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FAMILIA ENTEROBACTERIACEAE
Luis A. Merino, Liliana S. Lösch
Generalidades
La Flia. Enterobacteriaceae está formada por bacilos y cocobacilos gramnegativos (Figura 1),
anaerobios facultativos, no formadores de esporas, fermentadores de glucosa, no presentan actividad
de citocromooxidasa (son oxidasa negativa), reducen nitratos a nitritos y las especies móviles lo son
mediante flagelos de distribución peritrica.
A continuación se presentan algunos de los géneros, y dentro de ellos algunas especies, que
con mayor frecuencia se aíslan a partir de muestras clínicas humanas
Géneros Especies
Escherichia E. coli
Shigella S. flexneri, S. sonnei, S. boydii, S. dysenteriae
Salmonella S. enterica, S. bongori
Klebsiella K. pneumoniae, K. oxytoca
Enterobacter E. cloacae, E. aerogenes, E. agglomerans
Serratia S. marcescens, S. odorifera, S. fonticola
Citrobacter C. freundii, C. kooseri
Proteus P. vulgaris, P. mirabilis
Morganella M. morganii
Providencia P. rettgeri, P. stuartii
Yersinia Y. enterocolitica, Y. pestis
Estructura antigénica
Las enterobacterias poseen una estructura antigénica muy compleja. Mencionaremos los más impor-
tantes.
Antígeno K o capsular, que está presente sólo en algunas bacterias capsuladas como Kleb-
siella pneumoniae y Escherichia coli.
Antígeno Vi es un polisacárido que rodea a la bacteria sin llegar a ser una cápsula y es ca-
racterístico de algunas especies de Salmonella.
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Antígeno H o flagelar es proteico, es específico de especie y está presente sólo en las es-
pecies móviles.
Dentro de este grupo se incluyen aquellas especies que forman parte de la flora normal del
hombre y los animales, están presentes en el suelo, el agua y las plantas. Producen infección cuando
salen de su hábitat o hay alteraciones de las defensas locales. Los Géneros oportunistas que con
mayor frecuencia se aíslan de muestras clínicas son Escherichia, Klebsiella, Serratia, Enterobacter,
Citrobacter, Proteus, Morganella, Providencia, etc.
Estas bacterias producen infecciones extraintestinales como ser infecciones urinarias, sepsis,
meningitis, abscesos, neumonías, otitis, sinusitis, meningitis, etc.
Género Escherichia
Dentro del género la especie de mayor importancia es Escherichia coli. E. coli se encuentra
en número muy elevado en el contenido intestinal y tiene la capacidad de suprimir el crecimiento de
microorganismos proteolíticos debido a la liberación de bacteriocinas (colicinas), sustancias con ac-
ción bactericida, y está relacionado con la síntesis de vitamina K. Son fermentadoras de lactosa y
móviles.
Género Klebsiella
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Géneros Proteus
Este género está muy difundido en la naturaleza, se lo encuentra en el suelo, agua, aguas
servidas, materiales de animales en descomposición, tracto intestinal del hombre, etc. Juega un papel
importante en la descomposición de los cadáveres.
Se presenta con flagelos perítricos muy abundantes que hacen que “hormiguee” sobre la su-
perficie de un medio sólido de cultivo. Dentro del género Proteus las especies más importantes son:
P. mirabilis (indol negativo) y P. vulgaris (indol positivo).
Estos microorganismos son lactosa negativos y son productores de ureasa, factor de patoge-
nicidad en la producción de infecciones urinarias ya que esta enzima desdobla a la urea (muy abun-
dante en la orina) en amoníaco y dióxido de carbono. El amoníaco es tóxico para las células con lo
que se produce la irritación del epitelio urinario, lo que desencadena una reacción inflamatoria. La
alcalinidad alcanzada por la orina predispone a la litiasis urinaria.
Ciertas cepas de P. vulgaris (OX19 y OXK) comparten determinantes antigénicos con algu-
nas Rickettsias, por lo que los éstas cepas de Proteus sirven como antígeno para encontrar anti-
cuerpos anti-Rickettsias en la llamada prueba de Weil-Felix:.
Es conveniente incluir algún medio selectivo para bacilos gramnegativos como el Agar Eosina
Azul de Metileno (EMB) o Agar Mac Conkey, especialmente en aquellas muestras donde pueda apa-
recer flora acompañante.
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ellos, especialmente los recuperados a partir de muestras de pacientes hospitalizados, ser resisten-
tes a múltiples antimicrobianos.
Se conocen diferentes categorías de E. coli capaces de producir diarrea, las cuales difieren
en el mecanismo de patogenicidad. La diarrea se produce en relación a la ingestión de agua o ali-
mentos contaminados con materia fecal. A continuación se resumen las características de cada una
de ellas.
E. coli entropatógena (ECEP o EPEC): Se adhiere a la célula epitelial del enterocito, produ-
ce destrucción del ribete en cepillo por reordenamiento del citoesqueleto, disminuyendo la superficie
de absorción de agua. Esto da como resultado una diarrea del tipo acuosa. El diagnóstico se realiza
estudiando el efecto sobre cultivos celulares. En la siguiente imagen se esquematiza este mecanismo
de patogenicidad (FBP: unión de fimbrias a proteínas; eaeA y eaeB: proteínas de unión y lesión; ZO:
zónula de oclusión)
E. coli enterotoxigénica (ECET): Una vez adherida al enterocito, produce una toxina termo-
lábil (TL) y una termoestable (TS) que
Diarrea activan la adenilato y guanilato ciclasa,
respectivamente. Este mecanismo au-
menta la secreción de cloruro y bicarbo-
Ribete en cepillo nato, a la vez que disminuyen la absor-
ción de agua y electrolitos. El resultado
Efecto sobre es una diarrea acuosa de tipo colerifor-
AMPc y GMPc me. Se puede diagnosticar detectando
y otros
mediadores la toxina en las heces o en los cultivos
mediante técnicas de ELISA. En la figu-
ra de la izquierda se muestra el meca-
nismo de acción de ECET
proceso da como resultado una materia fecal con sangre, moco y pus (disenteriforme). El diagnóstico
debe hacerse mediante inoculación en cultivos celulares. En el siguiente esquema se detalla este
mecanismo de patogenicidad.
