Microbiología UNAH

UNAH
FACULTAD DE CIENCIAS
ESCUELA DE MICROBIOLOGÍA
29 de noviembre de 2020
AULA PRÁCTICA
PASANTIA DE MICROBIOLOGIA
Microbiología Clínica UNAH

III PAC 2020 1
UNAH
UROCULTIVO
Muestra de un niño de 6 años
Usamos el Asa de 0.01 ml
Como interpretaría este cultivo.
Sedimento urinario:
Bacterias escasas
Células epiteliales: escasas
Leucocitos: 0-1 leucocito/ campo 40x
UNAH
3
UNAH
REPORT
4
ESTE KOH
29 de
novie
mbre
de
2020
UNAH
ESCUELA DE MICROBIOLOGÍA Toma de muestra piel (Micología)
Toma de muestra Recolecta de escamas Examen en directo KOH

Limpieza, desinfección y
Material deshidratación 10%
Observación escamas y Siembra de escamas y

29 de
Montaje con azul de
reporte del examen en esperar 7 a 14 días para lacto fenol novie
directo observar crecimiento
mbre
de
2020
5
UNAH
ESCUELA DE MICROBIOLOGÍA Exudado de piel
6
29 de
novie
mbre
de
Gram Directo 2020
UNAH
7
29 de
novie
mbre
de
2020
UNAH
8
29 de
novie
mbre
de
2020
UNAH
CIP
5
Ejercicio 1
9
Antimicrobiano Diámetro Resultado GN
10 E
DA
Cefoxitin (FOX) 56 mm 15
2
Eritromicina (E) 06 mm
Clindamicina 28 mm
(DA)
FOX
Gentamicina 22 mm 30
(GN) 29 de
Ciprofloxacina 36 mm novie
(CIP) mbre
de
2020
UNAH
10
29 de
novie
mbre
de
2020
UNAH
11
UNAH
Exudado faríngeo
12
UNAH
UROCULTIVO
Punción Supra púbica de
pacientes niño de 6 meses
Sedimento urinario:
Bacterias: Escasas
Células epiteliales: No se observaron
UNAH
14
UNAH
15
UNAH
16
UNAH
Antimicrobiano Diámetro Resultado
Ampicilina 14 mm
Amoxicilina 20 mm
/AcidoClavulanico
Ceftrioxona 24 mm
Ceftazidime 25 mm
Imipenem 26 mm
Nitrofurantoina 12 mm
Ciprofloxacina 17 mm
17
UNAH
18
UNAH
Coprocultivo
19
UNAH
20
UNAH
ESCUELA DE MICROBIOLOGÍA Exudado piel

Cultivo de tejido de antebrazo
Diagnóstico Fascitis necrotizante
21
29 de
novie
mbre
de
2020
Gram Directo
UNAH
22
29 de
novie
mbre
de
2020
UNAH
ESCUELA DE MICROBIOLOGÍA UROCULTIVO

Mujer embarazada de 24 años
Sedimento urinario:
Bacterias: Escasas
Células epiteliales: moderadas
Leucocitos: 0-1leucocito/ campo 40x
UNAH
24
UNAH
UROCULTIVO
Paciente de consulta externa de
30 años

UNAH
26
UNAH

Paciente de consulta externa de 24
años
Sedimento urinario:
Bacterias: Abundantes
Células epiteliales: Moderadas
UNAH
28
UNAH
ESCUELA DE MICROBIOLOGÍA Ejercicio 1

Muestra: Esputo
Se realizo la microscopia ( 10 X) de la muestra de esputo
Preguntas: encontrándose :
1 campo: 34 leucocitos , 0 célula epitelial escamosa
1. Como realizaría el tamizaje de una muestra de 3 campo: 35 leucocitos , 0 célula epitelial escamosa
esputo? 4 campo: 28 leucocitos , 1 célula epitelial escamosa
2. En base a los resultados del tamizaje cual seria su
6 campo: 34 leucocitos , 1 célula epitelial escamosa 29
decisión? 7 campo: 35 leucocitos , 1 célula epitelial escamosa
UNAH
Si decidió trabajar la muestra en base a
los resultas del tamizaje.
Cual seria el protocolo de trabajo?

