale al de
totales).
P0= e--m
y por lo tanto es fácil calcular el valor de m:
m = -lnP0
Xo→2Xo→4Xo→8Xo→16Xo→32Xo---------nXo
La anterior ecuación ilustra que una población cada vez que se reproduce duplica
su cantidad, que es la característica reproductiva de las células microbianas.
Bacillu Sacarosa-sales 25
megaterium
Streptococos Leche 26
lactis
tgestación
ESPECIE tgestación(días) tgestación(min)
(meses)
Ratón 0,3 9 12960
Gato 1,9 58 83520
Perro 2,1 63 90720
Conejo 1,0 31 44640
Cerdo 3,8 114 164160
Oveja 5,0 150 216000
Hombre 9,0 270 777600
Elefante 24,0 720 1036800
NÚMERO DE GENERACIONES
El número de generaciones es el número de veces que una célula o población
se ha multiplicado o reproducido. La expresión matemática con la que se puede
calcular esta variable es la siguiente:
𝑡
𝑛=
𝑡𝑔
Donde:
n= Número de generaciones.
Despejando n:
𝐿𝑛 𝑋 − 𝐿𝑛 𝑋𝑜
𝑛=
𝐿𝑛 2
Donde:
X= Concentración final de células microbianas [=] m/v
Xo= Concentración inicial de células microbianas [=] m/v
Derivando la ecuación (4) respecto de X, se obtiene:
1 𝑑𝑥 0.693
=
𝑥 𝑑𝑡 𝑡𝑑
Donde:
X= Concentración de células [=] m/v
𝜇 = 0.693/𝑡𝑑
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RENDIMIENTO
Los rendimientos se definen como la relación entre el producto obtenido y el
sustrato consumido, usualmente referidos a la fuente de carbono y energía. El
rendimiento celular se define a través del concepto de nutriente limitante. Un
nutriente limitante es aquel sustrato que cuyo consumo controla la velocidad de
producción de biomasa. Es decir que la velocidad de crecimiento celular es
función de tal nutriente. En muchos casos existen más de un nutriente u otros
factores que intervienen en dicha velocidad, pero para simplificar se considera
siempre que sólo uno es el esencial y el más importante. A través de este
concepto de sustrato limitante se puede definir el rendimiento del proceso.
∆𝑋 𝐵𝑖𝑜𝑚𝑎𝑠𝑎 𝑝𝑟𝑜𝑑𝑢𝑐𝑖𝑑𝑎
𝑌𝑥/𝑠 = =
∆𝑆 𝑆𝑢𝑠𝑡𝑟𝑎𝑡𝑜 𝑐𝑜𝑛𝑠𝑢𝑚𝑖𝑑𝑜
Donde:
(∆𝑆)𝑚𝑐 = 𝐶𝑜𝑛𝑠𝑢𝑚𝑜 𝑑𝑒 𝑠𝑢𝑠𝑡𝑟𝑎𝑡𝑜 𝑝𝑎𝑟𝑎 𝑓𝑜𝑟𝑚𝑎𝑐𝑖ó𝑛 𝑑𝑒 𝑚𝑎𝑡𝑒𝑟𝑖𝑎𝑙 𝑐𝑒𝑙𝑢𝑙𝑎𝑟
∆𝑃 𝑃𝑟𝑜𝑑𝑢𝑐𝑡𝑜 𝑝𝑟𝑜𝑑𝑢𝑐𝑖𝑑𝑜
𝑌𝑝/𝑠 = =
∆𝑆 𝑆𝑢𝑠𝑡𝑟𝑎𝑡𝑜 𝑐𝑜𝑛𝑠𝑢𝑚𝑖𝑑𝑜
CINÉTICA DE CONSUMO DE SUSTRATO
Una vez que los microorganismos dejan la fase de retardo, ellos comienzan a
crecer vigorosamente y a medida que lo hacen la concentración de sustrato va
disminuyendo en un cultivo por lotes, esto puede ser representado mediante la
siguiente ecuación:
𝑑𝑠 1 𝑑𝑥
=−
𝑑𝑡 𝑌 𝑑𝑡
Reemplazando la ecuación de Monod:
𝑑𝑠 1 𝑆𝑋
= − 𝜇𝑚
𝑑𝑡 𝑌 𝐾𝑠 + 𝑆
Agrupando términos se tiene:
𝑑𝑠 𝐾𝑆𝑋
=−
𝑑𝑡 𝐾𝑠 + 𝑆
Donde:
K= Velocidad de consumo de sustrato = µmáx/Y
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X S P
CULTIVOS
El crecimiento bruto es
dx/dt = µx
Por lo tanto, el crecimiento neto es:
Turbidostato
Permite cultivos continuos con un coeficiente µ cercano al µ máx, trabajando a
valores altos de factor de dilución (D). Ello lo logra ajustando los valores de
densidad celular de modo que ningún factor nutricional se haga limitante.
Se dice que es un sistema de control interno porque es la misma concentración
de bacterias la que regula el flujo de entrada y de salida (por medio de un
mecanismo electrónico basado en la medición y control de la densidad óptica del
cultivo).
Inconvenientes:
Quimiostato
Para introducirnos al funcionamiento del quimiostato, partamos de la
observación de lo que pasaría en el turbidostato si desconectamos el fotómetro
y ajustamos la bomba para que vierta medio fresco al cultivo a una tasa (flujo)
menor que el que mantiene la µ cercana a la µ máx:
las bacterias tenderían a crecer a mayor velocidad que su dilución debida a
adición de medio fresco; por lo tanto, en un principio aumentaría la concentración
de bacterias.
Pero este incremento no podría continuar indefinidamente. Pero el crecimiento
tampoco se detendría. De hecho, tras un cierto tiempo, el cultivo alcanzaría
un nuevo estado estacionario de equilibrio, en el que la tasa de crecimiento
se hace proporcional a la tasa de adición de medio fresco. En este caso, el
cultivo crece exponencialmente, pero a tasas µ <µ máx. Sigue creciendo
exponencialmente porque la tasa de dilución del cultivo es una función
exponencial del tiempo.