Tema-8-QAII.

pdf

Buchelina

Química Analítica II

3º Grado en Química

Facultad de Ciencias
Universidad de Alcalá

Reservados todos los derechos.

No se permite la explotación económica ni la transformación de esta obra. Queda permitida la impresión en su totalidad.
 BLOQUE 3: espectrometría de masas e hibridación instrumental
TEMA 8

No se permite la explotación económica ni la transformación de esta obra. Queda permitida la impresión en su totalidad.
TEMA 8: hibridación instrumental
Propiedades ACOPLAMIENTO:

➢ Mejorar separación de componentes de la muestra previa a la detección

➢ Técnica acoplada (1ª) → separar componentes de la muestra
➢ Detección MS (2ª) → recibir componentes separados y detectarlos
MS + TÉCNICA DE SEPARACIÓN

- Cuando se trabaja con compuestos parecidos

- Cuando un compuesto está en más proporción que otro
- Cuando la matriz de la muestra interfiere

Reservados todos los derechos.

Aspectos:

• COMPATIBILIDAD – ver si los solutos de la 1ª técnica tienen o no las mismas propiedades

para la 2ª técnica
• COMPLMENTARIEDAD – combinar info de las dos técnicas
• ORTOGONALIDAD – usar técnicas con mecanismos diferentes - para acoplar, garantizar
que condiciones son
compatibles
técnica 1 técnica 2 - técnica que nos resuelva
el problema
- si técnica 2 separa m/z,
L, S o G LoG técnica 1 debe separar
P yT ↓P o P atm en función de otro
T ~ 200/300/500 criterio
Combinaciones:

• Técnicas MS entre sí → MS en tándem

• Técnicas de separación entre sí → multidimensionales
• Técnica de separación + MS → GC/MS, LC/MS, …

ESPECTROMETRÍA DE MASAS EN TÁNDEM

Tándem MS/MS o MS2

- Induce fragmentación de iones formados (ion progenitor) por colisión con átomos de gas o
aplicación de potencial, y se obtienen iones hijos
- 2 formas:
o Tándem en el tiempo (1 analizador)
o Tándem en el espacio (acoplamiento de 2 analizadores diferentes)

MS/MS en el espacio
MS 1 → seleccionar iones que queremos fragmentar

MS 2 → separa los fragmentos y hace barrido para obtener espectro

a64b0469ff35958ef4ab887a898bd50bdfbbe91a-5919005
 BLOQUE 3: espectrometría de masas e hibridación instrumental
TEMA 8

MS/MS en el espacio

No se permite la explotación económica ni la transformación de esta obra. Queda permitida la impresión en su totalidad.
Mejora selectividad, sensibilidad, elucidación de estructuras complejas

Posibles configuraciones: QqQ, Q-TOF, otros sistemas híbridos

Reservados todos los derechos.

➢ TRIPLE CUADRUPOLO (QqQ)

Q1 → seleccionar qué iones queremos fragmentar

q2 → célula de colisión que produce la fragmentación

Q3 → se detectan los fragmentos

- Podemos tener resolución unidad (Δm = 1)

- Uso de diferentes modos de barrido:
▪ Barrido de iones producto (análisis cualitativos, ↑ sensibilidad, ↑ selectividad) →
MS/MS en el tiempo
▪ Barrido de iones precursores Exclusivos
▪ Barrido de fragmento neutro QqQ
▪ SRM/MRM (análisis cuantitativos, ↑ sensibilidad, NO espectro MS/MS)
- ↑ sensibilidad, ↑ selectividad
- Para moléculas de baja masa molecular
- Equipo de baja resolución

Si juegas con fuego, te fuegas

a64b0469ff35958ef4ab887a898bd50bdfbbe91a-5919005
 BLOQUE 3: espectrometría de masas e hibridación instrumental
TEMA 8

➢ SISTEMA HÍBRIDO (Q-TOF)

- Mayor sensibilidad: modo SCAN
- Equipo de alta resolución
- ↑Rs, ↑ exactitud, ↑ rapidez

OTROS SISTEMAS HÍBRIDOS → EB/Q o EBE/Q, EBE/EBE,

No se permite la explotación económica ni la transformación de esta obra. Queda permitida la impresión en su totalidad.
EBE/TOF, TOF/TOF

TÉCNICAS DE SEPARACIÓN + MS

Cada punto es la suma total de

todas las señales del espectro en
ese punto determinado

Los CROMATOGRAMAS serán en función de:

Reservados todos los derechos.

