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TRADICIONAL MODERNA
Evolución de la Biotecnología
Alexander Fleming 1928
Descubre la penicilina
Robert Hooke (1663) 1942
Descubrimiento de la célula Producción de
penicilina Biotecnología
Moderna
Biotecnología
Padre de la Biotecnología de 2da
Luis Pasteur
1857
generación
Tradicional
4000 a.c
Egiptos
Rosalind Franklin (1952)
Ancestral a.c. Watson y Crick (1953)
600 a.c. Mendel (1866)
Sumerios y Leyes de la herencia
babilónicos
Crianza selectiva
Evolución de la Biotecnología
1989 se utilizan
bacterias para
1988 Proyecto limpiar derrame
Genóma Exxon Valdez en
Humano Alaska
1987 prueba de
tomate y papa
resistentes a
1979 Se virus. Ratones
produce transgénicos se
insulina usan como
humana y modelos clínicos.
hormona de Se producen
1973 Plantas
1er crecimiento
recombinante transgénicas
organismo resistentes a
transgénico a partir de
bacterias herbicida.
E. coli
transgénicas.
Evolución de la Biotecnología
2012
CINVESTAV
2009 Se libera
Secuencia del experimentalme
genóma del Maíz nte el Maíz
2006 por LANGEBIO.
Vacuna tolerante a
recombinante sequía y heladas
1993
contra el
1er medicamento 2000
recombinante para papiloma
1er genoma
esclerosis multiple vegetal
Arabidopsis
thaliana
EVOLUCIÓN DE LA BIOTECNOLOGÍA
EVOLUCIÓN DE LA
BIOTECNOLOGÍA
TIPOS DE BIOTECNOLOGÍA
Microbiana
Acuática Agrícola
BIOTECN
OLOGÍA
Médica Animal
Biorremedi
Forense
ación
Clasificación de la Biotecnología
Biotecnología:
Una ciencia de muchas disciplinas
Biotecnología Moderna
Nisina.
BIOTECNOLOGÍ
A EN LA
INDUSTRIA
ALIMENTARIA
Microorganismos
modificados
genéticamente para su
uso en la elaboración de
productos
Productos y servicios de origen
biotecnológico en diferentes sectores.
• Etanol, Biogás y otros combustibles a partir de biomasa.
Energía
Permite aislar y
manipular un
fragmento de ADN de
un organismo
(transgén) para
introducirlo en otro
organismo que puede
ser de otra especie.
Clonación
Conjunto de células u organismos genéticamente idéntico,
originado por reproducción asexual a partir de una única
célula u organismo o por división artificial de estados
embrionarios iniciales.
PCR (Reacción en Cadena de la
Polimerasa)
La PCR o reacción en
cadena de la
polimerasa es una
técnica de biología
molecular que
consiste
en amplificar millone
s de veces una región
de ADN a partir de
una cadena de ADN
molde. 1985
Mix Buffer: sirve para mantener el pH
adecuado para el funcionamiento del
ADN polimerasa.
Desnaturalizar el
ADN, es decir, hacer
que las dos hebras
complementarias se
separen.
Taq Polimerasa
La temperatura
depende del número
de bases que tienen
los primers entre
37-72ºC.
Este ciclo se repite 25 a 35 veces en una reacción de PCR típica, que generalmente
tarda 24 horas, según la longitud de la región de ADN que se copia.
Electroforesis
Es una técnica en la que una corriente eléctrica impulsa
fragmentos de ADN a través de una matriz de gel y los
fragmentos de ADN se separan según su tamaño. Se incluye un
estándar, o marcador de peso molecular, para determinarse el
tamaño de los fragmentos en la muestra de PCR.
• Los fragmentos de ADN de la
misma longitud forman una
"banda" en el gel que se puede
identificar a simple vista si el gel
se tiñe con un pigmento que se
una al ADN. Por ejemplo, una
reacción de PCR que produce
un fragmento de 400 pares de
bases (pb) .
Ramas:
Cultivo de tejido celular
Ingeniería genética de plantas
Importancia de la biotecnología vegetal
Transformación genética
Cultivo de meristemas
Cultivo de anteras
Estrictas condiciones de
esterilidad.
En un medio sintético nutritivo.
Con control de temperatura, luz y
fotoperiodo.
Alcances de la micropropagación vegetal
Manteniendo su
estructura normal durante
el tiempo de cultivo.
