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    PRACTICA 1. Bioseguridad en el laboratorio de virologia PRACTICA 1, BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO DE VIROLOGIA objetvo aifnazcr la préictica, el estudiante sera copan de: « Conocer las normas de bi i iosegurided empleadas en el laboratorio de virologia objelivos especificos * El esludiante aprendera | monels lec i ‘Imagen Retamada de: “EM. Laboratorio de gdecvaco de equipo ‘de _muesiras ee equipo en el laboratotio de virologia « Elestudiante adquirira conocimi los residuos peligrosos biolégico-i el laboratorio de virologia. lento sobre la manipulacién correcta de infecciosos y el demame de muestras en Antecedentes Elconocimiento de las propiedades fisicoquimicas ¢ infectocontagiosas de los virus permite Gefinir las normas que, en materia de seguridad, son necesarias pora no correr ningéin fiesgo de adquirir, aun en forma accidental, una infeccién por este tipo de particulas. Los patologias producidas por agentes virales son de alta frecuencia tanto en la consulta pedidtrica como de adultos. En la mayoria de los casos, el diagnéstico etiolégico se sospecha basado en los sintomas y signos del paciente y no se requiere confirmacién por laboratorio. Sin embargo, en la actualidad también nos vemos enfrentados a la complejidad de pacientes graves en unidades de cuidados intensivos, tales como pacientes oncolégicos, trasplantados e inmunosuprimidos, quienes presentan cada vez mejores expectativas de éxito en sus tratamientos [1]. Para el trabajo en el laboratorio deben tomarse en cuenta las siguientes consideraciones: * Use bata de laboratorio, guantes y mascarilla cuando sea necesario. \ * Absténgase de comer y/o fumar en la zona de laboratario. * Mantenga el Grea de trabajo limpia, aseada y en orden. . + Evite manipular sustancias quimicas y/o equipos sino ha sido capacitado para hacerlo. ; ; | * Marque todo el material en forma legible y adecuada, incluyendo iniciales del responsable, fecha y tipo de sustancia, * Nunca huela o pruebe sustancias; consulte Io etiqueta o pregunte a personas que ya la hayan usado 0 la conozcan ‘Grupo Fdacativo Safa XR 2) Escaneado con CamScanner pRACTICA 1 _ ; éngalos en los bolstl 1e lapices u objetos en la boca; manténgalo: los de Nose Colo HO os de alien el momento de utiizarlos, SU bay cerradas [2]. n lo posible y, en lo Pow deben permanecer Los siguientes son algunas definiciones de interés para los laboratorios y éregs q Sor ‘ microbiologia: infeccion: 6 fe ismos patégenos en todos los ambi infeceién: Desiruccion de microorganis 16¢ air Desi Jos distinfos medios mecdnicos, fae” , fics ¢ materios 0 partes que pueden Sef nocivos, por : Guimicos contrarios © su vid 0 desarrollo, con el fin de reducir el riesgo de Hransmision g le enfermedades. bjolégico-infeccioso: 1 que confine bacterios. vius u of rinfeccion, 0 que contiene 0 puede conteng er Residuo peligroso aes erganismos con capacidad de cousa toxinas producidas por microorganismes que causan efectos nocivos a seres vivos Ten en hospitales y establecimientos de atencién médica, Vol ambiente, que se gener iduos peligrosos biolégico-infecciosos los siguientes: la sangre, los cutti das de agentes infecciosos, los instrumentos y aparatos para tronstete ultivos, las muesiras biolégicas, los equipos y dispositivos desechabe, loracién y toma de muestras, los objetos punzocoriantes incluyende Sstour aguies hipodérmicas, de acupuntura y pare fo, porta'y cubreobjetos, tubos de ensayo y simferes Se consideran resi y cepas almacenat inocular y mezclar uiiizados para Ia exp) navojas, lancetas, jeringas, pipetas P totuaie, bisturies, cristaleria entera 0 0 [3]. Nota: Los residuos peligrosos biolégico-infecciosos deben set 1 [ 5 i 1 tratados por mét isi ‘o.quimicos que garanticen Ia eliminacion de microorganismos pategencs y al imeconocibles para su disposicién final en los sitios autorizados. Guia de Evaluacién 1.1 1. Describe cémo se Il leva a cabo el manejo é i jomoseentcoso'de‘aiaon dscidenies die elemrarmes y qué! medicias deben de MCROBIOLOGiA Y PARASITOLOGIA MEDICA *VIROLOG n ia ME i Escaneado con CamScanner A PRACTICA 1, Bioseguridad en el laboratorio de viroloaia 2, Menciona 5 residuos peligrosos biolagico-intecciosos. Sang ve 3. gCudl es el tratamiento de los residuos peligrosos biolégico-infecciosos? 4, Menciona § reglas basicas en el laboratorio de virolog(a y su importancia Grupo Educative Siglo xxi\ VL Escaneado con CamScanner / PRACTICA 2. Métodos utilizados en el diagnéstico viral : . PRACTICA 2. METODOS UTILIZADOS EN EL DIAGNOSTICO VIRAL Objetivo Al finalizar la préctica, el estudiante’ ser capaz dé * Distinguir teéricamente os principales mMBtodos de diagnéstico de virus humanos. Objetivos especificos * El estudiante identificaré los _métodos sper et Sabra utiizados para detectar —anticuerpos rogue clineatndoeretol y Merb espectficos y antigenos. * El esludianté conocerd la clasiticacién del lipo de muestras empleadas para el diagnéstico viral, Antecedentes Los virus son microorganismos muy pequefios cuyo tamafio oscila en la orden de nm (1X10" + m}, presentan ADN 0 ARN, cdpside y, algunos, envoltura. Su tamafio les permite pasar a través de los filtros que retienen bacterias. Ademads, existen virus capaces de infectar a éstas, los cuales reciben el nombre de bacteriéfagos. Muestras para diagnéstico Es determinante para el diagnéstico viral la obtencién temprana de una muestra adecuada, esto debido a que la excrecién del virus tiende a ser por pocos dias y la concentracién de particulas virales disminuye progresivamente con el tiempo, y emplear un medio de transporte para después llevar a refrigeracién. Las muestras. utiizadas son las siguientes: torundas nosofaringeas, aspirados faringeos, forundas rectales, heces, secreciones, sangre, LCR y biopsias. Diagnéstico viral Es de gran ayuda el diagndstico viral mediante estudios de laboratorio para confirmar la etiologia, asi como para el seguimiento clinico de |a entidad. Conocer cuando una infeccion es de etiologia viral es muy importante, porque determina un cambio en la conducta clinica y en el manejo terapéutico del paciente. ‘Grupo Educative Sigfo xx7( 13) Escaneado con CamScanner Racca 2 rmite conocel Ia spidemiologig do pe! vel de salud publicq Je implica o (a el GCGNESTICO Vir Tenemos a1 néstico adecu otaciones qu pleades pat Adicionalmente, realizar un diagt la infeccién viral y determinar las con” Dentro de los métodos més importantes em siguientes: 1, Aislamiento len cultivo evidenciarlos se UIilZON Sistema, Los virus son microorganismos intrace 8 ota invsion Vi Se eVidencgg