30
UNAH
Reporte este
Gram.
31
UNAH
Que medios de cultivos elijaría, y
mencione las condiciones y tiempo de
incubación que les daría ?
32
UNAH
Ejercicio 1
Ayúdenos a
interpretar este
cultivo .
33
UNAH
Si usted deicidio trabajar la
colonia alfa hemolítica.
20 mm
Que disco usaría la
identificación y como leerá el
resultado presentado.
34
UNAH
Como relazaría el
LV
antibiograma para este
microorganismo .
TE
Como leerá el antibiograma

presentado: OX
TS
Antibiotico Halo
Oxacilina 22 mm
Eritromicina 25 mm E
Clindamicina 28 mm
Tetraciclina 6 mm DA
35
Levofloxacina 19 mm
Trimetroprim/Sulfa 8 mm
UNAH
Elabore el reporte de la
muestra trabajada
36
UNAH
Hemocultivo Ruiz Castañeda
37
UNAH
Hemocultivo
38
UNAH
MIERCOLES (1)
39
UNAH

Muestra: Esputo
Se realizo la microscopia ( 10 X) de la muestra de esputo
encontrándose :
Preguntas: 3 campo: 8 leucocitos , 0 célula epitelial escamosa
1. Como realizaría el tamizaje de una muestra de 5 campo: 5 leucocitos , 0 célula epitelial escamosa
esputo? 6 campo: 8 leucocitos , 1 célula epitelial escamosa 40
2. En base a los resultados del tamizaje cual seria su 8 campo: 8 leucocitos , 0 célula epitelial escamosa
decisión? 9 campo: 4 leucocitos , 1 célula epitelial escamosa
UNAH
Reporte este
Gram
41
UNAH
Ayúdenos a
interpretar este
cultivo .
42
UNAH
Haga la
lectura de la
Bioquímica
presentada
43
UNAH
IMI
10
GEN CAZ
Como relazaría el 30
25
30
antibiograma para este 15 20

microorganismo .
44
FEP FOX AMC STX
30 30 30 10
Que discos usaría la 17

identificación y como leerá el 27 28 27
resultado presentado. CTX 27
30
CIP AK 29 de
10 10 30
novie
12 mbre
de
2020
UNAH
Elabore el reporte de
esta muestra
45
UNAH
REPORTE ESTE
46
KOH
29 de
novie
mbre
de
2020
UNAH

Cultivo de Pie derecho
Diagnóstico (Pie diabético)
47
29 de
novie
mbre
de
Gram Directo 2020
UNAH
48
29 de
novie
mbre
de
NaCl 6.5% 2020
UNAH
49
29 de
novie
mbre
de
2020
UNAH
ESCUELA DE MICROBIOLOGÍA Otitis externa
Como tomaría la
muestra ?
50
UNAH
Por favor ver video toma de
otitis externa a partir del
minuto 1 y 49 seg hasta el
min 2 y 43 seg
51
UNAH
52
UNAH
53
UNAH
54
UNAH
55
UNAH
56
UNAH
Exudado faríngeo
57
UNAH
Coprocultivo
58
UNAH
Coprocultivo
59
UNAH
ESCUELA DE MICROBIOLOGÍA Aspirado bronquial
60
UNAH

Cultivo de secreción Herida
61
29 de
novie
mbre
de
Gram Directo 2020
UNAH
62
29 de
novie
mbre
de
2020
UNAH
UROCULTIVO

masculino de 20 años
Sedimento urinario:
Bacterias: Moderadas
UNAH
64
UNAH
65
UNAH
66
UNAH
Ampicilina 10 mm
Amox/Clavulanico 17 mm
Ceftrioxona 20 mm
Ceftazidime 28 mm
Imipenem 30 mm
67
UNAH
68
UNAH

femenina de 4 años
Sedimento urinario:
Bacterias: Escasas
Células epiteliales: Escasas
10 x 0.01
Leucocitos: 0-3 leucocito/ campo 40x 10 x 10² = 1000 = 10³
UNAH
70
UNAH
UROCULTIVO
• Paciente de consulta externa