Son amorfos
Condiciones de cultivo
Soluciones concentradas de macroelementos (100x)
Vitaminas
Aminoácidos
Carbohidratos
NO3- , PO43- , Glucosa Piridoxina
K+, Ca2+, Mg2+,
SO42- mio-inositol Acido nicotínico
(C)
Micronutrientes:
Fe2+, Cu2+, Zn+, Biotina
Mn2+, Mo2+,
Co2+, I-
semisólidos)
Soporte inerte(medios
crecimiento
Reguladores del
Auxinas Agar
Esterilización
pH
5,6 – 5,8 1
Citocininas (0,7 a 1%) atmósfera,
Giberelinas Gelrite 15 a 20
minutos
en
autoclave
Propiedades físicas de los medios de cultivo
Su concentración y calidad
pueden tener efectos en el
desarrollo del cultivo
Semisólido
(hiperhidricidad,
crecimiento lento, etc.)
Consistencia
resulta imprescindible
cuando la propagación in
vitro es desarrollada
a través de diferentes vías
Líquido
- Inducción de
embriogénesis, cultivo de
protoplastos y cultivo de
suspensiones celulares
Intercambio gaseoso pH
• Los recipientes de cultivo • Constituye un factor crítico
se tapan con un film de • Se ajusta en el rango 5,5-
polietieleno (Resinite ) 5,8
para posibilitar el • Se modifica durante el
intercambio de gases. crecimiento de los cultivos
Existen varias modalidades y alternativas de recipientes
para el cultivo in vitro de plantas
Composición de medios de cultivo
comúnmente usados
Reguladores de Crecimiento
Auxinas
Interactúan unos con otros (de
acuerdo a las diferentes
fitohormonas).
Citocininas
Raíces
Citocininas
La transferencia de los
La multiplicación se
Los vástagos o plantines plantines de in vitro a ex
realiza a partir de los
Se considera finalizada deben crecer lo vitro es sumamente
nuevos vástagos, tanto
cuando se logra un suficiente como importante. Si no se
apicales como axilares,
adecuado número de para poder fotosíntetizar realiza cuidadosamente
que a su vez serán
explantos sobrevivientes y así sobrevivir sin el puede resultar en
subcultivados
sin contaminación. suplemento artificial de importantes
incrementando su
carbohidratos. pérdidas del material
número.
micropropagado
Etapas del
cultivo in
vitro de
plantas
superiores
La multiplicación de plantines se realiza bajo
condiciones de asepsia absoluta
La tasa de multiplicación se optimiza para
obtener un máximo rendimiento
Antes de cada nueva
subdivisión o repique se
constata la calidad del
material en propagación
Las especies que enraizan in vitro tienen mayor
probabilidad de supervivencia durante la aclimatación
UNIDAD II
Procedimiento de aplicación:
a) Todos los participantes se sientan en círculo. Uno de los participantes
recuerda alguna cosa relacionada con la fermentación en voz alta.
b) Comenzando por la derecha, el resto de los participantes manifiesta en
voz alta lo que a cada uno de ellos eso le hace recordar
espontáneamente.
c) Quien tarde más de cuatro segundo en responder, sale del ejercicio.
Discusión: Los alumnos que van saliendo del ejercicio, tendrán que llevar un
registro de lo que expresan sus compañeros, para elaborar una conclusión
general sobre la actividad.
Rutas Metabólicas
Sucesión de reacciones químicas que conducen de un sustrato (donde actúa
la enzima) inicial a uno o varios productos finales, a través de una serie de
metabolitos intermediarios. Su conjunto da lugar al metabolismo.
Ejemplos:
Quimiosíntesis
Síntesis de aminoácidos
Síntesis de lípidos
Síntesis de nucleótidos
Gluconeogénesis
Catabolismo
Fase destructiva del metabolismo en la cual se obtienen moléculas sencillas, que
servirán para construir las propias biomoléculas, y energía para la realización de
otras funciones celulares.
• Respiración anaeróbica.
Fermentación: el aceptor final de e- es
• Fermentación orgánico (generalmente etanol o un ácido
orgánico).
Glucólisis
Respiración
Catabolismo de protidos
Catabolismo de aminoácidos
Fermentación
¿Qué es Fermentación?
Aeróbica
Fermentación
Anaeróbica
Fermentación Aeróbica
La fermentación aeróbica consiste en la asimilación de
la materia orgánica por parte de microorganismos en
presencia de oxígeno y nutrientes.
