• ISO 6579, 1993

Salmonella  sp.  
en el medio de cultivo Agar 
XLD
  

Salmonella sp. en Agar XLD y

Agar Bismuto Sulfito

  

Salmonella sp. en Agar Verde

Brillante
  

Salmonella sp.

en Agar Salmonella y Shigella

  

NUMERACIÓN DE Staphylococcus aureus

10 g de muestra 1 mL 1 mL

90 mL
APS 9 mL
APS
....
10-1
  10-2 10-3
1 mL 1 mL 1 mL

Inocular 1 mL de cada dilución

por duplicado en placas Petri (14
mm) con Agar Baird Parker y
esparcir con la espátula
drigalsky.

Incubar a 35ºC por 18-24 h

Si no hay crecimiento, reincubar a 35ºC
35ºC por 24 h.

Seleccionar para la numeración, placas

plac as con un máximo de 200 colonias
co lonias (típicas y/o atípicas)
atípicas)
  

Aislar 5 colonias típicas y atípicas y colocar cada una de ellas

e llas en caldo
BHI
Incubar a 35°C por 24 h

PRUEBA DE 0,3 mL plasma + 0,3 mL de inóculo

COAGULASA de conejo con del Caldo BHI
EDTA
  Incubar a 35°C 

Examinar luego de 4-6 h y hasta

hasta un máx. de 24 h y verificar la formación de coágulo

No hay formación Formación de coágulo

de coágulo
Prueba de coagulasa (+)
Prueba de coagulasa (-)
Staphylococcus aureus

ISO 6888-1, 1999

  

Staphylococcus aureus
en Agar Baird Parker 
en Agar Baird Parker 
  

Staphylococcus aureus  

Prueba de coagulasa
  

NUMERACIÓN DE MESÓFILOS AEROBIOS

VIABLES
10 g de muestra 1 mL 1 mL

90 mL
APS 9 mL
APS
....
-1

10   10-2 10-3
1 mL 1 mL 1 mL
Inocular 1 mL de cada
dilución en placas Petri
por duplicado
Incorporar el medio Agar Plate Count*, homogenizar y
que se solidifique.

Incubar a 35ºC por 48 h

Seleccionar para la numeración placas con un máximo de 250 colonias

• Agregar a 100
100 mL de medio PCA, 2 mL de TTC al 0.5%
0.5% .
   (TTC= 2.3.5 triphenil tetrazolium chloride)

ICMSF Vol. 1, 2da. Ed. 2000

 

MESÓFILOS AEROBIOS
EN AGAR PLATE COUNT
EN AGAR PLATE COUNT
  

MESÓFILOS AEROBIOS

EN AGAR PLATE COUNT

  

COLIFORMES TOTALES
10 g de muestra 1 mL 1 mL

90 mL
APS 9 mL
....
APS
10-1
  10-2 10-3
1 mL 1 mL 1 mL
Caldo lauryl sulfato
Prueba Presuntiva 10 mL por tubo

2X X

Incubar a 35ºC por 24 - 48 horas

 
Los tubos positivos con gas y turbidez, se
pasan a:
  

Caldo verde brillante

Prueba confirmativa bilis lactosa
10 mL por tubo
Incubar a 35ºC por 24 - 48 horas

Leer los
tubos
Negativos a Positivos: gas y
gas y turbidez turbidez

COLIFORMES
TOTALES

ISO 4831:2006
  

 
  

Escherichia coli 
10 g de muestra 1 mL 1 mL

90 mL
APS 9 mL
....
APS
10-1
  10-2 10-3
1 mL 1 mL 1 mL
Caldo lauryl sulfato
Prueba Presuntiva 10 mL por tubo

  Incubar a 35ºC por 24 - 48 horas

Los tubos positivos con gas y turbidez, se

  pasan a:
  

PROCEDIMIENTO

 
Caldo EC
Prueba Confirmativa
10 mL por tubo

Incubar a 44.5ºC por 24 - 48 horas

Leer los
tubos
Negativos a Positivos: gas y

gas y turbidez turbidez

Sembrar en Agar EMB
(Eosina azul de metileno)

Colonias individuales, Bioquímica 

ICSMF - 2000 Escherichia coli 

  

INTERPRETACIÓN DE

RESULTADOS
  

Salmonella sp.

REPORTE:

AUSENCIA o PRESENCIA
Salmonella sp. en 25 g de
DE
muestra.
  

Staphylococcus aureus

CÁLCULO:
Tipo de Nº de
colonia colonias/ Bioquímica PRE
ufc
Plac
a dilución
-1 -2 Selección
de colonias Prueba de CÁLCULO
Coagulasa
1 T 42 3 3 (+) 42 5
A 28 3 1(+) 9,3 1,3
2 T 52 3 2 (+) 34,7 5
A 32 3 2 (+) 21,3 6,0
  
Promedi 5
 

Nº de colonias x inversa del

volumen usado x factor de la
dilución=
53,7 x 10 x 10 = 5370

REPORTE:

54 x 102 u.f.c. de Stap. aureus /

g de
  
muestra
 

MESÓFILOS AEROBIOS
Nº de RESULTADO

Placa colonias / (obtener la

dilución media aritmética
x factor de la REPORTE
-1 -2 -3 dilución)

2
1 188 19x 10 ufc
de mesófilos
190 x 10
2 192 aerobios / g
de muestra
  

COLIFORMES TOTALES

Nº de
tubos
Tipo de
Prueba positivos/ SERIE TABLA REPORTE
dilución (NMP)
-1 -2 -3
P.P. 3 3 2 15 x
NMP de10
P.C. 3 2 1 3-2-1 150 coliformes
totales/ g de
  
muestra
 

Escherichia coli 

Nº de tubos
Tipo de positivos/
prueba dilución SERIE TABLA REPORTE
-1 -2 -3 (NMP)

P.P. 3 3 2 20 NMP de
Escherichia
P.C. 2 2 1 coli  /
 / g de
muestra
Bioquí- 2 1 1 2-1-1 20
mica
  

CUADRO RESUMEN DE RESULTADOS

Agente Límite
microbiano por g/mL Resultado

m5
Aerobios 10 19 x 102
mesófilos
Coliformes 102 15 x 10

Staphylococcus 10 54 x 102
aureus
Escherichia coli  10 20

Salmonella sp. 0 Ausencia

en 25 g
  

CONCLUSIÓN

La muestra Nº 224, sobrepasa los

limites permisibles de Staphylococcus
aureus, Coliformes y de Escherichia
coli , según la Norma Sanitaria para el
funcionamiento de restaurantes y
servicios afines. Comidas preparadas
sin tratamiento térmico.
  
R. M. N 363-005/MINSA.
 

MUESTRAS DE ALIMENTOS
  

 
 LAVADO DE MATERIALES
 

 
 PREPARACIÓN DE MATERIALES
 

 
 PREPARACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO
 

 
 ANÁLISIS DE BEBIDAS GASIFICADAS
 

 
 ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO
  (DILUCIÓN DE LA MUESTRA)
 
 ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO
  (DILUCIÓN DE LA MUESTRA)
 
 COLOCANDO LA MUESTRA DILUIDA
  EN LA PLACA PETRI
 
 MÉTODO RAPIDO-PLACA
ANÁLISIS PETRIFILM
DE COLIFORMES- E. COLI
 

 
 INCUBACIÓN
 

COLIFORMES TOTALES y Escherichia coli 

  

 
 ANÁLISIS DE SALMONELLA
 

Bacillus cereus en Agar MYP

  

Mohos y Levaduras en Agar 

OGY
  

 
  

MUCHAS GRACIAS …