UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA

FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS Y FARMACIA

ESCUELA DE QUIMICA BIOLOGICA
DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGIA
Curso de Microbiologia General
Carrera de Química Biológica
Victor Rafael Márquez Jimenez
201407838 Clave:14

GUIA DE TRABAJO
Microbiología del Agua

Instrucciones: Las guías de microbiología de agua y alimentos integran sus

conocimientos adquiridos en el curso de Microbiología General. Las últimas
preguntas incluyen las características microbiológicas de los microorganismos que
fueron estudiados en el curso, que se pueden trasmitir por el agua y que causan
enfermedades en el ser humano. Bibliografía recomendada: “Brock, Biología de
los Microorganismos, 12a. y 14a. Ed., Alcamo, Prescott, Black,Microbiolgy etc. o
puede consultar otros textos confiables en internet e incluir las referencias al final
de su guía.

1. Enumere las principales fuentes de contaminación microbiana del agua.

 Basuras, desechos químicos de las fábricas, industrias,
 Aguas residuales y otros residuos que demandan oxígeno (en su mayor parte
materia orgánica, cuya descomposición produce la desoxigenación del
agua).
 Agentes patógenos, tales como bacterias, virus, protozoarios, parásitos que
entran al agua provenientes de desechos orgánicos, que incluyen heces y
otros materiales que pueden ser descompuestos por bacterias aerobias.
 Productos químicos, incluyendo los pesticidas, diversos productos industriales,
las sustancias tenso activas contenidas en los detergentes, y los productos
de la descomposición de otros compuestos orgánicos.
 Petróleo, especialmente el procedente de los vertidos accidentales.
 Minerales inorgánicos y compuestos químicos.
● Sustancias radioactivas procedentes de los residuos producidos por la
minería y el refinado del uranio y el torio, las centrales nucleares y el uso
industrial, médico y científico de materiales radiactivos. Vertimiento de
aguas servidas, Vertimiento de relaves mineros. Vertimiento de
productos químicos y desechos industriales
2. A. Elabore una lista de los materiales necesarios para el muestreo de agua
de chorro Domiciliar. B. Enumere las condiciones que deben tomarse en
cuenta para el Transporte de las muestras de agua al laboratorio. C.
Tiempo mínimo para realizar el análisis microbiológico.
A. recipientes estériles de vidrio esmerilado con boca ancha de 125 mL de
capacidad. El tapón y el cuello del frasco deben estar protegidos con una
cubierta de papel Kraft.

B. Al momento de muestreo es necesario recavar, como mínimo, la siguiente

información:
• Identificación unívoca de la muestra
• Identificación del sitio de muestreo (georeferenciación)
• Tipo de fuente y características de la misma (cercanía a pozos negros o
industrias, profundidad del nivel estático y total, si fuera pozo o perforación,
existencia de pozos abandonados, etc.)
• Destino (consumo humano, animal, riego, etc.).
• Información acerca del Establecimiento donde se ha muestreado (ubicación,
propietario, vías de contacto, etc.)
• Condiciones de muestreo (fecha y hora, nombre de quien realizó el muestreo).
• Tipo de análisis a efectuar.
• Reactivo empleado para su preservación, en caso de ser utilizado.
• Cualquier otra observación que se considere de importancia. Y de ser posible:
● Temperatura del agua al momento de la toma y pH
C. El tiempo transcurrido entre el muestreo y el análisis ha de ser el
mínimo posible.

3. Sobre los microorganismos indicadores: A. Explique cómo se definen y a qué

familia a pertenecen. B. Enumere las características de un microorganismo
indicador y ponga dos nombres de microorganismos indicadores.

A. Son organismos que tienen un comportamiento similar a microorganismos

patógenos cuya procedencia, concentración, hábitat y reacción a factores externos
es la de la mayoría. Su presencia determina la existencia de patógenos y permite
comparar sus reacciones a cambios de pH y temperatura o aplicación de medios
físicos o químicos de desinfección, con la ventaja de ser más fácilmente
cultivables o identificables, y económicamente factibles.

