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OBSERVACIÓN DE CÉLULAS
Práctica # 5

Abraham David Gutiérrez Álvarez


Yayra Cavadia Salas
Estefanía Pérez Camacho
Álvaro Andrés Pérez Luna

Estudiantes Universidad de Córdoba

Mi nombre es Nohemi Genes Díaz, Bióloga

Docente Universidad de Córdoba

Facultad en Educación y Ciencias Humanas, Universidad de Córdoba


Lic. Ciencias Naturales y Educación Ambiental
Biología General
Montería - Córdoba
Grupo: 01
20 de diciembre del 2021
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INTRODUCCIÓN

El estudio de las células avanzó paso a paso permitiendo al ser humano un estudio más
detallado de la misma, todos estos aportes al estudio de está hacer o permiten diferenciar sus
características y parte de su composición, así, se entiende por célula como la unidad
principal estructural y funcional de la vida. A pesar de que en un inicio solo se consideraba a
la célula como una serie de organelos y carácter gente rica es decir que estaba compuesta
simplemente por membrana, citoplasma y ADN, sin embargo, hoy día se tiene una serie de
experiencias y estudios los cuales permiten conocer las diferentes clasificación, la célula así
se clasifica en dos grandes grupos, estos corresponden a la las Eucariota y Procariotas. Todas
estas se pueden observar a través de avances científicos como lo es la evolución del
microscopio y diferentes métodos de tinción los cuales permiten saber su estructura, forma
entre otras características y su presencia en todo lo que rodea a los organismos encontrados
en todo el ecosistema.
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OBJETIVOS

OBJETIVO GENERAL:

La práctica busca se familiaricen con las células Procariotas y Eucariotas logrando


diferenciar, e incluso reconociéndose entre sí .Asimismo, se quiere comparar algunas
de sus características profundizando en técnicas para su debido estudio.

OBJETIVO ESPECÍFICO:

● Reconocer las principales diferencias entre las células procariotas y


eucariotas.
● Reconocer algunas diferencias entre la célula eucariota animal y la
célula eucariota vegetal.
● Conocer algunas técnicas en el estudio de las células.
● Comparar la forma, tamaño, superficie y el interior de las células
procariotas y eucariotas.
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PROCEDIMIENTO

OBSERVACIÓN DE BACTERIAS DEL YOGURT

Prepare en dos placas de portaobjeto un extendido fino de la muestra de las bacterias


suministradas en laboratorio. Coloque una gota de agua en el portaobjetos, con el asa
bacteriana tome una muestra del yogurt y realice un extendido fino sobre la gota de agua del
portaobjetos. Seque la muestra sobre el mechero, teniendo cuidado de no quemar la muestra.
Lleve ambas placas al puente de coloración, a una realícese una tinción simple y a la otra una
tinción de Gram.

Tinción simple

Agregue a la muestra bacteriana colorante azul de metileno hasta cubrir todo el extendido,
durante 2 minutos, cuide que no se seque la muestra. Luego lave con agua destilada, deje
secar al aire libre.
Observe con objetivo de 100x; en el último objetivo es necesario utilizar aceite de inmersión.
● ¿Cuántas veces se encuentra aumentada la imagen?
R/: La imagen al ser observada con un objetivo de 100x nos permite saber que
la imagen se encuentra aumentada 1000 veces su tamaño natural, permitiendo
así la observación de las diferentes bacterias que se encuentran el en yogurt a
través de la tinción simple, de. De esta forma se reconoce o se identifica que
las bacterias que se encuentran en el yogurt pertenecen a estreptococos y
bacilos.

