Tecnología en Química

Industrial y de
Laboratorio
POLITÉCNICO COLOMBIANO JAIME ISAZA CADAVID
Registro ICFES: 102621
FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS, SOCIALES Y HUMANAS
Asignatura: Análisis Instrumental, Código: CBS00367 Grupo: Calificación:

Examen: Taller teórico Análisis Instrumental cromatografía HPLC Y GC

Nombre del docente: Natalia Andrea Ramírez Cortés Fecha de entrega: 2022-07-26

Nombre del estudiante: C.C.:

Nombre del estudiante: C.C.:

Nombre del estudiante: C.C.:

FECHA DE LÍMITE DE ENTREGA: 26 DE JULIO 2022 (en físico)

1. A continuación, se muestra un cromatograma de la separación de un conjunto de siete

vitaminas hidrosolubles realizado por HPLC, se trabaja la separación en fase reversa,
utilizando una columna C18:

Basados en las estructuras químicas de cada analito, responda las siguientes preguntas:

a. ¿Qué tipo de elución emplearía (isocrático o gradiente) para la separación de estos

analitos? ¿Por qué?
b. ¿Qué fase móvil emplearía? Discuta que solvente o mezcla de solventes emplearía,
buffers, pH, en que proporciones y en caso de utilizar un gradiente, indique las
condiciones iniciales y finales de éste.
c. ¿Qué detector utilizaría? ¿Por qué?
d. Basados en los parámetros anteriores, indique el orden de elución.

Vitamina pKa
Ácido ascórbico 4.17-11.6
Riboflavina 10.2
Niacina 4.85
Biotina 4.65
Piridoxina 5.6-8.6
Cianocobalamina 1.59
Ácido pantoténico 4.4
2. Observe los siguientes cromatogramas y explique ¿Cómo se logra mejorar la resolución
de los picos del cromatograma (a) para obtener el cromatograma (b)? ¿Por qué se
cambia el orden de elución de los analitos?

Condiciones
cromatográfica
s:
(a) Fase móvil 70:30 (b) ¿? Agua:ACN Columna C18 de 30 cm de
longitud x 0.46 cm de DI

Flujo 1.5 mL/min

Detección UV 254 nm

3. ¿Si usted necesita realizar el análisis de una muestra desconocida usando GC, utilizaría
un método isotérmico o un método con programación de temperatura? en que se basaría
para elegir la temperatura mínima y la temperatura máxima para realizar su análisis, en
caso de realizar un corrido con programación de temperatura? Explique con claridad las
razones que lo llevaron a elegir cualquiera de los métodos.