Código EV-LAB-02

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Tipo de Ensayo Norma de Referencia

Determinación de la Concentración de NO2
en Solución captadora en ug/mtra, según ASTM D1607 (2018)
Informe de Ensayo Validado IV02-CL-260221

INDICE
1. OBJETIVO ............................................................................................................................................... 2
2. ALCANCE ................................................................................................................................................ 2
3. REFERENCIAS ........................................................................................................................................ 2
4. RESPONSABILIDADES .......................................................................................................................... 2
4.1. Analistas ........................................................................................................................................... 2
4.2. Supervisor de Laboratorio y Jefe de Laboratorio .............................................................................. 2
4.3. Gerente de Calidad........................................................................................................................... 2
5. DEFINICIONES ........................................................................................................................................ 2
5.1. Procedimiento: Forma específica para llevar a cabo una actividad o un proceso. ........................... 2
6. DESCRIPCIÓN DE ACTIVIDADES ......................................................................................................... 2
6.1. Principio ............................................................................................................................................ 2
6.2. Interferencias .................................................................................................................................... 2
6.3. Soluciones. ....................................................................................................................................... 3
6.4. Calibración........................................................................................................................................ 3
6.5. Cálculos. ........................................................................................................................................... 4
6.6. Control de calidad. ............................................................................................................................ 5
6.7. Observaciones. ................................................................................................................................. 5
7. PARAMETROS DE VALIDACIÓN .............................................................................................................. 5
8. DIAGRAMA DE FLUJO ............................................................................................................................... 7
9. REGISTROS ................................................................................................................................................ 7

Elaborado por: Revisado por: Aprobado por:

Cargo: Supervisor de Laboratorio Cargo: Jefe de Laboratorio Cargo: Gerente Calidad

Firma: Firma: Firma:

Fecha: 08/02/2021 Fecha: 09/02/2021 Fecha: 10/02/2021

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1. OBJETIVO

1.1 El presente método de ensayo validado describe en forma resumida el desarrollo de los ensayos
bajo el METODO VALIDADO IV02-CL-260221. El objetivo es garantizar un proceso de análisis
seguro y confiable bajo un lenguaje común y estándar para todos los analistas.

2. ALCANCE

2.1 Aplicable para el Método validado y Norma de la Referencia.

3. REFERENCIAS

3.1 Norma Técnica Peruana ISO/IEC 17025:2017 “Requisitos Generales Relativos a la Competencia
Técnica de los Laboratorios de Ensayo y Calibración”.
3.2 American Society for Testing Of Materials.

4. RESPONSABILIDADES

4.1. Analistas

4.1.1 Responsables de su elaboración y ejecución del instructivo en mención.

4.2. Supervisor de Laboratorio y Jefe de Laboratorio

4.2.1 Responsable de la revisión, implementación y cumplimiento de dicho instructivo.

4.3. Gerente de Calidad

4.3.1 Responsable de su revisión y actualización del instructivo.

5. DEFINICIONES

5.1. Procedimiento: Forma específica para llevar a cabo una actividad o un proceso.

6. DESCRIPCIÓN DE ACTIVIDADES

6.1. Principio

6.1.1 El método se basa en la absorción de NO2 en una solución absorbente que forme un colorante
azo de color violeta en 15 minutos y cuya absorbancia es mide a 550 nm.

6.2. Interferencias

6.2.1. La relación 10:1 de SO2 y NO2 no produce ningún efecto. La relación 30:1 de SO 2 y NO2
decolora el color en un grado bajo. La adición de acetona a la solución absorbente retarda la
perdida de color formando un producto adicional temporal con el SO2. Esto permite la lectura
de la intensidad dentro de 4 o 5 horas sin pérdidas apreciables.
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6.2.2. La relación 5:1 de Ozono y NO2 causara una pequeña interferencia, el máximo efecto ocurre
en 3 horas. La solución absorbente tendrá un ligero color naranja.

6.2.3. El nitrato de acetil-peróxido (PAN) puede producir un cambio de color en la solución absorbente.
Sin embargo, en el ambiente, la concentración de PAN es muy baja para causar algún error
significante en la medición del NO2.

6.3. Soluciones.

 Solución captadora o absorbente: Disolver 5 g de ácido sulfanílico anhidro en casi un litro de

agua desionizada que contiene 140 mL de ácido acético glacial. Se puede calentar un poco para
acelerar el proceso. Se enfría y se adiciona 20 ml de la solución de N-(1-Naftil) etileno diamina
dihidrocloruro al 0.1% y 10 ml de acetona. Diluir a 1 L. La solución es estable por varios meses
si es en un frasco de color ámbar bien cerrado y en refrigeración. La solución absorbente debe
estar a temperatura ambiente antes de su uso. Evitar el contacto prolongado con el aire durante
la preparación y el uso, ya que la coloración del reactivo será debido a la absorción de NO2.

