Verificacion de equipo UV Vis, precisión, exactitud, señal y ruido usando

diferentes materiales en celdas, estándar de oxido de holmio y sulfato de

cobre

Julian Felipe Medina

Universidad nacional de Colombia, bogota D.C

Entregado: 24/05/2023

Resumen evidenciando que la precisión del

espectrofotómetro no excede el 0,10%
En el desarrollo de la presente
de error. Los procedimientos
experimentación, se llevó a cabo la
realizados en este estudio
verificación del correcto
experimental permitieron verificar y
funcionamiento del espectrofotómetro
validar el adecuado desempeño del
Thermo Evolution UV-Vis de la
espectrofotómetro Thermo Evolution
reconocida marca Thermo. En primer
UV-Vis de la marca Thermo. Los
lugar, se procedió a evaluar la relación
resultados obtenidos en cuanto a la
entre la señal y el ruido emitido por el
relación señal/ruido, la elección del
equipo, arrojando un valor registrado
material de las celdas, la exactitud
de 323 unidades. A continuación, se
fotométrica y la reproducibilidad de las
realizaron pruebas utilizando
medidas respaldan la confiabilidad y
diferentes materiales para las celdas
precisión de este instrumento en su
de medición, concluyendo que el
aplicación para futuras
cuarzo se muestra como la opción
investigaciones y análisis fotométricos
más apropiada debido a su capacidad
para minimizar cualquier tipo de
interferencia indeseada. Además, se
Palabras clave: Absorbancia,
hizo uso del óxido de holmio como
transmitancia, celda, cuarzo, vidrio,
sustancia estándar de referencia con
plástico, oxido de holmio, sulfato de
el fin de evaluar la exactitud
cobre
fotométrica del espectrofotómetro. Los
resultados obtenidos indicaron que el
margen de error de dicho equipo no
supera el 0,20%. Asimismo, se llevó a Abstract
cabo un análisis exhaustivo de la During the development of the present
reproducibilidad de las medidas, experimentation, the verification of the
proper functioning of the Thermo
Evolution UV-Vis spectrophotometer,
manufactured by the renowned brand
Thermo, was carried out. Firstly, the
relationship between the signal and
the noise emitted by the equipment
was evaluated, resulting in a recorded
value of 323 units. Subsequently, tests
were conducted using different
materials for the measurement cells,
concluding that quartz emerges as the
most suitable option due to its ability to
minimize any kind of unwanted
interference. Furthermore, holmium
oxide was used as a reference
standard substance to assess the
photometric accuracy of the
spectrophotometer. The obtained
results indicated that the margin of
error for the equipment does not
exceed 0.20%. Likewise, a Materiales y métodos
comprehensive analysis of
measurement reproducibility was
performed, revealing that the precision
of the spectrophotometer does not
exceed a 0.10% error. The procedures
conducted in this experimental study
allowed for the verification and
validation of the proper performance
of the Thermo Evolution UV-Vis
spectrophotometer from the Thermo
brand. The results obtained regarding
the signal-to-noise ratio, choice of cell
material, photometric accuracy, and
measurement reproducibility support
the reliability and precision of this
instrument in its application for future
research and photometric analysis.
Keywords: Absorbance,
transmittance, cell, quartz, glass,
plastic, holmium oxide, copper sulfate.
Objetivos
Se llevó a cabo la realización de
diversas pruebas y análisis con el
objetivo de corroborar el correcto
funcionamiento de un
espectrofotómetro denominado
Thermos Evolution.
Evaluar y verificar múltiples
parámetros esenciales, tales como la
relación entre la señal y el ruido, así
como la exactitud y precisión del
instrumento.
Mediante estos procedimientos,
asegurar y confirmar la adecuada
operatividad y desempeño del
espectrofotómetro en cuestión.
Verificación del funcionamiento
equipo señal/ruido
Con el propósito de examinar y
evaluar la relación señal-ruido (S/N)
del equipo mencionado, se llevaron a
cabo mediciones de la transmitancia
(%T) del aire dentro de un rango
específico de lecturas que abarcó
desde 200 nm hasta 800 nm. Estas
mediciones se realizaron a una
velocidad promedio utilizando el
equipo en cuestión.
Análisis de celdas
Con el propósito de realizar una
comparación exhaustiva y detectar
posibles interferencias en los
diferentes rangos del espectro UV-
VIS, se procedió a registrar los
espectros de diversos materiales
utilizados en celdas, como el vidrio,
cuarzo y plástico. En este estudio
comparativo, se utilizó el aire como
blanco de referencia y se midió la
transmitancia (%T) de cada uno de los
materiales evaluados. El objetivo fue
identificar y analizar cualquier tipo de
interferencia que pudieran presentar
en el espectro UV-VIS.
Análisis de precisión y exactitud
Con el objetivo de verificar los
parámetros de exactitud y precisión
del espectrofotómetro, se procedió a
registrar el espectro de un cristal de
óxido de holmio como referencia de
longitud de onda. Cabe destacar que
previamente se capturó el espectro del
aire como línea base, utilizando el
blanco para medir y establecer un
punto de referencia. Para evaluar la
exactitud, se registraron señales de
absorbancia y transmitancia en un
amplio rango de 200 a 800 nm. En
cuanto a la precisión, se seleccionaron
dos bandas específicas, la banda 4
(360 nm) y la banda 8 (535 nm), y se
realizaron tres mediciones para
garantizar la reproducibilidad tanto en
absorbancia como en transmitancia.
Posteriormente, se llevaron a cabo los
registros de espectros de diluciones
de sulfato de cobre en diferentes
concentraciones: 0.02 M, 0.04 M, 0.06
M, 0.08 M, 0.10 M y 0.12 M. Estos
registros se realizaron en rangos
específicos, como 350-380 nm y 500-
580 nm, con el propósito de
determinar la exactitud fotométrica del
equipo.
Análisis de datos
Verificación del funcionamiento
equipo
Relación señal ruido
En el caso de tener una serie de n
mediciones independientes, el valor
de la señal se obtiene mediante el
cálculo de la media aritmética. La
relación señal/ruido (S/N) es un
parámetro utilizado para evaluar la
calidad de una medición y se calcula
mediante la siguiente expresión:
prom
S/N =
desvest
En el proceso de evaluación de la
exactitud fotométrica, se utilizaron
diversas soluciones diluidas de sulfato
de cobre.
Resultados
Durante la realización de la prueba
utilizando el aire como blanco, se
obtuvo un valor de relación señal/ruido
de 323.95. La relación señal/ruido es
una medida que indica la proporción
entre la señal detectada y el nivel de
ruido de fondo presente en la
medición. En líneas generales, una
relación señal/ruido elevada denota
que la señal medida es
considerablemente más fuerte en
comparación con el ruido de fondo.
Esta situación es favorable, ya que
una relación alta implica que la señal
es más nítida y más fácilmente
distinguible del ruido, lo cual
contribuye a mejorar la precisión de
las mediciones.
 Señal/Ruido de equipo

