Principios de Bioingeniería

Unidad II, Tema 4. Diseño de biorreactores

 Generalidades del biorreactor.

 Diseño de un biorreactor.

 Parámetros de control en el BRR.

©RMAGDEH2021 1
Generalidades del BRR
 Partes y configuraciones.

 Procesos continuos y discontinuos

 Sistemas de cultivos sumergidos.

 Fermentaciones en substratos sólidos.

2
 Recuerda...
En las siguientes láminas,
encontrarás algunos
enlaces-web que te
permitirán complementar la
información del tema que
estamos estudiando.
¡Visítalos!

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 Los biorreactores (BRR)
Un biorreactor/fermentador (BRR) es el centro de
cualquier proceso bioquímico en el que se empleen
sistemas microbianos o celulares de mamíferos o
plantas, para la manufactura económica de una amplia
variedad de productos biológicos útiles.

 Función principal: proveer un medio controlado para alcanzar

el crecimiento y la formación óptima de producto en el
sistema celular empleado.

FERMENTADOR BRR BIORREACTOR

4
https://biorreactores.wordpress.com/2013/05/27/que-es-un-biorreactor/
Importancia de los
bioprocesos

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Es importante para ti, como futuro
ingeniero, familiarizarte con una
serie de términos de uso común
en la práctica de la ingeniería
que se emplean en inglés.
En ese sentido, se han dejado a
propósito (en algunas láminas)
estos términos que no necesitan
traducción al español.

6
¿En qué etapa del proceso se
ubica el fermentador?

7
Imágenes de un
biorreactor ...

https://biorreactores.wordpress.com/2013/05/27/que-es-un-biorreactor/
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Esquema de un biorreactor, mostrando sus principales
componentes

https://stepquart59millard.wordpress.com/2016/09/20/biorreactores-industriales-de-suelo-por-
9
agitacion-y-rotativo/
 Los biorreactores
 El tamaño de los fermentadores/biorreactores varía entre:
• 5 a 10 litros (escala laboratorio) y de 500.000 litros (escala
industrial).
Dependerá del proceso y régimen operativo, p.e. procesos con medio no
renovado requieren fermentadores más grandes que los que funcionan
de modo continuo o semicontinuo.

 Los BRR industriales pueden dividirse en dos clases principales:

• Para procesos anaeróbicos y para procesos aeróbicos.
Los anaeróbicos, poco equipamiento excepto el utilizado para eliminar el
calor. Los aeróbicos, uno mucho más elaborado para lograr el mezclado
y la aireación adecuados.

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 Los procesos industriales y los
biorreactores
En la producción industrial se utilizan principalmente BRR:
No agitados, sin aereación (86%).
No agitados, con aereación (11%).
Agitados, con aereación (13%).

 El funcionamiento de cualquier biorreactor depende de:

• Concentración de biomasa.
• Mantenimiento de la asepsia.
• Agitación efectiva.
• Eliminación de calor.
• Condiciones correctas de corte (mezcla-viscosidad).
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Clasificación operativa de los BRR

https://biorreactores.wordpress.com/2013/05/27/clasificacion-de-los-biorreactores-2/

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Operación de los BRR...
 En continuo.

 En discontinuo.

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 Procesos Discontinuos/batch:

 Es un sistema cerrado, excepto para la aireación.

 El sustrato y el cultivo se añaden al inicio de la
fermentación, en cantidad limitada.
 El inoculado pasa por una secuencia de eventos
característicos de un ciclo de crecimiento.
 Formación eficiente de producto solo durante una
fracción del ciclo de fermentación. Los nutrientes son
limitantes.

14
 Gráfica de crecimiento en batch

http://avibert.blogspot.com/2009/11/cultivos-discontinuos-o-batch.html 15
 Cinéticas de generación de
productos
Tipo I. Producto del catabolismo (metabolismo primario). Consumo de substrato,
crecimiento y formación de producto simultánea. Trofofase e idiofase, se
solapan.

Tipo II. Producto del catabolismo. Consumo de substrato, crecimiento y

formación de producto ocurren separados. Trofofase e idiofase, no se
solapan.

Tipo III. Producto del metabolismo secundario. Consumo de substrato,

crecimiento y formación de producto separados. Trofofase e idiofase, en
tiempos distintos.

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 Procesos Continuos:

 Es un Sistema abierto.
 El sustrato se va agregando durante el desarrollo del
proceso.
 La población microbiana se mantiene en un estado de
crecimiento balanceado.
 Una vez el cultivo es agotado, se reemplaza por uno nuevo.
 Existe control de los posibles efectos de los constituyentes
tóxicos.
 Están adaptados principalmente a la formación de
metabolitos secundarios.