Sosades en lineos celulares que permitan su SPST en cambios en la. Motfologg, Hee eee ce eelar ¢ efecto ctopatice: CPE orpos de inclusicn, que s celular Tes Goluier, vacuotzacion, formacion Ge SME 1 Componentes virales o oe Combios hislolégicos producidos en las céivios PO! Variaciones en las esiructuras celulares [1]- julares, Y PO desarrol . _ jentes: Los sistemas de cultive més utifzados son los siguient sos i células. Le mayor @) Cultivos primasios: Se caracterizen por fener Varo® fees oe Seo cle vis, oor sone Grecinento Imitado in vio; son permisvas a un Ome a Células de rifén embrionatio humeno, an et b) Cepas de células diploides: Derivadas de tejidos nomoles a eee ee ge voelros, celarvianta vie) yporne stanoles PONE Pre eerie s Elan Consfituidas por un tipo de células que retisnen SY numero c iploide original, por ejemplo, jas fibroblasts de pulmen. ¢) Lineas celulares: Son céiulas inmortalizadas en el laboratorio, se cerocletaa por Gerivarse de telcos normales 0 de tumores maiignes y se han Pasaco Poy los menos 30 veces in vitro: por ejemplo, células Vero (rfién de mono verde iricano) [2]. 2. Inmunofluorescencia directa Es uno de las técnicas més antiguas y de uso mas difundido en el laboratario clinico, Muestras clinicas apropladas son recolectadas y colocaces sobre porlaobjetos, donde se dejan secar y fijar. Luego, se agregan anticuerpos especificos marcados con isotiocianato de fluoresceina, que difunden a través de la membrana celular y se combinan con los antigenos viricos en el interior de las células. La recs cién antigeno-anticuerpo se visualza con el microscopio de fluorescencia, por la aparicién de fluorescencia de color verde manzana. 3, Deteccién de acids nucleicos virales por reaccién de polimerasa en cadena Conecida como PCR (Reaccién en Cadena de la Polimerasa). Mediante esta técnica pueden encontrar cantidades minimas de un agente infeccioso en una muestra clirica Gracias a Ia ampliicacién selectiva y repetitiva de una secuencia de nuclesticos de un microorganismo determinado que hace un proceso de sintesis de ADN, Ta IGROBIOLOGIA ¥ PARASITOLOGIA MEDICA “VIROLOGIA” Escaneado con CamScanner PRACTICA 2. Métodos utilizados en el diagnéstico viral a 4, Microscopia electrénica Cuando algunos virus comunes no se aislan con los métodos de cultivo habituales ni pueden diagnosticarse por Iécnicas serolégicas, pueden estudirse con otras técnicas, como Ia microscopia electrénica. Tal es el caso de los Calcivirus, los Minirotavirus, los Astrovitus y los Parvovirus del cerebro. Sin embargo, hay tres grandes dificultades para su uso: el instrumento es caro y es dificil su mantenimiento. Sila Presencia de anticuerpos espectficos en contra de un virus determinado no permite el diagnéstico de dicha infeccién, se debe considerar el cambio en los titulos en un lapso corto de tiempo, o bien ver si hay seroconversion. En muchas virosis la presencia de IgM sugiere una infeccién reciente. 5. Fijacién de complemento El complemento comprende una serie de proteinas séricas que se activan en secuencia mediante la reaccién del antigeno con el anticuerpo especifico, en donde un anticuerpo €s capaz de activar o fijor el complemento; la IgM es mas eficiente que la IgG. La muestra se procesa con e| antigeno 0 el anticuerpo y el complemento. El complemento residual se determina mediante la lisis de eritrocitos cubiertos de anticuerpos que actéan como indicadores. Los anticuerpos medidos por este método se suelen desarroliar tardiamente en el desarrollo de la enfermeded, Los miembros de algunos grupos, como Adenovirus ¢ Influenza A y B, poseen antigenos comunes que se detectan por este método. 6, Hemaglutinacién e Inhibicién de la hemaglutinacién Se puede realizar con diversos virus que aglutinan selectivamente los eritrocitos de varias especies animales (por ejemplo: pollo, cobayo y humanes). La prueba de inhibicién de la hemaglutinacién es utilizada para deteccién de anticuerpes especificos en la muestra y la prueba de hemaglutinacién detecta al antigeno presente, Esta prueba es util para detectar virus de Rubéola y para determinar el estado inmunitario (i. 7, Ensayo inmunoenzimatico (ELISA) Esta técnica también se conoce como ensayo de ELISA (la identificacién de los complejos Ag-Ac se hace mediante el empleo de enzimas, bien unidas al ‘antigeno, o bien unidas al anticuerpo. Fl ensayo de ELISA puede ser directo, constando de los siguientes pasos: i. Se tapiza la placa con el anticuerpo especifico frente al antigeno a determinar, ii, Se ahade la muestra con el antigeno ili, Se adiciona el anticuerpo secundario marcado con la enzima que en presencia de su suslrato da un producia colareado soluble, este producto es cuantificado mediante el lector de ELISA € indirecto. Se diferencia del caso anterior en que se ahaden os anticuerpos, previamente incubadis con la muestra. Los anticuerpos que no se han unido a los antigenos de la muestra lo haran a los antigenos de los pocillos. Como enzimas se suelen utilizar la peroxidasa, la galactosidasa o la glucosa oxidasa. Grupo Educative siglo xxi |S. Escaneado con CamScanner PRACTICA 2 . Guia de Evaluacién 2.1 3 i tivo celular? 1. aCémo se detecta el crecimiento de un virus en 81! i 2. Menciona las caracteristicas generales de los VIUS- 3. 2QUE muesiras clinicas son apropiadas para la técnica de inmunofivorescencig directa? 4, En virosis, con qué se asocia la presencia de IgM? 5, gEn qué se basan las pruebas de ELISA? EY MicROBIOLOGIA ¥ PARASITOLOGIA MEDICA “VIROLOGIA” — Escaneado con CamScanner PRACTICA 2. Métodos utilizados en el diagnéstico viral Observaciones y Sugerencias Conclusiones Grave Favcatve tala wai DS Escaneado con CamScanner PRACTICA 3. Inoculacién en huevo no embrionado de pollo utilizando azul de metileno PRACTICA 3. INOCULACION EN HUEVO NO EMBRIONADO DE POLLO UTILIZANDO AZUL DE METILENO Objetivo A finalizar la practica, el estudiante seré capaz de: * Conocer la importancia del huevo embrionado y sus aplicaciones en el laboratorio de virologia. Objetivos especificos * —l estudiante conoceré las técnicas comtnmente utilizadas para la inoculacién de huevos embrionados de ave. * El estudiante llevard @ cabo la inoculacién en diferentes vias de azul de metileno en huevos de ave no embrionados. Antecedentes ImagenRetomads de-LAUCEM,Laborstero de ogee nica Endocrinology Micrabooga, Los embriones de pollo representan un método sensible para el aisiamiento viral. Son muy uilizados como fuente de cultivos primarios de fibroblastos, de células renales en monocape, para el aislamiento ce virus aviares, tienen Ia ventaja para propagor el virus en la inoculacién