120
Es importante destacar que el
100 espectrofotómetro Thermos Evolution
cuenta con un solo compartimento
80
para la muestra y se clasifica como un
equipo mono haz. En este contexto, se
%T

60
llevó a cabo la comparación de celdas
40
fabricadas con diferentes materiales,
20
como cuarzo, vidrio y plástico. El aire
se utilizó como blanco para realizar las
0
200 400 600 800
mediciones y se evaluó el porcentaje
nm de transmitancia de cada una de las
celdas.
Gráfico 1 señal/ruido del equipo La interferencia en la celda de cuarzo
Thermos Evolution es mínima, lo cual se debe a la alta
pureza del material SiO2 empleado. El
cuarzo se caracteriza por su
Rango de trasmitancia en estabilidad, lo que resulta en
diferentes celdas transiciones electrónicas de mayor
energía y longitudes de onda más
cortas. Esto se refleja en una ligera
Señal diferentes celdas interferencia alrededor de los 200 nm.
100

90
Por otro lado, la celda de vidrio
80 muestra una interferencia más
70 significativa en la región visible, pero
60 aún es posible realizar mediciones en
50
esta región. Sin embargo, en la región
abs

40
UV, alrededor de los 280 nm, la
30

20
transmitancia de la celda es nula
10 debido a la presencia de impurezas de
0 SiO2. Estas impurezas afectan la
200 300 400 500 600 700 800
-10
nm
estabilidad de los cristales y
disminuyen la energía requerida para
plastico vidrio cuarzo
las transiciones electrónicas, lo que se
refleja en la baja transmitancia en esta
Grafico 2 El equipo Thermos Evolution longitud de onda.
permitió evaluar el rango completo del
espectro UV-Vis en diferentes La celda de plástico presenta una
materiales de celdas, como el cuarzo, interferencia más pronunciada en el
vidrio y plástico, analizando su rango UV-Vis. Las impurezas
capacidad de transmisión presentes en el polímero pueden
provocar la degradación del material y
generar opacidad en la celda, lo cual Señal Holmio Abs

resultaría en errores en las 4

mediciones. Además, estas impurezas

3,5
pueden inducir la formación de
radicales, especialmente en 3

longitudes de onda de alta frecuencia. 2,5

Exactitud 2

abs
1,5
Se procedió a realizar la medición del
1
espectro UV-Vis del cristal de óxido de
holmio en un amplio rango de longitud 0,5

