Este trabajo describe la evaluación de varios parámetros para preparar un atún candidato

material de referencia (RM) para medir sus fracciones de masa total de Hg y metil-Hg mediante
vapor frío

espectrometría de absorción atómica (CV-AAS) y absorción atómica de horno de grafito de

muestreo sólido

espectrometría (SS-GF AAS). Los mejores resultados se obtuvieron después de la extracción con
tolueno y L-cisteína.

durante 15 min a 80 ° C. Los parámetros investigados fueron la estabilidad de la composición

química durante

producción, homogeneidad y segregación de analitos. No se observó segregación de analitos y el

se demostró que el material es estable incluso cuando se almacena a 50 ° C durante 10 meses.

Fracción de masa de Hg total

fue 3,03 ± 0,22 μg g-1 por CV AAS, 2,99 ± 0,43 μg g-1 por SS-GF AAS y 2,95 ± 0,15 μg g-1 por

analizador directo de mercurio (DMA). La fracción de masa de metil-Hg fue de 2,49 ± 0,13 μg g-1
por CV AAS

y 2,44 ± 0,46 μg g-1 por SS-GF AAS.

INTRODUCCIÓN

El mercurio (Hg) es un contaminante altamente tóxico que se encuentra en

variedad de especies químicas, entre las cuales el mercurio orgánico

Los compuestos son generalmente más tóxicos que los inorgánicos.

El metil-Hg puede afectar el sistema inmunológico, alterar la genética,

perturbar la función de las enzimas y dañar el sistema nervioso,

incluyendo la coordinación y los sentidos del tacto, gusto y

vista.

1 El consumo de pescado y marisco es la principal fuente

de la ingestión de metil-Hg por humanos.

2 Los niveles de metil-Hg

Hg en grandes peces depredadores como tiburones, marlín, pez espada

y ciertas especies de atún son altas, ya que este compuesto

está biodisponible en sistemas acuáticos, se bioacumula y

también se biomagnifica en la cadena alimentaria. Según Codex

niveles de referencia, los niveles máximos de metil-Hg se establecen en

1.0 y 0.5 mg kg-1 para peces depredadores grandes y no depredadores

peces, respectivamente.

3 Control y conocimiento de Hg

Los niveles son importantes para evitar desastres ambientales.

y / o promover información toxicológica.

Espectrometría de absorción atómica de vapor frío (CV AAS)

y espectrometría de fluorescencia atómica (CV AFS) son los

Los métodos más utilizados para medir el Hg total.

Teniendo en cuenta las preocupaciones sobre el medio ambiente

contaminación junto con la importancia de obtener

resultados analíticos precisos, el presente trabajo propuso

investigar varios parámetros tales como homogeneidad, analito

segregación y estabilidad en la producción de un atún

material de referencia candidato para Hg total y metil-Hg

medición de fracción de masa. Un método rápido y sencillo

se aplicó basándose en la extracción selectiva de metil-Hg.

La medición de Hg se realizó mediante CV AAS. Los resultados fueron

comparado con SS-GF AAS y analizador de mercurio directo

(DMA).}

Instrumentación

Las mediciones se realizaron con vapor frío.

espectrómetro de absorción atómica, modelo AAS Vario 6

(Analytik Jena AG, Jena, Alemania), equipado con un frío

sistema de generación de vapor (modelo HS55, Analytik Jena

AG) y una lámpara de deuterio para corrección de fondo. A

espectrómetro de absorción atómica de horno de grafito, modelo

Zeenit 600 (Analytik Jena AG) equipado con transversal

calefacción, corrector de fondo Zeeman, tubos de grafito y

Plataformas de muestreo de sólidos tipo barco con revestimiento pirolítico

(Analytik Jena) se utilizó. Una lámpara de cátodo de mercurio hueco

se utilizó en ambos métodos. Los parámetros instrumentales,

condiciones experimentales y programa de calefacción utilizado

para la medición de Hg por CV AAS y SS-GF AAS son

presentado en la Tabla 1.