de diversos hospedadores animales. Esta écnica es importante para la identificaci6n y diferenciacién de virus desconocicios [1]. Se han utilizado como el huésped natural para el crecimiento de los virus, propagacién y coracterizacién de los virus aviares y para la produccién de vacunas virales. Elembrién y sus membranas ayudan a proveer la diversidad de células necesarias para el cullivo de diferentes tipos de virus, dependiendo sobre todo de varias condiciones, como: * Via de inoculacién. + Edad del embridn, * Periodo de tiempo de incubacién. * Volumen y dilucin del inécuio utilizado. Grupo Educative Siglo XxI\12 Escaneado con CamScanner PRACTICA 3 * Temperatura de incubacién. g jones son obtenidos. * Elestado inmune de la parvada por e! cua! 10s embriones 5 Manejos preliminares nerse de OVES SANS ALPES, A, pora de esta manera elimina 10 Adenovirus o Broncuig 5 El huevo fértil empleado para el cultivo de virus debe obter Libres de Patégenos Especificos 0 SPF porsus siglas en ingles. Io presencia de virus que comunmente afectan a las aves. com Infecciosa Aviar, etc. Le incubacién es alrededor de 37°C y una humedad de 60.0 70 % (un alto exceso gg humedad permite un subdesarollo de la cémara de are, por [o fanto, und baja gy humedad permitira que haya un desarrollo menor). Los embriones deden estar g, movimiento varias veces al dia, ya sea automdtica © manualmente. El periods gp incubacién antes de la inoculacién depende, sobre todo, dela via de ineculacién, Ovoscopeo Consiste en revisar los huevos embrionades contra una fuente de luz intensa en uy ovoscopio, para mostrar el embrién, las membranas asociadas y sus cavidades. § procedimiento es el siguiente: 1. En un cuarto obscuro, colocar el huevo embrionado en el ovoscopio y observar el movimiento, las condiciones de las venas de sangre y el estado del embrién. 2. Con un lapiz, marcar la posicién del embrién y la camara de aire. 3. Comparar los embriones fértiles y los embriones muertos y de varias edades. Para la propagacién, cultivo y titulacién de virus, es indispensable determinar la viabilidad del embri6n, asi como dominar las técnicas de las diferentes vias de inoculacién, debidoe la especificidad que presentan algunos virus por determinadas células o tejidos. Ena Figua 1. se presentan las diferentes vias de inoculacién de huevo embrionado: OS icROBIOLOGIA ¥ PARASITOLOGIA MEDICA “VIROLOGIA a eee ll Escaneado con CamScanner PRACTICA 3, Inoculacién en huevo no embrionade de pollo utilizando azul de metileno noculaeiinen a Membrana Coroalantfdea 3. Covad Amistien Ieoculacén: Amnisties 4. Enoculacién enelsaco Vitlino sulaciéa slantoides 1, Cavidad Mlantoiéca ee 5. Membrana Corioalaneides, 4 Fig.1. Vias de inoculacién en huevo fériil de ave. 1. Cavidad Alantoidea 3. Saco Amnidtico 5. Membrana Corioalantoidea 2. Saco de Aire 4, Saco Vitelino Desarrollo de la practica Material: - 3 Huevos de pollo no embrionados, - Ovoscopio y pinzas de diseccién. - Recipiente pare recibir desechos. - Lapiz. - Jefingas de 3 a 5 mi - Agujas. - Colorante azul de metileno. - Guantes, Método: 1) Se llevaré a cabo Ia inoculacién en las vias de inoculacién en hueves no embrionados, empleando el colorante azul de metileno. ‘Grupo Educative Sigia XXI\ 2) Escaneado con CamScanner PRACTICA 3 |. Técnicas de inoculacién 9)Cavidad alantoidea: saminarlo. i. Colocar el huevo en el ovoscopio Pod PAT ite de a i. Marcar un punto o cruz de 2a 3mm. PS) Her camara de aire del lado conirano: aleml lil. Perforar la marca sefialada. iv. Con jeringa, inoculor con 0.1 respecto al huevo. mi en éngulo de 45 grades b)Saco vitelino: . : ‘é camara de aire i. Localizarla parte més alia del embri6n sobre: la y marcar con un punto 0 cruz. sn del embtion. ii. Marcar otto punto que indique la localizacion 6 ili. Perforar la marca sefalada. iv. Introducir una aguja recta con lige! embri6n. ra inclinaci6n opuesta al ¢)Cavidad amniética: Locatizar ia parte més alla de la camara de aire y Morcar un punto o cruz (*). Perforar la marca sefialada oo Inocular en el sitio donde se realiz6 el orificio hasta llegar al ojo del embrién. Il. Cosecha Posterior a la inoculacién en el huevo no embrionado, se llevard a cabo Ia cosechy revisando si se realizaron corectamente las inoculaciones (de acuerdo con la zona tefiida), abriendo cuidadosamente el huevo y depositando el huevo en una caja Petri Guia de Evaluacién 3.1 1, Describe qué tipo de virus humanos son inoculades en la cavidad alantoidea y sac vitelino. MICROBIOLOGIA ¥ PARASITOLOGIA MEDICA *VIROLOGIA Escaneado con CamScanner PRACTICA 3. Inoculacién en huevo no embrionado de pollo utilizando azul de metilene ee a ean 2. gCOmo se confirma la viabilidad de! embrién en un huevo embrionado? 3. 4Cudles son los usos del huevo embrionado en Virologia? 4. Menciona tres virus que pueden ser inoculados en ef huevo embrionado 5. Qué funcién tiene el ovoscopio? Grupo Educative Siglo Xx 23 Escaneado con CamScanner prActicn 3 Observaciones y Sugerencias Conclusiones Referencias bibliogrdficas . Pazos Salazor, N.G. et al. (2002). Manual laboroterio de vitologia Q F.2., BUAP, México. 2. Le6n Lara, L. (2013). Manual de practices de laboratorio de Virologia, FAVE, UAEM. Msic®: (Ea IcROBIOLOGIA V PARASTTOLOGIA MEDICA “ViROLOGIA® Escaneado con CamScanner PRACTICA 4. Técnica de ELISA para el diagnéstico viral , PRACTICA 4. TECNICA DE ELISA PARA EL DIAGNOSTICO VIRAL Objetivo Alfinalizar la practica, el estudiante seré capaz de: * Conocer la importancia de la técnica de ELISA para el diagnéstico viral. Objetivos especificos * Diferenciar la técnica de ELISA indirecta de imagen Retomada de LABCEM. Laboratorio de ELISA directa ‘Bicquimica Clinica Endocrinologla y Microbiclogia, + Aprender el fundamento y aplicaciones de la técnica de ELISA. Antecedentes Es de gran importancia el diagnéstico viral oportuno. Recientemente, el desarrollo de nuevas y mejores herramientas para evidenciar la presencia de virus hace posible que estas entidades se puedan descubrir y estudiar a nivel de laboratorios especializados y de diagnéstico de rutina Diagnosticar si une infeccién es de etiologia viral es necesario, porque detemina un cambio en la conducta clinica y en el manejo terapéutico del paciente, ademas ayuda al seguimiento clinico de la entidad. Las pruebas serolégicas permiten detector a los virus mediante pruebas directas o indlrectos. «Las pruebas directas son las que evidencian al virus 0 algunos de los antigenos virales que se pueden encontrar presentes en los tejidos 0 fluidos humanos. «Las pruebas indirectas son las que se utllizan con mds frecuencia y demuestran la determinacin de anticuerpos