Fase mesófila
• Reacción de síntesis
• Asimilación de elementos nutritivos, de materia orgánica, a los
microorganismos, utilizando una parte de los compuestos orgánicos
• Aumento de la temperatura
Fase termófila.
• Reacciones de autooxidación de los microorganismos cuando comienza
a faltar la materia orgánica .
• Se liberan los nutrientes usados previamente en la síntesis de nuevas
células.
• Una fracción de los microorganismos es transformado en H20 y C02, de
tal forma que la masa orgánica disminuye y tiende a cero.
• Comienza por encima de 40ºC, provocando una disminución del
crecimiento de la microflora mesófíla.
Incrementa la Compuestos
biodisponibilidad aromáticos
de nutrientes.
Modificación en
Carbonatación
la textura
Principales microorganismos utilizados en
las fermentaciones
Bacterias
Bacterias Bacterias Bacterias
Levaduras del ácido Mohos
lácticas acéticas propiónicas
glutámico
Bacterias Lácticas
Bacterias Gram Positivas
Anaerobios facultativos
Hemofermentativas, heterofermentativas y
bifidobacteriu.
Producción de CO2
(descarboxilación del fosfoglucanato)
Condiciones de anaerobiosis
⇒oxidación por medio de una flavoproteína
Ciclo fermentativo:
Bifidobacterium
Bacilos heterofermentativos.
Transformación de fructosa-6-
fosfato en eritrosa-4-fosfato y acetil-
fosfato.
Reordenación de eritrosa-4-fosfato
a heptosa-fosfato y triosa-fosfato.
Posterior transformación a acetil-
fosfato y gliceraldehído-3-fosfato.
Diferencia fundamental con la vía
heterofermentativa ⇒ no
producenCO2.
Serratia,
Enterobacter y
Bacillus
Principales Familias
Streptococcaceae
• Homofermentativo
• Producción de ácido láctico L(+)
• Células en pares o cadenas.
Principales Familias
Principales Familias
Principales Familias
Principales Familias
Bacterias ácido Lácticas utilizadas en la elaboración de
productos lácteos
Producción de alimentos fermentados
Queso Algunos tipos de pan
Vino (fermentación
Sauerkraut maloláctica)
Producción de diacetilo
VENTAJAS DESVENTAJAS
• Crecimiento rápido en los • Sensibilidad a fagos de algunas
sustratos alimentarios cepas industriales
• Anaerobiosis facultativa • Inestabilidad genética de
• Rápido descenso de pH algunos caracteres tecnológicos
• Resistencia a pH ácido relevantes
• Producción de sustancias • Requerimientos nutricionales
antimicrobianas (bacteriocinas) complejos (vitaminas y
aminoácidos)
• Actividad proteolítica limitada
Caracteres Genéticos codificados en
Plásmidos de L.LACTIS
Transporte y
metabolismo de
lactosa
Degradación de
Resistencia a caseína por la
antibióticos proteasa de
pared
Producción e
Transporte de
inmunidad
citrato y de
frente
oligopéptidos
a bacteriocinas
Formación de
Protección frente
polisacárido
a fagos
extracelular
Bacterias Lácticas como alternantes de
alimentos.
Producción de aminas biogénicas
Alteraciones en la cerveza
Industria azucarera
Productos lácteos
Carácter probiótico de cepas de Bacterias
Lácticas
Prevención de
Protección
infecciones del
frente al cáncer
tracto
urogenital Efectos de colon
Beneficiosos
Reducción de Estimulación de
niveles de la respuesta
colesterol inmune
Efecto Prevención de
antihipertensivo alergias
Medios de cultivos para la
fermentación
La preparación de medios para el desarrollo de procesos de
fermentación es una etapa fundamental para asegurar la
productividad de los mismos
Micronutrientes o
Nutrientes que se elementos traza (mg/L Fe, Mn, Mo, Ca, Zn y Co
pueden utilizar, o µg/L).
según diferentes
categorías: Componentes orgánicos
en bajas concentraciones
y que no son sintetizados
ni metabolizados por
células
Factores de
crecimiento
Vitaminas, aminoácidos,
ácidos grasos no
saturados.
Clasificación de los medios de cultivo
Sustratos
Aerobio
Requerimientos Condiciones del
nutricionales cultivo
Utilizan NO3 o
Anaerobio
SO4
Orgánico
Fuente de
Nitrógeno
Inorgánico
Requerimientos de macronutrientes:
P S SO4 o
K Mg
PO4H Aminoácidos Sales Sales
azufrados,
Requerimientos de micronutrientes:
Requerimientos de factores de
crecimiento:
Vitaminas del
complejo B
Poliaminas aminoácidos
Purinas Riboflavina
Ac.