B. estar ausentes en agua no contaminada y mantener una correlación de su

presencia con la de los patógenos, en mayor proporción. Deben sobrevivir en el
agua más tiempo y ser igual o más resistente a factores externos que los
patógenos, sin ser patógenos y no deben reproducirse en animales
poiquilotermos. Otra de sus características relevantes es ser de fácil, rápido y
económico aislamiento, cuantificación e identificación y en lo posible tener criterios
microbiológicos comunes internacionalmente. Deben hallarse de forma constante
en las heces y estar asociados a aguas residuales; estar distribuidos al azar en las
muestras y ser resistentes a la inhibición de su crecimiento por otras especies.
Entre las que se encuentran Bacteroides fragilis, Giardia intestinalis y
Cryptosporidium spp.
5. Sobre el método del Número más probable (NMP), con caldo Lauril Sulfato
Triptosa (LST), usado en la práctica de laboratorio: A. Elabore el diagrama de flujo
de las fases presuntiva y confirmatoria. B. Explique porqué se usa una serie de
tubos con caldo LST doble y dos series con caldo LST simple. C. De acuerdo a los
medios utilizados (LST y Caldo Bilis Lactosa Brillante): ¿qué microorganismos se
identifican en cada fase? D.¿Qué microorganismos indicadores se buscan para
confirmar la contaminación fecal? E. ¿En qué consiste la prueba Complementaria
de los Tubos Múltiples?

El grupo de bacterias coliformes incluye bacilos aeróbicos y anaeróbicos

facultativos, Gram-negativos, no esporíferos que fermentan lactosa y forman ácido
y gas a 35°C dentro de 48 horas. Los miembros de Enterobacteriaceae abarcan la
mayoría de este grupo, pero organismos tales como Aeromonas spp. también
pueden ser incluidos

6. Conteste: A. En qué se basa el método de filtración por membrana. B. Qué

materiales son necesarios para llevar a cabo este procedimiento y como se
informa? C. ¿Cómo se verifica la presencia de los coliforme fecales?

A. Los filtros de membrana son filtros de superficie, que muestran una estructura
microporosa precisa. Durante la filtración las partículas mayores que los poros de
la membrana son retenidas de forma fiable en la superficie de la misma. Las
particulas más pequeñas pueden pasar el filtro.

B. Material y equipo
 Membranas filtrantes de 0,45 µm de tamaño de poro
Soporte del filtro con embudo
Sistema de vacio
Pipetas estériles de 10 y 1 mL.
Estufa de cultivo
Asa de siembra
Pinzas estériles
C. Se utiliza el Caldo Endo para el recuento de coliformes totales. Este es un
medio para el aislamiento selectivo de los coliformes totales pues lleva inhibidores
para el resto de microorganismos. El lauril sulfato y desoxicolato que forman parte
de la fórmula del medio permite crecer a los coliformes lactosa positivo pero inhibe
el crecimiento del resto de bacterias acompañantes. Las colonias lactosa positivo
se colorean de rojo por la liberación de fucsina del sulfato de fucsina. Las colonias
de E. coli y de los coliformes muestran generalmente un brillo metálico.

Se utiliza este medio para la identificación y recuento de coliformes en agua, leche

y otros líquidos mediante filtración sobre membrana y esta incluido en las
recomendaciones de la APHA "American Water Works Association and Water
Pollution Control Federation: Standard Methods for the Examination of Water and
Wastewater, 2004 ".

Medio sólido selectivo, que se prepara en placas para filtración de membrana.

Medio líquido selectivo, que se deposita en placas de cultivo que llevan una
almohadilla absorbente (aproximadamente 2 mL por placa)

Cuando se obtienen recuentos de más de 200 colonias sobre una misma

membrana pueden dar resultados erróneos debido a la superpoblación, ya que lo
que aparece como una colonia puede ser originado por varias bacterias bajo
condiciones de hacinamiento. En estos casos debemos volver a muestrear el agua
y analizar muestras más diluidas.