especificos contra el virus (1] Técnica de ELISA La técnica de ELISA se utiliza para detectar antigenos de virus, bacterias, clamidias, protozoos y hongos en diversos tipos de muestras como heces, liquid cefalorraquideo, orina y material obtenido de vias respiratorias [2] Grupe Educative Siglo XXN\ 2S Escaneado con CamScanner PRACTICA 4 —— ee Jos VIOS: EN UNA Se preseny La técnica de ELISA puede realzarse principalmenté Tar, (ELISA Dee lclisn| 0 otra el antigeno en la muestra bioldgica qe 0 ect Sn is muest piolégica Indirect, ecilic observa la formacién de anticuerpos es? no. En fase sdlida. se fijan mattiz, tubo © Microplacg, antigeno que se quierg se hace UN lavado y 56 1, ELISA Directo ro del antige Esta prueba consiste en ensayos de capture Fe 6 una anticuerpos especificos para el virus en Ia supers ue contiene el luego se ponen en presencia del suero o muestia antic vere: demostrar, Una vez que ocure la reaccion antigen agrega un anticuerso marcado. a on zi En la técnica ELISA el anticuerpo se marc’ n US eran alcalina (FA) 0 la peroxidasa de rabano (FR). ¥ poe yeroduce U especifico para la enzima que es modilicado por & . a 4 ongitud de onda determinaca en a proporcional 4 [a Cantidad de _ que puede ser Ia fosfatasg ‘saecién s@ COlOCa al sustraty a co! in compuesto Coloreadg, ia en una | Para la cuantificacién se mide la absorbanc! a un espectrofotémetto, La cbsorbancia seré directame! antigeno en la muestra. Estas técnicas se utilizan ampliamente agente Norwalk, Parainfluenza ¢ influenza A y 8. en el diagnéstico de Hepatitis Ay B, Rotavirus, a 2. ELISA Indirecto Esta prueba seroldgica se emplea para determiner | determinado agente viral. La prueba ELISA indirecta fiene un. gntigeno especifico unido a una fase sdlida, que puede ie el suero del paciente que posee los ser un tubo, microplaca o perlas de vidrlo. Se le anade el s 2 Snticuerpos y después se adiciona el corjugado constituido por un anticuerpo IgG 0 loM Unido a une enzima. Se adiciona el sustrato especttico para la enzima que lo va a modificar y produce un compuesto coloreado, cuya intensidad es proporcional a Ia concentracién de anticuerpo en el suero del paciente. Esta prueba determina anticuerpos contra antigenos especifices del virus del Dengue, Herpes Vius, VIH. Sincilial Respiratorio, Citomegalovirus, Rubéola, Hepatitis A, By C, principalmente. En infecciones por Virus de Epstein-Barr se usa para demostrar marcadores serologicos tempranos de |a infeccin, que se pueden utilizar en el manejo de huéspedes inmunocomprometidos [1] 1a existencia de anticuerpos contra Pasos generales de un ELISA: 1. Tapizado del pocillo con el antigeno 0 anticuerpo. 2. Adicién de la muestra problema con la mezcla de antigenos o anticuerpos 3. Unién del antigeno 0 anticuerpo especifico al anticuer ic a aoe. TPO © antigeno tapizado en 26S MICROBIOLOGIA ¥ PARASITOLOGIA MEDICA “VIROLOGIA” Escaneado con CamScanner PRACTICA 4. Técnica lo ELISA para ol dlagnéstico viral a Lavado de! pocillo para eliminar el exceso do anligeno o anticuerpe no unide. Adicién del anticuerpo secundaria marcado con la endima. Unién del anticuerpo secundatio al anligeno 0 anticuerpo. Lavado del pocillo para eliminar el exceso de onzima no unida. Adicién del substrato. . Unién del subsirato a la onzima, 0. Desarrollo del color (3). OPN RE Guia de Evaluacién 4.1 1. Menciona las diferencias entre ELISA Direclo @ Indireclo. 2. Qué infecciones viricas se pueden determinar mediante pruebas de ELISA? 3. gQué ventajas tienen las pruebas de ELISA? 4, Qué desventajas tienen las pruebas de ELISA? 5. Qué funcién tiene el susirato en Ia prueba de ELISA? “Grup Educative Siglo XxI\ AL Escaneado con CamScanner pracric¢ng 00 Observaciones y Sugerencias Conclusiones Referencias bibliograficas 1. Pazos Salazar, N.G. et al. (2002). Manual laborctorio de virologia @.F.B., BUAP, México. 2. Brooks, Geo F. et all. (2001). Microbiologia Médiica de Jawelz, Melnick y Adelberg, 25a ed. ‘McGraw-Hill Interamericana, México. 3. Cétola, Viviane E. (2000). "Ensayo inmunoenzimético (ELISA) para la deteccién del antigeno de superficie del virus de la hepaillis B (HBSAq)", Wiener Laboratorios, Argentina. Disponible en: [http://www.wiener-lab.com.ar/VademecumDocumentos/V espanol! hbsag_elisa_sp pdf], Consultado: 02-04-2019, s/Vademecum%20espar 283 MicROBIOLOGIA Y PARASITOLOGIA MEDICA “VIROLOGIA” Escaneado con CamScanner PRACTICA 5. Identiti n de grupo sanguineo mediante la prueba de hemaglutinacion ee PRACTICA 5. IDENTIFICACION DE GRUPO SANGUINEO MEDIANTE LA PRUEBA DE HEMAGLUTINACION Objetivo Al finalizar la practica, el estudiante sera capaz de: + Conocer los principios y aplicaciones de la prueba serolégica de hemaglutinacién e inhibicién de la hemaglutinacién. Objetivos especiticos ae imagen Retonada de: LACE atoratero de + Diferencior la prueba de hemaglutinacién tloquimiaCna Endocrinology Miro. de la de inhibicién de la hemaglutinacién. + Aplicar ia prueba de hemaglutinacién para la determinacién de grupo sanguineo. Antecedentes Dentro de los méiodos utilizados para el diagnéstico de virus tenemos los de aglutinacién, que pueden realizarse en sangre. Esta reacclén evidencia fa aglutinacién de eritrocitos, proceso que recibe el nombre de hemaglutinacién Prueba de hemaglutinacion El nombre de hemaglutinacién se debe al hallazgo de que los virus de influenza podian aglutinar eritrocitos, posteriormente se determiné que el origen de esta propiedad se debia. ala existencia de una glicoproteina presente en la envoitura viral a Ia cucl se le denomind hemaglutinina. También se descubrié que la hemaglutinina tiene el papel de funcionar precisamente como el ligando viral encargade de reconocer al receptor en las células blanco. Procedimiento Para procesar la muesira se preparan diluciones seriadas al doble, empezando desde la dilucién 1:10 hasta la dilucién 1:1280, empleando como diluyente una solucién amortiguadora de fosfotos. Posteriormente, a cada dilucién se le adiciona la misma Cantidad de una suspensién de efitrocitos preparada al 1 %. Todo esto se realiza en tubos de fondo en Uo en microplacas dle fondo en U. Se observaré sedimentacién si es positiva Is prueba [1]. Grupo Educative Siglo xxi\22) Escaneado con CamScanner 1 prkericn sa [as PerSONAS en relag clasifico' que Ia recibe. Seginig fes ¥ wer uiantes grUPOs: O° A,B, AB. n , n distintos PATA Cada ingivig. JACIONAN G Ios diver Grupo sanguineo jan de 10.50"! Se denomina grupo sanguineo ala con la compatibilidad de los hematt Clasificacién de Landsteiner, se clasifican €" membrana que s Los eritrocitos poseen antigenos en su membrane Las pruebas ullizadas