17
Gráfica de crecimiento en continuo
https://goo.gl/Rr5vdr

dN/dt= tasa de crecimiento. N: Cantidad biomasa

µ: velocidad específica de crecimiento (t-1) Kd: ctte. Velocidad muerte celular.
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Tipos de BRR en continuo
Quimiostato. Tasa de crecimiento
controlada por un nutriente limitante.

Turbidostato. Tasa de crecimiento

controlada por la densidad óptica del
cultivo (turbidez).

19
 El quimiostato

http://www.davidmoore.org.uk/21st_Century_Guidebook_to_Fungi_PLATINUM/
Ch17_11.htm

20
Quimiostato: características.
 Volumen de cultivo constante.

 Tiempo corto para lograr un mezclado homogéneo.

 Condiciones ambientales (concentración nutrientes, pH, T, concentración

de antibióticos) pueden mantenerse constantes.

 Puede variarse una de las condiciones ambientales y permanecer la

velocidad de crecimiento constante.

 La concentración de biomasa puede fijarse (variando la concentración del

substrato limitante en la entrada) y mantenerse constante,
independientemente de la velocidad.

21
 El turbidostato

http://www.davidmoore.org.uk/21st_Century_Guidebook_to_Fungi_PLATINUM/Ch17_11.htm

22
Turbidostato: características.
 Busca mantener la turbidez del cultivo, manipulando la velocidad
a la que es alimentado el medio.

 La turbidez es una función de la concentración de biomasa en el

recipiente.

 Opera muy bien en tiempo cortos, porque la medida de turbidez

en ocasiones no es precisa. El lector óptico puede bloquearse
fácilmente por los biomateriales.

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Otros métodos para monitorizar
biomasa en un BRR
 Midiendo la concentración de dióxido de carbono en el medio.

 Mediante la concentración de oxígeno en el medio.

 Por la concentración residual de nutrientes (nutristat o

glucose-stat).

 A través del pH (pH-auxostat).

 Por la permitividad eléctrica (permittistas).

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 Ventajas del sistema continuo (abierto)
sobre el discontinuo (cerrado)
 La rapidez de crecimiento se puede controlar y mantener
constante.
 Permite monitorizar el efecto de la variación de los
parámetros físicos o químicos sobre el crecimiento.
 Permite mantener la producción de metabolitos
secundarios simultáneamente con el crecimiento.
 Admite controlar el crecimiento limitado por un substrato
y estudiar los cambios en la composición y la actividad
metabólica celular, modificando el nutriente limitante.

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 Ventajas del sistema continuo ...
(continuación)
 Permite optimizar la composición del medio para la
formación de biomasa y de producto.
 Resultados son más confiables y reproducibles.
 Mayor productividad por unidad de volumen y mejor
aprovechamiento del tiempo de procesamiento.
 El cultivo es más económico.
 Se pueden determinar de manera exacta las constantes
cinéticas, la energía de mantenimiento y el rendimiento
real del crecimiento.

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 Desventajas del sistema continuo
comparado con el discontinuo
 El crecimiento continuo, por largos períodos, puede
ocasionar la pérdida de la cepa original y favorece la
contaminación.
 Tanto la planta como el equipo auxiliar deben ser
confiables y de la mejor calidad posible
 No siempre se pueden obtener productos no relacionados
con el crecimiento, los cuales requieren de cultivo
intermitente.

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Sistemas de cultivos
sumergidos
Los más empleados industrialmente…
 Tanque agitado (STR- stirred tank reactor): diseño muy
versátil y sencillo. Usado para ácido ascórbico,
proteínas, antobióticos y enzimas.
 Tanque agitado con recirculación (Loop): levaduras y
etanol.
 Columna de burbujas (Bubble column BRR): ácidos
(cítrico, acético y láctico), esteroides y enzimas.
 Air-lift loop BRR: levaduras, bacterias y células
vegetales.

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Fermentaciones en substratos
sólidos-FSS
Proceso fermentativo ejecutado sobre un medio no
sumergido, en ausencia de agua libre, donde se usan
sustratos naturales que sirven como fuente de nutrientes y
son a su vez el soporte físico para los microorganismos.

Se emplean en la obtención de enzimas fúngicos por cultivos

en superficie y en la producción de champiñones.

Sustratos más utilizados: salvado de trigo, granos de cereal,

legumbres, madera y paja.

29
 Lectura Obligatoria FSS
UNIDAD II. Tema 4.

*** Disponible en el entorno virtual ***

30
Diseño de un biorreactor

 Condiciones de asepsia.

 Fenómenos de transporte.

 Relaciones empíricas.

 Instrumentación y control.

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 Condiciones necesarias para el
funcionamiento de un BRR: asepsia

 Emplear inóculos puros.