Un analizador de Hg directo (sistema DMA-80, Milestone,

Middletown, EE. UU.) Equipado con un cátodo de Hg hueco

lámpara (l = 253,7 nm) y los botes de Ni también se utilizaron como

método comparativo para la medición del Hg total

concentraciones. Las muestras con una masa de 100-200 mg fueron

cargado en los barcos de Ni. Todos estos parámetros fueron elegidos

según las instrucciones del fabricante.

La muestra se liofilizó utilizando el modelo ModulyoD

(Thermo Electron Corporation, Asheville, EE. UU.). los

Las muestras se trituraron utilizando un molino de corte de alimentos (GM

200, Retsch, Haan, Alemania) y un criogénico

molino con baño de nitrógeno líquido autónomo (MA 775

modelo, Marconi, Brasil). Un tamiz automático de acero inoxidable.

sistema (modelo AS 200, Retsch) se utilizó para separar seis

fracciones de muestra de diferentes tamaños de partículas:> 500, 400-500,

300-400, 250-300, 200-250 y 150-200 μm. Para medir

Hg total por CV AAS, la muestra de pescado se digirió usando

un horno de microondas de alta presión equipado con un cuarzo

matraz (Microondas 3000, Anton Paar, Graz, Austria). A

Baño calefactor de 10 L (modelo Q226M1, Solab, Piracicaba,

Brasil, Solab) y un baño ultrasónico (modelo 75D, VWR

International, Pensilvania, EE. UU.) Se utilizaron para promover

extracción de especies de metil-Hg.

Materiales y reactivos

Todas las soluciones se prepararon a partir de grado reactivo analítico

productos químicos que utilizan agua desionizada de alta pureza obtenida de

un sistema de purificación de agua Milli-Q® (Millipore, Belford,

ESTADOS UNIDOS). Ácido nítrico (65% m / m; Merck, Darmstadt, Alemania)

se destiló en alambique de cuarzo sub-hirviendo (Marconi, SP, Brasil).

Una solución estándar de Tritisol ® de 1000 mg L −1 Hg (Merck)
se utilizó para preparar las soluciones analíticas de referencia por
dilución en serie. Las soluciones de metil-Hg se prepararon usando un
estándar sólido de Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, EE. UU.).
Para la medición de Hg por SS-GF AAS,

soluciones concentradas de 1 g L −1 Na 2 IrCl 6 (Sigma-

Aldrich), 10 g L −1 Pd (NO 3 ) 2 (Merck) y 10 g L −1 Mg (NO 3 ) 2
(Merck) se utilizaron para preparar los modificadores químicos
(0.5 g L −1 Pd + 0.3 g L −1 Mg o 0.5 g L −1 Pd + 0.3 g L −1 Mg +
0,5% m / v de Triton X-100). Se agregó Triton X-100 (Merck)
a la solución de modificador químico (0,5% m / v).

Una solución de NaBH 4 al 0,75% (m / v) utilizada como reductor

La solución se preparó diariamente disolviendo NaBH 4 en polvo.
(NaBH 4 , Nuclear, São Paulo, Brasil) en un acuoso
solución de NaOH al 0,1% (m / v) (Merck). Ácido clorhídrico
Se usó (6 mol L -1 ) (Merck) para la reacción de hidruro.
Medición de la fracción de masa del metil-Hg
La especie se realizó después de la extracción con tolueno.
(Synth, Diadema, SP, Brasil) y cisteína (Sigma-Aldrich).
La precisión de la masa total de Hg y / o metil-Hg
El método de medición de fracciones se evaluó analizando
CRM: TORT-2 (hepatopáncreas de langosta, National Research
Consejo de Canadá, NRCC), certificado por contenido total de Hg,
CE-464 (atún, Materiales de referencia europeos, IRMM)
y SRM 1566b (tejido de ostra, Instituto Nacional de
Estándar y Tecnología, NIST), ambos certificados para Hg total
así como las fracciones de masa de especies de metil-Hg, y DOLT-4
(hígado de cazón, Consejo Nacional de Investigación de Canadá,
NRCC), certificado por contenido de metil-Hg