para establecer la clasific IE" * grupos sanguineos aprovechando las caracteristico indviduo, de wcuerdo con su porticulor codifieacion a evidencian los antigenos y/o anlicuerpos del g'¥PO comportamiento in vitro. El factor Rh es un aglutindgene encontrado en | rojes de primates y que también existe normalm sistema Rh existen varios antigenos: D, C, ¢, E, @: sin © ‘ n su la presencia del antigeno D en los efitrocitos y. de acuerdo co se dice que un individuo es Rh D positivo o Rh D negative (2). or nguinea rel munoldgicas AVE ExPrESA cag, jenética. En dichas prusts « guineo de acuerdo con y 940 porLandsteiner y Weiner 27105 albu Tmente er el 85 % de [OS MUMGNGS, fr g mbargo. de rutin, s6lo se deterring presencia 0 ausencig Desarrollo de la practica Material: - Lancetas. - Alcohol al 70 %. - Algodén. -Suero Anti A, Anti B, Anti AB y anti D (anti-Rh). - Portaobjetos. - Aplicadores de madera. Método: i) Marcar un poriaobjeto dividido en A, B, AB y D. 2} Limpicr el dedo indice con alcohol y pincharlo con una lanceta colocando une gota de sangre en A, B, AB y D. 3) Adicionar una gota de anti A, anti B, anti AB y antiD. 4) Mezclar cada preparacién con un aplicador de madera, 5) Homogenizar manualmente él portaobietos, cuidando qu i ati : ue ni 8) Observar aglutinacién y registrar los resultados, ave nose mezclen (GD eRoBIOLOGIA V PARASTTOLOGIA MEDICA “VIROLOGIA® Escaneado con CamScanner PRACTICA 5. Identificacién de grupo sanguineo mediante la prueba de hemaglutinacién ee Guia de Evaluacién 5.1 1. Menciona el fundamento de la prueba de la hemaglutinacién. 2. gCudl es la diferencia entre hemaglutinacién directa e inhibicién de la hemaglutinacién? 3. 8Qué ventajas tienen la prueba de hemaglutinacion? 4. Menciona tres ejemplos de virus que pueden detectarse por pruebas de hemaglutinacién, 5. Qué desventajas tienen la prueba de hemaglutinacién? “Grupo Educative Siglo XXI\ 3) Escaneado con CamScanner % ee ~ PRACTICA 5 Observaciones y Sugerencias Conclusiones Referencias bibliogrdticas 1. Pazos Salazar, N.G. et al. (2002). Manual laboratorio de virologia Q.F.B., BUAP, México. 2. Paz Morales, A. M. & Gaitén Femdndez, |. C. (2011). Manual de prdcticas cle laboratorio de Inmunologia. Universidad "Meriane Galvez", Guatemala, MICROBIOLOGIA ¥ PARASITOLOGIA MEDICA "VIROLOGIA"™ Escaneado con CamScanner PRACTICA 6. Virus de Infecciones respiratorlas ds PRACTICA 6. VIRUS DE INFECCIONES RESPIRATORIAS Objetivo Alfinalizar la préctica, el estudiante sera capaz de: * Eslablecer un marco de referencia para el estudio de virosis del tracto respiratorio. Objetivos especiticos * Conocer los principales agentes _virales imagen Retomada de LABcEM. aboratorio de implicados en las infecciones de las vios ‘lomimca Cina frdacinaoia y Mlrobitogt respiratorias. + Los estudiantes, junto con Io profesora, lievaran a cabo el andlisis de un caso clinico de virosis del tracto respiratorio. Antecedentes Estudios epidemiolégicos reportados en México indican la importancia de las infecciones respiratorias, ya que afecian a la poblacién, siendo una de las tres primeras causas de muerte infantil a nivel nacional. Diversos agentes etiolégicos son capaces de provocar infecciones respirctorias, entre ellos: virus, bacterias, hongos y pardsitos. La alta prevalencia de infecciones respiratorias de origen viral se debe principalmente ala gran cantidad de agentes infecciosos y a la faciiidad de transmisién de persona a persona, con frecuentes reinfecciones por algunos virus y, en algunos casos, a cambios en la antigenicidad viral [1]. Los virus respiratorios consiituyen, probablemente, ja causa més frecuente de enfermedad infecciosa aguda en el hombre; los nifios presentan de 3 a 7 episodios por aio, dependiendo de la edad; los adultos presentan una media anual de cinco episodios, fundamentalmente a nivel del tracto respiratorio superior [2]. La mayoria de estos virus se transmiten por contacto directo 0 por gotas o secreciones respiratorias, aunque algunos de ellos pueden también transmitirse mediante aerosoles. En edades avanzadas, las infecciones ocasionadas por el virus influenza A pueden conslituir cuadros graves y contribuir a la descompensacién de afecciones respiratorias crénicas, ‘Aunque las infecciones respirctorias virales ocurren durante todo el aio, el tipo de virus que puede desarrollarlas esta relacionado con el clima y las estaciones del aio. En zonas templadas, duronte el inviemo, se presentan los virus envueltos, como el virus de la influenza, Virus Sincitial Respiratorio (VSR) y Coronavirus. Mientras que los virus no envuellos, como los Rinovirus, se encuentran c menudo en la primavera y hasta el oto {1].Si bien, la Grupo Educative Siglo XxI\ 23. Escaneado con CamScanner PRAcricng id para la mayo, enfermedad pc Yori vedad oe oe rante en [05 dlvers0s arypg, 8 i6n e *odidla. limitadas al tracto Fespiratgs ie, VSR, 61 SARS-COV y los Adena Teplicacién viral se corelaciona con 1a 9f0 los virus respiratorios, la patagénesis de la infer infecciones por Rinovirus y Coronavirus SON. en a luer superior, mientras que el Virus de Influenz, Paral infectan las vias respiratorias inferiores, Virus de la Infivenza presenta un period * Cuadro agudo de fiebre elevada, con escolerr® seca y aumento de las secreciones respiratorias: a gs import BI VSR, en nifios, representa la causa més Impgre vente respiratorio inferior, asociada con bronauiclit. & Tequerirén hospitalzacion. Los Adenovirus son causa frecuente de infeccior® 1 infancia. Son responsables de cuadros de caracie como los acontecides en compamentos miliares ¥ manifestaciones asociadas son: amigdalits,fiebre prolong jo responsables de Mas de Ia mitad de i, todas las infecciones del fracto respiraigry acion corto de 1 a2 dias. Provo, cabezo, mialgias, artralgigg q durarentre 40 8 dias. ™ Og de incub lofrios, dolor de que suele nie de enfermedad STOVE del tig, a enmenores de 2 args, us ciones respiratorias, especicimente en | porddico ¥ aMbIEN epidéiiog en colegios. EN los nifios, da y fiebre muy infensa, Los Rinovirus afectan el tracto respiraiario, siend catarros que ocurren en |ainfancia y del 30% de superior. - or inovirus es la sinusitis, pues cerca day in ma infeccin Snel La complicacién més frecuente tras Ia in Co eves de snusts (3), 90 % de los que han sufrido esta infeccién presentan Desarrollo de la practica Método: 1) En equipos de laboratorio, los estudiantes llevardén a cabo Ia discusién y andisis de un caso clinico con una conclusion, mediante una exposicion. Guia de Evaluacién 6.1 1. Menciona cuatro ejemplos de virus causantes de infecciones respiratorias. 