 Solución de N-(1-Naftil) etileno diamina dihidrocloruro (0.1%): Disolver 0.1 g de N-(1-Naftil)

etileno diamina dihidrocloruro en 100 mL de agua desionizada. La solución es estable por varios
meses si es conservada en un frasco ámbar bien cerrada y en refrigeración.

 Solución stock de nitrito de sodio: Pesar 2.46 g de NaNO2 y diluir en un litro de agua
desionizada. La solución es estable por 90 días a temperatura ambiente, y un año si se guarda
en un frasco ámbar y refrigerado.

 Solución de trabajo de nitrito de sodio (0.0246 g/L): Un mililitro de esta solución produce un
color equivalente a 20 µg NO2 en 1 L de aire a 101 kPa y 25 ºC. Prepararlo diariamente antes de
usar diluyendo la solución stock de nitrito de sodio.

6.4. Calibración.

La estandarización está basado en que 0.82 moles de NaNO 2 produce el mismo color que 1 mol
de NO2. Un mililitro de la solución de trabajo de nitrito de sodio contiene 24.6 µg de NaNO 2. Ya
que el peso molecular del NaNO2 es 69.1, esto es equivalente a (24.6/69.1) x (46/0.82) = 20 µg
NO2.

Por conveniencia, las condiciones estándar son 101 kPa y 25ºC, en el cual el volumen molar del
gas es 24.47 L. Esto es muy cercano a las condiciones usadas en el equipo de muestreo del aire
que son 101 kPa , 70ºF y 50% de humedad relativa, en el cual la concentración molar del gas es
de 24.76 L o 1.2% mayor. Comúnmente, la corrección del volumen de muestra a estos
estándares es ligera y puede ser omitida, sin embargo para una mejor tendencia, puede ser
realizada por el promedio de la ecuación del gas ideal.
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Tabla 1. Volumen de la solución requerida para la curva de calibración.

Volumen de la Volumen de la
Total
Solución solución solución captadora
µg NO2 /mL(*)
Stock (mL) (mL)
Solución stock 0.2
2.50 22.50 0.020
mg/L
Solución stock 0.5
3.00 22.00 0.059
mg/L
Solución stock 0.5
5.00 20.00 0.099
mg/L
Solución stock 10
1.25 23.75 0.499
mg/L
Solución stock 10
2.50 22.50 1.000
mg/L
(*) Basado en una concentración de la solución NIST de nitrito de 1000ppm NO2

Tabla 2. Volumen de la solución requerida para los puntos de control.

Volumen de la Volumen de la
Total
Solución solución solución captadora
µg NO2 /mL (**)
Stock (mL) (mL)

Solución stock 1 mg/L 1.00 24.00 0.40

Solución stock 10 mg/L 1.50 23.50 6.00

(**) Basado en una concentración de la solución stock de nitrito de sodio 20μ NO2

Tomar 25 mL de la solución stock de nitrito de sodio 20μ NO 2 y enrazar a un volumen de 50 mL

para obtener 10 mg/L NO2

Adicionar cantidades de conocidas de la solución de nitrito de sodio en fiolas de 25 mL y enrazar

con la solución absorbente. Mezclar y dejar reposar por 15 minutos para que se desarrolle el
color completamente y leer la absorbancia a 550 nm usando agua destilada como referencia.

6.5. Cálculos.

Calcular los (µg NO2 / mL) de la muestra por medio de la ecuación de la recta obtenida de la
curva de calibración representada por la siguiente ecuación:

𝒀 = 𝑨𝒃𝒔𝒐𝒓𝒃𝒂𝒏𝒄𝒊𝒂𝒎𝒖𝒆𝒔𝒕𝒓𝒂 − 𝑨𝒃𝒔𝒐𝒓𝒃𝒂𝒏𝒄𝒊𝒂𝒃𝒍𝒂𝒏𝒄𝒐 𝒅𝒆 𝒎é𝒕𝒐𝒅𝒐

𝒀 = 𝒎𝑿 + 𝒃
Donde:
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m = pendiente
b = intercepto
Y = absorbancia corregida, y
X = µg NO2/mL obtenidos de la curva

Calcular los µg NO2/muestra

ug de NO2/muestra= X x fd x Vb

Donde:

fd = Factor de dilución
X = µg NO2/mL obtenidos de la curva
Vb = Volumen total de la solución absorbente en mL

6.6. Control de calidad.

Blanco de muestra (BK-M) por cada corrida, Muestra Duplicado (MD) por cada 10 muestras
como máximo, Muestra Control (MC) por cada 10 muestras como máximo ,Muestra Control Gas
Patrón (MC-GP) cada 6 meses. Revisar FQ-LAB-17 REGISTRO DE CRITERIOS DE
ACEPTACIÓN Y RECHAZO DE LOS CONTROLES.