• Usamos el Asa de 0.001 ml
• Como interpretaría este

cultivo.
Sedimento urinario:
Bacterias: Escasas
UNAH
72
UNAH
Sedimento urinario:
Células epiteliales escamosas: Moderadas
73
UNAH
74
UNAH
Sedimento urinario:
75
UNAH
76
UNAH
Como interpretaría este

cultivo.
Sedimento urinario:
Células epiteliales: Escasa
Leucocitos: 15-18 leucocitos/ campo 40x
77
UNAH
78
UNAH
79
UNAH
80
UNAH
81
UNAH
82
UNAH
Hemocultivo
83
UNAH
Vaginal
84
UNAH
DIA LUNES (2)
85
UNAH
COPROCULTIVO
86
UNAH
87
Otica
UNAH
88
UNAH
Exudado faríngeo
89
UNAH
90
UNAH
91
29 de
novie
mbre
de
2020
UNAH
¿Reporte?
UNAH
ESCUELA DE MICROBIOLOGÍA Exudado piel
93
29 de
novie
mbre
de
2020
UNAH
94
29 de
novie
mbre
de
2020
UNAH
95
29 de
novie
mbre
de
2020
UNAH
Exudado piel
96
29 de
novie
mbre
de
2020
UNAH
97
29 de
novie
mbre
de
2020
UNAH
Sedimento urinario:
UNAH
99
UNAH

cultivo.
Sedimento urinario:
100
UNAH
101
UNAH
102
UNAH
103
UNAH
Ampicilina 10 mm
Amox/Clavulanico 6 mm
Ceftrioxona 10 mm
Ceftazidime 15 mm
Imipenem 26 mm
104
UNAH
105
UNAH

cultivo.
Sedimento urinario:
Bacterias: Escasas
Leucocitos: 8-10 leucocito/ campo 40x 106
UNAH
107
UNAH

cultivo.
Sedimento urinario:
Leucocitos: 0-2/ campo 40x
108
UNAH
109
UNAH
UROCULTIVO

cultivo.
Sedimento urinario:
Leucocitos: 55-58 leucocitos/ campo 40x
110
UNAH
111
UNAH
112
UNAH
113
UNAH
114
UNAH
115
UNAH
Hemocultivo
116
UNAH
Liquido pleural
117
UNAH
Exudado Vaginal
118
UNAH
Exudado Vaginal
119
UNAH
DIA MIERCOLES (2)
120
UNAH
Coprocultivo
121
UNAH
122
UNAH
123
Esputo
UNAH
124
UNAH
Exudado piel
125
29 de
novie
mbre
de
2020
UNAH
Abceso facial
126
29 de
novie
mbre
de
2020
UNAH

cultivo.
UNAH
128
UNAH
129
UNAH
Eritromicina 6 mm
Clindamicina 6 mm
Rifampcina 10 mm
Nitofurantoina 6 mm
Tetraciclina 17 mm
Cefoxitin
Cefoxitin 18 mm
130
UNAH
131
UNAH

UNAH
133
Examen en fresco Coloración Giemsa
UNAH
Que medios, condiciones y tiempo de
incubación utilizaría para la siembra de
una muestra respiratoria con hallazgos de
un hongo dimorfico
134
UNAH
28 °C
135
UNAH
37 °C
136
UNAH
Como hacemos un Buffy coat ?
137
UNAH
UNAH
DIA LUNES (3)
139
UNAH
Hemocultivo
UNAH
141
UNAH
142
otica
UNAH
143
UNAH
Exudado faríngeo
144
UNAH
145
Exudado
piel
29 de
novie
mbre
de
2020
UNAH Exudado
vaginal
146
29 de
novie
mbre
de
2020
UNAH
Exudado piel
147
29 de
novie
mbre
de
2020
UNAH
UROCULTIVO
148
UNAH
UROCULTIVO
149
UNAH
UROCULTIVO
UNAH
UROCULTIVO
151
UNAH
UROCULTIVO
UNAH
UROCULTIVO
153
UNAH
UROCULTIVO
154
UNAH
DIA MIERCOLES (3)
155
UNAH
156
REPORTEMOS ESTE KOH
29 de
novie
mbre
de
2020
UNAH
UNAH
UROCULTIVO
158
UNAH
UROCULTIVO
159
UNAH
Exudado faríngeo
160
UNAH
UROCULTIVO
161
UNAH
162
UNAH
Liquido Pleural
163
UNAH
164
UNAH
Exudado uretral
165
UNAH
Exudado vaginal
UNAH
UNAH
168
UNAH
169
UNAH
170
ANTIBIOGRAMA 29 de
novie
mbre
de
2020
UNAH
Métodos de detección de suceptibilidad antimicrobiana
171
Método de Micro Método E test Método de Método de Agar
dilución en Caldo Difusión en Disco Dilución
29 de
novie
Método mbre
de
comerciales 2020
UNAH
ESCUELA DE MICROBIOLOGÍA Ver video: Antibiograma
172
29 de
novie
mbre
de
2020
UNAH
Consideraciones para realizar un antibiogra
173
Selección del Indicaciones para las Criterios de interpretación Detección de los
antimicrobiano pruebas de susceptibilidad de las pruebas de mecanismo de resistencia
susceptibilidad 29 de
novie
mbre
de
2020
UNAH
Etapas del antibiograma
174
1.Estandarización 2.Elección de 3.Siembra 4.Insertar discos
del inóculo antibióticos
UNAH
Lectura interpretada del Antibiograma