34, MIcROBIOLOGIA Y PARASITOLOGIA MEDICA “ViROLOGIA® Escaneado con CamScanner PRACTICA 6. Virus de Infecciones respirator ————— ee 2. gCuadles son los factores de riesgo de una infeccién de las vias respiratorias? 3. Menciona tres virus localizados en las vias respiratorias superiores é inferiores. 4, 2Qué recursos de laboratorio estan indicados para el diagnéstico de infecciones de las vias respiratorias? 5. Menciona el cuadro clinico del virus de Ia influenza y sus complicaciones. Observaciones y Sugerencias Grupo Educative Sigio XxI\ 3° Escaneado con CamScanner PRACTICA 7. Virus de infecciones gastrointestinales SSS ee PRACTICA 7. VIRUS DE INFECCIONES GASTROINTESTINALES Objetivo Al finalizar el curso, el estudiante sera capaz d + Eslablecer un marco de referencia para el estudio de virosis del tracto gastrointestinal, Objetivos especificos ™ a raen Retorada de: LACE aboard + Identificar los agentes etiolégicos de las ionic ineaEndeernelonay troy, principales virosis del tracto gastrointestinal. + Los estudiantes, junto con la profesora, llevaran a cabo el andlisis de un caso clinico de virosis del tracto gastrointestinal. Antecedentes Las gastroenteritis infeeciosas son ocasionadas por una gran variedad de microorganismos patégenos. Las de origen viral estan producidas principalmente por un grupo de virus, entre los cuales se encuentran Rotavirus, Norwalk, Calicivirus, Adenovirus y Astrovirus. Los virus son responsables del 70 % de las diarreas infecciosas, las cuales son invasivas, no inflamatorias y cursan de forma auto limitada, excepto en _ individuos inmunocomprometidos [1]. Los Rotavirus ocasionan diarreas severas en nifios menores de dos aiios. Son responsables de aproximadamente el 50 % de las diarreas en nifios que presentan cuadros de deshidratacién. Estas infecciones son la causa mas frecuente de morbilidad y mortalidad en nifios menores de cinco afios en los paises en desanollo, con alrededor de mil millones de episodios diarreicos y entre cuatro y cinco millones de muertes por afio, siendo factores importantes para su prevalencia problemas de desnutricién y condiciones de poca higiene. Se distribuyen mundialmente. La incidencia més alta se presenta en los meses frios, aunque en las regiones con poca variacién de temperatura no hay una disibucién estacional clara, La severidad de las manifestaciones clinicas depende del serotipo © subtipo, la edad y condiciones previas de salud, el vémito es un signo importante y muy frecuente [2] Se ha descrito que el virus Norwalk es la causa mas comin de brotes de gostroenteri viral entre los adultos. En los nifios, el 3 % de los casos de nifios hospitalizados por diarrea lo excretan. Produce gasiroenteritis y se caracterizan por un periodo de incubacién de 24 Grupo Educative Sigio xxi\ 32 Escaneado con CamScanner PRACTICA 7 ee va UN predamin;, rarreas (Se 0050" Minig horas, seauido de cefalea, néuseas, vamos ¥ J"? { oy Vémitto en nifios y de diced en adultos)- Los Astrovirus estan asociados con el 3. 054% oct afios, con una mayor incidencia en el nviemo, "ESE™ iy mayor incidencia en meses calidos ¥ PARES CON Fe mids [1]. autolimitada y asintomatica, salvo en incividuos " genteritis en nifios menore, or jos AGENOVIFUS @St05 SUclen fy 9 tropical, Ia diarea syatg pe Desarrollo de la practica Método: nc cabo Ia discusion y analiss gy los estudiantes llevardt 1) En equi , ici ) quipos de laboratorio, Mpdiante una exposicion. un caso clinico con una conclusion, Guia de Evaluacién 7.1 1. Menciona cuatro ejemplos de virus causantes de infecciones gastrointestinales, 2. Menciona cudles son los factores de riesgo en una infeccién por Rotavirus. 3. gCudles son las manifestaciones clinicas de una infeccién por Rotavirus? ‘SEY WICROBIOLOGIA Y PARASITOLOGIA MEDICA “VIROLOGIA™ Escaneado con CamScanner PRACTICA 7. Virus de infecclones gastrointestinales ee 4, Menciona tres técnicas inmunolégicas utlizadas pora el diagnéstico de vius de infecciones gastrointestinales. 5. Menciona tres virus causantes de infecciones gastrointestinales que presentan ARN en su estructura, Observaciones y Sugerencias Grupo Educative Siglo XxI\ 32 Escaneado con CamScanner PRACTICAS 8. Virus de Infecciones exantematicas Seen naman PRACTICA 8. VIRUS DE INFECCIONES EXANTEMATICAS obletivo Al finalizar la préctica, el estudiante sera capaz de: * Esicblecer un marco de referencia para el estudio enfermedades exanieméticas. Objetivos especificos + Identificar los agentes etiolégicos de las agen etorads ge LACE aorta de principales enfermedades exantemalicas biog ia lic tncoinolgny Meron + Los estudiantes, junto con a. profesora, llevaran a cabo el andlisis de un caso clinico de enfermedades exanteméticas. Antecedentes Muchas enfermedades causadas por agentes infecciosos se asocian a manifestaciones cutdneas. En algunos casos, el exantema puede ser la clave de la enfermedad, y en otros, s6lo un indicador vago de una enfermedad. Las enfermedades exanteméticas son més comunes en la infancia y, por lo general, son causadas por una infeccién sistémica y se asocian con frecuencia a fiebre [1] EI mismo proceso patolégico que produce la erupcién en la piel puede involucrar otras partes del cuerpo, como pulmones, higado y bazo. El exantema es una erupcién eritematosa difusa en a piel, de extensién y distribucién variable, habitualmente auto limitado, formado por una amplia variedad morfologica de lesiones, eritematosas o purptreas, maculores, papulosas, vesiculares y pustulosas [2] Dentro de los exantemas cldsicos tenemos el sarampién, rubéola, roséola y varicela, siendo los mas comunes en Ia infancia. A pesar de que ha bajado Ia incidencia del sarampién y la rubéola debido a la vacunacion, es importante revisarlas. El Parvovirus B19 es un virus que puede producir un exantema en la infancia, ademas de alteraciones importantes en el feto. El exantema se presenta en forma de placas eritematosas y edematosas sobre eminencias malares que dan la impresion de mejillas abofeteadas con una duracién de | a 4 dias. EI virus del Sarampién se transmite principalmente por medio de gotitas expulsadas del aparate respiratorio © suspendido en el aire que entran en contacto con las vias respiratorias superiores 0 la conjuntiva. Elser humaino es el Unico hospedero natural del virus. Grupo Educative Siglo Xxi\ 4) Escaneado con CamScanner PRACTICA & de el momento de la ®xPosigg des e8y 13) El periodo de incubacién es de 10 dias (entr do por todo el m hasta el inicio de la fiebre. ee virus esta. a unc vie ¥ commienzos El Sarampién es sumamente contagios®- oe a fines resenta despu dey te se produc trosmision 5© P PUES deg climas templados generalmen