6.7. Observaciones.

En el caso que el color sea muy intenso, se puede realizar diluciones enrazando con la solución
absorbente.
El tiempo de vida y estabilidad de la solución captadora es de 3 días, en cadena de frío. Pasado
los 3 días la solución captadora no utilizar, estos deben ser devueltos al laboratorio.

7. PARAMETROS DE VALIDACIÓN

 Precisión. grado de coincidencia existente entre los resultados independientes de un ensayo,

obtenidos en condiciones estipuladas. (ISO 5725-1).

 Veracidad. grado de concordancia existente entre el valor medio obtenido de una gran serie de
resultados y un valor aceptado como referencia. (ISO 5725-1).

Selectividad/especificidad. Es el grado por el cual un método puede determinar un analito

particular dentro de una mezcla compleja, sin ser interferido por otros componentes de la mezcla.
La capacidad de un método para determinar exactamente y específicamente el analito del interés
en la presencia de otros componentes en una matriz en la muestra bajo condiciones indicadas de
la prueba. (Guía CG 4 EURACHEM / CITAC / Third Edition).

 Rango de trabajo. Es el intervalo entre la más alta y más b aja concentración (cantidades) del
analito en la muestra, para la cual se ha demostrado que el método analítico tiene un nivel
apropiado de precisión, veracidad y linealidad.

 Linealidad. Es la relación entre la concentración de analito y la respuesta del método. Esta

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relación, denominada comúnmente curva patrón o curva de calibración, no tiene por qué ser lineal
para que el método sea eficaz. Cuando no sea posible la linealidad para un método, se deberá
encontrar un algoritmo adecuado.

Define la capacidad del método para obtener los resultados de la prueba proporcionales a la
concentración del analito.

 Sensibilidad. Es el cambio en la respuesta de un instrumento de medida dividido por el cambio

correspondiente en el estímulo.

Nota: El estímulo puede ser por ejemplo la cantidad del mensurando presente. La sensibilidad
puede depender del valor del estímulo. Aunque esta definición se aplica claramente un
instrumento de medida, puede también ser aplicada al método analítico en su totalidad,
considerando otros factores tales como el efecto de la concentración medida.

 Límite de detección. el límite de detección de un procedimiento analítico es la menor cantidad

de un analito en una muestra la cual puede ser detectada pero no necesariamente cuantificada
con un valor exacto.

El contenido más bajo que se puede medir con certeza estadística razonable. (Guía CG 4
EURACHEM / CITAC / Third Edition).

 Límite de Cuantificación. Es la concentración mínima que puede determinarse con un nivel

aceptable de exactitud y precisión. Se establece examinando una muestra o material de
referencia apropiado.

El contenido igual o mayor que el punto de más bajo concentración en la curva de calibración.
(Guía CG 4 EURACHEM / CITAC / Third Edition).

 Robustez. Es la medida de la resistencia de un método al cambio de respuesta cuando se

introducen pequeñas variaciones en el procedimiento.

La robustez de un procedimiento analítico es una medida de su capacidad de no ser afectado por

pequeñas, pero deliberadas variaciones en parámetros del método, y proporciona una indicación
de su confiabilidad durante su normal uso. (Guía CG 4 EURACHEM / CITAC / Third Edition)

Nota: Los procedimiento y resultados de los parámetros de validación evaluados se encuentran detallados
en el INFORME DE ENSAYO VALIDADO IV02-CL-260221.
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8. DIAGRAMA DE FLUJO

Temperar la Muestra a Temperatura de Ambiente.

Analizar la Muestra lo más pronto posible (Lectura

Directa)

Fijar el Espectrofotómetro a 550nm usando la celda de

1cm.

Autocerar con un blanco de Laboratorio (BK-L).

Leer y reportar las Muestras en g/muestra

9. REGISTROS

Tiempo de
Nombre Código
Retención
Reporte de Dióxido de Nitrógeno (aire) FQ-LAB-46 4 años