TEMA 1.

EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA

Organización funcional de un laboratorio de microbiología y bioquímica.

Vestuario: acceso directo desde el exterior y dispone de todo lo necesario para que el trabajador pase directamente
al laboratorio.

Tomas de muestra: aislado del resto y dispone del material necesario.

Medios de cultivo: cerca del área de esterilización, con campana de flujo laminar y refrigerador.

Esterilización: dotado de autoclave y situado en un lugar estratégico con fácil acceso desde todos los puntos del
laboratorio.

Bacteriología: dispone de todo el material necesario para la manipulación de muestras bacteriológicas.

Micología: estudio de muestras susceptibles de contener mohos o levaduras.

Virología: dedicado a la investigación de virus.

Microscopía: se encuentran los microscopios especiales.

Recogida de residuos: que deben estar aislados, protegidos y esterilizados.

Almacén: donde se conservan los medios de cultivo, reactivos y material fungible.

Condiciones del laboratorio: mesas limpias y resistentes a los desinfectantes, iluminación natural y artificial,
ventilación sin corriente de aire para evitar la diseminación de los productos infecciosos, lavabos y red de agua
potable cerca de las mesas de trabajo.

Normas de seguridad medioambientales

Utilizar siempre guantes.

Lavarse las manos antes y después de trabajar.

No dejar en la mesa objetos personales.

No tocar nada de otros compañeros.

No llevarse nada a la boca.

No pipetear con la boca.

Utilizar siempre la bata la cual debe estar cerrada en todo momento.

Utilizar gafas de seguridad en caso de salpicaduras.

Utilizar la técnica correcta para quitarse los guantes.

Los desechos biológicos deben de ser descontaminados antes de su eliminación.

Gestión de residuos.

Normas generales de trabajo

El material empleado en manejo de microorganismos debe de estar estéril.

Las manipulaciones a un radio de 10-15cm del mechero Bunsen.

Todo el material debe estar al alcance de la mano.

Es necesaria la rapidez y el automatismo.

Limpieza del material

Se lavará tras su utilización con agua y jabón, con la ayuda de estropajos y escobillones. También, se puede dejar
sumergido en una disolución de detergente en gran proporción durante algunas horas, posteriormente se enjuagan
con agua corriente varias veces, finalmente, se pasa por agua destilada (para evitar depósitos desales residuales),
dejándose secar en escurridores o se lleva a la estufa a 70ºC. Una vez seco, se guarda en las estanterías

Limpieza de material con restos de agar solidificado:

El agar se licua introduciéndolo en baño maría a 60-70ºC o en microondas. El agar licuado no debe verterse en las
tuberías de la red de desagüe, ya que al solidificarse la obturaría. Antes de que solidifique se trasvasa a una bolsa
para residuos. La bolsa que contiene el agar se deja solidificar y se elimina con el resto de material solido
desechable.

Material de escaso riesgo:

-Materiales que NO contactan con ninguna fuente de microorganismos, como ocurre con el utilizado en la
preparación de reactivos, disoluciones etc.

-Materiales que contactan con microorganismos demostradamente inocuos.

-Material metálico fácilmente esterilizable a la llama

Limpieza del material de elevado riesgo

-Esterilizar

La esterilización garantiza la eliminación de todas las formas de vida microbiana incluidas las esporas. Esto se
consigue con calor húmedo a presión (autoclave).

Funcionamiento del autoclave:

1º Revisar el nivel de agua, si no hay suficiente se le añade y debe ser agua descalficada.

2º Llenar el cesto:

-Tubos de ensayo: en una gradilla metálica al fondo de la cesta. (hay tapones de colores para distinguir qué es
cada cosa).

-Frascos ISO: al fondo del cesto y abrirlos un cuarto.

-Matraces Erlenmeyer: Tapado con un algodón y al fondo de la cesta.

-Pipetas: envueltas en papel abal con una flecha dibujada en el sentido contrario de la punta de la pipeta.

-Placas: Meterla en una bolsa del autoclave y encima poner otra bolsa más a la cual se deberá de hacer un nudo
para cerrarla y ponerla encima de lo demás.

3º Cerrar y darle a POWER-> SELECCIONAR-> P6 (corto)/P9 (largo) -> START.

4º Cuando acabe antes de abrirla hay que ver el manómetro y ver que la presión está a 0.

-Desinfectar

Si no es posible esterilizarlo se puede desinfectar con agentes químicos como el fenol o la lejía o con agua de una Tº
mayor a 75º. Esto destruye los microorganismos patógenos, pero no sus esporas.
Condiciones de asepsia

Llamamos condiciones de asepsia a aquellas en las que se le impide el desarrollo y la contaminación por
microorganismos.

Técnica de asepsia (NUNCA)

• Introducir en un cultivo un asa de siembra no esterilizada.

• Mantener el tubo o la placa de Petri abiertos más del tiempo

necesario para transferir el cultivo.

• Coloca la tapa del tubo o de la placa de Petri en la superficie de la mesa de trabajo.

• Tocas la tapa del tubo con otra cosa que no sea la boca del tubo flameada.

Técnica de asepsia (SIEMPRE)

• Flamear el borde del tubo antes y después de introducir el asa o la pipeta para sembrar.

• Esterilizar el asa de siembra después de completar la siembra.

• Trabajar con un mechero encendido situado entre el operador y los materiales que se manipulan.

• Mantener la placa de Petri en posición invertida, salvo que el medio esté fundido o no se haya absorbido todo el in

• Eliminar el material contaminado (puntas de pipeta, pipetas de vidrio, portas, etc.) en un recipiente con
desinfectante como agua con lejía o en los contenedores amarillos para residuos biológicos.