Tinción simple bacterias, objetivo 100X


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Tinción de Gram

1. Agregue a la muestra bacteriana una solución de cristal violeta hasta cubrir


todo el extendido, durante 1 minuto, cuide que no se seque la muestra; luego
lave con abundante agua destilada.
2. Cubra la muestra con lugol de gram durante 1 minuto, luego lave con
abundante agua destilada.
3. Bañe la muestra con alcohol-acetona durante aproximadamente 10 segundos
para eliminar el exceso de colorante.
4. Cubra la superficie de la muestra con safranina (colorante de contraste)
durante 1 minuto, lavar con agua destilada. Deje secar al aire libre.
5. Observe con objetivos de 10x, 40x y 100x; en el último objetivo es
necesario utilizar aceite de inmersión.
Las bacterias gram-positivas se observaran de color azul intenso o violeta, y
las gram-negativas de color rosado o rojo.

OBSERVACIÓN CON TINCIÓN DE GRAM

● ¿Cuántas veces se encuentra aumentada la imagen?

R/: Primeramente se observa con un objetivo de 10x que quiere decir


que se encuentra aumentada 100 veces, Luego con un objetivo de 40x
lo que permite saber que se encuentra ampliada 400 veces y por último
un objetivo de 100x el cual corresponde a un aumento de 1000 veces si
tamaño natural.

● ¿Cuál de las muestras es gram negativa?


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R/: La muestra Gram negativa corresponde a la muestra 1, esto se debe


a su tonalidad o su tinción recordando así que la técnica de tinción de
Gram sugiere o demuestra que dependiendo de la coloración que
presentan pueden ser positivas o negativas (azul para +, y rojo para -).

● ¿Cuál de las muestras es gram positiva?

R/: La muestra Gram positiva corresponde a la muestra número 2, co


se puede observar su tinción es de color azul lo cual indica a través de
este método la presencia de las bacterias en el yogurt.
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OBSERVACION DE CELULAS ANIMALES

Epitelio bucal:
Coloque una gota de agua en un portaobjeto, con un palillo mondadientes realice un frotis
en el epitelio interno de su boca, realice un extendido sobre la gota de agua en el portaobjeto.
Flamee la muestra sobre la llama del mechero para fijar la muestra, con cuidado de no
quemarla. Realice una tinción simple con el colorante azul de metileno.
Observe con objetivos de 10x, 40x y 100x; en el último objetivo es necesario utilizar aceite
de inmersión.

● ¿Cuántas veces se encuentra aumentada la imagen?

R/:
○ La primera imagen del tejido epitelial bucal se encuentra aumentada
400 veces ya que el objetivo utilizado fue X40.
○ La segunda imagen del mismo tejido se encuentra aumentada 1000
veces, ya que, el objetivo utilizado fue X100.
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● ¿Qué diferencias encuentras entre las dos observaciones?

R/:
En la primera imagen se observa un fondo claro y grupos de células muy
juntos, en cambio en la segunda imagen se observa un fondo más azul y
células más definidas y más dispersas.

● ¿Por qué es importante la tinción celular?

R/:
La tinción es importante en la observación de células, ya que, mejora el
contraste de la imagen y aumenta la definición de los organelos dentro de las
células individuales observadas.
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OBSERVACION DE CELULAS VEGETALES

Hoja de elodea:
Realice un montaje de una hoja de elodea sobre un portaobjeto. Observe con objetivos
de 4x, 10x y 40x.
Realice los dibujos correspondientes.

● ¿Cuántas veces se encuentra aumentada la imagen?

R/:
● Primera imagen :(Elodea, objetivo de 10x)
La imagen se encuentra aumentada 100 veces ,ya que los lentes de 10x
muestran un objeto en 100 veces .
● Segunda imagen( Elodea, objetivo de 40x)
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Se encuentra aumentada 400 veces , ya que los lentes de 40x muestran


400 veces .

● ¿Qué organelos puedes observar?

R/:
Elodea, objetivo 10x= Se visualiza la pared celular ,aún no se logran ver los
cloroplastos en su totalidad .
Elodea ,objetivo de 40x= Ya se logran visualizar los cloroplastos y se observa
la ciclosis(movimiento) .

● ¿Por qué no es necesaria una tinción en este tipo de muestra?