de onda, abarcando desde 200 nm 0

200 300 400 500 600 700 800
hasta 800 nm. Durante la medición se -0,5
longitud de onda nm
obtuvieron datos tanto en absorbancia
como en porcentaje de transmitancia,
los cuales arrojaron los siguientes Grafico 4 obtención del espectro UV-
resultados. vis experimental del cristal de óxido de
holmio utilizando el espectrofotómetro
Señal Holmio %T Thermos Evolution. Durante el
100 experimento, se registraron los
90 valores de absorbancia del cristal en
80 diferentes longitudes de onda.
70

60

50
Tabla 1 Se procedió a evaluar la
precisión del espectrofotómetro
%T

40

30
Thermos Evolution en todo el rango
del espectro UV-Vis mediante la
20
medición de la absorbancia del cristal
de óxido de holmio.
10

-10
200 300 400 500 600 700 800
Ond Longitu Longitud Error
longitud de onda nm
a d Literatur relativ
Exp a o
(nm) (nm)
Grafico 3 espectro UV-vis 1 279,1 279,3 0,2
experimental del cristal de óxido de 2 287,1 287,5 0,4
holmio utilizando el espectrofotómetro 3 333,9 333,7 0,2
Thermos Evolution. Los datos 4 360,5 360,9 0,4
obtenidos corresponden a la 5 418,3 418,7 0,4
porcentaje de transmitancia del cristal 6 452,5 453,2 0,7
en diferentes longitudes de onda. 7 459,8 460,0 0,2
8 536,5 536,2 0,3
 9 637,4 637,5 0,1 Tabla 3 Precisión del equipo
Thermos Evolution para la banda 8
del cristal de óxido de holmio.
Al revisar los datos obtenidos para el
espectro del óxido de Holmio en el
equipo Thermos Evolution, se observa Banda 8 Longitud Longitud Error
que, según las especificaciones del # replica Literatura Exp relativo
fabricante, la precisión de longitud de (nm) [1] (nm)
onda es de ± 0,50 nm. En el caso de 1 536.2 536.4 0.2
la banda 4, se supera el límite en 2 536.2 536.5 0.3
ambos casos por 0,4 nm. No obstante, 3 536.2 536.4 0.2
las demás bandas se encuentran 4 536.2 536.5 0.3
dentro del rango establecido por el 5 536.2 536.5 0.3
fabricante, lo que indica que el equipo
cumple con los requisitos de exactitud
fotométrica. Según las especificaciones
proporcionadas por el fabricante del
espectrofotómetro Thermos Evolution,
Precisión fotométrica. la capacidad de reproducir longitudes
de onda se estipula en ± 0,10 nm. Al
Para evaluar la precisión, se analizar los datos de exactitud
realizaron 5 mediciones repetidas de obtenidos para las bandas 4 y 8, se
las bandas 8 y 4 del cristal de óxido de observan las longitudes de onda de
holmio, tomando lecturas previas del 360,9 ± 0,5 nm y 536,2 ± 0,5 nm
blanco (aire) para establecer la línea respectivamente. Al comparar estos
base. Los resultados obtenidos se valores con los registrados en las
muestran en las tablas 6 y 7. tablas 2 y 3, se verifica que el equipo
cumple con los estándares de
reproducibilidad fotométrica
Tabla 2 Se múltiples mediciones de la establecidos. Asimismo, al contrastar
banda 4 del cristal de óxido de holmio estos resultados con los reportados en
utilizando el equipo Thermos Evolution la literatura, se constata que los
para evaluar su precisión. errores se mantienen dentro del límite
del 0,5 de la longitud teórica
Banda 4 Longitud Longitud Error
# replica Literatura Exp nm relativo correspondiente al cristal de óxido de
holmio.
(nm) [1]
1 360.9 360.5 0.4
2 360.9 360.6 0.3
3 360.9 360.7 0.2
4 360.9 360.6 0.3
5 360.9 360.6 0.3
 Señal Holmio %T 360 nm Señal Holmio %T 530 nm

80.000 100

70.000 90

80
60.000
70
50.000
60
%T

40.000

%T
50
30.000
40
20.000
30
10.000
20
0
10
345 350 355 360 365 370 375 380 385
nm 0
490 500 510 520 530 540 550 560 570 580
nm
1 ciclo 2 ciclo 3 ciclo

4 ciclo 5 ciclo
1 ciclo 2 ciclo 3 cilo 4 ciclo 5 ciclo

Grafico 5 %Transmitancia del oxido Gráfico 7 %Transmitancia del oxido

de holmio para longitud de onda de holmio para longitud de onda
de 360 nm de 535 nm