Procedimientos

Preparación del material de referencia del candidato a atún

Para preparar el material de referencia candidato, atún
se adquirieron peces del sur de Brasil. El procedimiento
adoptado para preparar este material fue descrito previamente
por Carioni et al.  10 en el que la muestra se liofilizó durante
48 h, hasta un contenido de humedad de 2,52 ± 0,12%, luego molido
utilizando un molino de corte durante 3 min a 5000 rpm seguido de
molienda fina con molinillo criogénico (5 min de congelación
seguido de 3 ciclos de 2 min de molienda, con 1 min de
congelación entre cada ciclo). Ochenta frascos de vidrio que contienen
Se generaron 30 g de cada uno de este material. Antes del análisis,
las muestras se irradiaron con γ. El contenido de agua en crudo
El tejido de pescado se evaluó pesando la muestra antes
y después del procedimiento de liofilización.
Métodos de comparación: DMA y SS-GF AAS
Medición directa de la masa total de Hg y metil-Hg
fracciones por SS-GF AAS se realizó utilizando el procedimiento

desarrollado por nuestro grupo y publicado en trabajos anteriores. 8

Para la medición de Hg total, película de Ir y 5 µg de Pd + 3 µg de Mg
La solución se utilizó como producto químico permanente y co-inyectado.
modificadores, respectivamente. 11 Un volumen de 10 µL de Pd + Mg
fue co-inyectado junto con 10 µL de soluciones analíticas
o muestra sólida (0.200-0.400 mg). Curvas de calibración
se obtuvieron utilizando soluciones de referencia que contienen
0,5-3,0 mg L -1 Hg 2+ en HCl al 0,1% v / v. Para químico directo
especiación, 5 µg Pd + 3 µg Mg o 5 µg Pd + 3 µg Mg +
Se utilizaron soluciones de Triton X-100 al 0,5% m / v como co-inyectadas
modificadores químicos (10 µL). Calibración con analítica
soluciones de 0.5-4.0 mg L −1 Hg 2+ y metil-Hg y
Se utilizaron masas de muestra que oscilaron entre 0,200 y 0,800 mg.
para realizar la especiación química directa.

Un analizador de Hg directo (sistema DMA-80, Milestone,

Middletown, EE. UU.) Equipado con un cátodo de Hg hueco
lámpara (λ = 253,7 nm) y los barcos de Ni se utilizaron como un comparativo
método para medir las concentraciones totales de Hg. Muestras con
se cargó una masa de 100-200 mg en los barcos y
introducido en el sistema DMA-80. Todos estos parámetros
se aplicaron de acuerdo con las recomendaciones del fabricante

Desarrollo de métodos para la masa total de Hg y metil-Hg

medición de fracción por CV AAS
Mediciones de fracción de masa total de Hg y metil-Hg
fueron realizadas por CV AAS utilizando el instrumental
parámetros presentados en la Tabla 1. Para la fracción de masa de Hg total
medición, las muestras de pescado se sometieron primero a ácido
digestión usando un horno de microondas de alta presión. Alrededor
Se mezclaron 200 mg de muestra de pescado con 1 mL de
HNO 3 , 2 mL de H 2 O 2 y 3 mL de H 2 O y sometido a la
siguiente programa de calefacción [temperatura (° C), rampa (min),
mantener (min)]: (140, 5, 1), (180, 4, 5) y (200, 4, 10). los
La solución resultante se diluyó con agua desionizada hasta un
volumen final de 15 mL