Niacina
Pantotético
Disponibilidad de los componentes
Muchos constituyentes del medio y productos del metabolismo
actúan como agentes complejantes o precipitantes:
aminoácidos, hidroxiácidos, hidróxidos, y los aniones P04 y C03
-2 .
USO INDUSTRIAL
Sustancias orgánicas con capacidad quelante
Costo
Materias primas más importantes
corresponden a fuentes de C y N.
Debe considerarse
la cantidad de
biomasa del
microorganismo al
ser empleado
Proceso de Fermentación
3. Optimización
Falta de información respecto a coeficientes de rendimiento de
macro y microelementos para el cultivo de microorganismos.
Muerte o
inactivación
Destrucción total
Eliminación con
de
medio físico
microorganismos
Métodos de
esterilización
BIORREACTORES
Anaeróbico
Aeróbico
Biorreactor
Condiciones
ambientales
controladas
Varia su tamaño
y material
¿Qué es un biorreactor?
Es un recipiente en el que se lleva a cabo un proceso químico
que involucra organismos o sustancias bioquímicamente
activas derivadas de dichos organismos.
Características de los Biorreactores
Calidad de mezclado (tiempo de mezcla
de patrones de flujo)
Operación aséptica.
Función de un Biorreactor
La función principal es de
proveer un medio controlado
para alcanzar el crecimiento
optimo y la formación de
productos finales óptimos o
cualquiera de ambos, en el
sistema celular particular
empleado.
¿Qué es lo que realiza un biorreactor?
Mantener las células o microorganismos distribuidos en
todo el volumen de cultivo.
Biorreactor continuo
Tanque Columna de
agitado burbujeo De Lechos Lechos Lechos de Aireado y
(Agitación (Agitación circulación empacados fluidizados goteo agitados
mecánica) neumática)
Clasificación de Biorreactores
por su forma y tipo de agitación
La concentración de sustrato
decreciente.
Móviles con agitación: Tipo hélice (1,3,8), tipo planos (2,5,6), tipo
hélice inclinado (4,7).
Clasificación de Biorreactores
por su forma y tipo de agitación
Biorreactores de
agitación Neumática
Tipos
Columna de
Airlift
burbujeo
Características Generales
Agitación neumáticamente (gas a presión)
Columna de burbujeo
(Neumática)
Características de diseño:
• Distribución de gas parte inferior recipiente
• Parte superior con mayor diámetro (arrastre)
Distribuidores estáticos de gas
por su forma y tipo de agitación
Condiciones
Ascendente Descendente
Configuraciones
Características de diseño:
Aspartato
Fumarato
Separación de isómeros
de aminoácidos.
Lechos Fluidizados
Mala estabilidad
Complejidad de diseño
No esterilidad
• Agitación mecánica
Bioensayo
Determinación de la acción o de la concentración de
una sustancia por medio de la respuesta biológica
observada en las células, los tejidos o los animales.
Principio de equivalencia
OCDE en 1993
Un nuevo alimento o componente de alimento puede ser
sustancialmente equivalente a su similar de origen natural y por
lo tanto ser tratado de la misma manera respecto de su
seguridad alimentaria.
Argumentos
socialmente
válidos
La relación
entre ciencia Permite regular
los OMG en el
marco de:
Evaluación de inocuidad de los
alimentos
Toxinas y alérgenos
presentes en los alimentos
Secuencia de aminoácidos
de las proteínas
Sustancias tóxicas
Ingeniería Genética
La ingeniería genética se define como el estudio y manipulación
de los genes de organismos vivos para mejorar la vida del
hombre.
Permite aislar y
manipular un
fragmento de ADN de
un organismo
(transgén) para
introducirlo en otro
organismo que puede
ser de otra especie.
Clonación
Conjunto de células u organismos genéticamente idéntico,
originado por reproducción asexual a partir de una única
célula u organismo o por división artificial de estados
embrionarios iniciales.
PCR (Reacción en Cadena de la
Polimerasa)
Aumenta el
numero de copias
de un fragmento
determinado de
ADN para hacer
diferentes estudios.
Primer: primer es una cadena de ácido
nucleico o de una molécula relacionada
que sirve como punto de partida para
la replicación del ADN.