Producción de la Penicilina a

partir del Penicillium notatatum

OPERACIONES DE SEPARACIÓN

Grupo B:
Andrea Sanz Jaén
Lucía Cienfuegos Delgado
Mario Silva Real
Ariadna Cano Barea
María Fernández Martínez
María José Sánchez Ruiz
Inmaculada Domínguez Gómez
 1. Definición del problema
El problema contemplado se basa en la producción de penicilina a partir del hongo Penicillium
notatum.

Comenzamos con una suposición en la que trabajamos en una empresa biotecnológica donde
nos piden diseñar las primeras etapas para tratar el caldo de cultivo tras el biorreactor en el que
generamos la penicilina a partir del hongo mencionado anteriormente teniendo en cuenta que
contamos en nuestra planta con un biorreactor de 500 L de capacidad.

Finalmente debemos contar con un sistema de filtración y un diseño básico de los equipos
seleccionados para el proceso.

2. Introducción
2.1. Penicillium notatum

El Penicillium notatum se trata de un hongo capaz de producir 2 mg de penicilina por cada litro
de cultivo. Esta especie se caracteriza porque los individuos se agrupan formando hifas y
finalmente un micelio. Es capaz de producir esporas, pero trataremos de mantener las
condiciones óptimas para el hongo y usaremos un tratamiento con rayos gamma en lugar de
productos químicos para evitar que se sinteticen en gran número, por lo que despreciaremos las
esporas.

2.2. Penicilina

La penicilina forma parte del grupo de antibióticos betalactámicos, el cual

posee un anillo β-lactámico que le confiere las propiedades como antibiótico
al ser un inhibidor específico de la síntesis de peptidoglicanos. La estructura
general de la penicilina se conoce como ácido 6-aminopenicilánico (6-APA),
compuesta por un anillo tiazolidínico con un anillo β-lactámico condensado,
el cual tiene una cadena lateral (R). Este compuesto surge de la ruta de
degradación de la lisina como metabolito secundario.
2.3. Disrupción celular

Al ser un metabolito excretado, no necesitamos un método mecánico de ruptura celular, sino

que someteremos a estrés el hongo mediante el tratamiento de sus esporas con radiaciones
gamma, pues existe un aumento de su rendimiento gracias a la irradiación del hongo, mejorando
considerablemente la producción de penicilina debido a la alta esporulación y variación de la
morfología de las cepas mutantes.

Usaremos un filtro rotatorio a vacío o de tambor para poder separar la penicilina de los demás
componentes celulares obtenidos tras la biosíntesis de misma por parte del Penicillium.

3. Proceso de obtención de la Penicilina

Esquema general del proceso de
extracción de la penicilina.
Una vez realizada la fermentación y obtenida la penicilina, es necesario separarla primero del
hongo (micelio) y posteriormente separarla del medio. Para ello, primero se utiliza un filtro
rotativo de vacío para separar del caldo las partículas sólidas y las células (micelios). Para la
extracción de la penicilina es práctica generalizada usar una extracción líquido-liquido continua
a contracorriente. Normalmente se utiliza acetato de butilo o de amilo. La penicilina se extrae
de la fase acuosa a pH ácido y pasa a la fase orgánica. Para llevar a cabo este proceso se recurre
al extractor centrifugo Podbielniak o POD. Después, se incorpora una segunda etapa de
extracción, para devolver la penicilina a un medio acuoso con una solución buffer de fosfato que
devuelve el pH a valores neutros. El siguiente paso es la cristalización de la sal de penicilina G
potásica que se realiza tratando la corriente acuosa saliente de la segunda POD con una solución
saturada de acetato potásico. Se produce entonces la precipitación de la sal cuyos cristales
quedan en suspensión. Los últimos pasos consisten en separar los cristales del líquido matriz y
el secado de los mismos.

Filtro de tambor rotatorio al vacío

Las principales aplicaciones industriales de los filtros a vacío se encuentran en los
procedimientos de fabricación de gran tonelaje. Las partículas son atrapadas en el interior del
medio filtrante debido a que los poros del medio filtrante presentan un tamaño mucho mayor
que el de las partículas.

En el filtro rotatorio de tambor a vacío el producto a filtrar llega de forma continua a la cuba del
filtro y un agitador pendular en la misma cuba impide la sedimentación de los sólidos. El tambor
es el elemento filtrante y su superficie exterior está dividida en celdas recubiertas por tela
filtrante donde se depositan los sólidos en una capa uniforme al aplicar el vacío, el cual es creado
por una bomba. De esta superficie, un 1/3 se encuentra sumergida en la solución a filtrar,
adaptando su velocidad de rotación a las características de la filtración y el producto.

El tambor está dividido en distintas secciones para que en su rotación las celdas pasen
sucesivamente por las zonas de filtración, lavado y desecado.