Para la medición de la fracción de masa de metil-Hg, un

se adoptó el procedimiento de extracción. A 300 mg de pescado
muestra, 3 mL de 6 mol L- 1 HCl y 10 mL de tolueno fueron
adicional. Para mejorar la eficiencia de la extracción, la mezcla
se sometió a calentamiento en un baño de agua caliente durante 5, 10,
15, 20, 25 y 30 min a 80 ° C. El mismo procedimiento fue
adoptado usando un baño ultrasónico para 5, 10, 15, 20, 25 y
30 min a temperatura ambiente (25 ° C). Posteriormente, la muestra
fue sometido a una segunda extracción. Un volumen de 4 mL
de la solución anterior se transfirió luego a un tubo de vidrio
a lo que se le añadieron 2 ml de solución de L-cisteína al 2% m / v.
Después de mezclar durante 10 min, 0,1 mL de la fase acuosa se
tomado para análisis por CV AAS. Para comprobar la posibilidad de
interconversión entre especies de Hg durante la extracción
procedimiento, prueba de adición y recuperación de 3 µg de Hg II y
Se realizó metil-Hg

Se realizó una curva de calibración con sucesivas diluciones.

de solución de 1000 mg L −1 Hg II . Concentraciones entre 5 y
Se utilizaron 40,0 µg L -1 en CV AAS.
La posibilidad de interconversión de especies durante la
extracción de calor, así como la eficiencia del procedimiento fueron
comprobado mediante una prueba de recuperación de picos de 3 µg de Hg II , 3 µg de
metil-Hg y 1,5 µg L -1 de Hg II + 1,5 µg de metil-Hg
que se agregaron a soluciones acuosas y a soluciones
que contiene la matriz de pescado.

Evaluación de la composición durante la producción del material,

pruebas de segregación, homogeneidad y estabilidad de analitos
Los efectos del procesamiento de muestras durante la producción.
del total de especies de Hg y metil-Hg causadas por congelación
Se investigaron el secado y la molienda criogénica. Este estudio
se realizó analizando crudo, liofilizado y liofilizado
atún secado + triturado criogénicamente + irradiado con γ.
La segregación de analitos se investigó analizando
muestras de diferentes tamaños de partículas. En este estudio, 200 mg de
Las muestras liofilizadas se trituraron en un molino de corte durante 3 min.
a 5000 rpm, tamizado y separado en seis fracciones:> 500,
500-400, 400-300, 300-250, 250-200 y 200-150 µm.

La homogeneidad "entre botella" y "dentro de la botella"

fueron estimados. Para la homogeneidad "entre botellas"
investigación, 12 matraces de CRM (de 80 matraces) fueron
seleccionados al azar y una porción de 300 mg de cada uno fue
analizado para las fracciones de masa total de Hg y metil-Hg por
CV AAS. Para evaluar la homogeneidad en una botella, un
frasco único de CRM (de entre 12 usados previamente
matraces) se seleccionó al azar y 12 porciones de 300 mg
fueron analizados utilizando el método propuesto
La estabilidad del CRM se probó analizando
material para las fracciones de masa de Hg total y metil-Hg después
almacenamiento en diferentes condiciones: 4 ° C (refrigerador), 25 ° C
(armario) y 50 ° C (estufa) durante 2, 4, 6, 8 y 10 meses

Resultados y discusión

Desarrollo de métodos para la masa total de Hg y metil-Hg

medición de fracción por CV AAS
Un método preciso de análisis de muestras es uno de los
los prerrequisitos para la producción de MR, ya que el analito
El contenido debe ser investigado antes, durante y después de la
proceso de producción. En el caso del análisis de especiación,
el método propuesto debe garantizar el producto químico
forma de la especie, evitando la interconversión entre
diferentes formas. Las técnicas con guiones son las más
utilizado en análisis de especiación. Sin embargo, se sabe que
También se pueden obtener buenos resultados para el análisis de especiación.
utilizando técnicas sencillas como CV AAS. Ambos inorgánicos
y el metil-Hg se puede reducir con NaBH 4 , dependiendo
sobre la concentración de los reactivos utilizados para hidruro
Generacion. Sin embargo, el Hg inorgánico se puede medir
a temperatura ambiente mientras que la medición de metil-Hg
Requiere calentamiento del atomizador de celda de cuarzo para promover
Descomposición de hidruro de metil-Hg. 12,13 Para ello,
el uso de un disolvente apropiado para promover la selectividad
es necesaria la extracción del analito. Considerando el
naturaleza lipofílica de las especies de metil-Hg, Westoo 14 propuso
el uso de tolueno como disolvente. Para mejorar la eficiencia
de extracción, se utilizó calentamiento con radiación de microondas.
En este trabajo, el uso de un baño calefactor y / o ultrasónico
baño en lugar de radiación de microondas para metil-Hg
se propone la extracción. Usando este procedimiento, metil-
Se disolvió Hg en un disolvente orgánico (tolueno) y se
luego se extrae a una solución acuosa (2% m / v de L-cisteína
solución) antes del análisis por CV AAS. Extracción usando
El baño de calentamiento a 80 ° C durante 15 min mostró los mejores resultados.
El tratamiento de la muestra con baño de ultrasonidos no fue eficaz
para extraer especies de metil-Hg generando bajas recuperaciones en
Los resultados. Se verificó la precisión de estos procedimientos.
analizando los CRM (Tabla 2).