R/:
La mayoría de los tejidos ,sobre todo los de los animales son incoloros y por
ello se necesitan teñir para observar sus características morfológicas con el
microscopio óptico. Ello se consigue con el uso de los colorantes ,sustancias
que son capaces de unirse de manera más o menos específica a estructuras del
tejido aportando les calor .
En este tipo de muestra no se considera necesaria la Tinción , ya que ,la hoja
de Elodea es muy fina, casi transparente se le agrega Agua para que se vea
más fácil ; la Tinción lo que busca es mejorar el contraste de la imagen
aumentando la definición de los organelos dentro de la célula ; otra cosa que
ayuda a qué en este caso la Tinción no sea necesaria es el color verde de la
hoja ( de los cloroplastos de la hoja ) son organelos que se distinguen muy
fácil.
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Realice un cuadro comparativo entre los tres tipos de células observados en su


práctica de laboratorio.
● ¿Qué semejanzas y qué diferencias encuentra?

R/:
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● ¿Tipos de tinción utilizados?

R/:
Para la bacteria del yogurt y la célula animal se hizo uso de la tinción simple
(azul de metileno)y la tinción de Gram en comparación a la célula vegetal que
no se usó ningún tipo de tinción
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PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS

1. ¿Son iguales todas las células observadas? ¿En qué se diferencian?

R/:
No son iguales ya que algunas son células vegetales eucariotas y otras células
animales eucariotas y procariotas y estás a su vez se diferencian según su estructura,
tamaño y forma

2. ¿En qué consiste la tinción diferencial? ¿A qué se debe la diferencia en la tinción de


las
bacterias gram-positivas y las bacterias gram-negativas?

R/:
La tinción diferencial requiere más de un tipo de colorante y se utiliza para distinguir
entre varios tipos de células bacterianas. Una tinción diferencial típicamente consiste
de tres pasos principales:
● Primero un colorante primario, el cual se utiliza para teñir a todas las células
en la tinción.
● Segundo un paso de decoloración, el cual remueve el colorante solo de ciertos
tipos de células.
● Tercero un colorante de contraste, el cual tiñe las células recién decoloradas
pero no tiene efecto sobre las células que aún retienen el colorante primario.

La tinción propuesta por el médico danés Christian Gram en 1884, es una de las
tinciones diferenciales más utilizadas en bacteriología, que clasifica los cultivos
bacterianos de menos de 24 horas en Gram positivas y Gram negativas.La reacción de
la tinción de Gram se basa en la cantidad de peptidoglucano que se encuentra en las
paredes celulares de estas bacterias. Las bacterias Gram positivas tienen muchas capas
de peptidoglucano, las cuales a su vez, sostienen moléculas de ácido teicoico.

El ácido teicoico reacciona con el cristal violeta y el yodo utilizado en este proceso de
tinción. Un complejo de las moléculas cristal violeta-yodo-ácido teicoico es muy
difícil de remover. Como la pared celular de las células Gram positivas retiene estos
compuestos, es más difícil decolorar una célula Gram positiva que una Gram
negativa. Una mezcla de alcohol remueve el cristal violeta de la célula Gram negativa,
pero no de la Gram positiva. Esta mezcla de alcohol también disuelve mucho de la
capa exterior de lipopolisacárido de la pared celular de la pared Gram negativa, lo
cual acelera la remoción del colorante primario cristal violeta de estas células.

Cuando otro colorante, usualmente safranina, se añade, las células Gram positivas
siguen decolor azul-violeta mientras que las Gram negativas absorben el color rojizo
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de la safranina, al Final del procedimiento de tinción, las células Gram positivas serán
del color del cristal violeta, o colorante primario y las células Gram negativas serán
del color de la safranina que es el colorante de contraste. La Tinción Gram tiene valor
diagnóstico y puede ser aplicada a diversos y múltiples tipos de especímenes clínicos
como líquidos corporales estériles (LCR), exudados, excreciones(orina), secreciones
(esputo), abscesos y tejidos.También puede aplicarse a diferentes tipos de materiales
de uso hospitalario como catéteres y soluciones para el diagnóstico y control de las
enfermedades intrahospitalarias.

3. ¿Cuál es el efecto de los antibióticos sobre las bacterias?