primavera, mientras que en ¢ estacion de lluvias [3]. La Rubeola es una enfermedad cot ‘ocurren durante la primavera. EI con Presenta un exantema constituido Po la madre puede transmitir el virus malformaciones congénitas o la muerte ocurre la infeccién, el riesgo para el feto es Maver (2 lav. uy contagiosa qu aricela es una enfermedad muy conled een Casta de fh Varicela Zoster, comin en Ia infancia Wye, anorexia, NGUSEOS Y VErnts, 2.4.3 dios, puede haber cefalea, fotofobio. mialgios, On nchos y Wego papulas exantema se caracteriza por lesiones ve Fc ortaio seroso, de nimero vatiou se vuelven vesiculas tensas,.delicadas, qu! * pruriginosas [2]. jimas tropico! ales rot 0, los brotes epidény, io espontane ntagiosa de oespit toria y por via tronsploceny Hagio @5 por vs apulas de 204MM, COT rosa pg; 5 Oe tandose rubéola_ Congéritg, le |a edad gestacional Cuan, ns ante el siprimer iimestre del embarg, ila primoinfeccién del y represent eee jebre y Malestar general poy comienzal 'e contienen lig Desarrollo de la practica Método: io, los estudiantes llevaran a cabo la discusion y andlisis de 1) En equipos de laboratori ‘onclusion, mediante una exposicion. un caso clinico con una c Guia de Evaluacién 8.1 1. Menciona las familias a las que pertenecen el virus del Sarampién y de la Rubedla. 42S MicROBIOLOGIA ¥ PARASITOLOGIA MEDICA “VIROLOGIA”™ Escaneado con CamScanner PRACTICAS 8. Virus de infecclones exantematicas Oo 2, gCudles son las pruebos de diagnéstico utilzadas para la identificacién de virus que ocasionan enfermedades exanteméticas? 3. gCudles son las manifestaciones clinicas del caso clinico revisado? 4, gQué recursos de laborajorio se indicaron para confirmar el diagnéstico en el caso clinico revisado? 5. gCudl seria la conclusién para el caso clinico revisado? Observaciones y Sugerencias Grupo Educative Siglo xxi 23 Escaneado con CamScanner PRACTICA 9. Virus causantes de infecciones por Herpes Virus NR PRACTICA 9. VIRUS CAUSANTES DE INFECCIONES POR HERPES VIRUS objetivo Alfinalizar la practica, el estudiante seré capaz de « Eslablecer un marco de referencia para el estudio infecciones por Herpes Virus, Objetivos especificos + Ideniificor los agenles etiolégicos de las principales infecciones por Herpes Virus, snabentetonadn de nl abontroe + Los estudiantes, junto con la profesora, llevarén elomark lia tora y web a cabo el andlisis de un caso clinico de infeeciones por Herpes Vitus, Antecedentes Los Herpes Virus Humanos se encuentran ampliamente diseminados en el mundo y tienen la capecidad de establecer latencia. Durante [a Iatencia, el ADN viral se encuentra en el interior del nécleo celular, pero no se detectan parliculas virales; sin embargo, bajo ciertas condiciones, puede reactivarse Ia replicacién viral (estrés psicolégico, fatiga, exposicién al calor, al {tio © al sol, menstruacién, el coito, fiebre, inmunosupresion, administracién de corticosteroides, cirugia laser, trauma tisular local, etc.) [1]. Los Virus Herpes Humanos estan agrupades en tres subfamilias basadas en diferencias en las caractersticas de los virus (estructura del genoma, tropismo tisular, efectos citopaioligices y localzacién de la infeccién latente), asi como en la patogenia de la enfermedad y su manifestacion, Los Virus Herpes Humanos son los Virus del Herpes Simple de los Tiss 1 y 2 (VHS-1 y VHS-2}, el Virus de la Varicela-2éster (VV7Z}, el Virus de Epstein-Barr, el Citomegalovirus (CMV). el Virus Herpes Humano 6 y 7 {VHH-6 y VHH-7) y el recién descubierto VHH'8 relacionado con el Sarcoma de Kaposi [2]. &l Virus de Herpes Simple Tipo | es un virus de gran tamafio y neurottépico que causa orincipalmente infecciones orales; desde leves, como el herpes labial, hasta grave, como lameningoencefalilis. El HSV Tipo 2 8s muy similar, pero da lugar @ infecciones ano-genilales © Herpes Neonatal. El Virus de fa Varicela-Zéster (VZV) es un virus neurodermatotropo, cuyo modo de contacto iniciol es por inhalacién de gotitas que penetran en el organismo a través del aparato respiratorio, con un petiodo de incubacién de 1 a 3 semanas, es el causanle de la Varicela Grupe Educative Siglo XxI\ 43. Wont Escaneado con CamScanner a jaos, mientras QUE su F80Ctivgg, como infeccién primaria, afectando €N adultos da lugar al Herpes Zéster. ; El Virus EBV infecta y se replica en el epitel re linfocitos B. Se transmite por Ia saliva ¥ | sa nt mayoria de los nifios, generalmente de forma" trig g edad. En paises desarollados, sin emba'” ° cterizd Causando la mononucleosis infeccioso. qU® §° astenia y faringifis. rofaringe, asl Com, o oral ¥ 278 on desarrollo infer” log 1 ea. v antes de los dos gag °la neraimente a Adolescg, por fiebre, linfadenonay®t s, s como semen, Sava O1Sche maja, scam fencia su infeccitn prima” ® denopatics y el lugar de lajage! ulas solvates ¥ Puede injeg’ EI CMY se detecta en sangre y en secreciones orale’ Es un virus muy frecuente, generalmenle adquiride linfa sintomatica cursando con faringits, malestar, lebye YU @8 desconocido, puede enconirase a nivel de les 8 monocitos gingivales, macréfagos y linfocitos T. . ero ha sido reciente, El HHV-6 fue criginalmente lomado Vins B linfolrépico, Po vy ae. dona reclositicado como Herpes Vive. le vis infects Cl een er toms salivares y se ais en a saliva de lar mayoria de los indvicves PUTT So nb a nivel de encia de lesiones periociontales. El HHV- 7 PAeCE men dos condiciones patolégicas: la Roséola y [a Piiriasis Rosceo- EIHHV-8 ha sido recientemente descubierlo y se cree que es el agente clave sa veg de Kopos: se ha identificado en numerosas lesiones, incluso en lesiones Periodontcles g, pacientes VIH positives [3]. Desarrollo de la prdctica Métode 1) En equipos de laboratorio, los alumnos llevorén a cabo la discusi6n y ondlisis de un caso clinico con una conclusién, mediante una exposicion. Guia de Evaluacién 9.1 1. Menciona dos ejemplos de virus causantes de infecciones por Herpes Virus. (255 MICROBIOLOGIA Y PARASITOLOGIA MEDICA “VIROLOGIA” Escaneado con CamScanner PRACTICA 9. Virus causantes de infecciones por Herpes Virus ee 2, Menciona cudles son los factores de riesgo para Herpes Simple Tipo 1 y Tipo 2. 