Para comprobar la ausencia de interconversión entre especies.

en el procedimiento que se basa en la extracción mediante un baño calefactor,
Se realizaron pruebas de recuperación de picos. Los resultados presentados
en la Tabla 3 muestran una ausencia de interconversión entre
especies en solución acuosa y en matriz de pescado. Una recuperación
se observó tan solo un 5% cuando se añadió Hg inorgánico,
lo que indica que la extracción por tolueno no es significativa.
Por otro lado, se observó una recuperación cercana al 100%.
cuando se añadió metil-Hg, ya que esta especie es soluble
en tolueno. Cuando una mezcla que contiene Hg inorgánico y
se agregó metil-Hg, solo se notó una recuperación del 50%,
ciertamente debido al metil-Hg soluble. El analítico propuesto
El método mostró límites de detección (LOD) y límites.
de cuantificación (LOQ) tan bajo como 0,3 y 1,0 mg kg -1 ,
respectivamente, para el Hg total y 0,6 y 1,8 mg kg -1 ,
respectivamente, para metil-Hg. Los resultados son comparables a
el obtenido por SS-GF AAS, 8 que presentó LOD y
LOQ respectivamente de 0.374 y 0.623 mg kg −1 para el Hg total
y 0,140 y 0,234 mg kg -1 para el Hg inorgánico. El LOD
El valor de DMA es de 10 µg kg −1 para el Hg total, de acuerdo con el
fabricación. Este valor es mucho más bajo que el observado
para otros métodos; sin embargo, es importante señalar
que es un instrumento dedicado a la medición de Hg.
En conclusión, es posible inferir que la extracción usando
tolueno y L-cisteína seguido de calentamiento a 80 ° C en un
Se puede utilizar un baño de agua durante 15 min para medir el metil-Hg en
muestras de pescado. Los resultados para el Hg total y el metil-Hg en este
material obtenido por los métodos propuestos (SS-GF AAS
y CV AAS) y DMA se presentan en la Tabla 4.

cuadro 2. Medición de metil-Hg en pescado por CV AAS después de extracción selectiva

utilizando tolueno y L-cisteína como disolvente asociado al baño calefactor a
80 ° C durante 15 min y extracción mediante sistema ultrasónico a temperatura ambiente
(25 ° C) durante 5 min

Fracción de masa de metil-Hg ± desviación estándar / (mg kg -1 ) (CV,%); n = 3

Cuadro 3. Prueba de adición y recuperación de Hg II y metil-Hg en agua

solución y en la muestra de pescado sometida al procedimiento de extracción utilizando
tolueno y L-cisteína asociados al calentamiento a 80 ° C en baño calefactor y
analizado por CV AAS

cuadro 4. Medición de la fracción de masa de Hg total y metil-Hg por

SS-GF AAS, CV AAS y DMA en material de referencia candidato a atún
SS-GF AAS: absorción atómica de horno de grafito de muestreo sólido
espectrometría; CV AAS: espectrometría de absorción atómica de vapor frío;
DMA: analizador directo de mercurio