R/:
Los antibióticos son fármacos que se utilizan para tratar las infecciones bacterianas.
Son ineficaces contra las infecciones víricas y la mayoría del resto de infecciones. Los
antibióticos acaban con los microorganismos o detienen su reproducción, facilitando
su eliminación por parte de las defensas naturales del organismo.
Las bacterias, al igual que el resto de seres vivos, sufren modificaciones a lo largo del
tiempo en respuesta a los cambios ambientales. A causa del uso generalizado y
abusivo que se ha hecho de los antibióticos, las bacterias están expuestas a dichos
fármacos de forma constante, y aunque muchas de ellas mueren tras exponerse a los
antibióticos, algunas presentan resistencia a sus efectos farmacológicos. Por ejemplo,
hace 50 años, Staphylococcus aureus (una causa frecuente de infecciones cutáneas)
era muy sensible a la penicilina. Pero con el paso del tiempo, algunas cepas de esta
bacteria desarrollaron una enzima capaz de descomponer la penicilina, lo que anula la
eficacia del fármaco. Algunos investigadores desarrollaron una nueva forma de
penicilina que la enzima no podía descomponer, pero al cabo de pocos años las
bacterias se adaptaron y se volvieron resistentes incluso a esta penicilina modificada.
Otras bacterias también han desarrollado resistencia a los antibióticos.

4.¿Cuál es el objetivo de realizar tinciones de células o tejidos?

R/:
Una tinción o coloración es una técnica auxiliar utilizada en microscopía para mejorar
el contraste en la imagen vista al microscopio. Los colorantes y tinturas son sustancias
que usualmente se utilizan en biología y medicina para resaltar estructuras en tejidos
biológicos que van a ser observados con la ayuda de diferentes tipos de microscopios.
Los diferentes colorantes pueden ser utilizados para aumentar la definición y
examinar grandes cortes de tejido o poblaciones celulares.

5. ¿Cuáles son las principales diferencias entre las células animales y vegetales?

R/:
● Las células animales NO tienen pared celular, un elemento que le aporta más
rigidez a las animales que sí que tienen este componente. Puedes comprobar
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esta diferencia de forma rápida: cuando una planta muere, sigue quedando
rígida hasta pasado cierto tiempo que va perdiendo su rigidez; el motivo de
esto es que cuenta con estas paredes que le dan una materia más rígida.
● Otra de las diferencias básicas entre la célula animal y vegetal es que esta
última contiene cloroplastos, un elemento que le permite sintetizar los
azúcares gracias al dióxido de carbono, el agua y la luz solar. Este proceso se
conoce como fotosíntesis y es algo que es exclusivo del reino vegetal.
● La célula vegetal tiene únicamente una vacuola llena de líquido y, esta, ocupa
la mayor parte de su interior; sin embargo, la célula animal tiene diferentes
vacuolas de un tamaño menor que están repartidas por su interior.
● Otra diferencia entre la célula animal y vegetal es que la última puede
reproducirse de forma individual siguiendo, así, una reproducción asexual; en
cambio, las animales necesitan de reproducción sexual para poder crear
nuevos seres vivos.
● En la célula vegetal, los plastidios son de vital importancia, sin ellos no
podrían sobrevivir; en los animales, en cambio, ni siquiera existe este
componente celular.
● La forma en la que una célula animal tiene de recibir nutrientes es heterótrofa
mientras que las células vegetales son autótrofas.
● La forma de una célula vegetal es similar a un prisma, en cambio, las de los
animales pueden tener múltiples formas y muy diferentes entre sí: pueden ser
planas, ovaladas, con forma de estrella, etcétera.

6. Enumera algunas técnicas de tinción usadas en el estudio de la biología celular.

R/:
● Tinciones simples
Se usa un único colorante, que siempre es de tipo básico. Se utilizan solamente para
incrementar el contraste; todas las células absorberán el colorante y quedarán teñidas
del mismo color. Se fija el espécimen, se añade el colorante y se deja el tiempo
adecuado para que se absorba, se retira el exceso de colorante y la preparación ya está
lista para ser observada.