 Excluir contaminantes.
 Diseñar tuberías, válvulas y accesorios esterilizables.
 Esterilización (121ºC @ 15 psi, 15-30 min).

ASEPSIA ESTÉRIL

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 Fenómenos de transporte
 Transferencia de masa.

 Transferencia de calor.

 Transferencia de cantidad de movimiento.

GAS

SÓLIDO Sistema 3-α LIQUIDO

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 Complejidad del sistema 3-α en
el caldo de fermentación

Fase gaseosa Fase líquida

dispersa: dispersa:
O2, N2, CO2 n-alcanos, grasas,
CH4, H2 aceites, esteroides,
otros insolubles en agua

Fase acuosa:
nutrientes disueltos,
productos y enzimas
Sólidos suspendidos: Biofase suspendida:
Sustancias sólidas MO, células vegetales y
propias del caldo Animales, enzimas,
de fermentación. Cultivos, etc.

34
 Aireación:
Transferencia de masa (oxígeno)
 El O2 se disuelve poco en agua y, en un fermentador con una
elevada densidad de población microbiana, hay una gran
demanda de O2 por parte del cultivo. Para asegurar una
adecuada aireación se utilizan: un difusor (aireación) y un
impulsor (movimiento).

El difusor/sparger es un dispositivo con una serie de agujeros, en

un aro de metal o una boquilla, a través de los cuales se hace
pasar aire, esterilizado por filtración, hasta el fermentador.

35
difusor/sparger

36
 El mezclado: Transferencia de masa y de
cantidad de movimiento
 El mezclado asegura el acceso uniforme de todas las células microbianas a los
nutrientes.
 Uno de los agitadores más corrientes es una lámina plana o un disco plano
unido a un eje central, que gira a gran velocidad al rotar el eje unido a un
motor. Con el fin de asegurar el máximo de mezclado suelen instalarse
deflectores/baffles verticalmente a lo largo del diámetro interior del
fermentador.
 El vástago que hace girar el impulsor/impeller está unido al motor a través
de otro eje que debe penetrar en el fermentador desde fuera.
 Para mantener la esterilidad, el cierre hermético que conecta el eje con el
motor debe evitar que los contaminantes no puedan pasar a través de él.

37
Impellers

impulsor

38
 Flujo de fluidos
 La dinámica de los fluidos en los fermentadores es muy importante
porque la eficacia en el diseño y en el modo de operar el fermentador
dependen de un mezclado adecuado.

Aumento de la velocidad de agitación

39
Mezclado: baffles y rodetes

La ubicación del agitador en el BRR,

determina el patrón de mezcla
de los materiales.
Baffles
Baffles

Baffles

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 Transferencia de energía:
calor
 Para que el crecimiento, el metabolismo y la transferencia de masa
ocurran a las velocidades deseadas, debe suministrarse o
eliminarse energía del reactor.

 Procesos que generan y consumen calor en un biorreactor:

• Durante la esterilización.
• En el metabolismo.
• Como resultado del mezclado y la aereación.
• BRR operan @ T>Tamb, se necesita una fuente de calor para
mantener la temperatura.
• Si se necesita la remoción de calor, se emplearán sistemas de
enfriamiento (coils, jackets).

42
43
 Potencia necesaria
 Para fermentadores de 100; 2500 y 50000 litros se
requieren 1-2; 15 y 100 KW, respectivamente.
 Determinar la potencia, es parte del balance de
energía.

44
Imágenes de equipos y partes
de BRR

https://bbi-biotech.com/en/artikel/schikanekorb-fuer-1l-gefaess/

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Diseño de un fermentador-BRR

 Balance de materia.

 Balance de energía.

46
Balance de materia...

47
Balance de energía...

48
Diseño del fermentador.
Relaciones empíricas-STR

49
 Instrumentación y control en el BRR
Cualquier proceso microbiano debe ser monitorizado para asegurar que éste
transcurre adecuadamente.

 En la mayoría de los casos es necesario:

• Medir el crecimiento y la formación del producto,
• Controlar parámetros ambientales que se van alterando a medida
que el proceso transcurre.
 Los factores ambientales frecuentemente monitorizados son:
• Temperatura,
• Concentración de oxígeno,
• pH,
• Masa celular y
• Concentración del producto.

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 Instrumentación y control:
ventajas del uso de computadores

 Obtención de datos sobre el proceso, mientras el mismo está

transcurriendo.

 Procesamiento de los datos recién recogidos.

 Ofrecer una respuesta adecuada a las indicaciones de un programa

respecto a cuándo y cuánto nutriente hay que añadir.

 Modelado de los procesos de fermentación.

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Instrumentación y control:
uso de computadores

52
53