Antibiograma para Staphylococcus Antibiograma para Enterococcus
Discos a probar Discos a probar
UNAH
Antibiograma para Pseudomonas aeruginosa Antibiograma para Acinetobacter

UNAH
Antibiograma para Enterobacteriaceae Antibiograma para Streptococcus

Discos a probar pneumoniae. Discos a probar
UNAH
Antibiograma para Streptococcus spp Antibiograma para Haemophilus

UNAH
5. Incubación
179
29 de
novie
mbre
de
2020
UNAH
.
6 Lectura e interpretación
180
29 de
novie
mbre
de
2020
UNAH
181
29 de
novie
mbre
de
2020
UNAH
Dra. Nancy Montserrat Álvarez

Detección fenotípica
BLEE
de mecanismos de
u Resistencia a una o mas C3G, C4G y
monobactames resistencia
AMPc
u Sinergia positiva antibiótica
u Resistencia a C3G con BLEE
u Inhibición por AMC, AMS negativo en Bacterias
u Reportar sin importar sinergia: Cefoxitina, u Resistencia a inhibidores de Gram negativas
carbapenemes, Inhibidores B-lactamicos B-lactamasas
u Reporte: Resistencia a Penicilinas, u Achatamiento de halo C3G
Cefalosporinas de 1,2,3,4 generación y ante un inductor (AMC, Carbapenemasas
monobactames FOX, IMI, AMP) : AMPc u Halos de imipenem menor a 21 mm, con
inducible algunas excepciones (Proteus,
Salmonella, BGNNFG)
BLEA
u Resistentes hasta cefalosporinas de 2da
generación (siempre es constitutiva)
Sensibilidad disminuida a las quinolonas

u NAL, CIP, LEV, NOR
UNAH
Detección fenotípica S. aureus resistente a meticilina
Detección de fenotipo MLSB. D-test de mecanismos de q Usar disco de cefoxitin para

predecir resistencia a oxacilina
resistencia antibiótica
Eritromicina Clindamicina Mecanismo Reporte q S.aureus y S. coagulasa negativa
de en Bacterias resistente a meticilina debe
resistencia Gram Positivas informarse “Resistente a todas las
cefalosporinas y beta lactámicos
Susceptible Susceptible Ausente Sensible
ambos discos
q Amoxi/clav, ampi/sulb, pip/tazo,
imipenem, deben reportarse
independientemente de los
Susceptible Con/ MLSB Resistente resultados del antibiograma
ó achatamiento inducible Ambos discos
Resistente
Sin/ E-flujo Eritro:resistente