● Tinciones diferenciales
Se utilizan para distinguir entre tipos de microorganismos. La técnica de tinción
diferencial consta de dos etapas: una tinción simple seguida de una tinción de
contraste. En la tinción de contraste se utiliza otro colorante que tiñe (y por tanto,
revela) las células no teñidas por el primer colorante. Estas tinciones son muy
utilizadas en microbiología.

● Tinciones específicas
Se utilizan para incrementar el contraste en las células microbianas y revelan
estructuras particulares, entre las que se incluyen en los flagelos y las cápsulas.
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● Tinción adecuada
En su forma más simple, el verdadero proceso de tinción puede implicar la inmersión
de la muestra en la solución colorante, seguido del aclarado que es un lavado para
eliminar el exceso de colorante y la observación. Muchos tintes, sin embargo,
requieren del uso de un mordiente. Cuando la solución de colorante en exceso se
elimina durante el aclarado, la tinción mordentar permanece.

● Tinción negativa:
Un método sencillo de tinción para bacterias, que además es un claro caso de
cromofobia y que por lo tanto funciona aun cuando los métodos de tinción positiva
fallan, es la tinción negativa. Esto puede ser conseguido simplemente extendiendo la
muestra en un portaobjetos y aplicando directamente sobre ella una gota de nigrosina
o tinta china y cubriendo luego la muestra humedecida con un cubreobjetos. Luego de
esto, los microorganismos pueden ser observados fácilmente por medio de
microscopía en campo claro como inclusiones claras muy bien contrastadas contra el
medio oscuro que las rodea

● Tinción indirecta:
Se denomina de este modo a las tinciones que hacen uso de un mordiente, un
mordiente habitual es el ácido tánico.

● Tinción directa:
Hablamos de tinción directa cuando el colorante interacciona directamente con el
sustrato, sin otro tratamiento previo.

● Tinción Gram:
La tinción de Gram es uno de los métodos de tinción más importantes en el
laboratorio bacteriológico. Su utilidad en la práctica de referencias a la morfología
celular bacteriana (cocos, bacilos, positivos, negativos, etc.) se basan justamente en la
tinción de GRAM
1. Se tiñe el espécimen con el primer colorante, cristal violeta.
2. Se añade el mordiente, yodo.
3. Se aplica el agente decolorante, normalmente una solución de acetona o
etanol. En este momento, las bacterias Gram negativas pierden su tinción
violeta, pero las Gram positivas retienen el colorante.
4. Como colorante de contraste se añade safranina, que tiñe de rosa las bacterias
Gram negativas, previamente decoloradas; mientras que a las bacterias Gram
positivas les proporciona un color violeta más intenso.
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CONCLUSIÓN

Gracias al análisis de las distintas células fue posible marcar diferencias y establecer
conceptos mediante la observación de las estructuras de las células animales, vegetales y
microorganismos procariotas. Se identificó el tipo de tinción utilizado en determinadas
observaciones, se resaltó la importancia e la tinción en el proceso de observación a través del
microscopio, además se complemento dicho procedimiento con una serie interrogantes los
cuales aclararon conceptos sobre la tinción, el efecto de los antibióticos y diferencias entre
los tipos de células.
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REFERENCIAS

● IzoOr Zamora. Tinción diferencial. [pdf].


https://www.scribd.com/doc/108181836/TINCION-DIFERENCIAL
● Brian J. Werth, PharmD, University of Washington School of Pharmacy.( 2020).
https://www.msdmanuals.com/es-co/hogar/infecciones/antibi%C3%B3ticos/introducc
i%C3%B3n-a-los-antibi%C3%B3ticos
● Ruíz Laura. ( 2017). ¿Cuál es la diferencia entre célula animal y
vegetal?.https://www.mundodeportivo.com/uncomo/educacion/articulo/cual-es-la-dife
rencia-entre-celula-animal-y-vegetal-aqui-la-respuesta-44412.html

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