Instructivo para el procesamiento de micrografías SEM usando ImageJ

1. Por seguridad realizar una copia de seguridad de las imágenes.

2. Abrir la pestaña "File" y luego "Open...".
3. Seleccionar micrografía.
4. Con la herramienta "Straight" trazar una línea a lo largo de la barra de escala (usar la
tecla Shift para ayudarse a que sea totalmente recta).
5. Ir a la pestaña "Analyze" luego "Set scale".
6. Dejar el casillero "Distance in pixels" tal y como está porque ya automáticamente se
rellenó.
7. En "Known distance" colocar 50.
8. En "Unit of length" colocar um y dar OK. Ahora la imagen tendrá escalas reales de
distancia.
9. Ahora con la herramienta "Rectangle" encerrar el área de trabajo que vamos a analizar, la
mayor parte de la dentina que nos interesa.
10. Ir a la pestaña "Image" y luego hacer click en "Crop". La imagen se recortará sólo en el
área de interés.
11. Ahora ir a la pestaña "Image" y luego en "Type" seleccionar "8 bits".
12. Nuevamente volvemos a "Image" y ahora en "Adjust" escogemos "Threshold..."
13. Seleccionamos la zona oscura de la curva de grises (de izquierda a derecha) hasta llenar
de rojo sólo las zonas negras de túbulos.
14. Hacer click en "Apply".
15. Ir a la pestaña "Analyze" y luego a "Analyze Particles..." dar directamente a OK.
16. Aparecerá una ventana "Summary" con los resultados. De esta ventana tomar los valores
"Average Size" y "%Area" en una tabla Excel.
17. Cerrar todo sin guardar cambios y comenzar con la siguiente micrografía.