Por otra parte, un número de colonias inferior a 10 ó 20 por membrana es poco

fiable como base para establecer cuantitativamente la concentración bacteriana de
la muestra. Por ejemplo, la obtención de 2 colonias a partir del análisis de 1 ml de
un agua, no nos permite afirmar que ese agua contenía 200 colonias en 100 ml.
En estos caso conviene repetir el análisis filtrando un volumen de muestra mayor.

7. ¿Qué método usaría ud. si está en una investigación de campo y necesita saber
si el agua está contaminada con coliformes fecales?

Método para la determinación de bacterias coliformes, coliformes fecales y

Escherichia coli por la técnica de diluciones en tubo múltiple (Número más
Probable o NMP)
8. Si el agua analizada proviene de un chorro domiciliar y se confirma la presencia
de coliformes fecales, cuáles son las medidas que usted recomendaría que se
tomen para evitar que las personas que están consumiendo dicha agua adquieran
y desarrollen una enfermedad infecciosa?

Notificar a los habitantes de dicho domicilio y a EMPAGUA ya que el agua del

sector tiene que ser analizada, establecer un programa de divulgación sobre
desinfección y tratamiento del agua de pozos y avisar al centro de salud para
evitar enfermedades gastrointestinales en la población más susceptible

9. ¿Qué son las Normas COGUANOR NTG 2009? Elabore un cuadro en donde se
inclúyalos parámetros permitidos para las aguas tratadas.

La normalización es un proceso que tiende a uniformar aspectos técnicos

inherentes a productos, procesos y servicios, que cobra relevancia en el ámbito
internacional con la globalización de la economía. La Comisión Guatemalteca de
Normas -COGUANOR- es el Organismo Nacional de Normalización, adscrito al
Ministerio de Economía

10. Elabore un cuadro con las siguientes infecciones trasmitidas por el agua en
países sub desarrollados: Giardiasis, Amebiasis, Shigelosis, Salmonelosis,
Rotavirus, Cólera, y Hepatitis A. Incluya para cada una: Nombre del agente causal,
principales características por ejemplo: si es una bacteria, virus o protozoo,
fuentes de trasmisión, inóculo necesario para causar infección, principales
síntomas, diagnóstico, tratamiento y las medidas de prevención.

Infección Nombre del fuentes principales tratamiento

agente de síntomas
causal trasmisió
n

Giardiasis Giardia Protoz Heces de Diarrea, Secnidazol:

intestinalis oo persona cólico, ADULTOS: 2 g
Infectada dolor abd, vía oral.
náuseas, Cápsula(s) en
Anorexia toma única.

Amebiasis Entamoeba Protoz Agua, diarrea, Metronidazol o

Histolytica oo alimentos estreñimie tinidazol
, fecal - nto, dolor
oral abdominal
de tipo
 cólico

Shigelosis Shigella Bacteri Fecal – Diarrea Restitución de

a Oral inflamatori líquidos
a, fiebre,
dolor,
vómitos

Salmonelo Salmonella Bacteri Fecal – Escalofrío Ciprofloxcina

sis a oral s, Cefalea, 500mg por/
Náuseas, 12h/10 días.
Anorexia

Rota Virus Reoviridae Virus Fecal - Diarrea, Restitución de

Oral fiebre líquidos

Cólera Vibrio Bacteri Fecal - Diarrea, Restitución de

Cholerae a Oral vómitos, Líquidos,
Entumeci Tetraciclinas
mi-ento 500 mg/6h 3
días

Hepatitis A Paramyxovi Virus Fecal - Vómito, Reposo,

rus Oral fiebre, Restitución de
náusea, líquidos
fatiga

Referencias

3er Informe sobre el desarrollo de los recursos hídricos en el mundo «El agua en
un mundo en constante cambio». WWAP, 2009