Señal Holmio Abs

Señal Holmio Abs 530 nm
1,2
0,45

1 0,4

0,35
0,8 0,3

0,25
abs

abs

0,6
0,2

0,4 0,15

0,1
0,2
0,05

0
0
480 500 520 540 560 580
345 350 355 360 365 370 375 380 385
nm
nm

1 ciclo 2 ciclo 3 ciclo

1 ciclo 2 ciclo 3 ciclo
4 ciclo 5 ciclo
4 ciclo 5 ciclo

Gráfico 6 absorbancia del oxido de Gráfico 8 absorbancia del oxido de

holmio para longitud de onda de holmio para longitud de onda de
360 nm 535 nm

Exactitud fotométrica
Durante el experimento, se llevó a
cabo un minucioso análisis
mediante el escaneo de la solución
en múltiples concentraciones. Se
realizó una observación detallada 1,6
de los espectros obtenidos y se
1,4
pudo constatar que presentaban
un patrón consistente y similar 1,2

entre sí. Un hallazgo relevante fue 1

la identificación de la longitud de 0,8

onda máxima correspondiente al

abs
0,6
analito, que se situó en torno a los
0,4
800 nanómetros. Esta información
resulta crucial, ya que permite 0,2

determinar la región del espectro 0

550 600 650 700 750 800 850 900
UV-Vis donde el compuesto -0,2
estudiado muestra su máxima 0.02Mlongitud de0.04M
onda nm 0.06M

absorción. 0.08M 1.0M 1.2M

Grafico 9 espectros de diferentes

Asimismo, se observó un
comportamiento altamente
significativo al incrementar la
concentración de sulfato de cobre
en la solución. En este sentido, se
constató que a medida que la
concentración aumentaba, la
señal de absorbancia también
experimentaba un incremento
notable. Este fenómeno evidencia
una relación proporcional entre las
variables, respaldando así la
validez y aplicabilidad de la ley de
Lambert-Beer en el contexto de
este estudio.
diluciones de sulfato de cobre en la
región UV-Vis, abarcando un rango de
longitud de onda de 550 nm a 900 nm,
utilizando el espectrofotómetro.
El experimento para comprobar la
ley de Lambert-Beer utilizando
sulfato de cobre como analito. Se
realizó un gráfico de absorbancia
versus concentración y se obtuvo
una ecuación de ajuste de la forma
y = 10.5652 + 0.1014x. Además, se
determinó un coeficiente de
determinación (R2) de 0.9866.

La ley de Lambert-Beer establece

una relación lineal entre la
absorbancia de una solución y la
concentración del analito presente
en dicha solución. Según la
ecuación obtenida, la absorbancia
aumenta linealmente a medida que
la concentración de sulfato de
cobre aumenta.
El coeficiente de determinación Se llevó a cabo una exhaustiva
(R2) es una medida de la bondad evaluación del espectrómetro
del ajuste lineal. En este caso, un Thermos Evolution para verificar su
valor de R2 de 0.9866 indica una desempeño y funcionalidad. Se
alta correlación entre la realizaron mediciones de varios
absorbancia y la concentración. parámetros clave, como la relación
Esto sugiere que la ecuación de señal/ruido, precisión y exactitud, con
ajuste proporciona una buena el objetivo de confirmar si el equipo
aproximación de la relación entre operaba dentro de los rangos
estas dos variables. establecidos por el fabricante. Los
resultados obtenidos demostraron
que, en su mayoría, el equipo cumplía
El experimento realizado confirma con las especificaciones y requisitos
la ley de Lambert-Beer al obtener establecidos.
una relación lineal entre la
absorbancia y la concentración de
sulfato de cobre. La ecuación de Se realizó una comparación entre
ajuste y = 10.5652 + 0.1014x distintas celdas fabricadas con
proporciona una forma de materiales diversos. Durante este
cuantificar la concentración de análisis, se pudo constatar que las
sulfato de cobre en muestras celdas de cuarzo ofrecen el mejor
desconocidas utilizando rendimiento para realizar mediciones
mediciones de absorbancia. en todo el espectro.
1,6 Las celdas de vidrio y plástico se
1,4 mostraron adecuadas para
y = 10,562x + 0,1014
1,2 R² = 0,9866
mediciones en la región visible,
especialmente a partir de los 400 nm.
1 Cabe destacar que las celdas de
0,8 plástico presentan la ventaja de ser de
abs

un solo uso, lo que previene posibles

0,6
problemas de contaminación cruzada.
0,4

0,2

0
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