Disentería
Entrada
Leucocitos, sangre y moco
Endocitosis
Células del
epitelio Muerte
Lisis celular
columnar vacuolar
del intestino Multiplicación
Capilares
Invasión del tejido
Neutrófilos superficial
y macrófagos
(fagocitosis9
Género Shigella
Las especies más frecuentes en nuestro país son S. flexneri (85%) y S. sonnei (14%). Estas
bacterias son todas inmóviles. Producen diarrea relacionada con la ingestión de agua y alimentos
contaminados con materia fecal, pu-
diendo transmitirse además de per-
sona a persona por la vía ano-mano-
boca.. Luego de ingerida, la bacteria
se adhiere al enterocito, induce la
captación por la célula intestinal me-
diante reacomodamiento del citoes-
queleto (endocitosis inducida). Una
vez internalizada, la bacteria destruye
la vacuola endocítica y se reproduce
en el citoplasma, invade células veci-
nas y produce lesión en el epitelio
Leucocito dando como resultado una materia
Muerte del macrófago
fecal con sangre, moco y pus (disen-
Liberación bacteriana
Inflamación (IL-1β)
teriforme). Secretan además la toxina
Shiga, por lo que también pueden
desencadenar un Síndrome Urémico
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Género Salmonella
Salmonella enterica subespecie enterica es la única descripta como patógena humana. De-
ntro de este género se encuentran más de 2000 serotipos teniendo en cuenta sus antígenos O, H y
Vi. Los serotipos se denominan con letra mayúscula normal (no en redondilla) y generalmente indican
el lugar del primer aislamiento.
Estas bacterias no fermentan la lactosa, la mayoría de los serotipos son móviles y producen
diarrea relacionada con la ingestión de alimentos contaminados con materia fecal, pudiendo dar com-
plicaciones como sepsis, neumonías, abscesos, etc.
Reacción de Widal: es una reacción de aglutinación directa con cepas de S. Typhi y S. Paratyphi
A y S. Paratyphi B. Detecta anticuerpos contra los antígenos O y antígenos H. Se realiza mediante
aglutinación en portaobjetos. Debe hacerse en la primer semana y repetir una semana después para
ver variaciones de título. Títulos de Anti O > 1/80 son indicativos de infección actual.
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Género Yersinia
Yersinia pestis es el agente etiológico de la peste. La peste es una zoonosis, o sea que la su-
fre un animal (la rata) y esta la trasmite al hombre por medio de las pulgas. La especie de pulga más
importante es la Xenopsylla cheopis que adquiere la Yersinia al picar a un animal con bacteriemia y al
picar a un hombre las inyectan con la sangre del animal enfermo. Se conocen tres formas clínicas de
la peste:
1) Forma bubónica: es la forma más frecuente. La pulga pica generalmente en los miem-
bros inferiores y al progresar por los linfáticos producen los típicos bubones (que son los gan-
glios inguinales infectados e infartados). La infección toma solamente un ganglio, el cual se
hipertrofia y se hace doloroso. Además, puede supurar liberando un pus que contiene a las
Yersinias. Si esta supuración no se produce, la enfermedad evoluciona hacia la forma septi-
cémica de la peste.-
2) Forma septicémica: se manifiesta como una sepsis gravísima de tipo hemorrágico. Pue-
de producirse como una forma primaria o bien ser secundaria a la forma bubónica. En mu-
chos casos la evolución es fulminante.
3) Forma pulmonar: puede ser una forma primaria o secundaria a una forma bubónica. La
forma primaria se debe a un contagio interhumano directo. Por los esputos de los enfermos
se liberan las Yersinias y suele acompañarse de daño del SNC.
Yersinia enterocolítica produce diarrea por enteroinvasión sobre todo en el colon. Al igual que
la Y. pseudotuberculosis, es ureasa positiva (Y. pestis es ureasa negativa). Afecta sobre todo a niños,
siendo más frecuente en invierno. La vía de transmisión es la fecal - oral. Se produce un compromiso
ganglionar intenso. La complicación más grave es la septicemia aunque es poco frecuente.
La muestra debe ser materia fecal recién emitida, la cual se debe transportar en un frasco
estéril de boca ancha o pueden seleccionarse las porciones más patológicas con un hisopo y remitir-
las en medio de transporte.
Materia fecal
↓
Examen en fresco y Coloración de Gram
↓
Siembra en Agar E.M.B. o Mac Conkey y Agar SS
↓ Incubar 24 hs a 37ºC
Pruebas bioquímicas
↓
Identificación serológica
↓
Antibiograma
Siempre deben sembrarse medios selectivos como Agar E.M.B. o Agar Mac Conkey y Agar
Salmonella-Shigella ya que en materia fecal siempre hay gran número de bacterias acompañantes.
Para más detalles acerca del procesamiento de estas y otras muestras, se recomienda consultar la
Guía de Trabajos Prácticos.
En la siguiente tabla se muestra el resultado de algunas pruebas bioquímicas para los géne-
ros enteropatógenos.
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Si bien el tratamiento con antibióticos de las diarreas se limita a pacientes con enfermedades
de base e inmunocomprometidos, debe realizarse un antibiograma porque estas bacterias presentan
resistencia variable frente a los antimicrobianos.