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BIOLOGÍA CELULAR Cátedra B

UNIDAD Nº 3: MÉTODOS DE ESTUDIO DE LA BIOLOGÍA CELULAR


Microscopía Óptica y Electrónica
TRABAJO PRÁCTICO DE MICROSCOPÍA n° 2
Las células son demasiado pequeñas para observarlas a simple vista. El
descubrimiento y estudio de las células sólo fue posible a partir del siglo XVII, cuando se
inventó el microscopio. Un microscopio es un instrumento que aumenta el tamaño de una
imagen y permite ver más detalles que los que sería posible visualizar a simple vista. El
microscopio más sencillo es una lupa o un par de anteojos para leer. Los microscopios
ópticos compuestos utilizados en Biología Celular están constituidos por sistemas de lentes.
El poder de resolución es la capacidad del microscopio de producir imágenes
separadas de objetos que están muy cerca uno de otro. La resolución no depende sólo del
sistema óptico del microscopio, sino también de la longitud de onda de la luz y de otros
factores, como el espesor de la muestra, la calidad de su fijación y la intensidad de la tinción.
Actualmente se utilizan microscopios ópticos que incorporan muchas mejoras
complejas, pero las propiedades de la luz en sí misma fijan un límite a su poder de
resolución. Los microscopios electrónicos sobrepasan este límite mediante el empleo de
haces de electrones en lugar de luz, lo que permite visualizar los menores detalles de las
células e incluso posibilita la visualización individual de algunas moléculas de mayor tamaño.

a. RESPONDEMOS el siguiente interrogante:

¿Cómo se pueden observar las células para su estudio?

Para ayudarnos a responder esta pregunta invitamos al Lic. José Manuel Gómez de la
Universidad Nacional de Tucumán, para que nos cuente cuáles son las partes de un
microscópio óptico (MO), cómo enfocar correctamente un preparado y cuáles son los
cuidados que demos tener cuando trabajamos en microscopía. MIRAMOS el video sobre
“Microscopio óptico: componentes, enfoque y cuidado” utilizando el siguiente link:

https://www.youtube.com/watch?v=LXbWgRwXFPk

Teniendo en cuenta la información del video,

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b. PROPONEMOS posibles respuestas (hipótesis) a nuestro interrogante.

c. SEÑALAMOS las partes fijas y móviles del MO en la figura y FUNDAMENTAMOS la


función de cada uno de ellos en relación a la formación de la imagen.

d. ARMAMOS un guión para explicarle a un compañeros, que no pudo ver el video,


los pasos que hay que seguir para enfocar un preparado histológico.
FUNDAMENTAMOS cada paso.

e. REALIZAMOS una búsqueda en internet sobre los diferentes tipos de microscopios


ópticos y, con la información investigada, ELABORAMOS un cuadro comparativo donde
se exprese para qué se utiliza cada uno y qué tipo de información proporciona.

La observación de la estructura interna de una célula es difícil, no solo porque sus


componentes son diminutos sino también son transparentes y en gran parte incoloros.

a. OBSERVAMOS el video de la Fundación Universitaria del Área Andina (Colombia)


que muestra el procedimiento utilizado para realizar un EXTENDIDO DE CÉLULAS DEL
EPITELIO DE LA MUCOSA BUCAL mediante la técnica de citología exfoliativa.

https://www.youtube.com/watch?v=NYr7mjfXGy0 *

*Aclaración: placa=portaobjeto

b. OBSERVAMOS la microfotografía obtenida a partir de la observación del preparado al


MO y COLOCAMOS nombres a las estructuras que reconocemos.

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100X, aumento total:

40X, aumento total:

c. Teniendo en cuenta el poder de resolución del MO y que la superficie de la mucosa bucal


esta colonizada por microorganismos que forman un biofilm, RESPONDEMOS si
podremos observar bacterias o virus (como COVID-19) en una preparación como la de
microfotografía.

d. EXPLICAMOS cómo se utiliza el objetivo de 100X para la observación de la muestra.

e. RESPONDEMOS, qué tipo de colorante es el azul de metileno y a qué se debe la afinidad


tintorial del núcleo y el citoplasma de las células de la preparación.

f. JUSTIFICAMOS la realización de cada uno de los pasos de la preparación del video y


FUNDAMENTAMOS porqué se trata de una preparación temporal.

g. ENUMERAMOS las medidas de bioseguridad utilizadas por el profesional durante el


procesamiento de la muestra biológica del video. REFLEXIONAMOS sobre el riesgo
biológico asociado a la práctica odontológica en el contexto actual de pandemia de
COVID-19.

El diagnóstico anatomopatológico de lesiones, como la del carcinoma espinocelular,


requiere del estudio de la morfología celular bajo el microscopio combinado con el análisis
molecular.

ANALIZAMOS el video del Dr. Alonso Calvo, Profesor de Histología de la Universidad de


Navarra, donde explica los pasos del procesamiento de muestras biológicas para la
obtención de preparados permanentes para MO
https://www.youtube.com/watch?v=KyO3TT2NaKk
y para microscopía electrónica
https://www.youtube.com/watch?v=TfbOez7gHXA

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COMPLETAMOS el siguiente cuadro comparativo sobre los pasos a seguir en el procesamiento de material biológico:

PASOS PARA LA MO
PREPARACIÓN DE MET
FUNDAMENTO CITOLOGÍA MATERIAL INCLUÍDO
MATERIAL
BIOLÓGICO EXFOLIATIVA EN PARAFINA
OBTENCIÓN DEL
MATERIAL

FIJACIÓN

Deshidratación previa
a la inclusión

INCLUSIÓN

CORTE

Montaje inicial

COLORACIÓN o
CONTRASTACIÓN

Montaje final

OBSERVACIÓN
ELABORAMOS un informe sobre el TP de microscopía nº 2 que contenga la
estructura de un trabajo científico, a saber:

 TÍTULO: debe representar la idea básica del problema analizado durante el TP


 INTRODUCCIÓN: incluye los antecedentes del problema y el planteo de la hipótesis de
trabajo
 MATERIALES Y MÉTODOS: es la metodología utilizada para resolver el problema
 RESULTADOS: los datos obtenidos al realizar las actividades del TP, con dibujo de las
observaciones y cuadro comparativo
 CONCLUSIONES: análisis de los resultados y verificación de la hipótesis de trabajo
 BIBLIOGRAFÍA: cita de las fuentes bibliográficas consultadas

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