Evaluación de la homogeneidad de las muestras de peces candidatos a MR

La preparación de MR implica varios pasos durante
qué riesgo de contaminación, pérdida de analito y cambios
en la microdistribución del analito en el material necesita
ser evitado. En el caso de RM para análisis de especiación,
Se debe tener cuidado para evitar la interconversión entre
especies. Para garantizar la calidad del material final,
la producción debe ser controlada y los MR deben tener
su composición evaluada antes, durante y después
producción, ya que estudios previos han demostrado que la muestra
el procesamiento puede cambiar la estructura de algunos compuestos,
por ejemplo, especies de arsenobetaína. 15 Los resultados presentados en
La Tabla 5 muestra las fracciones de masa totales de Hg y metil-Hg en

Cuadro 5. Medición de la fracción de masa de Hg total y metil-Hg por CV

AAS en el material de referencia candidato a atún presentado a diferentes
pretratamiento

El pescado crudo y el procesado están cerca uno del otro, lo que indica
ninguna influencia del procedimiento de preparación de MR en su
concentraciones.
Considerando los resultados obtenidos para el Hg total y
metil-Hg en pescado crudo, pescado liofilizado y liofilizado
y pescado triturado criogénicamente (Tabla 5), no hubo
influencia del tratamiento de la muestra en el Hg total o metil-Hg
fracciones de masa ya que hubo una buena concordancia entre
Los resultados. Estos resultados también muestran que la homogeneidad
de la distribución de la fracción de masa de Hg total y metil-Hg fue
mejorado en los pasos finales de la producción de RM. Mientras que la
El coeficiente de variación de la muestra sin moler fue de alrededor
18%, este valor no fue superior al 5% para el material final
(pescado liofilizado, molido e irradiado) (Cuadro 5). los
coeficiente de variación obtenido para el "entre botellas"
y estudios de homogeneidad "en botella" del material final
fueron, respectivamente, 1,6 y 5,6% para el Hg total y 1,4 y
1,8% para metil-Hg, respectivamente. Estos resultados indican
este material es homogéneo para una masa de 300 mg.

Evaluación de la segregación de analitos

Se requiere una distribución de tamaño de partícula estrecha para evitar
falta de homogeneidad causada por la segregación de analitos. Conociendo el
El contenido de analitos de una variedad de tamaños de partículas es importante.

para evitar errores de muestreo, especialmente porque durante la RM

almacenamiento, las partículas de diferentes tamaños tienden a separarse. dieciséis
El valor medio del tamaño de partícula fue de 36 µm y el 80% del
las partículas eran inferiores a 100 µm. Otro 20% está compuesto
de partículas entre 100 y 600 µm. La ocurrencia de
La segregación de analitos se verificó midiendo el Hg total.
y fracciones de masa de metil-Hg en diferentes tamaños de partículas
obtenido por tamizado (Cuadro 6). Los resultados mostraron que
solo la fracción que contiene partículas entre 200 y
300 µm presentaron menor contenido de Hg total. En el caso de
metil-Hg, se presentan partículas entre 100 y 150 µm
altas concentraciones de este analito. Sin embargo, el alto
desviación estándar indica valores estadísticamente equivalentes
cuando se compara con los resultados obtenidos para otras fracciones.
También se utilizó una muestra no fraccionada triturada criogénicamente.
analizados y los resultados estuvieron de acuerdo con la media
valor de todas las fracciones (Tabla 6). Los resultados (Tabla 6) también
mostró que el coeficiente de variación no cambió
con tamaño de partícula, lo que indica una buena homogeneidad en el
masa de muestra tomada para análisis (300 mg). Considerando estos
observaciones, la molienda criogénica estaba por lo tanto indicada
para la preparación de RM de atún, en la que la partícula media
el tamaño fue de 36 µm. 