→ Modo SCAN: se mide repetidamente el espectro de masas completo dentro de un intervalo
de masas
o Cromatograma de iones totales (TIC) – intensidad de todos los iones detectados
dentro del intervalo en cada instante de tiempo
** en cada instante de tiempo tenemos un espectro de masas
o Cromatograma de pico de base (BPC) – abundancia del ion más abundante en cada
espectro en un intervalo de tiempo
** nos quita ruido
o Cromatograma de iones extraídos (EIC) – abundancia de un ion determinado
elegido entre todos los iones del espectro obtenido en cada momento en un intervalo
de tiempo
** en cada instante de tiempo una m/z determinada
→ Modo SIM (Q, QqQ)
→ Modo MS/MS (IT, QqQ, QTOF)
→ Modo SRM/MRM (QqQ)

Sensibilidad (Q): TIC < SIM
Sensibilidad (TOF): TIC < EIC
Sensibilidad: SIM (Q) < SRM (QqQ)
En modo SCAN podemos averiguar cualquier señal de
m/z que determinemos pero en modo SIM una vez
seleccionado un m/z el resto de info se pierde

➔ CROMATOGRAFÍA DE GASES + MS
Equipos con fuentes EI o CI, y
GC MS analizadores Q, TRAP, TOF o
sectores magnéticos
ALTO VACÍO
↑P ↓P

Si juegas con fuego, te fuegas

a64b0469ff35958ef4ab887a898bd50bdfbbe91a-5919005
 BLOQUE 3: espectrometría de masas e hibridación instrumental
TEMA 8

No se permite la explotación económica ni la transformación de esta obra. Queda permitida la impresión en su totalidad.
Acoplamiento:
INCOMPATIBILIDADES:
- Directo
▪ Sílice fundida con flujos de gas • el fluyentes sale de la
▪ Calentamiento para evitar condensaciones columna a P atm y MS
▪ 100% muestra llega a MS → máxima trabaja en alto vacío
sensibilidad, NO pérdidas • eliminar el flujo de gas inerte
▪ Alto vacío que genera gradiente de P, (He) que se usa como gas
modifican tiempos de elución portador
▪ Cambio de columna complejo • la velocidad de adquisición
- En régimen abierto de datos
▪ Tobo en T abierto a la atmósfera
▪ Barrido por flujo de He → al estar abierto y en contacto con el O2, las moléculas

Reservados todos los derechos.

se pueden oxidar o degradar por eso se hace pasar corriente de He
▪ Caída de P se reduce
▪ Cambio de columna sencillo
- Sistemas de enriquecimiento
➔ CROMATOGRAFÍA DE LÍQUIDOS + MS
Acoplamiento directo → APCI o ESI INCOMPATIBILIDADES:

• HPLC con fase líquida y

LC MS MS con fase gaseosa
• HPLC a ↑P y MS en vacío
ALTO VACÍO
↑P ↓P • HPLC a T entre 25-50ºC y
MS entre 100-350ºC
INTERFASES: • HPLC usa tampones
inorgánicos y MS solo
- Evaporación selectiva del disolvente, previa a la entrada tampones volátiles
en MS (acetato, carbonato,
- Reducción del flujo de líquido introducido en MS → uso formiato, etc.)
de columnas capilares o divisores de flujo
- Interfases de MS a P atm → no necesita interfase
adicional
FUENTES:
- ESI → trabaja a menores flujos porque más gotas se forman con menor tamaño, y la
superficie aumenta considerablemente aumentando la desorción
- APCI → no trabaja bien a flujos pequeños porque el electrodo en forma de aguja no
funciona bien

a64b0469ff35958ef4ab887a898bd50bdfbbe91a-5919005
 BLOQUE 3: espectrometría de masas e hibridación instrumental
TEMA 8

No se permite la explotación económica ni la transformación de esta obra. Queda permitida la impresión en su totalidad.
** tablas en el pdf de resumenes espectrometria

Reservados todos los derechos.

Si juegas con fuego, te fuegas

a64b0469ff35958ef4ab887a898bd50bdfbbe91a-5919005