Resistente Achatamiento Clinda:susceptible Enterococcus (faecalis,faecium)
q Discos a probar: AMP, CIP, TE, VA,
GEN
Resistente Resistente MLSB Resistente
constitutiva Ambos discos
q Resistencia intrínseca a
cefalosporinas, TSX y clindamicina
q Detección de resistencia a
vancomicina y teicoplanina
UNAH
E
15 DA DA
2 2
E
15
184
DA
E 2
15 29 de
novie
mbre
de
2020
UNAH
Referencia: http://antimicrobianos.com.ar/.../NOVEDADES-CLSI-2019-v4.pdf
185
UNAH
ESCUELA DE MICROBIOLOGÍA Ejercicios
186
ATB HALOS INTERPRETACION INFORME
Ampicilina (AMP) 20 mm
Ampicilina/Sulbactam (AMS) 23 mm
Nitrofurantoína (NIT) 10 mm
Trimetroprim/ Sulfa(TMS) 25 mm
Ciprofloxacina (CIP) 33 mm
29 de
Gentamicina (Gen) 19 mm novie
Cefixime (CFM) 30 mm mbre
de
2020
UNAH
187
Ampicilina/Sulbactam 14 mm
(AMS)
Trimetroprim/ Sulfa(TMS) 22 mm
29 de
Gentamicina (Gen) 21 mm novie
Cefixime (CFM) 28 mm mbre
de
2020
UNAH
188
Ampicilina/Sulbactam Mm
(AMS)
Trimetroprim /sulfa(TMS) 25 mm
Ciprofloxacina (CIP) 35 mm 29 de
novie
Gentamicina (Gen) 21 mm
mbre
Cefixime (CFM) 28 mm de
2020
UNAH
189
ATB HALOS INTERPRETACI INFORME
ON
Amoxicilina/acido 08 mm
clavulanico (AMc)
Ceftazidime (CAZ) 16 mm
Ceftrioxona (CTX) 18 mm
29 de
novie
Gentamicina (Gen) 21 mm mbre
Cefoxitin (FOX) 20 mm de
2020
UNAH
Ejercicios
ATB HALOS INTERPRE INFORME
190
TACION
Cefepime (FEP) 26 mm
Amoxicilina/acid 06 mm
o clavulanico
(AMc)
Ceftazidme (CAZ) 6 mm
Ceftrioxona (CTX) 6 mm
Tazobactam(TAZ) 23 mm 29 de
novie
Imipenem(IMI) 25 mm mbre
Cefoxitin (FOX) 06 mm de
2020
UNAH
IMP
10
Ejercicios
CAZ
30
191
FOX
Amoxicilina 17 mm
/acido
Clavulanico
(AMC) AMC
30
Ceftrioxona 06 mm
(CRO)
CRO
Ceftazidime 28 mm 30 29 de
(CAZ) novie
mbre
Imipenem 30 mm
de
(IMP)
2020
UNAH
FOX
30
Ejercicios
192
CIP NB
Clindamicina 26 mm
(DA)
(CIP)
Novobiocina 06 mm DA E 29 de
2 15
novie
mbre
de
2020
UNAH
193
29 de
novie
mbre
de
2020
UNAH
Ejercicios
DA
Antimicrobiano Diámetro Resultado E 2
15
194
Cefoxitin (FOX) 10 mm
Clindamicina 24 mm
(DA)
FOX
30
29 de
novie
mbre
de
2020
UNAH
Ejercicios AMP
Antimicrobiano Diámetro Resultado CIP CTX
Ampicilina 20 mm AMC
Amoxicilina 25 mm
/acido Clavulanico
CAZ
Ceftrioxona 06 mm
Ceftazidime 28 mm IMI
Imipenem 30 mm NIT
Ciprofloxacina 26 mm 195
UNAH
CIP
5
Ejercicios
196
Antimicrobiano Diámetro Resultado GN
10 E
DA
2
Clindamicina 24 mm
(DA)
FOX
Gentamicina 13 mm 30
(GN) 29 de
Ciprofloxacina 35 mm novie
(CIP) mbre
de
2020
UNAH
Ejercicios GN
10
NIT
30
197
FEP
Amoxicilina 6 mm CIP 30
5
/acido Clavulanico
Cefepime 22 mm
Ceftazidime 25 mm
Gentamicina 06 mm CAZ
AMC
30
29 de
novie
mbre
de
2020
UNAH
GN
Ejercicios
198
DA
2
Antimicrobiano Diámetro Resultado FOX
30
Cefoxitin (FOX) 25 mm
Clindamicina 28 mm E
(DA) 15
Gentamicina 12 mm
(GN) 29 de
NB
Novobiocina 06 mm 5 novie
mbre
de
2020
UNAH
FEP
30
PTZ
100
AM
Ejercicios
/10
K
30
199
CAZ
30 (CIP)
CIP
5
Piperacilina/Tazob 25 mm
actam (PTZ)
Cefepime (FEP) 32 mm 29 de
ME
M Ceftazidime (CAZ) 25 mm novie
10
mbre
Meropenem
Amikacina (AMK) 36
15 mm
mm de
2020
UNAH
IMI
10
GEN CAZ
30 30
Observe el siguiente
200
antibiograma y determine si
FOX AMC STX
existe algún mecanismo de FEP
30 30 30 10
resistencia
CTX
30
CIP AK 29 de
10 30
novie
mbre
de
2020
UNAH
201
Discusión en grupo que
antibióticos usamos para
Stenotrophomonas maltophilia
y
para los (BGNNFG) en general
29 de
novie
mbre
de
2020
UNAH
STX LEV
10 30
GEN
10
202
Observe el siguiente
AMC
OXA
1 antibiograma y determine
si existe algún mecanismo
30
DA
E 2
15
de resistencia
NB
5
AM FOX
30
29 de
K
novie
mbre
de
2020
UNAH
Tarea
• Estimado estudiante se le pide leer las diapositivas sobre el control de calidad en el
203
antibiograma debe realizar su propio resumen,ya que en su próximo laboratorio nos
tomaremos 5 min para realizar una discusión sobre lo leído.
UNAH
Control de Calidad
204
Antibiograma
UNAH
Parámetro a controlar en un antibiograma

