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Fisiología - Guía de Trabajos Prácticos

APARATO REPRODUCTOR
TP– REPRODUCTOR I (Extendido vaginal en la rata)

4.1. TEMARIO
Caracteres sexuales. Determinación y diferenciación sexual. Regulación
neuroendocrina de la función sexual. Papel de la hipófisis. Testículo: funciones
hormonales y generativas. Regulación de la función testicular. Efectos
fisiológicos de las hormonas masculinas. Ovarios: regulación de la función
ovárica. Efectos fisiológicos de las funciones ováricas. Ciclo ovárico.

4.2. OBJETIVOS: luego de realizar las experiencias propuestas, Ud. deberá


estar en condiciones de reconocer en un extendido vaginal de la rata las
variaciones citológicas durante las distintas etapas del ciclo sexual.

4.3. INTRODUCCION
El ciclo estrual de la rata tiene una duración de cuatro a cinco días y se
repite a lo largo del año (poliestro). El ciclo se divide en cuatro etapas:
proestro, estro, metaestro y diestro, las que pueden identificarse por
cambios característicos en el tipo de células presentes en los frotis (extendidos)
vaginales.
Durante el proestro se forman nuevos folículos y el útero aumenta de tamaño,
preparándose para la implantación que puede tener lugar durante la fase de
estro.
La ovulación se produce durante el estro, período en que la hembra está en
celo. Si no se produce la copulación, en el metaestro se forma un cuerpo lúteo
transitorio que entra en regresión durante el diestro. El útero, que tiene un
color rosado y estaba lleno de fluido durante el estro, se torna luego delgado y
anémico.
Durante el Trabajo Práctico se estudiará el extendido vaginal de una rata,
para identificar la etapa del ciclo en que se encuentra. El principio del método
es muy similar al de la técnica de Papanicolaou, usada rutinariamente en clínica
humana para la detección y prevención del cáncer genital femenino.

4.3.1. Extendido Vaginal


La citología exfoliativa es un método de investigación endocrina que brinda
buena información a través del extendido o frotis vaginal, pudiéndose
identificar las etapas del ciclo por cambios característicos en el tipo de células
presentes.
Los roedores poseen un ciclo vaginal histológicamente definido. Su vagina
posee un epitelio pavimentoso estratificado, formado por varias capas celulares
que no tienen límites definidos sino que maduran desde las capas profundas a
las superficiales, con etapas intermedias.
Para poder identificar los frotis vaginales es necesario conocer las variaciones
morfológicas de las células descamadas en cada una de las fases del ciclo del
estro.
Proestro: se observan gran cantidad de células epiteliales redondeadas y
nucleadas; dura 18 h.

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Estro: se observan células epiteliales grandes, cornificadas y anucleadas;
dura 28 h.
Metaestro: aparecen leucocitos y células cornificadas distribuidas
regularmente; dura 8 h.
Diestro: hay gran cantidad de leucocitos polimorfonucleares, la cantidad de
células epiteliales nucleadas es escasa o nula; dura 53 h.
Observe el banco de imágenes del Campus y, de acuerdo a las descripciones
anteriores determine en la fase del ciclo que se encuentra cada una de las
fotos

4.4. PARTE PRÁCTICA


4.4.1. Obtención del Extendido Vaginal: se enjuaga la vagina con solución
salina isotónica mediante una pipeta Pasteur con un delgado catéter adosado
en su extremo (Fig. 1).Una gota de la suspensión celular obtenida se deposita
luego en la porción media de un portaobjeto limpio, extendiéndola con el mismo
catéter. Se cubre con un cubreobjeto y se observa al microscopio, primero a
bajo y luego a mayor aumento.
Para establecer en qué fase del ciclo se encuentra el animal, compare lo que
usted observa con las imágenes de la Fig. 2.

4.5. CUESTIONARIO
Al finalizar el trabajo práctico el alumno deberá responder lo siguiente
1) ¿En qué fase del ciclo del estro se encuentra la rata estudiada? Justifique su
respuesta.
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2) Relacione las fases del ciclo estrual de la rata con las fases del ciclo
menstrual ovárico de la mujer.
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3) ¿Cuál es el período fértil de la mujer? Justifique su respuesta.


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4) Mencione algunos métodos anticonceptivos que Ud. conozca.


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Fig. 1. Obtención de la muestra

Fig. 2. Frotis vaginal de la rata

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