abla 6. Evaluación de la homogeneidad y segregación de Hg por CV AAS

en el material de referencia del candidato a atún
La composición de un material de referencia y la
Los parámetros estudiados deben permanecer estables durante todo el
período de utilización del material. Se almacenaron 16 muestras
ya sea a baja temperatura (4 ° C, refrigerador), ambiental
temperatura (25 ° C, gabinete) y temperatura más alta (50 ° C,
cocina). La muestra conservada en el frigorífico se consideró
la referencia desde la actividad microbiológica y el compuesto
la degradación se minimiza a baja temperatura. Los resultados
para la masa de Hg total (Figura 1a) y metil-Hg (Figura 1b)
fracciones en estas muestras mantenidas en diferentes condiciones
se presentan en la Tabla 6. Comparando los resultados de total-Hg

fracción de masa incluso para muestras en condiciones extremas

(50 ° C durante 10 meses), no se observó ninguna variación cuando
De Student t se aplicó test (nivel de confianza del 95%). Mismo
Se observaron resultados para metil-Hg excepto por debajo de 25 ° C
y 50 ° C durante 10 meses que presentaron resultados alrededor
15% menos. Las pruebas de estabilidad se realizarán después de 2 años, pero
los resultados presentados indican que el atún candidato
El material de referencia es adecuado para su uso como control de calidad.
especialmente si se almacena a 4 ° C.
Figura 1. Prueba de estabilidad para (a) Hg total y (b) fracción de masa de metil-Hg
por CV AAS en el almacenamiento de material de referencia candidato a atún a (□) 4 ° C,
( ■ ) 25 ° C y (■) 50 ° C durante 2, 4, 6, 8 y 10 meses

Conclusiones
La técnica AAS se usa comúnmente para elementos totales
medición de contenido. Este documento mostró que también puede ser
utilizado para el análisis de especiación. El muestreo sólido-GF AAS fue
demostrado ser una alternativa interesante para medir el total-
Hg y metil-Hg durante el análisis de rutina de muestras de pescado.
La posibilidad de utilizar una muestra de tamaño reducido (<0,5 mg)
lo hace apto para ser aplicado en microanálisis. En el caso
de CV AAS, pretratamiento apropiado de la muestra como ácido
descomposición (para la medición de Hg total) o selectiva
extracción usando un solvente apropiado (para metil-Hg
medición) permitió el análisis de especiación.
La preparación de materiales de referencia requiere la
investigación de varios parámetros como la homogeneidad,
segregación y estabilidad de analitos, ya que son directamente
vinculado a la exactitud y precisión de los resultados. En el

estuche de material de referencia para análisis de especiación, especial

Se debe prestar atención a la interconversión entre especies.
durante la preparación de la muestra.
Se analizó el material de referencia del candidato a atún
utilizando dos métodos desarrollados por el grupo. SS-GF AAS
y CV AAS demostraron ser herramientas interesantes para medir
fracciones de masa totales de Hg y metil-Hg en atún. En el
En el primer caso, se realizó un análisis directo de muestras sólidas. En el
segundo, se requirió la digestión ácida de la muestra para
Medición de la fracción másica de Hg y extracción con tolueno
y se utilizó L-cisteína para la medición de metil-Hg.
Considerando la composición del atún evaluado
antes, durante y después de la preparación de un atún
candidato RM, sin contaminación, pérdida de analito o
La conversión de especies de metil-Hg a otras especies fue
observado. Excepto por el tejido de pescado crudo, adecuado
Se obtuvo homogeneidad con todos los pretratamientos.
procedimientos y todos los tamaños de partícula evaluados, aunque el
coeficientes de variación indicaron que el mejor procedimiento
para la preparación de RM se molió finamente en un molino criogénico.
Teniendo en cuenta las fracciones de masa de Hg total
y metil-Hg en todos los tamaños de partícula estudiados, analito
no se observó segregación. Todos los resultados indican que
este candidato RM es adecuado para el control de calidad de
Medición de Hg y metil-Hg en muestras de atún, desde
la estabilidad del material ha sido confirmada y la masa
los valores de las fracciones se han asignado correctamente.
Este material ya se ha distribuido a muchos
Laboratorios de investigación brasileños a analizar. los
La distribución se realizó a través de un programa de pruebas de aptitud.
organizado por la doctora Ana Rita Araújo Nogueira y
PhD Gilberto Batista de Souza de Embrapa Pecuaria
Sudeste (São Paulo, SP)