§ Medio de Cultivo
§ Preparación del inoculo
El medio de Cultivo mas Utilizado
es agar Mueller Hilton por las § Estandarización del inoculo
siguientes características: § Inoculación en placas de agar
205
§ Aplicación de discos de
§ Su reproductibilidad antibióticos
§ Bajo contenido de § Incubación de las placas de agar
inhibidores § Medición de halos de inhibición
§ Buen crecimiento de la § Interpretación de resultados
mayoría de las bacterias según normas de la CLSI
patógenas
UNAH
Preparación del inoculo Estandarización del inoculo

§ Método de crecimiento previo 0.5 Escala de McFarland
Para microorganismos de crecimiento Se usan como referencia en
206
rápido suspensiones bacteriológicas para
1. Cultivo con mas de 24 horas saber el número de bacterias por
2. Cultivo en medio selectivo mililitro.
3. Cultivo con muy pocas colonias Casos específicos en los que se
usa es en el de antibiograma o
§ Método de suspensión directa pruebas de sensibilidad, donde es
Para microorganismos de crecimiento necesario para estandarizar el
fastidioso método y se eviten falsos
positivos o negativos
1. Cultivo fresco con 18-24 horas de
incubación
UNAH
Consecuencias de un inoculo mal estandarizado
§A mayor densidad:
Disminución en los halos de
inhibición o Falsa resistencia
207
0.25 0.5
§ A menor densidad: Aumento
en los halos de inhibición o
Falsa sensibilidad
1
UNAH
Caracterististicas de crecimiento
§ Para sembrar el inoculo debe utilizarse el medio de cultivo adecuado

§ Bacterias de rápido crecimiento: Enterobacterias, Pseudomonas sp,
Acinetobacter sp, Staphylococcus sp, Enterococcus sp , Vibrio cholerae
208
Sembrar en Agar Mueller Hinton
§ Bacterias de desarrollo fastidioso: Streptococcus sp, Haemophilus spp,
Neisseria sp sembrar en Agar Müller Hinton c/sangre de cordero al 5% para
Estreptococos
§ Agar HTM para Heamophilus
§ Agar GC suplementado para Neisseria.
UNAH
Inoculación de las placas
209
UNAH
Aplicación de los discos de antibióticos Control en los discos de antibióticos

§ Sacar los antimicrobianos dos horas para §La fecha de vencimiento del
que adquieran T ambiente antimicrobiano impreso en el tubo o frasco,
210
No utilizar discos que hayan vencido
§ No usar mas de 6 discos en placas de 100 §Que los discos no estén húmedos
mm ni mas de 12 discos en placas de 150 §El almacenamiento adecuado a 4˚C
mm conservados en envases herméticos y con
desecante para evitar la humedad ya que
§ Colocar los discos sobre la superficie del esta puede reducir la carga del
agar antimicrobiano
§Las cepas ATCC utilizadas para controlar la
§ Una vez colocado el disco no debe ser carga de los antimicrobianos
§E. coli 25922
removido. §S. aureus 25923
§E. coli 35218
UNAH
Consecuencias de antimicrobianos no
controlados
211
UNAH
Medida de zonas de inhibición e interpretación
212
UNAH
CONTROL DE CALIDAD INTERNO
213
UNAH
ESCUELA DE MICROBIOLOGÍA Control de calidad en el medio de cultivo
Cuando se abre un nuevo frasco de