3, gCudles son las monifestaciones clinicas del Virus de Herpes 26ster 4, De acuerdo con los diferentes Herpes Virus, gcudles pueden ser prevenidos mediante vacunaci6n? 5. Menciona el tipo de dcido nucleico que presentan cada uno de los Herpes Virus. Observaciones y Sugerencias “Grupo Educative Siglo XxI\ 42 Escaneado con CamScanner PRACTICA 10. Virus causantes de Infecclones hemorragicas ———— SEE PRACTICA 10. VIRUS CAUSANTES DE INFECCIONES HEMORRAGICAS opjetivo Alfinalizar la practica, el estudiante sera capaz de: « Establecer un marco de referencia para el estudio de viriosis causadas por virus hemorragicos. Objetivos especificos : a Imagen etomads de LANCEM,ibratorio de + Identificar los agentes eliolégicos de las Bicgumia Cina Endocrinology Meroiloge principales infecciones hemorrdgicas. * Los estudiantes, junto con la profesora, llevaran a cabo el andliss de un caso clinico de infecciones hemorrdgicas, Antecedentes Las infecciones hemorrdgicas virales son causadas por varias familias de virus distintas y, en la mayoria de los casos, son transmitidas por insectos. Estas enfermedades afectan a mas de 100 millones de personas en el mundo y hacen perecer a 60,000 cada aio. La mayoria de estos virus atacan las células dendrtticas, jos monocitos y los macréfagos. fslas células son susceptibles, lo que favorece la reproducci6n del virus (viremia), que modifica las funciones celulares de preseniar antigenos y citoquinas. Esto pudiera contribu ala patogénesis observada en la mayoria de las infecciones hemorragicas [1]. En México, una gran poblacién se encuentra exouesta ala infeccién en las zonas costeras, tanto del Golfo de México como del Océano Pacifico. Otro virus cercanamente relacionado con el Dengue, més letal y que también es transmitido por picadura de mosquitos, es el de Fiebre Amarilla (2). Aunque la Fiebre Amarilia se encuentra controlada debido a la vacunacién, muchas regiones son suscepiibles a una reemergencia si la enfermedad es introducida por vigjeros [1]. Hoy en dia, el Dengue es considerado como una de las enfermedades virales transmitidas Por artrépodos mas importantes en humanos en términos de morbilidad y mortalidad. Globaimente, se estima que cada afio ocurren de 50.a 100 millones de nuevas infecciones por el Virus del Dengue. Entre estas, alrededor de 500,000 casos desarollan fiebre hemorragica y/o sindrome de chaque hemorragico, Una de las manifestaciones de este tivo de enfermedades es la fiebre con sangrade, la Cual consiste en dafio al sistema vascular con incremento en la permeabilidad de las Grupo Educative Siala xxi 2) Escaneado con CamScanner précrigt@ 1 causar enfermedag gicos peer ytus del Ebola. La ma mona os virus hel i ft ig jente EN un re: natural Serv 0 ese les como len i hemor icas resice células endoteliales. Aunque algun otros pueden causar hemorragios de los virus causantes de infeccione: animal y/o vector artrépodo. Desarrollo de la practica es la discusion y angi udiantes levaran o cabo tte 1) En equipos de laboratorio, los esd mediante und exposicion. un caso clinico con una conclusio Guia de Evalvacién 10.1 . jones hemorragicas. | Menciona dos ejemplos de virus causantes de infeccio! 2. Menciona cudles son los factores de riesgo para el Virus de Dengue y Chikungunya 3. gCudles son las manifestaciones clinicas del caso clinico revisado? ‘SOS MICROBIOLOGIA ¥ PARASITOLOGIA MEDICA "VIROLOGIA™ Escaneado con CamScanner PRACTICA 10. Virus causantes de infecciones hemorragicas TR 4, 2Qué Tecutsos de leboratorio se indicaron para confimar el ci ‘ lagnéstico en el caso dlinico revisado? 5, gCuGl seria la conclusion para el caso clinico revisado? Observaciones y Sugerencias Grape Faveative Sito SS Escaneado con CamScanner pRACTICA T Aplicaclén de tecnica do ELISA en el dlagnéstico det virus de Hepatitis ay Hi lepatitis c PRACTICA 11. APLICACION DE LA TECNICA DE ELISA EN EL DIAGNO VIRUS DE HEPATITIS B Y HEPATITIS © NOSES Det obietivo Al finalzar la practica, el estudiante seré capar de: + Relacionar la técnica de EUSA para el diagnéstico del virus de Hepatitis B y Hepatitis C, Objetivos especiticos + Establecer un marco de referencia para el — estudio de Hepatitis B y Hepatitis C, soninia nes tncetasepey ne + Conocer el fundamento de la técnica de ELISA yu utlidad para la identificacién de Hepatitis B yc. Antecedentes Muchos virus, pertenecientes a diferentes familias, son con humanos. Estos tienen distintas formas de iransmision grados de severidad, la cual resulta de la destruc replicaci6n viral en este érgano. jOcidos por causar hepatitis en y causan enfermedad, con diferentes cién de las células del higado por la La Hepatitis se caracteriza por causar fatiga y ofros sintomas, que resuitan de la inadecuada funcién del higado y que pueden ser fatales. Los virus cuyo sindrome primario de enfermedad en el hombre es la Hepatitis han sido tlamados histéricamente Virus dela Hepatitis, seguido por una letra, en el orden de aislamiento. Asi tenemos al Virus de la hepatitis A, el primero en ser cisiado, el Virus de la Hepatitis B, el segundo, y as sucesivamente. Se han identificado al menos 7 virus causantes de Hepatitis Viral [1]. La Hepatitis producida por cada tipo de virus es clinicamente indistinguible, por ejemplo; la Hepatitis aguda producida por el Virus de la Hepatitis B es idéntica a la producida por los vitus tipo A, C, D, etc., lo que significa que clinicamente no es posible determinar el tipo de virus infectiva. Sin embargo, el estudio epidemiolégico y la historia clinica del paciente pueden orientar hacia algun virus en particular (2). A menudo la Hepatitis crénica provoca cittosis y, en Ultima instancia, carcinoma hepatocelular [3]. & Virus de la Hepatitis B (VHB) afecta a una gran parte de la poblacién mundial; actualmente es la causa principal de enfermedad hepatica en el mundo y, segin estimados de la OMS, existen mas de 2 mil millones de personas (2 de cada 5 habitantes) infectados con el virus, alrededor de 300 millones son portadores crénicos y se calcula que las secuelas producidas por este virus causan mds de un millon de muertes anuales. ‘Grupo Educative Siglo XXI\ SS Escaneado con CamScanner PRACTICA 11 ee one 4s de 170 millo ji jsten MAS ie Nes a muy extendiso. gn) nepali agg a tres tipos de de 105 casos; 2) infeccién crépj, cién en é! mas tardia de la vida da) ‘a A enun is en el 15% di 70 persistente con posible progresion a enferme’ la fa grave & cirrosis en © ellos (y S de los pacientes infectados, y3) progresion "PCS. contienen UNG mezcla gy Los métodos ELISA son los que actuaimente estin 2 Ge ambos, frente los que «a péplidos sintéticos o recombinantes, 0 und COM” indica que UN SUETO eS react, miden los anticuerpos IgG que tiene Ia muestra. Cuore cuerpos frente a AIQUNO 0 todas jog Con esta metodologia, se esta afirmando que tiene OF cudl o cudtes [4]. antigenos empleados en la prueba, pero NO sabe 4a cori antigeno de superte, EI Virus de la Hepatitis 8 contiene una profeina conee ia exposicion al HBV y Detisig (HBsAg), generalmente aparece 6 semanas despues

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