4.1 Parámetros a tener en cuenta:

Los parámetros de diseño fundamental a tener en cuenta en un filtro de tambor rotatorio a

vacío de nuestras características son los siguientes:
ELECCIÓN DEL MEDIO FILTRANTE

Para la elección del medio filtrante en este caso, es necesario considerar el tamaño de los
conidios, siendo, según microbewiki, de un mínimo de 20 micras y de una media de 40 a 50
micras. Hemos elegido una que está formada por un monofilamento de propileno(PP) en tejido
de sarga de la marca Bonfilt por las siguientes características: es resistente a ácidos, alcálisis,
hidrólisis, oxidación y moho; trabaja a temperaturas de hasta 90 Cº; contiene una superficie
densa y lisa con el consecuente aumento del rendimiento de filtración y mejora del lavado de la
torta; cumple con los requisitos de la FDA; y presenta un tejido de sarga estable en transversal y
resistente mecánicamente con fácil liberación de la torta de filtración.
ELECCIÓN DEL CAUDAL DE ENTRADA AL FILTRO

Con el fin de llevar a cabo el proyecto en un tiempo razonable bajo la posibilidad de hacer el
proceso continuo (permitiendo el crecimiento del hongo en el biorreactor), trabajaremos
tratando 500L cada 48 horas siendo el caudal de entrada en el filtro de 10,5L por hora.
DISEÑO DEL FILTRO Y ECUACIÓN GENERAL PARA LA FILTRACIÓN POR TORTA:
FILTRACIÓN A CAUDAL CONSTANTE

Para llevar a cabo el diseño del filtro debemos tener en cuenta ciertos aspectos como que la
capacidad de nuestro reactor es de 500L además de que, vamos a trabajar en continuo. Esto
último es totalmente determinante puesto que podemos encontrarnos con dos formas de
trabajo para llevar a cabo este tipo de filtración; la primera es a presión constante por lo que el
caudal del líquido y el volumen filtrados irán disminuyendo con el tiempo debido al aumento del
espesor de la torta, la segunda es a caudal constante (nuestro caso) en la cual deberá aumentarse
de forma gradual la presión aplicada en el filtro para vencer la resistencia cada vez mayor de la
torta.

Si tenemos en cuenta que las partículas que forman la torta son de pequeño tamaño y la
velocidad del fluido a través de los canales es lenta, podemos asumir que trabajamos en régimen
laminar. De este modo el flujo a través del sólido puede describirse por la ecuación de Kozeny:
∆𝑃𝑇 375 (1−𝜀)2 Siendo:
= ⋅𝜇⋅𝜐⋅
𝐿 𝐷𝑝2 𝜀3 • Dp el diámetro de la partícula
• 𝜇 la viscosidad del fluido
• v la velocidad del fluido referida al área de la sección transversal del lecho S
• 𝜀 porosidad

Esta expresión puede ser modificada añadiendo parámetros como la retención de la torta
(W) y la resistencia de la torta (α)
𝑚𝑎𝑠𝑎 𝑑𝑒 𝑝𝑎𝑟𝑡𝑖𝑐𝑢𝑙𝑎𝑠 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝑡𝑜𝑟𝑡𝑎 𝑀 𝑐
𝑊= = = ⋅𝜌
𝑉𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒𝑛 𝑓𝑖𝑙𝑡𝑟𝑎𝑑𝑜 𝑉 1−𝑐 𝐿
Dando lugar a lo que conocemos como ecuación general para la filtración por torta:
1 𝑑𝑣 ∆𝑃
⋅ =𝜇⋅𝛼⋅𝑤
𝑆 𝑑𝑡 ⋅ (𝑉 + 𝑉𝑒)
𝑆
Teniendo en cuenta esto y que el proceso se lleva a cabo a caudal constante debemos
aplicar las siguientes ecuaciones:
𝜇⋅𝛼⋅𝑤 𝜇⋅𝛼⋅𝑤
∆𝑃 = 𝑘1 ⋅ 𝑉 + 𝑘2 ; 𝑑𝑜𝑛𝑑𝑒: 𝑘1 = 2
⋅ 𝑄 𝑦 𝑘2 = ⋅ 𝑄 ⋅ 𝑉𝑒
𝑆 𝑆2
Para expresar la relación entre el volumen filtrado y el tiempo de filtración, se parte de la
definición de caudal de filtración; teniendo en cuenta una tarta incomprensible y
recordando que la velocidad de filtración es cte se llega:
𝜇⋅𝛼⋅𝑤 2 𝜇⋅𝛼⋅𝑤 2
∆𝑃 = 𝑘3 ⋅ 𝑡 + 𝑘4 ; 𝑑𝑜𝑛𝑑𝑒 𝑘3 = 2
⋅ 𝑄 𝑦 𝑘4 = 𝑄 ⋅ 𝑡𝑒
𝑆 𝑆2
Una vez tenemos las ecuaciones a emplear, debemos recopilar todos los datos y
suposiciones necesarias para obtener una expresión de la presión en función de t y te:

1. Vamos a suponer que nuestro caudal es de 1.38*10^-4L/h de media

2.125 𝐿 1 𝑚3 1ℎ −7
𝑚3
𝑄= ⋅ ⋅ = 5,903 ⋅ 10
ℎ 1000𝐿 3600𝑠 𝑠
2. Al encontrarse en medio tomamos como viscosidad y densidad la de
3.Suponemos valores de c=0.25kg y alfa= 1,4*10^6 m/kg, de tal forma que hallamos:
0.25 𝑘𝑔
𝑤= ⋅ 103 = 333.33 3
1 − 0.25 𝑚
4.Obtenemos k3 y k4:

10−3 ⋅ 1.4 ⋅ 106 ⋅ 333.33

𝑘3 = ⋅ (5.903 ⋅ 10−7 )2 = 1.511 ⋅ 10−6 ; 𝑘4 = 1.511 ⋅ 10−6 ⋅ 𝑡𝑒
(0.328)2

5. ∆𝑃 = 1.511 ⋅ 10−6 𝑡 + 1.511 ⋅ 10−6 𝑡𝑒

Para calcular la sección, primero hemos tenido que calcular la masa de torta seca por
unidad de área. Para este caso, supondremos la longitud de la torta que queremos coger
que será de 0.08 cm:
𝑘𝑔 𝑘𝑔
𝑊𝑐 = 333.3 3
⋅ 0.08 𝑚 = 26.66 2
𝑚 𝑚
Usaremos una gráfica que nos relaciona la masa de la torta seca por unidad de área (en
lb/ft^2)

Pasando los 26.66 kg/m^2 a las unidades

correspondiente nos da: 5.46 lb/ft^2 que
interpolando en el grafico podemos ver que
tendríamos un tiempo de filtración de
aproximadamente un minuto. Con esto ahora
podemos calcular el radio de filtración

𝑘𝑔
𝑊𝑐 26.66 𝑚3 𝑘𝑔 𝑘𝑔
𝑅𝑎𝑡𝑖𝑜 𝑓𝑖𝑙𝑡𝑟𝑎𝑐𝑖ó𝑛 = = = 26.66 2 = 1599.6 2
𝑡𝑓 1 𝑚𝑖𝑛 𝑚 ⋅ 𝑚𝑖𝑛 𝑚 ⋅ℎ

Supondremos que queremos obtener 175 kg/h de torta seca:

𝑘𝑔
175
𝑆= ℎ = 0.328 𝑚2
𝑘𝑔 1
1599.6 2 ⋅
𝑚 ⋅ℎ 3

4. Propuesta de filtro de tambor rotatorio al vacío

Teniendo en cuenta todos los factores que afectan a la elección del filtro, consideramos que el
más apropiado es uno del tipo Nutsche de la marca Buchiglas.

En caso de obturación del filtro a la hora de realizar el proyecto experimentalmente, contamos

con agentes coadyuvantes, los cuales aumentan la porosidad de la torta.
 5. Bibliografía
- Ruta de biosíntesis de la penicilina: https://www.kegg.jp/entry/pathway+pcs00311-
https://rodin.uca.es/handle/10498/18409
- Barcat, J. A. (2006). Sobre la historia de la penicilina, la segunda línea. Revista de Medicina, 66, 363-366.
- https://rodin.uca.es/bitstream/handle/10498/18409/b37396481.pdf?sequence=1&isAllowed=y
- Apuntes y diapositivas tema 3. Filtración. Operaciones de separación. Grado en Biotecnología Facultad de Ciencias
UCA.
- (S/f). Gruptefsa.com. Recuperado el 14 de octubre de 2022, de https://gruptefsa.com/filtros_de_vacio/08-
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- Estructura general de la penicilina: KEGG COMPOUND: C00395
- Nathwani, D., Wood, M.J. Penicillins. Drugs 45, 866–894 (1993). https://doi.org/10.2165/00003495-199345060-
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- M.A. Steffens, E.S. Fraga, I.D.L. Bogle. Multicriteria process synthesis for generating sustainable and economic
bioprocesses. Computers and Chemical Engineering 23 (1999) 1455-1467.
- (Diseño De Biorreactor Para Penicilina [z0x2xm72ynqn] (doku.pub))
- Tela de filtro de correa para filtros horizontales de correa de vacío, proveedor de correas de filtro de vacío
(bonfilt.com)
- RPF Rotary Pressure Filter - BHS Sonthofen Process Technology - Catálogo PDF | Documentación técnica | Brochure
(directindustry.es)