Cuando se prepara un nuevo
medio de cultivo lote de medio de cultivo
§ Fecha de vencimiento § Profundidad del agar
214
§ Signos de humedad en el medio § Humedad del medio de cultivo
deshidratado § Esterilidad del medio de cultivo
§ Composición del medio: pH , Cationes, § Crecimiento en el medio
Timina-Timidina
UNAH
ESCUELA DE MICROBIOLOGÍA Control de calidad en el medio de cultivo
Control de pH
Consecuencias de pH mal ajustad
El rango de pH va de 7,2
a 7,4 a temperatura • Si el pH del medio es acido: se
ambiente y debe observa menor actividad de
determinarse después Macrolidos, Aminoglucósidos y
de su solidificación. Quinolonas.
• A este mismo pH se observa mayor
actividad de penicilinas y
tetraciclinas
• La cepa control de pH es la
Escherichia coli ATCC 25922 frente a
discos de gentamicina y tetraciclina.
215
UNAH
ESCUELA DE MICROBIOLOGÍA Control de cationes bivalentes en el medio de cultivo
-21
§ El control de cationes bivalentes debe a: 16
n
realizarse cuando se adquiera un nuevo m
ic i
lote de medio de cultivo nta
GEN
G e
216
§ La concentración debe ser
Ca: 20-25mg/L
Mg: 10-12,5Mg/L
Colistin, Tetraciclinas aumentan
Aminoglucosidos
El exceso de Zn afecta Carbapenemasas
La cepa control es Pseudomonas
aeruginosa ATCC 278553 frente a
gentamicina
UNAH
Control de timina-timidina
• Este debe realizarse cada vez

que se adquiere nuevo lote de
medio
217
• El contenido de este debe ser
escasa o nula en el medio
• La cepa control Enterococus
faecalis ATCC 29212 frente STX
UNAH
Control de profundidad del medio
• Cada laboratorio deberá estandarizar

el volumen del medio necesario para
obtener una profundidad de 4mm
218
• El volumen de medio es
aproximadamente 30-32mL en cajas
de 100mm
• El plaqueo debe realizarse sobre un
mesón de superficie horizontal y
uniformemente plana para evitar la
inclinación de los medios
UNAH
Consecuencias del medio sin profundidad adecuada
• Mayor profundidad del

medio produce reducción
219
de halos de inhibición:
Falsa resistencia
< 4mm
• Menor profundidad del 4mm
medio produce
agrandamiento de halos
de inhibición: Falsa
> 4mm
sensibilidad
UNAH
Control de humedad del medio
• Se controla cada vez que se realiza

la prueba
• La superficie del medio debe ser
220
húmeda
• No debe contener gotas de
condensación sobre la superficie
del agar antes de utilizarlo
• El exceso de gotas se elimina
colocando en la incubadora a 35˚C
por el lapso de 10-30 minutos
UNAH
Control de esterilidad
• Del lote de placas se separa

aproximadamente el 5%
• Se incuba a 35˚ C durante 24-48
horas observar cualquier
221
presencia de contaminación
• Descarta todo el lote si la
contaminación es significativa es
decir mayor al 50%
• El medio de cultivo NO debe
contener ni una sola colonia de
contaminación antes de realizar la
prueba
UNAH
Control de crecimiento
• Del lote preparado separar

aproximadamente el 5%
• Sembrar la cepa control de crecimiento
222
especifica para cada medio
• ATCC 25922 Y 25923 para MH
• ATCC 49619 MH con sangre de cordero
al 5%
• ATCC 49226 para control de GC
suplementado
• ATCC 49247 para control de HTM
UNAH
ESCUELA DE MICROBIOLOGÍA Control del tiempo de

Control de temperatura de
incubación
incubación
• La mayoría de microrganismos se
incuba durante 16-18 horas
• Los microorganismos deben de ser tiempos mayores dan halos falsos
incubados a 35 ˚C
• Temperaturas mayores y menores
223
dan halos de inhibición con Falsa
sensibilidad
• Se debe realizar el control y registro
diario de las estufas de incubación
para evitar errores de
interpretación
UNAH
Fuentes de Error
• Inadecuada conservación de cepas control ATCC

• Inadecuada control de los medios de cultivo
• Profundidad del medio inadecuado
• Mala conservación de antimicrobianos
224
• Cepas mal identificadas y contaminadas
• Inoculo bacteriano mal estandarizado
• Siembra inadecuada del inoculo
• Temperatura y atmosfera de incubación inadecuada
• Lectura e interpretación de resultados
• Transcripción de resultados

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